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運用高效液相色譜法檢測食品中丙烯酰胺

2018-02-14 13:00
現(xiàn)代食品 2018年9期
關(guān)鍵詞:丙烯酰胺檢測器色譜法

◎ 陸 燁

(上海市酒類產(chǎn)品質(zhì)量檢驗中心有限公司,上海 200081)

丙烯酰胺是一種白色晶體化學(xué)物質(zhì),無氣味,熔點82~86 ℃,沸點125 ℃,在丙酮、乙醇、乙醚及水中有較好的溶解性。有關(guān)資料顯示,日常食用的面包、油炸食品中都含有一定劑量的丙烯酰胺,因此,要高度重視丙烯酰胺的檢測,積極應(yīng)用現(xiàn)代化檢測手段,有效檢測不同食品中丙烯酰胺含量,為我國食品安全提供有效保障。

1 丙烯酰胺的形成機理與危害

1.1 丙烯酰胺的形成機理

丙烯酰胺的形成機理涉及多種說法,其學(xué)說理論指出,在高溫環(huán)境下,利用還原糖和天冬酰胺反應(yīng)獲得丙烯酰胺。后期其他相關(guān)學(xué)者發(fā)表論文對丙烯酰胺形成機制進行論述,解釋了利用美拉德反應(yīng)可以獲得該物質(zhì)。同時,該形成機制還涉及其他途徑,其中主要包括N-糖苷途徑和天冬酰胺途徑。

1.2 丙烯酰胺的危害分析

①丙烯酰胺具有神經(jīng)毒性,如果暴露量在0.2~10 mg/kg時,對神經(jīng)可造成一定程度損傷,而日常攝入量在0.3~0.8 μg/kg,同時,丙烯酰胺可誘導(dǎo)自由基釋放,導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)氧化應(yīng)激,因此存在一定致癌性,引發(fā)基因損傷或突變。②相關(guān)實驗數(shù)據(jù)顯示,在高劑量丙烯酰胺環(huán)境下有可能激發(fā)潛在腫瘤基因,導(dǎo)致部分癌癥風(fēng)險升高。③丙烯酰胺表現(xiàn)出一定生殖毒性,根據(jù)實驗數(shù)據(jù)表明,丙烯酰胺會對小鼠附睪精細(xì)胞膜產(chǎn)生一定危害,導(dǎo)致精子活性下降。

2 食品中丙烯酰胺含量的影響因素

2.1 原料

食物中丙烯酰胺含量會受到原料中天冬酰胺和還原性糖的影響??茖W(xué)家們深入分析了60多種土豆,由此獲取到丙烯酰胺含量會受到糖含量影響。同時,有關(guān)學(xué)者指出,常見谷類和淀粉類食品中丙烯酰胺含量會受到天冬酰胺影響,并且該影響要大于糖含量的影響,如果含有天冬酰胺成分較低,則食品中天冬酰胺含量越高,其含有丙烯酰胺含量會隨著上升,當(dāng)前者含量增加到一定含量,食品中丙烯酰胺含量會隨著降低。儲藏環(huán)境和種植條件會對還原糖和天冬酰胺含量產(chǎn)生一定影響,比如在種植馬鈴薯時應(yīng)用含氮高的化肥,則成熟后馬鈴薯含有天冬酰胺含量會比較高,如果儲藏環(huán)境溫度較低,則食品當(dāng)中還原糖含量會隨著升高,尤其是一些食品通過高溫加工后所含有丙烯酰胺含量會大大提升。

2.2 加熱

①丙烯酰胺生成會受到加熱溫度影響。食品在加熱過程中,當(dāng)溫度處在120~160 ℃時,丙烯酰胺生成量會隨著加熱溫度上升而增加,如果處在180~200 ℃,則丙烯酰胺含量會隨著加熱時間增加出現(xiàn)一個先上升后下降趨勢。比如,在低溫環(huán)境下貯藏馬鈴薯,該食品內(nèi)部分淀粉會以還原糖的形式存在,如果通過煎炸方式來處理馬鈴薯,則馬鈴薯顏色會加深,會生成大量丙烯酰胺,所以,馬鈴薯片如果用在油炸等途徑,則前期貯藏時盡量放在超過8 ℃環(huán)境中,或者在溫度比較高的環(huán)境中存放,避免馬鈴薯產(chǎn)生大量還原糖,防止油炸馬鈴薯時會有大量丙烯酰胺產(chǎn)生。②丙烯酰胺生成會受到加熱時間影響,如將蛋氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺以及葡萄糖加熱5~60 min,溫度控制在180 ℃,通過實驗?zāi)軌虬l(fā)現(xiàn),天冬酰胺和葡萄糖在加熱5 min時,其丙烯酰胺含量最高,后期加熱會逐漸降低。在加熱到10 min時,葡萄糖和谷氨酰胺反應(yīng)生成丙烯酰胺含量處于最高,后期加熱含量不會產(chǎn)生變化。在與蛋氨酸共同加熱時,當(dāng)加熱時間達(dá)到30 min時,其丙烯酰胺含量會隨著加熱時間延長逐漸增加,后期逐漸穩(wěn)定在某一水平。

