劉瑤，趙曉云，韓穎，趙雅寧，李建民，李佳寧

（1. 華北理工大學(xué)護(hù)理與康復(fù)學(xué)院社區(qū)護(hù)理學(xué)教研室，河北 唐山 063600； 2. 華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，河北 唐山 063600； 3. 唐山市人民醫(yī)院急診科，河北 唐山 063600）

腦缺血后處理對腦缺血再灌注大鼠Notch1信號通路及學(xué)習(xí)記憶功能的影響

劉瑤1，趙曉云1，韓穎1，趙雅寧1，李建民2，李佳寧3

（1. 華北理工大學(xué)護(hù)理與康復(fù)學(xué)院社區(qū)護(hù)理學(xué)教研室，河北 唐山 063600； 2. 華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，河北 唐山 063600； 3. 唐山市人民醫(yī)院急診科，河北 唐山 063600）

目的探討腦缺血后處理（CIP）對全腦缺血大鼠Notch1信號通路及其學(xué)習(xí)記憶功能的影響。方法將128只健康的雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（sham組）、腦缺血再灌注模型組（CIR組）、腦缺血后處理組（CIP組）、抑制劑組（DAPT組），每組32只。采用改良的Pulsinelli四血管阻斷法制備全腦缺血模型；DAPT組是在實施CIP前腹腔注射γ分泌酶抑制劑（DAPT）。Morris 水迷宮測試檢測大鼠學(xué)習(xí)記憶功能，HE染色觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)變化；免疫組織化學(xué)法、Western blotting法檢測大鼠腦組織海馬CA1區(qū)Notch1在海馬區(qū)的表達(dá)情況。結(jié)果與sham組比較，CIR組海馬區(qū)存活細(xì)胞率顯著降低（P ＜ 0.05），Notch1陽性細(xì)胞數(shù)及Notch1蛋白的表達(dá)水平明顯升高 （P ＜ 0.05）；與CIR組比較，CIP組海馬區(qū)存活細(xì)胞率顯著升高（P ＜ 0.05），Notch1陽性細(xì)胞數(shù)及Notch1蛋白的表達(dá)水平明顯升高（P ＜ 0.05）；與CIP組比較，DAPT組海馬區(qū)存活細(xì)胞率顯著降低（P ＜ 0.05），Notch1陽性細(xì)胞數(shù)及Notch1蛋白的表達(dá)水平明顯降低。結(jié)論CIP可促進(jìn)腦缺血再灌注大鼠學(xué)習(xí)記憶功能恢復(fù)，其機(jī)制可能與激活Notch1信號通路有關(guān)。

腦缺血再灌注損傷； 腦缺血后處理； Notch1； 學(xué)習(xí)記憶； 大鼠

隨著人口老齡化的發(fā)展，缺血性腦卒中在我國的發(fā)病率和致殘率逐年增加，嚴(yán)重增加了人們的生活負(fù)擔(dān)。腦缺血再灌注損傷機(jī)制復(fù)雜，腦缺血后處理 （cerebral ischemic postconditioning，CIP）是誘導(dǎo)缺血耐受的新干預(yù)策略，CIP是指組織缺血后在再灌注的早期階段給予一系列快速間歇性中斷血流的操作，2006年ZHAO等［1］研究發(fā)現(xiàn)CIP可以減少腦缺血再灌注損傷，減少腦梗死面積。CIP的作用機(jī)制未明，已發(fā)現(xiàn)CIP與線粒體鈣超載、避免氧自由基的過度產(chǎn)生、細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶信號通路等有關(guān)［2-4］，但其是否影響Notch1信號通路尚未見報道。

Notch 信號通路是一條經(jīng)典的依靠轉(zhuǎn)錄反應(yīng)激活的信號通路，影響神經(jīng)發(fā)育過程中的細(xì)胞分化、增殖與凋亡等多種程序。Notch1受體與配體JAG1相互作用，對神經(jīng)干細(xì)胞的增殖分化發(fā)揮重要作用。已有研究［5］顯示，Notch1參與缺血腦損傷后血管及神經(jīng)元的新生過程。本研究建立大鼠全腦缺血再灌注損傷模型，應(yīng)用CIP進(jìn)行干預(yù)，從Notch1信號通路角度探討CIP對缺血再灌注大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響，為缺血性腦卒中早期救治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

