魏寒松+馬春紅+李立旻+馬慶敏+李會(huì)敏

摘要：目的 觀察妊娠晚期婦女假絲酵母菌感染的病原菌類型分布及其對(duì)抗真菌藥的敏感性。方法 收集產(chǎn)科住院患者陰道拭子，接種沙保羅葡萄糖瓊脂平板。使用Vitek 2 compact微生物鑒定系統(tǒng)進(jìn)行菌種鑒定，ATB-FUNGUS 3進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。所有數(shù)據(jù)采用WHONET5.6進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果 妊娠晚期陰道真菌感染以白假絲酵母菌為主（83.23%），其次為光滑假絲酵母菌（14.93%），其它假絲酵母菌占1.84%。白假絲酵母菌、光滑絲酵母菌對(duì)5種常用抗真菌藥耐藥率均低于10%。其它假絲酵母菌對(duì)唑類藥物耐藥率較高。結(jié)論 白假絲酵母菌對(duì)常見(jiàn)抗真菌藥敏感性較高，其它假絲酵母菌耐藥性高于白假絲酵母菌。治療假絲酵母菌感染時(shí)應(yīng)結(jié)合菌種鑒定及藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選擇抗真菌藥物。

關(guān)鍵詞： 妊娠；假絲酵母菌；真菌藥敏試驗(yàn)

Infection of Candida Vaginalis in Women with Late Pregnancy and its Drug Resistance

WEI Han-song，MA Chun-hong， LI Li-min，MA Qing-min，LI Hui-min

（Department of Clinical Laboratory，Ninghe Tianjin Hospital，Tianjin 301500，China）

Abstract：Objective To observe the effect of late pregnancy women in Candida infection of pathogenic bacteria types distribution and antifungal drug sensitivity.Methods Collected obstetric hospitalized patients vaginal swab，inoculation of glucose agar.Sandy Paull strains were identified using Vitek 2 compact microbial identification system，ATB-FUNGUS 3 susceptibility test.All the data were analyzed by WHONET5.6 statistical analysis.Results Candida albicans were mainly infected with Candida albicans（83.23%），followed by Candida glabrata（14.93%）and Candida albicans accounted for 1.84%.Candida albicans，Smoothe yeast resistance to five commonly used antifungal agents were less than 10%.Other Candida strains have higher resistance to azole drugs.Conclusion Candida albicans is more sensitive to common antifungal agents，and other Candida strains are more resistant to Candida albicans.Treatment of Candida infection should be combined with the identification of bacteria and drug susceptibility test results reasonable choice of antifungal drugs.

Key words：Pregnancy；Candida；Fungal susceptibility test

20%～30%健康無(wú)癥狀非妊娠婦女陰道內(nèi)可以分離到假絲酵母菌屬，大多數(shù)為白假絲酵母菌。如果隨訪時(shí)間超過(guò)1年，則分離率可超過(guò)70%[1]。當(dāng)酵母樣真菌與宿主之間寄生的平衡被暫時(shí)干擾，它們能夠引起外陰陰道假絲酵母菌?。╲ulvovaginal candidasis ， VVC），并伴隨炎癥等臨床特征。VVC常常與某些已知的危險(xiǎn)因素有關(guān)，例如，妊娠、不恰當(dāng)使用抗生素引起微生物菌群失調(diào)和免疫抑制劑的使用等[2]。

多數(shù)VVC患者在沒(méi)有明確診斷的前提下就給予OTC藥物治療，因此，其準(zhǔn)確發(fā)病率不明。據(jù)估算，約有75%的女性在育齡期至少有過(guò)1次VVC發(fā)作，其中約半數(shù)會(huì)復(fù)發(fā)。在美國(guó)關(guān)于VVC發(fā)病率的描述只有兩項(xiàng)以發(fā)病人群為基礎(chǔ)的研究[3]。

本研究通過(guò)形態(tài)學(xué)及體外培養(yǎng)研究等方法，調(diào)查分析妊娠晚期婦女陰道假絲酵母菌感染情況，及其對(duì)常用抗真菌藥物的耐藥情況。為該疾病的流行病學(xué)研究和臨床醫(yī)師抗感染治療提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1標(biāo)本來(lái)源于我院 2014年1月～12月的產(chǎn)科住院患者，從陰道后穹窿分別用無(wú)菌棉拭子和一次性轉(zhuǎn)運(yùn)拭子取分泌物做涂片顯微鏡檢查和真菌培養(yǎng)。直接涂片鏡檢可見(jiàn)真菌孢子及菌絲，培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)假絲酵母菌生長(zhǎng)者納入到本實(shí)驗(yàn)中。

1.1.2 儀器與試劑 哥倫比亞血瓊脂平板、沙保羅葡萄糖培養(yǎng)基購(gòu)自梅里埃上海生物制品有限公司。Vitek 2 compact 全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)、ATB-FUNGUS3酵母樣真菌藥敏試劑盒（微量稀釋法）購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司。MJX-250BⅢ霉菌培養(yǎng)箱購(gòu)自天津泰斯特儀器有限公司。

