劉勇 趙龍 張凡 柏合

【摘要】 目的：探究在裸鼠繁育中應(yīng)用IVC獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)的效果。方法：自2016年6月從本校醫(yī)藥研究中心SPF級(jí)動(dòng)物室中，選擇一間約20 m2的房間，在無(wú)特殊病原微生物（SPF）屏障系統(tǒng)的基礎(chǔ)上安裝IVC獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)，作為研究組；另選擇相同大小的房間，僅安裝SPF屏障系統(tǒng)，作為對(duì)照組。研究起始，對(duì)照組與研究組都放置6只雌鼠（nu/+）與6只雄鼠（nu/nu），按照雌雄比1︰1的比例合籠。截止到2017年12月，統(tǒng)計(jì)兩組的分娩間隔、平均每胎產(chǎn)仔數(shù)、存活率。結(jié)果：兩組的分娩間隔、平均每胎產(chǎn)仔數(shù)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；研究組的存活率顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：在裸鼠的繁育過(guò)程中應(yīng)用IVC獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)，能夠顯著提升裸鼠的存活率，從而能為臨床動(dòng)物實(shí)驗(yàn)提供更多優(yōu)質(zhì)可用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

【關(guān)鍵詞】 裸鼠； SPF屏障系統(tǒng)； IVC獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)； 分娩間隔； 存活率

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.29.007

作為一種存在先天性免疫缺陷的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，裸鼠的免疫力低下是由于T細(xì)胞的缺失所造成的。裸鼠需要在無(wú)特殊病原微生物（specific pathogen free，SPF）級(jí)以上的環(huán)境中生長(zhǎng)。管理中稍有不慎就會(huì)導(dǎo)致種群的死亡與污染[1]。正因?yàn)槿绱?，裸鼠的繁育飼養(yǎng)成為困擾研究人員的重大問(wèn)題。裸鼠最重要的三個(gè)特征是無(wú)毛（hairless）、無(wú)胸腺（athymus）和裸體（Naked）。原種的裸鼠表現(xiàn)出無(wú)鼻毛的特征，足尖常常處于收縮的狀態(tài)、螺旋樣畸形。性成熟的雌性裸鼠沒(méi)有規(guī)律的發(fā)情周期，卵巢比較小，注射hCG后無(wú)法促進(jìn)其排卵。除了雌性裸鼠在生殖方面有缺陷外，雄性裸鼠經(jīng)常產(chǎn)生畸形的精子，活動(dòng)力低下，因此原種裸鼠的生育力極低[2]。新生的裸鼠剛開(kāi)始的生長(zhǎng)速度和正常小鼠沒(méi)有明顯差異，但在3周后，約是離乳的時(shí)間，裸鼠的生長(zhǎng)速度顯著遲緩，普遍表現(xiàn)出肝臟疾病，死亡率較高，平均壽命在14～25周。經(jīng)過(guò)優(yōu)化育種后的遠(yuǎn)交系無(wú)胸腺裸體小鼠在外形上看，與原種一致，全身接近于無(wú)毛，有時(shí)可在裸鼠的背部見(jiàn)到稀疏的帶狀毛，皮薄、褶皺較多[3]。為提高裸鼠的存活率、純合裸鼠（nu/nu）的獲得率，本研究中心引入獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)（individual ventilated cages，IVC），探究獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)在裸鼠繁育中的應(yīng)用，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 2016年6月本校醫(yī)藥研究中心從北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所購(gòu)入12只雌鼠（nu/+）、12只雄鼠（nu/nu），所選種鼠均為8周大。研究起始，對(duì)照組與研究組都放置6只雌鼠（nu/+）與6只雄鼠（nu/nu），按照雌雄比1︰1的比例合籠。

1.2 方法 從本校醫(yī)藥研究中心SPF級(jí)動(dòng)物室中，選擇一間約20 m2的房間，在SPF屏障系統(tǒng)的基礎(chǔ)上安裝IVC獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)，作為研究組；另選擇相同大小的房間，僅安裝SPF屏障系統(tǒng)，作為對(duì)照組。