清潔級健康雄性SD大鼠128只，體質(zhì)量300～350 g，購自北京維通利華實驗動物中心，于華北理工大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗中心飼養(yǎng)。實驗室環(huán)境：溫度22～26 ℃，相對濕度40%～70%，空氣壓力梯度20 Pa。在模型制造前讓大鼠適應(yīng)環(huán)境7 d，自由進(jìn)食飲水。Notch1兔抗鼠多克隆抗體由美國Abcam公司提供，γ分泌酶抑制劑（DAPT）購自美國SELLECK生物科技有限公司，二甲基亞砜（dimethyl sulphoxide，DMSO）購自美國Sigma公司，伯樂電泳轉(zhuǎn)印系統(tǒng)、凝膠成像系統(tǒng)購自美國Bio-Rad公司，Nikon攝影生物光學(xué)顯微鏡購自日本株式會社尼康。

1.2 動物模型建立

將128只大鼠采用隨機(jī)數(shù)字法分為假手術(shù)組（sham組）、腦缺血再灌注模型組（CIR組）、CIP組、抑制劑組（DAPT組）。全腦缺血模型利用改良的Pulsinelli四血管阻斷法（4-VO）制作。動物常規(guī)麻醉，頸正中切口，分離雙側(cè)頸總動脈，在其下置線備用。切開大鼠枕后部正中，暴露雙側(cè)第1頸椎橫突翼孔，熱凝椎動脈，每次電凝時間約2～4 s，將翼小孔后雙側(cè)椎動脈永久閉塞。術(shù)后大鼠縫皮回籠，造模后24 h，在大鼠清醒狀態(tài)下以無創(chuàng)性微動脈夾夾閉兩側(cè)的頸動脈20 min，實行再灌注，最后完成縫合。CIP組大鼠先同CIR組大鼠一樣采用改良的Pulsinelli四血管閉塞法制作大鼠全腦缺血模型，實現(xiàn)永久再灌注前，進(jìn)行松開動脈夾15 s，夾閉15 s，如此進(jìn)行3次缺血/再灌注循環(huán)，實現(xiàn)CIP。假手術(shù)組分離暴露血管，但不電凝椎動脈，不夾閉頸總動脈。

1.3 水迷宮檢測空間學(xué)習(xí)記憶功能

模型制作完成后的48、72 h，采用Morris 水迷宮檢測大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶功能，Morris水迷宮是檢測空間學(xué)習(xí)記憶功能切確、客觀的一種方法，通過計算機(jī)系統(tǒng)記錄大鼠的游泳軌跡，記下其找到平臺時間和穿過平臺的次數(shù)。根據(jù)計算機(jī)的記錄儀記錄大鼠游泳的軌跡、逃避潛伏期以及穿臺次數(shù)，求各組均值。

1.4 HE染色檢測神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目及形態(tài)結(jié)構(gòu)

選取每組各時間點4只大鼠，以0.4%戊巴比妥納麻醉大鼠，開胸、暴露心臟，進(jìn)行4%多聚甲醛行心臟灌流后，斷頭取腦，4 ℃冰箱放置至少24 h。視交叉后1～6 mm 處冠狀面切開， 4%多聚甲醛固定液固定，石蠟包埋，連續(xù)冠狀切片，每只大鼠取5張海馬區(qū)切片，片厚4 μ m。切片常規(guī)脫蠟，行HE染色。選用Motic-6.0圖像采集以及分析系統(tǒng)計算每個視野存活的神經(jīng)元數(shù)，以平均細(xì)胞存活密度表示。

1.5 免疫組化檢測海馬區(qū)Notch1的表達(dá)

切片常規(guī)脫蠟，枸櫞酸鹽微波修復(fù)，然后滴加一抗（Notch1，1∶150），濕盒中4 ℃過夜，滴加二抗，37 ℃恒溫箱內(nèi)孵育1 h；DAB 顯色，蘇木素復(fù)染，脫水、透明、封片。用光學(xué)顯微鏡（×400）觀察并計數(shù)組織中陽性細(xì)胞數(shù)，每個大鼠取5 張切片，每個切片隨機(jī)選取不重復(fù)的視野3～5個，計數(shù)視野下陽性細(xì)胞數(shù)量。