3 高效液相色譜法檢測對食品中丙烯酰胺檢測

3.1 食物樣品處理

提取食品中的丙烯酰胺時,因為丙烯酰胺屬于極性化合物,所以在提取過程中要發(fā)揮有機溶劑作用,其中比較常用的有機溶劑有二氯甲烷-乙醇、乙酸乙酯、乙腈、甲醇-水以及水等,在提取丙烯酰胺時,提取方式主要包括固相微萃取、加速溶劑萃取以及液-液萃取。①在應(yīng)用液-液萃取方式時,其主要溶劑為水,主要是因為水可以溶解大量的丙烯酰胺,通過水混合一定比例溶劑,可以有效萃取食品中大部分的丙烯酰胺。在實際的萃取過程中,要想保障萃取質(zhì)量和萃取效率,要對溫度和加熱時間進行精確控制,將時間設(shè)置在30 min,萃取過程的加熱溫度要控制在60~80 ℃。②加速溶劑萃取技術(shù)應(yīng)用,如果食品樣品是固體或半固體,則在實施萃取之前要有效發(fā)揮加速溶劑萃取技術(shù)的作用,該技術(shù)主要是對壓力和溫度實施控制,其中壓力提升10~20 MPa,溫度要提升20~200 ℃,發(fā)揮其萃取效率高、選擇性好、基體影響好、快速以及使用溶劑含量少等優(yōu)勢。

3.2 食品樣品純化處理

大部分食品中含有丙烯酰胺雜質(zhì)較多,同時含量非常低,所以,要想獲取精確性檢測數(shù)據(jù)和檢測結(jié)果,需要通過有效的富集和純化方式來處理樣品中的丙烯酰胺,其中純化技術(shù)主要有化學(xué)純化法和固相萃取法,同時可以將兩種方法結(jié)合,從而保障純化質(zhì)量與純化效率。相關(guān)學(xué)者在應(yīng)用固相萃取-高效液相色譜法時,檢測出食品中丙烯酰胺含量在27~198 μg/kg。應(yīng)用化學(xué)純化法主要目的是清除樣品中可能存在的干擾物質(zhì),并依照干擾物基本特征來對沉淀劑實施選擇,其中Carrez是常用的一種沉淀劑。

3.3 高效液相色譜法在丙烯酰胺檢測中的應(yīng)用

高效液相色譜法在實際應(yīng)用時,其應(yīng)用機理基本相同,但要依照不同檢測目標(biāo)采用不同的處理技術(shù)。以氣相色譜理論為基礎(chǔ),檢測過程中涉及多種專業(yè)化技術(shù),其中包括高靈敏度、高壓泵以及高效固定相檢測器,是一種常見的檢測技術(shù)方法,涉及檢測器主要有二極管陳列檢測器、電化學(xué)檢測器、熒光檢測器以及紫外檢測器。首先從食品樣品中萃取出丙烯酰胺,然后實施純化處理,利用C18固相萃取技術(shù),分離過程使用Aglient XDB反向C18來實施,在實施測定時利用二極管陳列檢測器,從而獲取最終檢測數(shù)據(jù)與檢測結(jié)果,其中檢出量最低為10 ng/g,檢出限值為10 μg/kg,回收率為80%~115%。同時可以利用正相-高效液相色譜法實施檢測,首先將食品樣品進行粉碎處理,得到均勻小顆粒后,在70 ℃熱水中提取,然后經(jīng)過震蕩和離心環(huán)節(jié),最終充分過濾,再將正己烷脫脂加入其中,通過液相色譜法進一步測定后得出檢測限為10 μg/kg,回收率為95%~103%。通過結(jié)果能過看出,該方法和其他檢測方法結(jié)果非常接近,因此能夠?qū)κ称分斜0穼嵤┯行z測。

4 結(jié)語

由于丙烯酰胺會對人體產(chǎn)生危害,所以,要高度重視食品中丙烯酰胺含量問題,積極發(fā)揮高效液相色譜法來對食品當(dāng)中丙烯酰胺物質(zhì)實施有效檢測,同時深入分析何種情況下食品中丙烯酰胺含量會大幅度升高,并對此積極采取有效措施,從而有效降低食品當(dāng)中丙烯酰胺含量,為人們生命健康提供有效保障。

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