1.2.1 獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)的安裝與使用 研究組所使用的獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)購(gòu)自蘇州市猴皇動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)備科技有限公司，產(chǎn)品型號(hào)為MKS-112，廠家安排專業(yè)的工人上門安裝。裸鼠放置在配套使用的過(guò)濾帽鼠盒與層流柜。IVC獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)的良好運(yùn)行，關(guān)鍵在于送、排風(fēng)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)與安裝。以國(guó)外先進(jìn)設(shè)備為基礎(chǔ)，將動(dòng)物福利考慮在內(nèi)，IVC籠盒內(nèi)的空氣流向應(yīng)該使得過(guò)濾凈化后的空氣均勻平穩(wěn)的分布在內(nèi)，構(gòu)成正壓風(fēng)幕，避免過(guò)強(qiáng)氣流的產(chǎn)生。

1.2.2 裸鼠的飼養(yǎng) （1）兩組室溫變化范圍控制在21～25 ℃。照明時(shí)間統(tǒng)一設(shè)定為光照12 h，黑暗12 h。空氣中的相對(duì)濕度控制30%～50%。（2）按照由低至高的不同級(jí)別設(shè)定空氣凈化與過(guò)濾裝置，三組空調(diào)交替完成過(guò)濾的任務(wù)[4]。（3）所用的生長(zhǎng)繁殖飼料購(gòu)買自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。飼料原料有豆渣、魚(yú)粉、啤酒酵母粉、植物油、玉米、小麥、麥麩、磷酸氫鈣、石粉、鐵、銅、錳、鋅、維生素A、維生素D、維生素E、維生素B1、泛酸等。最終飼料中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的終濃度為：水分10%，粗蛋白23.59%，粗纖維2.1%，粗脂肪5.01%，粗灰分7.68%等。飼料買來(lái)之后，由于裸鼠過(guò)于低下的免疫力，需要對(duì)其進(jìn)行放射的滅菌處理（Co60）。自由攝入，定期添補(bǔ)。每周可適量添加熟雞蛋黃、生瓜子[5]。（4）飲用水經(jīng)過(guò)凈水器（四季沐歌MU-Q01凈水機(jī)）處理后，用鹽酸將pH值調(diào)至3.5左右，并在水中加入適量的濃縮魚(yú)肝油粉（武漢遠(yuǎn)成共創(chuàng)科技有限公司生產(chǎn)）。自由攝入，定期添補(bǔ)。（5）每周更換一次墊料。

1.2.3 飼養(yǎng)注意事項(xiàng) 研究人員進(jìn)入鼠房?jī)?nèi)，應(yīng)穿著滅菌后的實(shí)驗(yàn)服，并佩戴無(wú)菌口罩、帽子、乳膠手套。

1.2.4 飼養(yǎng)記錄 裸鼠到達(dá)研究中心時(shí)即建立表格，將籠號(hào)詳細(xì)的記錄清楚，便于后續(xù)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。

1.3 觀察指標(biāo) 每日上午9點(diǎn)至10點(diǎn)觀察裸鼠繁育情況。從每只雌鼠生下第一窩仔鼠開(kāi)始記錄，截止到2017年12月底，統(tǒng)計(jì)兩組的分娩間隔、平均每胎產(chǎn)仔數(shù)，以及統(tǒng)計(jì)8周后的存活率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 18.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對(duì)照組的分娩間隔為（41.2±2.7）d，研究組為（43.7±2.8）d，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.986，P=0.064）。對(duì)照組平均每胎產(chǎn)（7.8±1.4）只，研究組平均每胎產(chǎn)（7.9±2.8）只，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.012，P=0.071）。仔鼠出生8周即性成熟后，對(duì)仍健在的新生裸鼠數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，對(duì)照組的存活率為（76.9±3.4）%，顯著低于研究組的（86.4±1.7）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-6.122，P<0.001）。