1.6 Western blotting檢測海馬區(qū)Notch1蛋白的表達(dá)

脫頸法處死大鼠，迅速取雙側(cè)海馬區(qū)組織，4℃ PBS充分洗滌，加入裂解液，冰浴中勻漿，4 ℃、12 000 r/min離心15 min取上清。采用BCA法測定蛋白濃度，將0.8 mL蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液和BSA蛋白標(biāo)準(zhǔn)混合配制成濃度為25 mg/mL的蛋白標(biāo)準(zhǔn)液。依據(jù)電腦繪制出來的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算待測蛋白的濃度。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE），轉(zhuǎn)膜，封閉液中封閉1 h，加入CyclinD1、CDK4（1∶500）與actin （1∶1 000）的一抗，4℃孵育過夜，TBST洗膜，加二抗（1∶800），37 ℃孵育1 h，TBST洗膜，ECL顯影，用數(shù)碼成像分析系統(tǒng)軟件分析各因子的平均灰度值，比較目的因子和內(nèi)參的平均灰度值的比值。

1.7 統(tǒng)計學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，采用Excel建立數(shù)據(jù)庫，數(shù)據(jù)均采用x-±s表示，采用單因素方差分析，P ＜ 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠水迷宮檢測結(jié)果

與sham組比較，CIR組大鼠逃避潛伏期時間明顯延長、穿臺次數(shù)明顯減少（P ＜ 0.05），大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力呈明顯下降趨勢；與CIR比較，CIP組大鼠相應(yīng)時間點的潛伏期明顯縮短、穿臺次數(shù)明顯增加（P ＜ 0.05），提示CIP可顯著改善大鼠的學(xué)習(xí)記憶成績；與CIP組比較，DAPT組大鼠相應(yīng)時間點的逃避潛伏期明顯延長、穿臺次數(shù)明顯減少（P ＜ 0.05），大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力明顯下降。見表1、圖1。

2.2 各組大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)學(xué)變化

sham組大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元結(jié)構(gòu)完好、胞質(zhì)淡染而均勻；與sham組比較，CIR組神經(jīng)細(xì)胞存活率顯著降低（P ＜ 0.05），且CIR組大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元損壞，表現(xiàn)為細(xì)胞正常結(jié)構(gòu)消失，細(xì)胞形態(tài)異常；與CIR組比較，CIP組在相應(yīng)時間點神經(jīng)細(xì)胞存活率升高（P ＜ 0.05），且CIP組神經(jīng)元形態(tài)損傷程度減輕，胞質(zhì)淡染，細(xì)胞核變性情況減輕；DAPT組神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)不完整，與CIR組相似，與CIP組比較，DAPT組相應(yīng)時間點神經(jīng)細(xì)胞存活率降低（P ＜ 0.05）。見表2、圖2。

表1 各組大鼠水迷宮潛伏期和穿臺次數(shù)的比較（Tab.1 Comparison of the Morris water maze test results between each group（

表1 各組大鼠水迷宮潛伏期和穿臺次數(shù)的比較（Tab.1 Comparison of the Morris water maze test results between each group（

1） P ＜ 0.05 vs sham group；2） P ＜ 0.05 vs CIR group；3） P ＜ 0.05 vs CIP group.

72 h Escaping latency （s）Frequency of crossing the platform Escaping latency （s）Frequency of crossing the platform Sham 20.32±0.25 12.53±1.59 20.02±0.24 12.87±1.30 CIR 53.86±1.821） 4.14±0.981） 62.03±1.421） 2.97±1.261）CIP 41.35±1.601），2） 8.66±0.831），2） 45.96±1.461），2） 6.59±0.671），2）DAPT 46.62±1.451），3） 6.41±0.761），3） 54.88±1.391），3） 4.53±0.981），3）Group 48 h

