劉玲玲 余 萍 云亞歌 王 青

(青海大學附屬醫(yī)院眼科，青海 西寧 810001)

眼瞼基底細胞癌中窖蛋白- 1和血管生成的關系

劉玲玲 余 萍 云亞歌 王 青

(青海大學附屬醫(yī)院眼科，青海 西寧 810001)

目的 檢測眼瞼基底細胞癌中窖蛋白(Caveolin)- 1、血管內皮生長因子(VEGF)和白細胞分化抗原(CD)31的表達，關注Caveolin- 1與血管生成的關系。方法 58例確診為眼瞼基底細胞癌并行手術的患者作為觀察組，常規(guī)留取術后的石蠟包埋組織，選擇皮膚基底細胞乳頭狀瘤術后石蠟包埋組織17例作為對照組，應用免疫組化二步法檢測兩組中Caveolin- 1、VEGF和CD31的表達。結果 Caveolin- 1、VEGF的陽性率、CD31標記的微血管密度(MVD)在兩組中的表達差異有統計學意義(P<0.01)。觀察組中Caveolin- 1、 VEGF陽性率和MVD值與腫瘤最大徑密切相關，Caveolin- 1與Ki67指數密切相關，Caveolin- 1、 VEGF陽性率和MVD值均與性別、年齡無相關性。線性相關分析顯示觀察組中Caveolin- 1和VEGF、Caveolin- 1和MVD呈負相關。結論 眼瞼基底細胞癌中Caveolin- 1低表達是促進腫瘤形成的重要因素，Caveolin- 1與腫瘤間質的血管生成有明顯相關性。

眼瞼；基底細胞癌；窖蛋白(Caveolin)- 1；血管內皮生長因子(VEGF)；血管密度

基底細胞癌在老年人多見，易好發(fā)于曝光部位，其生物學行為較為特殊，主要表現為生長緩慢及較低的轉移率。眼瞼是最常見的好發(fā)部位，病變形成和進展中可以出現侵襲性生長，進而破壞局部組織和器官〔1，2〕。本病也是富于血管的腫瘤，腫瘤生長過程中伴有明顯的血管生成〔3〕。窖蛋白(Caveolin)- 1是胞膜窖在細胞膜表面特異性內陷微區(qū)的標記性蛋白，對腫瘤形成和血管生成可能有重要作用〔4〕。血管內皮生長因子(VEGF)是被大家公認的血管生成促進因子，可以調節(jié)腫瘤間質血管內皮細胞的新生和血管的形成，其高表達時可以為腫瘤提供必要的營養(yǎng)和氧〔5〕。本文針對眼瞼基底細胞癌患者術后組織中Caveolin- 1、VEGF和白細胞分化抗原(CD)31蛋白的表達進行研究，分析其臨床意義及相關性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2014年1月至2016年7月青海大學附屬醫(yī)院診斷為眼瞼基底細胞癌并行手術治療的患者作為觀察組，共58例，其中男31例，女27例，年齡46～88歲，平均68.6歲。術后均經病理學進行診斷，符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中的標準。患者或家屬簽署知情同意書。皮膚基底細胞乳頭狀瘤術后石蠟包埋組織17例作為對照組，其中男9例，女8例，年齡48～79歲，平均62.3歲，兩組一般資料無明顯差異。

1.2 Caveolin- 1、VEGF和CD31的檢測方法 兩組術后組織均常規(guī)送病理科，取材、常規(guī)脫水，包埋，切取4 μm切片于膠片上進行Caveolin- 1、VEGF和CD31蛋白表達的檢測，均應用免疫組化二步法，二氨基聯苯胺(DAB)顯色，嚴格按說明書上要求的步驟操作，做好質量控制，減少人為誤差。

1.3 Caveolin- 1、VEGF和CD31的判定 結果均應用Olympus光學顯微鏡觀察，由病理醫(yī)師判讀。Caveolin- 1的陽性部位是細胞膜和(或)細胞質，VEGF的陽性部位是細胞質，均以染成棕黃色定為陽性細胞，選擇上皮細胞中染色較為明顯的區(qū)域進行計數，共選擇5個高倍視野(400倍)，取平均值，以<10%定為陰性，以≥10%定為陽性。CD31以細胞質和細胞膜染成棕黃色為陽性細胞，以連續(xù)的細胞簇、細胞叢或分支狀連續(xù)的內皮細胞判定為微血管，共選擇5個腫瘤間質的區(qū)域進行微血管密度(MVD)的計數(400倍)，取平均值。