3 討論

20世紀(jì)60年代，在英國(guó)的一家醫(yī)院里，一位醫(yī)生無(wú)意間在非近交系小鼠中發(fā)現(xiàn)幾只沒(méi)有毛發(fā)包被的小鼠。同年代，有學(xué)者證明了這種沒(méi)有毛發(fā)的小鼠的產(chǎn)生是由于染色體上的等位基因突變所造成的[6]。對(duì)這種小鼠的皮膚組織與正常小鼠的皮膚進(jìn)行組織學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)有異常，經(jīng)證明是常染色體退化導(dǎo)致的，因此得名“裸體（Nude）”，“nu”是其突變的基因符號(hào)，可惜當(dāng)時(shí)沒(méi)有引起大眾的注意[7]。此后，當(dāng)研究人員發(fā)現(xiàn)裸鼠不具有胸腺，這才吸引了醫(yī)學(xué)與生物學(xué)相關(guān)的研究人員的關(guān)注。在裸鼠被發(fā)現(xiàn)之前，用動(dòng)物模型去進(jìn)行免疫學(xué)的研究，一般選擇的是給小鼠注射抑制T細(xì)胞的藥物，或者是手術(shù)摘除胸腺。由于藥物對(duì)T細(xì)胞的抑制作用不完全，手術(shù)的副作用過(guò)多，關(guān)于免疫學(xué)的研究進(jìn)展處于一個(gè)緩慢前進(jìn)的狀態(tài)。而裸鼠的發(fā)現(xiàn)，為免疫學(xué)的研究與進(jìn)展提供了一個(gè)理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型[8]。

因?yàn)槁闶笤N過(guò)于低下的免疫力，壽命短，生育率也較低，無(wú)法大規(guī)模的應(yīng)用于實(shí)際的研究工作。目前在裸鼠的繁育過(guò)程中不用nu/nu雌鼠，因其繁殖性能低，一般采用雜合子交配方式或隱性純合子雄性與雜合子雌鼠交配。這種交配方法，其后代將出現(xiàn)表現(xiàn)型正常的仔鼠和裸鼠，比例為1︰1。為了改良這些缺點(diǎn)，人們將原種裸鼠與其他種群的小鼠雜交，一代代繁育，最終獲得了壽命較長(zhǎng)、生育率好、免疫力能耐受SPF的遠(yuǎn)交系無(wú)胸腺裸體小鼠，得以廣泛應(yīng)用[9]。

因?yàn)闆](méi)有T細(xì)胞維持免疫力，繁育裸鼠所用的飼料、所處環(huán)境要求條件較為嚴(yán)格。國(guó)外的研究人員經(jīng)過(guò)多年的繁育，得出了一定的經(jīng)驗(yàn)。裸鼠的繁育條件采用無(wú)特定病原體（SPF）級(jí)，飼養(yǎng)條件選定為屏障系統(tǒng)或隔離系統(tǒng)[10]。但是一些發(fā)生在裸鼠中的傳染性疾病也有所報(bào)道。各國(guó)根據(jù)自己的實(shí)際需要，在自身?xiàng)l件的基礎(chǔ)上建立了相應(yīng)的質(zhì)量控制方法，大力促進(jìn)了裸鼠繁育工作和以裸鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的其他相關(guān)學(xué)科的飛速發(fā)展[11]。