圖1 各組大鼠水迷宮檢測Fig.1 Morris water maze test of rats in each group

2.3 各組大鼠海馬區(qū)Notch1免疫組化結(jié)果

sham組未見Notch1陽性細(xì)胞，其他組有不同程度的陽性產(chǎn)物表達(dá)，在48 h陽性細(xì)胞最多。與sham組比較，CIR組大鼠在各時間點Notch1陽性細(xì)胞數(shù)量顯著增加（P ＜ 0.05）；與CIR組比較，CIP組各時間點Notch1陽性細(xì)胞數(shù)量進(jìn)一步增加（P ＜ 0.05）；與CIP組比較，DAPT組相應(yīng)時間點Notch1陽性細(xì)胞數(shù)量減少（P ＜ 0.05）。見表3、圖3。

2.4 各組大鼠海馬區(qū)Notch1Western blotting結(jié)果

sham組Notch1蛋白表達(dá)量較少，其他組有不同數(shù)量的表達(dá)，均在48 h表達(dá)最高。與sham組比較，CIR組大鼠各時間點 Notch1蛋白的表達(dá)水平明顯增加（P ＜ 0.05）；與 CIR 組比較， CIP 組各時間點 Notch1?蛋白表達(dá)水平進(jìn)一步升高（P ＜ 0.05）；與CIP組比較，DAPT組各時間點Notch1蛋白表達(dá)水平降低 （P ＜0.05）。見表4、圖4。

表2 各組大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元存活率比較（%）Tab.2 Comparison of hippocampal nerve cell survival rates between each group（%）

表2 各組大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元存活率比較（%）Tab.2 Comparison of hippocampal nerve cell survival rates between each group（%）

1） P ＜ 0.05 vs sham group；2） P ＜ 0.05 vs CIR group；3） P ＜ 0.05 vs CIP group.

Nerve cell survival rate 6 h 24 h 48 h 72 h Sham 98.41±1.00 98.10±1.22 97.60±1.48 97.59±1.47 CIR 76.25±1.131） 69.14±1.631） 61.99±1.611） 4.19±1.751）CIP 87.06±0.911），2） 79.63±1.531），2） 70.10±1.681），2） 63.98±1.361），2）DAPT 81.08±1.661），2），3） 74.09±1.611），3） 65.05±1.591），3） 58.21±1.201），3）Group

圖2 大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞HE 染色 ×400Fig.2 HE staining of neuronal cells in the rat hippocampus ×400

表3 各組大鼠海馬區(qū)Notch1陽性細(xì)胞數(shù)比較（，個/高倍鏡視野）Tab.3 Comparison of Notch1-positive nerve cells between each group （，/HPF）

表3 各組大鼠海馬區(qū)Notch1陽性細(xì)胞數(shù)比較（，個/高倍鏡視野）Tab.3 Comparison of Notch1-positive nerve cells between each group （，/HPF）

1） P ＜ 0.05 vs sham group；2） P ＜ 0.05 vs CIR group；3） P ＜ 0.05 vs CIP group.

Group Notch1 positive nerve cell 6 h 24 h 48 h 72 h Sham 2.45±1.05 2.48±1.10 2.59±0.86 2.47±0.88 CIR 4.42±0.601） 6.48±0.931） 10.81±1.041） 8.76±1.011）CIP 8.63±0.941），2） 11.26±1.131），2） 15.89±1.111），2） 13.42±1.081），2）DAPT 6.30±0.911），3） 8.72±0.901），3） 12.70±1.041），3） 9.86±1.051），3）

圖3 大鼠海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞免疫組織化學(xué)染色 ×400Fig.3 Immunohistochemical staining of hippocampal nerve cells in rats ×400