1.2方法

1.2.1所有標(biāo)本同時(shí)接種哥倫比亞血瓊脂平板和沙保羅葡萄糖瓊脂平板，35℃有氧環(huán)境培養(yǎng)24～72 h。使用VITEK 2 Compact 全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)YST鑒定卡對(duì)純培養(yǎng)菌落進(jìn)行鑒定。使用梅里埃ATB-FUNGUS 3藥敏試劑盒進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。結(jié)果判斷參照試劑盒說(shuō)明書(shū)。參照鑒定儀器與藥敏試劑盒推薦的質(zhì)控菌株ATCC 2950光滑假絲酵母菌、ATCC6258 柔假絲酵母菌對(duì)細(xì)菌鑒定與藥敏進(jìn)行質(zhì)控。質(zhì)控結(jié)果在控的情況下記錄試驗(yàn)結(jié)果。

1.2.2所有數(shù)據(jù)采用WHONET 5.6 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2結(jié)果

2.1假絲酵母菌種類、患者年齡分布 從2627份產(chǎn)科住院患者陰道拭子中分離到假絲酵母菌489株，分離率18.61%。其中白假絲酵母菌407株占83.23%，光滑假絲酵母菌73株占14.93%，其它假絲酵母菌9株占1.84%，以白假絲酵母菌為主，其次為光滑假絲酵母菌。從年齡分布來(lái)看，感染人群以21～30歲（77.10%）為主，其次為31～40歲（13.10%），其它年齡段占9.8%。見(jiàn)表1。

2.2假絲酵母菌對(duì)5種抗真菌藥物的敏感性 本研究中發(fā)現(xiàn)有2例（0.5%）白假絲酵母菌對(duì)兩性霉素B耐藥；有3例（0.7%）白假絲酵母菌，1例光滑假絲酵母菌對(duì)5-氟胞嘧啶呈現(xiàn)劑量依賴性敏感（SDD）。未發(fā)現(xiàn)其它酵母菌對(duì)上述兩種藥呈現(xiàn)耐藥。所分離到的酵母菌對(duì)唑類抗真菌藥物都呈現(xiàn)出不同程度的耐藥性，光滑假絲酵母菌要略高于白假絲酵母菌，但二者要明顯低于其它假絲酵母菌，見(jiàn)表2。

3討論

假絲酵母菌屬在女性VVC患者中的分布與地區(qū)和種群相關(guān)。通常在單純性或復(fù)雜性VVC的患者中，同一份陰道拭子只能分離到一種假絲酵母菌；但是，也有少數(shù)患者（2～5%）發(fā)現(xiàn)同時(shí)存在兩種或兩種以上假絲酵母菌感染[4]。本試驗(yàn)中，未發(fā)現(xiàn)存在兩種或以上假絲酵母菌感染的情況。其原因可能由于假絲酵母菌在沙保羅平板上菌落形態(tài)差別較小，未使用顯色培養(yǎng)基。因此，不排除有漏檢的可能。

與歐美相比，非白假絲酵母菌在亞非國(guó)家更為常見(jiàn)。在土耳其、印度和尼日利亞，光滑假絲酵母菌所致VVC比例占30～37%[5-6]。但是，我們觀察到所有非白假絲酵母菌占比為16.77%。這與國(guó)內(nèi)其它研究及美國(guó)的報(bào)道非常相似[7]。

研究表明，依照美國(guó)CLSI M27-A檢測(cè)陰道分離酵母菌對(duì)氟康唑的敏感性，提示大約21.1%菌株對(duì)氟康唑耐藥[1]。也有研究表明，陰道酵母菌對(duì)氟康唑和氟胞嘧啶耐藥性較低分別為（3.7% 和3.0%）[8]。在本研究中，白假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌對(duì)5種抗真菌藥物的耐藥率都處于較低水平。其中，兩性霉素B耐藥率低于1%，5-氟胞嘧啶未發(fā)現(xiàn)耐藥株，氟康唑耐藥率低于3%，伊曲康唑耐藥率低于6%，伏立康唑耐藥率低于3%。在不同菌株中，氟康唑MIC值升高僅見(jiàn)于克柔假絲酵母菌（R：75.0%，SDD：25%，主要考慮存在天然耐藥）。耐藥率低的原因可能是試驗(yàn)對(duì)象身體狀況良好、無(wú)慢性病病史、無(wú)長(zhǎng)期使用抗真菌藥物史。因此，從該人群中分離到的酵母菌大多數(shù)為野生型菌株。

本研究還發(fā)現(xiàn)，部分感染患者陰道內(nèi)分離的非白色假絲酵母菌，體外藥敏試驗(yàn)對(duì)吡咯類抗真菌藥不敏感。但是，使用氟康唑治療該耐藥株表現(xiàn)出良好的臨床療效。我們推測(cè)其可能與減少陰道真菌數(shù)量、緩解陰道負(fù)荷有關(guān)。

由于條件的限制，很少有醫(yī)院將真菌藥敏試驗(yàn)用于對(duì)VVC患者的管理和動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。但是，我們認(rèn)為在頑固性VVC或突破性真菌感染患者優(yōu)化治療時(shí)，藥敏試驗(yàn)具有較大的指導(dǎo)意義。本研究提示我們，治療假絲酵母菌感染時(shí)應(yīng)結(jié)合菌種鑒定及藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選擇抗真菌藥物。

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