蔣豐智，曾俊峰，趙青，唐明生，黎小秀

(1 東莞市婦幼保健院，廣東東莞523000；2 東莞市第三人民醫(yī)院)

臨床及流行病學(xué)資料[1]顯示，川崎病(kawasaki disease,KD)是一類因感染觸發(fā)的急性自身免疫性血管炎綜合征，是兒童獲得性心臟病的最重要病因。KD患兒的早期識(shí)別對(duì)治療及預(yù)后非常重要，目前KD的診斷主要依靠臨床表現(xiàn)和心臟超聲檢查，臨床上廣泛應(yīng)用的常規(guī)炎性指標(biāo)(WBC、PCT、CRP、ESR)和D-二聚體、PLT等凝血指標(biāo)特異性不是很高，尋找新的KD生物標(biāo)志物意義重大[2]。正五聚蛋白3(pentraxin-3，PTX3)作為一種與血管炎癥密切相關(guān)的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在KD患兒的治療中備受關(guān)注。本研究觀察了KD患兒外周血PTX3水平變化，并探討其意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2017年1月～2018年5月東莞市婦幼保健院和東莞市第三人民醫(yī)院收治的KD患兒64例(KD組)，其中男39例、女25例，年齡3～70個(gè)月。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合2017年美國(guó)心臟協(xié)會(huì)(American Heart Association，AHA)臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；②患兒發(fā)病年齡<6歲；③按病情進(jìn)行靜脈免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin，IVIG)和阿司匹林標(biāo)準(zhǔn)治療后臨床恢復(fù)良好者；④能在門診定期復(fù)診者。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有心血管系統(tǒng)(包括先天性)、免疫系統(tǒng)疾病或近期使用過(guò)免疫調(diào)節(jié)劑的患兒。KD組患兒在治療前接受心臟彩超檢查，參照相關(guān)文獻(xiàn)[4]標(biāo)準(zhǔn)，依據(jù)左、右冠狀動(dòng)脈主干內(nèi)徑測(cè)定值評(píng)價(jià)患兒冠狀動(dòng)脈病變程度，將64例急性期KD患兒分為冠脈損傷組(CAL組，18例)和非冠脈損傷組(NCAL組，46例)。同期選取體檢健康兒童30例(健康組，男20例、女10例，年齡6～60個(gè)月)、發(fā)熱超過(guò)5 d的呼吸道感染患兒30例(發(fā)熱組,男16例、女14例，年齡5～62個(gè)月)作對(duì)照。本研究獲兩家醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患兒及家長(zhǎng)知情同意。

1.2 外周血PTX3和炎癥因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)檢測(cè) KD組患兒分別于臨床病程急性期[發(fā)病后第5～7天)、亞急性期(發(fā)病后第11～13天，連續(xù)注射IVIG(1 g/kg)2 d并口服阿司匹林熱退48 h以上]以及恢復(fù)期(發(fā)病后第4～5周)各采集靜脈血1次，標(biāo)本均靜置1 h后3000 r/min(離心半徑10 cm)離心10 min，分離得血清1.5～2 mL，保存于-30 ℃冰箱備用。健康組和發(fā)熱組兒童于入組時(shí)常規(guī)無(wú)菌靜脈采血3～4 mL。采用ELISA法檢測(cè)各組兒童外周血PTX3和炎癥因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)水平。

2 結(jié)果

2.1 各組外周血PTX3和IL-1β、IL-6、TNF-α水平比較 結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 各組外周血PTX3和IL-1β、IL-6、TNF-α水平比較[M(P25,P75)]

注：與健康組相比，﹡P<0.05；與發(fā)熱組相比，﹟P<0.05；與KD組恢復(fù)期相比，△P<0.05；與KD組亞急性期相比，☆P<0.05。

2.2 CAL組和NCAL組患兒外周血PTX3和IL-1β、IL-6、TNF-α水平比較 結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 CAL組和NCAL組患兒外周血PTX3和IL-1β、IL-6、TNF-α水平比較[M(P25,P75)]