3 討論

本研究結(jié)果顯示，CIR組與sham組比較，大鼠海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞存活率降低，神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)損傷嚴(yán)重，同時大鼠CIR所導(dǎo)致的腦損傷明顯影響大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，而CIP組可以促進(jìn)大鼠腦缺血再灌注后損害的學(xué)習(xí)功能恢復(fù)。CIP對腦缺血大鼠起到內(nèi)源性保護(hù)作用，可以明顯減輕缺血再灌注損傷。本研究中，與CIR組比較，CIP組各時間點海馬區(qū)神經(jīng)元損傷的細(xì)胞明顯減少，且細(xì)胞形態(tài)較規(guī)整，說明CIP可明顯減少腦缺血再灌注損傷。目前，CIP在缺血再灌注損傷的保護(hù)作用得到廣泛證實，已廣泛用于各種器官缺血再灌注損傷的研究之中，心肌、腎臟、肝臟等CIP可以明顯減輕缺血再灌注損傷［6-8］。但CIP發(fā)生發(fā)展的細(xì)胞分子機(jī)制十分復(fù)雜，目前仍未得到統(tǒng)一的答案。 孔渝菡等［9］利用大鼠腦缺血模型進(jìn)行CIP后檢測發(fā)現(xiàn)，CIP組IL-1β、IL-6的表達(dá)降低，提示炎癥介質(zhì)參與CIP過程；NEMETHOVA等［10］應(yīng)用腦片培養(yǎng)研究發(fā)現(xiàn)，CIP抑制腦組織中氧化應(yīng)激損傷的發(fā)生；PATELIYA等［11］研究發(fā)現(xiàn)CIP的保護(hù)機(jī)制與ATP依賴的鉀通道開放有關(guān)。因此，關(guān)于CIP對大鼠腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用的確切機(jī)制還待進(jìn)一步研究。

表4 各組大鼠海馬區(qū)Notch1蛋白水平比較（ Tab.4 Comparison of Notch1 protein levels between each group（

表4 各組大鼠海馬區(qū)Notch1蛋白水平比較（ Tab.4 Comparison of Notch1 protein levels between each group（

1） P ＜ 0.05 vs sham group；2） P ＜ 0.05 vs CIR group；3） P ＜ 0.05 vs CIP group.

Group Notch1 protein expression level 6 h 24 h 48 h 72 h Sham 0.15±0.04 0.16±0.05 0.15±0.05 0.16±0.04 CIR 0.28±0.081） 0.44±0.071） 0.72±0.041） 0.55±0.091）CIP 0.59±0.071），2） 0.73±0.051），2） 0.94±0.041），2） 0.82±0.071），2）DAPT 0.44±0.101），3） 0.58±0.081），3） 0.83±0.061），3） 0.65±0.081），3）

圖4 各組大鼠海馬區(qū)Notch1蛋白表達(dá)Fig.4 Protein expression of Notch1 in the hippocampal cells of rats in each group

Notch信號是一種進(jìn)化保守的信號通路，通過相鄰細(xì)胞之間Notch受體與配體的結(jié)合，對于干細(xì)胞自我更新起著至關(guān)重要的作用。Notch信號通路主要由Notch受體、配體、核內(nèi)CSL區(qū)與DNA結(jié)合，表達(dá)于多種組織和器官中，可調(diào)控細(xì)胞增殖、分化和凋亡。且在大鼠肝臟缺血再灌注損傷后，Notch1 信號通路能夠通過增加超氧化物歧化酶表達(dá)來加強(qiáng)超氧陰離子等的清除從而抑制氧化應(yīng)激，減輕肝臟缺血/再灌注損傷［12］。越來越多的研究指出Notch信號通路與神經(jīng)系統(tǒng)關(guān)系密切，是缺血性腦損傷后神經(jīng)發(fā)展的調(diào)控信號之一。研究［13］發(fā)現(xiàn)當(dāng)成年小鼠發(fā)生腦缺血時Notch信號通路被激活，該通路激活后可促進(jìn)缺血后神經(jīng)干細(xì)胞的存活。陳娉婷等［14］發(fā)現(xiàn)通過上調(diào)腦缺血再灌注大鼠海馬區(qū)Notch1、Notch2蛋白表達(dá)水平，調(diào)節(jié)Notch信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，促進(jìn)腦缺血損傷后神經(jīng)功能修復(fù)。陳曉梅［15］對腦卒中大鼠進(jìn)行高壓氧預(yù)處理，發(fā)現(xiàn)高壓氧可以提前激活Notch信號通路，促進(jìn)神經(jīng)功能損傷，明顯減輕梗死面積。本實驗運用免疫組織化學(xué)和Western blotting觀察CIP對大鼠海馬區(qū)Notch1蛋白表達(dá)情況，結(jié)果顯示CIP組各時間點的Notch1蛋白表達(dá)水平較CIR組明顯升高，且學(xué)習(xí)記憶能力明顯提高，說明CIP可以調(diào)節(jié)Notch信號通路的表達(dá)。CIP可減少脂質(zhì)過氧化反應(yīng)和超氧化物陰離子的產(chǎn)生，從而抑制氧自由基生成。而低氧環(huán)境可以激活Notch1信號通路并誘導(dǎo)其下游基因的表達(dá)。由此推測CIP對神經(jīng)的保護(hù)作用可能是通過提高Notch1信號，降低缺血所引起的氧化應(yīng)激損傷，從而減小對神經(jīng)元細(xì)胞的傷害。