裸鼠的淋巴細(xì)胞與正常的淋巴細(xì)胞狀態(tài)不同，由于胸腺的異常，進(jìn)而引發(fā)T細(xì)胞由無(wú)活性的狀態(tài)到有活性的轉(zhuǎn)變出現(xiàn)障礙[12]。雖然B細(xì)胞、T細(xì)胞的前體是正常的，由于胸腺不存在，因此無(wú)形成有功能的正常的T細(xì)胞[13]。因?yàn)椴淮嬖谛叵?，裸鼠的免疫反?yīng)是不完整的、異常的，是一種免疫缺陷動(dòng)物。胸腺分布于健全的小鼠的胸骨柄的后方，毗鄰氣管、位于心臟的腹面，胸腺分左右兩葉，外形呈現(xiàn)乳白色脂肪狀。機(jī)體免疫功能的正常與否，與胸腺有著密切的關(guān)系，有研究可以證明，胸腺能夠分泌多種表現(xiàn)出生物活性的多肽類物質(zhì)，統(tǒng)稱為胸腺素[14]。胸腺素能夠促使淋巴組織增殖分化形成新的淋巴細(xì)胞；胸腺素已被證實(shí)同機(jī)體免疫技能有密切的關(guān)系，能夠促進(jìn)來(lái)自其他組織的原始淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)變成有免疫活性的T淋巴細(xì)胞，進(jìn)而發(fā)揮免疫功能。

為了防止基因突變以恢復(fù)裸鼠的免疫功能，常在裸鼠中應(yīng)用多種免疫學(xué)檢測(cè)方法來(lái)證明其T淋巴細(xì)胞處于缺陷的狀態(tài)[15]。例如，使用羊紅細(xì)胞或者是地鼠的紅細(xì)胞反復(fù)免疫，T淋巴細(xì)胞的免疫功能沒(méi)有得到恢復(fù)，如果再用三硝基苯基修飾過(guò)的上述兩種紅細(xì)胞進(jìn)一步免疫，裸鼠體內(nèi)沒(méi)有產(chǎn)生三硝基抗體，則證明還是原來(lái)的裸鼠。除了應(yīng)用紅細(xì)胞進(jìn)行驗(yàn)證，用狂犬活疫苗對(duì)裸鼠與正常小鼠進(jìn)行驗(yàn)證，關(guān)于血清中抗體的產(chǎn)生、或者是抗體本身的功能，裸鼠與正常小鼠呈現(xiàn)出不一樣的趨勢(shì)，通過(guò)該種處理的正常小鼠能表現(xiàn)出良好的免疫功能，而裸鼠無(wú)法產(chǎn)生可被檢測(cè)到的免疫反應(yīng)[16]。

IVC獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)，是應(yīng)用于小型嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)的新一代SPF級(jí)、凈化通氣的飼養(yǎng)裝備，可以取代傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)的屏障、凈化系統(tǒng)。近些年來(lái)在國(guó)內(nèi)許多以小型嚙齒類動(dòng)物為研究對(duì)象的研究室，IVC的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。這種在SPF級(jí)別上加裝的空氣凈化設(shè)備，即不同于過(guò)去那種完全的屏障，也不同于開(kāi)放環(huán)境下的IVC安裝。與單純的SPF級(jí)屏障系統(tǒng)做比較，三級(jí)凈化空調(diào)機(jī)組耗電量降低，由于IVC系統(tǒng)本身運(yùn)行所需要的耗電量很低，因此IVC的應(yīng)用能夠節(jié)省運(yùn)營(yíng)成本[17]。空氣進(jìn)入IVC系統(tǒng)前，經(jīng)過(guò)了三級(jí)空調(diào)凈化后，又經(jīng)過(guò)了IVC主機(jī)與各個(gè)籠盒的凈化，裸鼠所呼吸到的空氣處于一個(gè)相對(duì)潔凈的狀態(tài)。由于進(jìn)入IVC系統(tǒng)之前，空氣已經(jīng)被過(guò)濾，這樣的操作能夠在一定程度長(zhǎng)延長(zhǎng)IVC系統(tǒng)的使用壽命與效率。這樣，既能保證了裸鼠生長(zhǎng)繁殖的微環(huán)境處于SPF狀態(tài)，也能防止裸鼠之間相互傳染疾病，同時(shí)對(duì)研究人員的身體健康起到了保護(hù)的作用。由于裸鼠沒(méi)有毛發(fā)進(jìn)行包被與保護(hù)，其適于裸體小鼠的室溫為26～28 ℃（78～820 F），