1.4 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件進行χ2檢驗、線性相關分析。

2 結 果

2.1 兩組Caveolin- 1、 VEGF陽性率和MVD值比較 兩組Caveolin- 1、 VEGF陽性率和MVD值差異顯著(P<0.01)。見表1。

表1 兩組Caveolin- 1、 VEGF陽性率和MVD值比較〔n(%)〕

2.2 觀察組中Caveolin- 1、 VEGF陽性率和MVD值在不同臨床特征中的比較 觀察組中Caveolin- 1、 VEGF陽性率和MVD值與腫瘤最大徑密切相關，Caveolin- 1與Ki67指數密切相關，Caveolin- 1、 VEGF陽性率和MVD值均與性別、年齡無明顯相關性。見表2。

2.3 觀察組中Caveolin- 1、 VEGF陽性率和MVD值相關性 觀察組中Caveolin- 1和VEGF(r=-0.46，P=0.043)、Caveolin- 1和MVD(r=-0.44，P=0.046)呈負相關。

表2 觀察組中Caveolin- 1、 VEGF陽性率和MVD值在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

3 討 論

Caveolin- 1基因定位于染色體7q31.1上，也是FRA7G脆性位點，這個位點常在機體惡性病變時缺失，因此該區(qū)域被認為是腫瘤抑制基因的遺傳標志〔6，7〕。Caveolin- 1也被認為是一個候選抑癌基因，其表達的蛋白為21～24 kD的膜整合蛋白，其胞膜窖這一細胞膜表面富含膽固醇和鞘脂的特異性內陷區(qū)域，在膜內易形成二聚體，也可以與Caveolin- 2形成異寡聚體〔8〕。Caveolin- 1對血管新生有雙向調控作用〔9〕。研究認為VEGF及其下游作用分子一氧化氮(NO)是血管生成的強效促進物質，而內皮型NO合酶及VEGF受體存在于內皮細胞的小凹陷中，這個區(qū)域具有活化Caveolin- 1的作用，如果Caveolin- 1表達過高和過低，NO合酶和NO的產生均受到明顯的影響〔10〕。也有學者對Caveolin- 1的結構進行觀察發(fā)現，Caveolin- 1對腫瘤形成有負調控作用，其機制是通過支架作用域CSD區(qū)實現的，此區(qū)域較容易與信號轉導分子相互作用，并形成其生物學功能〔11〕。腫瘤在生長過程中能分泌多種促血管生成因子，其中VEGF的分泌是促進腫瘤血管形成的重要物質，VEGF在作用過程中通過與位于血管內皮細胞或某些腫瘤細胞表面高親和力的受體特異性結合而發(fā)揮作用〔12，13〕。其分泌的機制主要是自分泌〔14〕。CD31被認為是血管新生的重要標志物，尤其是腫瘤間質的血管生成，其效果明顯優(yōu)于CD34和Fli- 1等血管內皮細胞的標志物〔15〕。

本實驗提示Caveolin- 1低表達、VEGF高表達時可以促進腫瘤的生成，因此在眼瞼基底細胞癌中Caveolin- 1發(fā)揮的是抑癌基因的作用，VEGF發(fā)揮的是癌基因的作用。提示Caveolin- 1和VEGF異常表達是促進腫瘤生長的促進蛋白因子，此時腫瘤生長加快，腫瘤體積增大。提示Caveolin- 1低表達時可以促進腫瘤細胞的增殖，因此Caveolin- 1高表達時可以在一定程度上抑制腫瘤細胞的增殖過程，當其失活后腫瘤失控性增生明顯，細胞異型性增大，細胞生長活躍。本實驗結果未發(fā)現VEGF與Ki67標記的增殖指數的關系，但有學者發(fā)現VEGF與細胞增殖有關〔3〕，這種差異可能與基底細胞癌的低增殖特征有關，也可能與本組病例較少有關，后續(xù)研究可以擴大樣本關注VEGF對基底細胞癌增殖的相關問題。本實驗未發(fā)現Caveolin- 1、 VEGF陽性率和MVD值與性別、年齡的相關性，因此一般臨床特征的差異不是影響蛋白表達的特異性因素。本文相關分析說明基底細胞癌中Caveolin- 1是抑制腫瘤血管生成的因子。正常上皮和良性腫瘤中Caveolin- 1高表達，不僅對腫瘤生成具有一定的抑制作用，也對間質的血管生成有較好的控制作用，此時腫瘤增生、轉移的開關未被激活，細胞呈現正常的狀態(tài)，其表達丟失后引發(fā)腫瘤生長的相關蛋白的級聯反應，促進腫瘤生長〔16〕。但是關于Caveolin- 1在腫瘤中表達下調或丟失后啟動的對腫瘤生長的促進作用，可能還涉及細胞凋亡、周期調控及應激反應等生物學機制〔17〕。

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〔2017- 05- 22修回〕

(編輯 苑云杰)

王 青(1958- )，女，碩士生導師，主任醫(yī)師，主要從事眼科研究。

劉玲玲(1980- )，女，主管護師，主要從事眼科臨床疾病研究。

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A

1005- 9202(2017)15- 3843- 03；

10.3969/j.issn.1005- 9202.2017.15.091