學(xué)習(xí)記憶是大腦最重要的神經(jīng)功能之一，此功能的實現(xiàn)需要有完備的組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)突觸結(jié)構(gòu)的高度可塑性。SCHINDER等［16］提出了新生神經(jīng)細(xì)胞參與學(xué)習(xí)、記憶能力的可能突觸機(jī)制。王玨等［17］研究發(fā)現(xiàn)Notch信號通路對神經(jīng)干細(xì)胞的增殖起關(guān)鍵作用。CIP提高了小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，其機(jī)制可能是CIP引起了Notch1的表達(dá)增加，調(diào)節(jié)神經(jīng)干細(xì)胞增殖，改變突觸可塑性，從而提高了學(xué)習(xí)記憶能力。

綜上所述，本研究結(jié)果顯示CIP可能通過改善Notch1信號通路，減少了神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，提高了學(xué)習(xí)記憶能力。因此認(rèn)為CIP作為一種新的腦保護(hù)措施，可能從多機(jī)制途徑發(fā)揮對腦組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的保護(hù)作用，給臨床治療提供了一種新的治療策略。

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（編輯 武玉欣）

The Effect of Ischemic Postconditioning on the Notch1 Signaling Pathway and Learning and Memory in Rats with Cerebral Ischemia Reperfusion Injury

LIU Yao1，ZHAQ Xiaoyun1，HAN Ying1，ZHAO Yaning1，LI Jianmin2，LI Jianing3
（1. Department of Community Nursing，College of Nursing and Rehabilitation，North China University of Science and Technology，Tangshan 063000，China； 2. Department of Neurosurgery，Affiliated Hospital of North China University of Science and Technology，Tangshan 063000，China； 3. Department of Emergency，Tangshan People’s Hospital，Tangshan 063000，China）

ObjectiveTo assess the effect of ischemic postconditioning on the Notch1 signaling pathway，and learning and memory in rats with global cerebral ischemia.MethodsA total of 128 healthy male SD rats were randomly divided into the sham operation （sham），whole-brain ischemia（CIR），ischemic treatment（CIP），and inhibitor（DAPT） groups，with 32 rats in each group. A global cerebral ischemia model was generated using the modified Pulsinelli’s four-vascular occlusion model，and the inhibitor group was injected intraperitoneally with gamma secretase inhibitors （DAPT） before ischemic treatment. Rats’ learning and memory function results from the Morris water maze test were assessed by observing the changes in hippocampal CA1 neurons with HE staining. The expression of Notch1 in the CA1 area of the hippocampus was assessed using immunohistochemical and Western blotting methods in rats.ResultsCompared with the sham group，the hippocampal cell survival rate in the CIR group decreased significantly （P ＜ 0.05） and the expression level of Notch1 increased significantly （P ＜ 0.05）. Compared with the CIR group，the CIP group revealed a significantly higher hippocampal cell survival rate （P ＜ 0.05） and an increase in Notch1 expression （P ＜ 0.05）；compared with the CIP group，the hippocampal cell survival rate significantly decreased after DAPT administration （P ＜ 0.05） and Notch1 expression decreased significantly.ConclusionIschemic postconditioning can promote the recovery of learning and memory ability，which may relate to the activation of the Notch1 signaling pathway.

cerebral ischemia reperfusion injury； cerebral ischemic postconditioning； Notch1； learning and memory； rat

R743

A

0258-4646（2017）11-0984-06

10.12007/j.issn.0258-4646.2017.11.006

河北省自然科學(xué)基金（H2012401007）

劉瑤（1992-），女，碩士研究生.

趙雅寧，E-mail：zyning789@126.com

2017-03-25

網(wǎng)絡(luò)出版時間：