吳 超

·實(shí)驗(yàn)研究·

復(fù)方大青顆粒解熱抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究

吳 超

目的 觀察復(fù)方大青顆粒的解熱抗炎效果。方法 通過(guò)酵母液致大鼠發(fā)熱模型，觀察復(fù)方大青顆粒的退熱作用；通過(guò)二甲苯致小鼠耳廓腫脹模型和蛋清致大鼠足腫脹模型，觀察復(fù)方大青顆粒的抗炎作用。結(jié)果 復(fù)方大青顆粒對(duì)酵母引起的大鼠體溫增高有明顯的抑制作用，對(duì)二甲苯引起小鼠耳廓腫脹和蛋清引起大鼠足腫脹具有明顯的抑制作用。結(jié)論 復(fù)方大青顆粒具有較好的解熱抗炎作用，為其臨床運(yùn)用提供了確鑿的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

復(fù)方大青顆粒 解熱 抗炎

復(fù)方大青顆粒是眾多感冒發(fā)熱患者首先的藥物之一，由大青葉、板藍(lán)根等藥物組成，具有清熱解毒，宣透表邪的功效［1］。在臨床應(yīng)用多年，用于流感、咽炎，急性扁桃體炎、流行性腮腺炎等，并對(duì)病毒性感染有一定的預(yù)防作用。根據(jù)其臨床主治功效，作者從解熱、抗炎方面對(duì)復(fù)方大青顆粒進(jìn)行藥效學(xué)研究，以期為臨床用藥提供詳實(shí)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥物 復(fù)方大青顆粒由浙江省中醫(yī)院制。雙黃連口服液購(gòu)于哈藥集團(tuán)三精制藥股份有限公司。安琪高活性干酵母購(gòu)于湖北安琪酵母股份有限公司（用時(shí)采用注射用生理鹽水配置成所需濃度）。10%新鮮蛋清液現(xiàn)配。其余試劑均為市售分析純。

1.2 動(dòng)物 SPF級(jí)ICR小鼠，體重（20±2）g，購(gòu)自浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心（動(dòng)物合格證編號(hào)：2008001510623）。SD大 鼠（180±20）g， 購(gòu)自浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心（動(dòng)物合格證號(hào)：2007000566028）。

1.3 動(dòng)物飼養(yǎng)條件 所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均飼養(yǎng)于浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心的屏障環(huán)境，室溫（20±1）℃，相對(duì)濕度50%~70%。換風(fēng)次數(shù)15~20次/h，光照150~200Lx，12h明暗交替，噪音<50db，設(shè)有溫度、濕度、光照、壓力梯度等自動(dòng)控制和顯示系統(tǒng)。

