張士才

[摘要] 目的 探討T.spotTB聯(lián)合結(jié)核抗體檢測在結(jié)核病診斷中的應用價值。 方法 選擇我院于2016年5月～2017年5月期間收治的結(jié)核病患者89例（結(jié)核組），非結(jié)核呼吸系統(tǒng)患者74例（非結(jié)核組）；另選擇我院2016年5月～2017年5月期間健康體檢者50例作為對照組。觀察采用T.spotTB、結(jié)核抗體檢測結(jié)核病的陽性率及聯(lián)合檢測靈敏度和特異度。 結(jié)果 T.spotTB檢測結(jié)核組陽性率高于非結(jié)核組和對照組，非結(jié)核組陽性率高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；結(jié)核抗體檢測結(jié)核組陽性率高于非結(jié)核組和對照組，非結(jié)核組陽性率高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；T.spotTB聯(lián)合結(jié)核抗體檢測結(jié)核組陽性率高于非結(jié)核組和對照組，非結(jié)核組陽性率高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；T.spotTB聯(lián)合結(jié)核抗體檢測靈敏度和特異度高于T.spotTB、結(jié)核抗體。 結(jié)論 T.spotTB聯(lián)合結(jié)核抗體檢測在結(jié)核病診斷中具有重要價值，診斷陽性率較高，且聯(lián)合診斷靈敏度和特異度較高。

[關(guān)鍵詞] T.spotTB；結(jié)核抗體；結(jié)核病；診斷價值

[中圖分類號] R521 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2018）01-0127-03

The value of T.spotTB combined with tuberculosis antibody test in the diagnosis of tuberculosis

ZHANG Shicai

Department of Clinical Laboratory， Tai'an Tumour Prevention and Treatment Hospital in Shandong Province 271000， China

[Abstract] Objective To investigate the value of T.spotTB combined with tuberculosis antibody in the diagnosis of tuberculosis. Methods A total of 89 cases tuberculosis teated in our hospital from May 2017 to May 2016 were selected as tuberculosis group； A total of 74 cases non tuberculous respiratory system teated in our hospital from May 2016 to May 2017 were selected as non tuberculosis group； another 50 cases healthy persons in our hospital from May 2016 to May 2017 were selected as control group. The positive rate of tuberculosis and the sensitivity and specificity of combined detection were detected by T.spotTB and TB antibody. Results the positive rate of T.spotTB detection of tuberculosis group was higher than non tuberculosis group and control group， non tuberculosis group was higher than control group（P<0.05）； tuberculosis antibody positive rate of tuberculosis group was higher than non tuberculosis group and control group， non tuberculosis group was higher than control group（P<0.05）； the rate of T.spotTB combined with Mycobacterium tuberculosis antibody detection of tuberculosis group was higher than non tuberculosis group and control group， non tuberculosis group was higher than tcontrol group（P<0.05）； T.spotTB combined with Mycobacterium tuberculosis antibody detection sensitivity and specificity than T.spotTB and tuberculosis antibody. Conclusion T.spotTB combined with TB antibody detection is of great value in the diagnosis of tuberculosis， and the diagnostic rate is high， and the sensitivity and specificity of the combined diagnosis are higher.