其散失體溫較有毛小鼠為快。處于連續(xù)空氣層流中，它們的散熱更快，需要大約28 ℃（800 F）的室溫予以補(bǔ)償。一般飼料室內(nèi)溫度控制在（25±1）℃也可以。如果裸鼠和有毛雜合子鼠同籠飼養(yǎng)時(shí)室溫可略低一點(diǎn)。飼料在連續(xù)空氣層流室中的裸鼠需要將層流室內(nèi)溫度提高到28 ℃。相對(duì)濕度應(yīng)保持在40%～60%，此時(shí)，成年裸體小鼠皮膚水分散失最少。濕度過(guò)低，對(duì)新生裸鼠生存不利，這在空氣層流環(huán)境中尤為重要。

IVC獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)的良好運(yùn)行，關(guān)鍵在于送、排風(fēng)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)與安裝。以國(guó)外先進(jìn)設(shè)備為基礎(chǔ)，將動(dòng)物福利考慮在內(nèi)，IVC籠盒內(nèi)的空氣流向應(yīng)該使得過(guò)濾凈化后的空氣均勻平穩(wěn)的分布在內(nèi)，構(gòu)成正壓風(fēng)幕，避免過(guò)強(qiáng)氣流的產(chǎn)生[18]。要防止籠盒內(nèi)的裸鼠特別是新生的仔鼠，由于風(fēng)速過(guò)大、通風(fēng)過(guò)度而出現(xiàn)脫水的現(xiàn)象，與其他普通小鼠相比，沒(méi)有毛發(fā)包裹的裸鼠更容易脫水致死。除了籠盒上部的氣流，籠盒下部也應(yīng)該有均勻穩(wěn)定的氣流通過(guò)，以使得墊料處于干燥的狀態(tài)，將裸鼠代謝產(chǎn)生的異位一并排出。送、排風(fēng)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)需要適用于整體（小于

5 kPa）或分體式獨(dú)立通風(fēng)籠具的設(shè)計(jì)與制作[19]。

經(jīng)過(guò)改良育種后的遠(yuǎn)交系無(wú)胸腺裸鼠，依據(jù)有無(wú)IVC分為研究組與對(duì)照組。對(duì)照組的分娩間隔（41.2±2.7）d與研究組（43.7±2.8）d比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而對(duì)照組平均每胎產(chǎn)仔數(shù)為（7.8±1.4）只，研究組為（7.9±2.8）只，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），這說(shuō)明在裸鼠繁育中應(yīng)用IVC系統(tǒng)對(duì)其生育能力沒(méi)有顯著影響。新生的仔鼠出生8周即性成熟后，對(duì)照組的存活率為（76.9±3.4）%，顯著低于研究組的（86.4±1.7）%（P<0.05）。

綜上所述，在裸鼠繁育的過(guò)程中，應(yīng)用IVC獨(dú)立送風(fēng)系統(tǒng)，對(duì)裸鼠的生育能力沒(méi)有影響的同時(shí)還能夠顯著性的提升新生仔鼠的存活率，使擴(kuò)群的速度與質(zhì)量得到有效的保證，為下一步進(jìn)行免疫學(xué)方面的研究或者是構(gòu)建多種人惡性腫瘤的模型奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，在臨床研究中具有較大的應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]王麒龍，王愛(ài)東，芮琴，等.全腦穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白的膠質(zhì)瘤模型裸鼠的制備與鑒定[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2016，33（5）：1412-1416.

[2]張亞立，徐陽(yáng)，金華國(guó)，等.雙盤管冷源溫濕度獨(dú)立控制系統(tǒng)新風(fēng)送風(fēng)方式研究[J].暖通空調(diào)，2016，46（6）：87-90.