1.4 儀器 ZRY-2D 智能熱原儀（重慶友朋科技有限公司）；JJ200/d=0.01g 電子天平（常熟市雙杰測(cè)試儀器廠）；FA-1104 電子分析天平（上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司）；YLS一7B足趾容積測(cè)量?jī)x（濟(jì)南益延科技發(fā)展有限公司）。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法［2］（1）取SD雄性大鼠70只，正常每天兩次測(cè)量體溫，測(cè)量3d。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天每h測(cè)量體溫1次/h，連續(xù)測(cè)量三次，選取體溫變化≤0.3℃的大鼠進(jìn)行分組，除空白組10只大鼠外，其余60只大鼠用15%酵母液按2ml/100g背部皮下注射制作大鼠發(fā)熱模型，空白組皮下注射等容量的無(wú)菌生理鹽水，注射完成4h后測(cè)體溫，選肛溫升高>0.8℃者，按隨機(jī)數(shù)值表分為模型組、陽(yáng)性對(duì)照組（雙黃連口服液1.2g生藥/ kg）、復(fù)方大青顆粒低劑量組（1.35g/kg）、復(fù)方大青顆粒中劑量組（1.8g/kg）、復(fù)方大青顆粒高劑量組（2.4g/ kg），每組10只，按0.5ml/100g大鼠體重口服灌胃相應(yīng)的藥物一次，空白組和模型組大鼠灌服等體積的蒸餾水。分別于給藥后0.5h、1h，2h、4h測(cè)肛溫1次。以給藥后不同時(shí)間點(diǎn)測(cè)得的肛溫與基礎(chǔ)肛溫之差值為考察指標(biāo)，采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行方差分析。（2）取雌性ICR小鼠60只，按體重隨機(jī)分為6組：空白組、模型組、雙黃連口服液組、復(fù)方大青顆粒低劑量組（2.03g/ kg）、復(fù)方大青顆粒中劑量組（2.7g/kg）、復(fù)方大青顆粒高劑量組（3.6g/kg），每組各10只。各組0.25ml/100g連續(xù)灌胃給藥3d，1次/d，空白組灌胃等容量的蒸餾水。除空白組外，其余各組于末次給藥30min 后，各鼠右耳雙面涂以二甲苯0.05ml，左耳不涂作為自身對(duì)照，0.5h后處死小鼠，剪下兩邊的耳廓，用直徑為 8mm 的打孔器分別于左右兩耳廓相同部位取耳片，用電子天平稱定質(zhì)量。記錄左右耳片質(zhì)量，計(jì)算腫脹度［3］。腫脹度（mg）=右耳片質(zhì)量-左耳片質(zhì)量，耳廓腫脹抑制率（%）=（模型組耳廓腫脹度均值-給藥組耳廓腫脹度均值）/模型組耳廓腫脹度均值×100%。（3）取大鼠60 只，隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、雙黃連口服液組、復(fù)方大青顆粒低劑量組（1.35g/kg）、復(fù)方大青顆粒中劑量組（1.8g/kg）、復(fù)方大青顆粒高劑量組（2.4g/kg），每組各10只。各組0.5ml/100g連續(xù)灌胃給藥，1次/d，連續(xù)3d，空白對(duì)照組灌胃等容量的蒸餾水。以踝關(guān)節(jié)毛際線為標(biāo)準(zhǔn)，用足趾測(cè)定儀測(cè)量每只大鼠右后肢足跖容積。末次給藥1h 后，在各大鼠左側(cè)足跖皮下注射100%的新鮮蛋清0.05ml/只，于致炎后0.5h、1h、2h、4h用足趾測(cè)定儀測(cè)定右后足跖容積，計(jì)算公式：足腫脹度=［致炎后足跖容積（ml）－致炎前足跖容積（ml）］/致炎前足跖容積×100%。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件。計(jì)量資料以（x±s）表示，采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)方大青顆粒對(duì)酵母致大鼠發(fā)熱的解熱作用 見(jiàn)表1。

表1 復(fù)方大青顆粒對(duì)酵母致大鼠發(fā)熱的解熱作用（x±s）

2.2 復(fù)方大青顆粒對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響 見(jiàn)表2。

表2 復(fù)方大青顆粒對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響（x±s）

2.3 復(fù)方大青顆粒對(duì)蛋清致大鼠足趾腫脹的影響 見(jiàn)表3。

表3 復(fù)方大青顆粒對(duì)蛋清致大鼠足趾腫脹的影響（x±s）

3 討論

復(fù)方大青顆粒主要由大青葉和板藍(lán)根等中藥組成。大青葉［4］為十字花科植物菘藍(lán)的干燥葉，苦、寒，歸心、胃經(jīng)。具有清熱解毒，涼血消斑的功效。有研究表明大青葉通過(guò)抑制下丘腦前列腺素E3 受體（EP3）mRNA 的表達(dá)來(lái)發(fā)揮抗炎作用［5］。