注：與NCAL組相比，﹡P<0.05。

2.3 KD組患兒外周血PTX3與IL-1β、IL-6、TNF-α的相關(guān)性分析 KD組患兒外周血PTX3與IL-1β、IL-6、TNF-α均呈正相關(guān)(r分別為0.655、0.679、0.605，P均<0.01)。

2.4 KD組患兒急性期外周血PTX3對(duì)KD的診斷結(jié)果 因發(fā)熱組和健康組間外周血各指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，合并為對(duì)照組。ROC分析顯示，KD組患兒急性期外周血PTX3診斷KD的AUC為0.909(95%CI為0.861～0.957，P<0.01)，計(jì)算可得最大Youden指數(shù)為0.682。取PTX3>11.7 μg/L為界值，外周血PTX3診斷KD的靈敏度為76.6%、特異度為91.7%。

3 討論

研究[5]認(rèn)為，KD為患兒被多種微生物損傷后促進(jìn)B細(xì)胞、T細(xì)胞參與免疫激活，導(dǎo)致炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子瀑布樣效應(yīng)，最后引起全身炎癥反應(yīng)。IL-1β、IL-6、TNF-α是研究較多的炎性細(xì)胞因子。本研究發(fā)現(xiàn)，KD患兒急性期炎癥因子IL-1β、IL-6、TNF-α均較健康組和發(fā)熱組明顯升高，治療后明顯下降，恢復(fù)期已趨正常，與健康組和發(fā)熱組無(wú)差異，與相關(guān)研究[6,7]結(jié)果一致。因亞急性期時(shí)容易出現(xiàn)IL-1β、IL-6、TNF-α指標(biāo)假陽(yáng)性，故IL-1β、IL-6、TNF-α檢測(cè)僅可考慮作為KD急性期實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)。

PTX是先天性體液免疫的重要組成部分，包括長(zhǎng)鏈家族及短鏈家族成員。長(zhǎng)鏈家族中的PTX3作為惟一的可溶性模式識(shí)別受體，僅在接受并結(jié)合TNF-α、IL-1β等炎癥因子、Toll樣受體激動(dòng)劑、脂多糖等炎癥信號(hào)配體時(shí)合成，正常情況下表達(dá)很低。PTX3在體內(nèi)參與免疫防御、炎癥、細(xì)胞凋亡、血管重塑等多種生物學(xué)反應(yīng)，與眾多免疫相關(guān)性疾病有密切關(guān)系[8, 9]。PTX3主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，可直接地反映動(dòng)脈局部炎癥狀態(tài)[10]。外周血PTX3反應(yīng)迅速，升高時(shí)間約6～8 h，且在炎癥反應(yīng)中存在時(shí)間持久[11,12]。研究[13]證實(shí)，PTX3在血液中的存在時(shí)間較長(zhǎng)，易檢測(cè)，且基因較恒定，不受總膽固醇、高密度脂蛋白、血紅蛋白、吸煙、肥胖和性別等因素影響，利于臨床應(yīng)用。在過(guò)敏性紫癜性腎炎、抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體相關(guān)性小血管炎等研究[14,15]中均發(fā)現(xiàn)血清PTX3水平可反映血管炎嚴(yán)重的程度及活動(dòng)性。本研究發(fā)現(xiàn)，KD組患兒PTX3與炎癥因子IL-1β、IL-6、TNF-α成正相關(guān)，說(shuō)明PTX3的產(chǎn)生與免疫應(yīng)答的機(jī)制相關(guān)；ROC顯示急性期外周血中PTX3診斷KD的效能較高，若以PTX3>11.7 μg/L為診斷界值，特異度可達(dá)91.7%、靈敏度為76.6%。CAL組患兒PTX3水平高于NCAL組，且在病程中也表現(xiàn)出與病情活動(dòng)相關(guān)變化趨勢(shì)，故外周血中PTX3水平與疾病嚴(yán)重程度、活動(dòng)性及治療反應(yīng)相關(guān)，適用作為監(jiān)測(cè)血管炎進(jìn)展的標(biāo)志物。本研究發(fā)現(xiàn)，KD組患兒恢復(fù)期PTX3水平仍高于健康組和發(fā)熱組，說(shuō)明血管炎癥部位產(chǎn)生的PTX3在發(fā)病后至少持續(xù)1個(gè)月，可指導(dǎo)臨床上進(jìn)行持續(xù)干預(yù)。

綜上所述，外周血PTX3作為一種新的生物學(xué)標(biāo)志物，有助于KD患兒的臨床診斷、疾病活動(dòng)性和嚴(yán)重性評(píng)估。