[3] Hasegawa K，Suetsugu A，Nakamura M，et al.Imaging Nuclear-Cytoplasmic Dynamics in Primary and Metastatic Colon Cancer in Nude Mice[J].Anticancer Research，2016，36（5）：2113.

[4]范為之，姜心禪，關(guān)永格，等.裸鼠人來(lái)源性子宮腺肌病造模方法的比較[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2017，25（1）：43-47.

[5]馮雪，宋永，周敏，等.子宮內(nèi)膜異位癥裸鼠模型子宮內(nèi)膜的雌、孕激素受體表達(dá)[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2016，25（2）：112-115.

[6] Ramirez D，Maurice M J，Cohen B，et al.Robotic Level III IVC Tumor Thrombectomy： Duplicating the Open Approach[J].Urology，2016，90（4）：204-207.

[7]唐煥煥，沈曉燕，段小群，等.不同U87細(xì)胞數(shù)量對(duì)裸鼠原位惡性膠質(zhì)瘤模型構(gòu)建的影響[J].山東醫(yī)藥，2016，56（10）：29-30.

[8]文彬，孫海濤，賀松其，等.鱉甲煎丸對(duì)HepG2裸鼠移植瘤的抑制作用及瘤體組織中β-catenin、Tbx3表達(dá)水平的影響[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，36（2）：210-214.

[9] Zhang Z，Tong J，Tang X，et al.The ubiquitin ligase HERC4 mediates c-Maf ubiquitination and delays the growth of multiple myeloma xenografts in nude mice[J].Blood，2016，127（13）：1676-1686.

[10]鞠思敏，陳飛，劉均，等.上頜竇黑色素瘤原位裸鼠模型的建立及其生物學(xué)特征[J].臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2017，31（20）：1599-1602.

[11]楊曉，蔣益蘭，李勇敏，等.健脾消癌方對(duì)大腸癌肝轉(zhuǎn)移裸鼠模型肝組織MMP-9、TIMP-1表達(dá)的影響[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2016，22（10）：1323-1325.

[12] Chen S，Chen J Z，Zhang J Q，et al.Hypoxia induces TWIST-activated epithelial-mesenchymal transition and proliferation of pancreatic cancer cells in vitro and in nude mice[J].Cancer Letters，2016，383（1）：73-84.

[13]李紅俊，楊天華，黃艷平，等.近紅外熒光蛋白和熒光素酶雙標(biāo)記肝細(xì)胞癌移植裸鼠模型的建立[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2017，33（11）：1529-1533.

[14]王龍，唐軍，劉增禮，等.68Ga-DOTA-cRGD的制備及對(duì)荷肺腺癌裸鼠的顯像研究[J].中華核醫(yī)學(xué)與分子影像雜志，2016，36（2）：127-130.

[15] Zhang Y，Tome Y，Suetsugu A，et al.Determination of the optimal route of administration of Salmonella typhimurium A1-R to target breast cancer in nude mice[J].Anticancer Research，2017，32（7）：2501.

[16]倪惠娟，張舟，戴永東，等.人子宮內(nèi)膜異位癥裸鼠皮下模型的構(gòu)建[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2016，96（33）：2675-2677.

[17]李猛，楊璐璐，陳琢，等.CAFs及IL-8對(duì)裸鼠人卵巢癌移植瘤生長(zhǎng)的影響[J].山東醫(yī)藥，2016，56（21）：25-27.

[18]陳愉生，涂洵崴，俞梅娥，等.裸鼠肺癌腦轉(zhuǎn)移模型中血腦屏障超微結(jié)構(gòu)的觀察[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2016，24（5）：494-498.

[19]張乃鍵，蔣森，吳欽良，等.miR-100對(duì)裸鼠食管鱗狀細(xì)胞癌移植瘤生長(zhǎng)的影響[J].山東醫(yī)藥，2016，56（38）：35-37.

（收稿日期：2018-06-06） （本文編輯：張爽）