[Keywords] T.spotTB； Tuberculosis antibody； Tuberculosis； Diagnostic value

結(jié)核病主要是由結(jié)核分枝桿菌感染，且是一種慢性傳染病，近年來其發(fā)病率呈不斷上升趨勢，嚴重影響人們身心健康和生活質(zhì)量[1-2]。結(jié)核病發(fā)生后對體內(nèi)的許多器官產(chǎn)生不同程度的損害，使其生理功能受到嚴重影響[3]。目前，臨床上采用細菌學診斷是結(jié)核病診斷的“金標準”，并且在早期以痰結(jié)核菌試驗診斷結(jié)核病，不僅細菌培養(yǎng)耗時較長、陽性檢出率低且操作復雜[4]。因此，臨床上采取有效的檢測方法尤為重要[5-6]。研究探討T.spotTB聯(lián)合結(jié)核抗體檢測在結(jié)核病診斷中的應用價值，旨在為臨床治療結(jié)核病提供一定參考價值?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2016年5月～2017年5月期間收治的結(jié)核病患者89例（結(jié)核組），按照《臨床診療指南結(jié)核病分冊》[7]中相關(guān)診斷標準。89例患者中，男54例、女35例，年齡24～75歲、平均（54.28±4.62）歲。選擇我院2016年5月～2017年5月間收治的非結(jié)核呼吸系統(tǒng)患者74例（非結(jié)核組），其中男45例、女29例，年齡24～75歲、平均（55.03±5.17）歲。另選擇我院2016年5月～2017年5月期間健康體檢者50例作為對照組，其中男32例、女18例，年齡24～75歲、平均（54.68±4.91）歲。三組性別和年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 納入標準及排除標準

納入標準：（1）經(jīng)胸膜活檢、痰菌實驗及X線檢查等證實為結(jié)核病患者；（2）經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準者；（3）簽署知情同意書者。

排除標準：（1）結(jié)核病高風險感染者；（2）合并肺、腎、肝等功能嚴重異常者；（3）精神疾病者；（4）哺乳期或者妊娠期婦女。

1.3 主要儀器和試劑

主要儀器：BACTEC MGIT 960型快速培養(yǎng)儀（美國BD公司）。

主要試劑：結(jié)核分枝桿菌抗體診斷試劑盒（廣州健侖生物科技有限公司）。

1.4 方法

1.4.1 細胞混合液標本采集及T.spotTB檢測 所有研究對象均于入院后清晨空腹采集3 mL外周靜脈血，于室溫下加培養(yǎng)液混合均勻，分離，得到單個細胞層，加入細胞懸液10 μL和0.4%細胞稀釋液40 μL，取細胞混合液，將其加入細胞計數(shù)板中，處理活細胞計數(shù)，且在培養(yǎng)板中加入50 μL抗原A、50 μL抗原B、50 μL AIM-V無血清培養(yǎng)液，置于5%CO2、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)孵育24 h，棄去舊培養(yǎng)液，加入50 μL新鮮酶標抗體溶液，置于4℃下培養(yǎng)60 min后，再加入底物溶液50 μL，反應8 min，洗滌，干燥處理，進行斑點計數(shù)。

1.4.2 血清標本采集及結(jié)核抗體檢測 所有研究對象均于入院后清晨空腹采集3 mL外周靜脈血，以離心半徑15 cm，轉(zhuǎn)速2500 r/min，離心，分離血清，置于-20℃下保存待測。檢測血清38 kD-免疫球蛋白G（IgG）。血清中結(jié)核IgG能夠被結(jié)核分枝桿菌抗原所捕獲，且IgG抗體可與SPA膠體結(jié)合形成特異性紅色斑點，若檢測出現(xiàn)紅色斑點則為陽性。

1.5 觀察指標

（1）觀察三組T.spotTB檢測、結(jié)核抗體檢測及T.spotTB聯(lián)合結(jié)核抗體結(jié)核陽性率并比較；（2）觀察T.spotTB和結(jié)核抗體聯(lián)合檢測靈敏度和特異度。靈敏度=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%；特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%。

1.6 統(tǒng)計學方法

采用SPSS22.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計及處理，三組之間計數(shù)資料比較采用R×C卡方分割檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 三組T.spotTB檢測、結(jié)核抗體檢測及T.spotTB聯(lián)合結(jié)核抗體檢測結(jié)核陽性率比較

T.spotTB檢測結(jié)核組陽性率高于非結(jié)核組和對照組（P<0.05），非結(jié)核組陽性率高于對照組（P<0.05）。見表1。結(jié)核抗體檢測結(jié)核組陽性率高于非結(jié)核組和對照組，非結(jié)核組陽性率高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；T.spotTB聯(lián)合結(jié)核抗體檢測結(jié)核組陽性率高于非結(jié)核組和對照組，非結(jié)核組陽性率高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