板藍(lán)根［6］為十字花科植物菘藍(lán)的干燥根，苦、寒，歸心、胃經(jīng)。具有清熱解毒，涼血利咽的功效。用于瘟疫時(shí)毒、發(fā)熱咽痛、溫毒發(fā)斑、痄腮、爛喉丹痧、大頭瘟疫、丹毒、癰腫。板藍(lán)根能提高小鼠腹腔巨大噬細(xì)胞的吞噬功能、促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖來(lái)增強(qiáng)小鼠的細(xì)胞免疫能力，從而發(fā)揮抗炎解熱作用［7］。Otsuka等［8］研究發(fā)現(xiàn)，板藍(lán)根中的苯并噁嗪酮衍生物能抑制組織胺的釋放而具有抗炎作用。

酵母菌所含的莢膜多糖和蛋白質(zhì)是造成大鼠發(fā)熱的主要物質(zhì)，其致熱機(jī)理是由注射部位的局部潰爛引發(fā)的劇烈炎癥反應(yīng)所致，這與臨床上伴內(nèi)臟或皮膚有明顯炎癥所致發(fā)熱的機(jī)理類似，因此用酵母菌致大鼠發(fā)熱模型來(lái)考察清熱藥的解熱作用，對(duì)臨床用藥有指導(dǎo)意義。二甲苯刺激作用可使小鼠耳毛細(xì)血管通透性增高，血管內(nèi)液向組織間隙滲出導(dǎo)致耳廓腫脹，這與臨床上的炎癥滲出機(jī)理相似，因此該模型可以佐證復(fù)方大青顆粒的抗炎作用。蛋清致大鼠足趾腫大模型是通過(guò)異源蛋白致炎的急性變態(tài)反應(yīng)，導(dǎo)致大量炎性物質(zhì)滲出。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)研究，進(jìn)一步證明了復(fù)方大青顆粒良好的抗炎效果。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方大青顆粒能顯著降低酵母菌所致發(fā)熱大鼠的體溫，能顯著抑制二甲苯所致的小鼠耳腫脹和蛋清致大鼠足跖腫脹，具有較好的清熱解毒、抗炎等作用，顯示出較好的宣透表邪的功效，為其臨床用于治療感染性疾病提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

［1］ 王京霞, 張琦, 陳琳, 等. 復(fù)方大青顆粒急性毒性實(shí)驗(yàn)研究. 浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2014, 24(6): 496- 498.

［2］ 陳奇. 中藥藥理研究方法學(xué). 北京: 人民衛(wèi)生出版社, 2011: 310, 332, 410.

［3］ 鄔姍, 何開(kāi)勇, 潘望平, 等. 金柴抗感膠囊解熱抗炎止咳作用研究. 醫(yī)藥導(dǎo)報(bào), 2013, 32(3): 313- 315.

［4］ 國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典. 北京: 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 2010: 20-21.

［5］ 董軍, 裘晟, 謝新華, 等. 大青葉對(duì)IL-1β 作用下兔下丘腦EP3 mRNA表達(dá)的影響. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志, 2007, 23(1): 42-45.

［6］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典. 北京: 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 2010: 191.

［7］ 陶光遠(yuǎn),譚毓治.南板藍(lán)根注射液藥效學(xué)試驗(yàn)研究.廣東藥學(xué), 2002, 12(3): 36-38.

［8］ Otsuka H, Hirai Y, Nagao T, et al. Anti-inflammatory activity of benzoxazinoids from roots of Coix lachryma-jobi var. ma-yuen. Journal of Natural Products, 1988, 51(1): 74-79.

Objective To observe the antipyretic and anti-inflammatory effects of compound Daqing Granules. Methods The fever models were established in rats with high temperature induced by yeast.The inf l ammatory models were established in rats with auricle swelling induced by dimethylbenzene and foot edema induced by fresh egg white. Results Compound Daqing Granules showed signif i cant antipyretic activity in rats with high temperature induced by yeast.Compound Daqing Granules showed signif i cant anti-inf l ammatory activity in rats with auricle swelling induced by dimethylbenzene and foot edema induced by fresh egg white. Conclusion Compound Daqing Granules has notable antipyretic and anti-inf l ammatory effects.

Compound Daqing granules Antipyretic Anti-inf l ammatory

310006 浙江省中醫(yī)院