2.2 T.spotTB聯(lián)合結(jié)核抗體檢測靈敏度和特異度

T.spotTB聯(lián)合結(jié)核抗體檢測靈敏度和特異度高于T.spotTB、結(jié)核抗體。見表2。

3 討論

結(jié)核病主要是由結(jié)核分枝桿菌感染所致的一種慢性傳染性疾病。臨床上診斷結(jié)核病并不容易，由于其多因素復雜化，如免疫抑制劑的使用增多、人口老齡化、糖尿病的流行及獲得性免疫缺陷綜合征的越發(fā)猖獗等，肺結(jié)核引發(fā)的癥狀通常缺乏特異性，并且體征對其診斷有所限制[8-9]。大部分肺結(jié)核的影像學表現(xiàn)與臨床表現(xiàn)相比于傳統(tǒng)的肺結(jié)核存在很大的出入。結(jié)核病的輔助檢查中尤以痰培養(yǎng)作為結(jié)核病診斷的金標準，但其培養(yǎng)陽性率較低，并且對潛伏期結(jié)核實用性差，培養(yǎng)操作周期長、要求高，同時不能及時診斷肺結(jié)核，從而可能會延誤結(jié)核的最佳治療時機[10-12]。因此，臨床上采用有效的診斷結(jié)核病的方法尤為重要。近年來研究報道顯示，T.spotTB試驗用于結(jié)核病診斷方面取得良好效果，且具有較高的靈敏度和特異度[13]。

T.spotTB是以酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)為基礎而產(chǎn)生，主要是通過利用結(jié)核桿菌感染者外周血單核細胞中存在結(jié)核特異性T細胞，在受到結(jié)核桿菌特異抗原刺激后這些淋巴細胞分離干擾素-γ而設計的T細胞免疫斑點試驗[14]。結(jié)核特異的混合抗原A和混合抗原B、PBMC，與對照試劑一起加入預先包被抗體的微孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)[15]。當出現(xiàn)PBMC中存在特異性T細胞時，加入培養(yǎng)液中的結(jié)核桿菌特異混合抗原多肽A和B將刺激其分泌。本文研究結(jié)果表明，T.spotTB檢測結(jié)核組陽性率高于非結(jié)核組和對照組，非結(jié)核組陽性率高于對照組，說明T.spotTB檢測陽性率較高。血清結(jié)核抗體試驗不受卡介苗接種影響，具有操作簡單、重復性好，且不受人為因素影響。血清結(jié)核抗體敏感性不高，按照結(jié)核抗體來源種類不同，分為單克隆與多克隆抗體，其中單克隆抗體技術(shù)要求高，多克隆抗體制備方法簡便，應用較多[16-19]。其中單克隆抗體設備繁瑣，并且及時要求高；多克隆抗體制備方法簡便，應用較多。但單克隆抗體特異性高于多克隆抗體，是一種診斷理想的抗體。本文研究結(jié)果表明，結(jié)核抗體檢測結(jié)核組陽性率高于非結(jié)核組和對照組，非結(jié)核組陽性率高于對照組，說明結(jié)核抗體檢測陽性率相對較低。但臨床研究報道顯示，血清結(jié)核抗體敏感度較低，而T.spotTB特異度較低[20]。本文研究表明，T.spotTB試驗檢測特異度僅為26.32%，結(jié)核抗體試驗檢測敏感度僅為45.76%，與上述研究報道基本一致。

綜上所述，T.spotTB聯(lián)合結(jié)核抗體檢測在結(jié)核病診斷中具有重要價值，診斷陽性率較高，且聯(lián)合診斷靈敏度和特異度較高。但本文研究還存在觀察患者較少不足，故而還需在后續(xù)研究中增加觀察患者進行深入研究，提供可靠的臨床參考價值。

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（收稿日期：2017-09-19）