王楠

（浙江中醫(yī)藥大學附屬江南醫(yī)院手外科 浙江 杭州 311201）

靜脈輸注化療藥物極易導致化療性靜脈炎的發(fā)生，早期的護理措施及藥物干預效果顯著。新鮮馬鈴薯外敷作為一種傳統(tǒng)的方式防治靜脈炎被基層廣泛應用，其主要藥理成分馬鈴薯糖苷生物堿具有良好的消炎鎮(zhèn)痛作用。發(fā)生靜脈炎的血管在創(chuàng)傷及修復的過程中伴隨著各類細胞因子的釋放[1]，用于檢測靜脈炎癥反應的指標主要分為兩類，一類是促血管生成因子，如bFGF；一類是炎癥因子，如TNF-α。課題組化療性靜脈炎造模后，檢測穿刺點周圍血清中bFGF和TNF-α的水平，探討馬鈴薯糖苷生物堿防治化療性靜脈炎的效果。

1.資料與方法

1.1 動物及試劑

32只新西蘭大白兔，體重2.2kg，雌雄各半。α-茄堿，α-卡茄堿，硫酸長春新堿，500g/L硫酸鎂，兔抗bFGF、TNF-α的ELISA檢測試劑盒，全自動酶標儀等。

1.2 藥膏制備

精確稱取α-茄堿3mg和6mg，分別稱取30g凡士林，將α-茄堿分別倒入均勻混合。4℃冰箱保存?zhèn)溆?。?卡茄堿配置方法同上。

1.3 實驗分組

A組：0.5g空白霜膏兔耳靜脈涂抹。

B組：500g/L硫酸鎂濕敷于兔耳靜脈，30min，保持濕潤。

C組：新鮮馬鈴薯洗凈去皮搗泥，沿兔耳靜脈外敷，透明膜覆蓋固定，共1 h。

D1、D2組：0.5g 100mg/kg及200mg/kgα-茄堿霜膏兔耳靜脈涂抹均勻。

E1、E2組：0.5g 100mg/kg及200mg/kgα-卡茄堿霜膏兔耳靜脈涂抹均勻。

F組：無外敷處理。

各組給藥至48 h。其中A、D1、D2、E1、E2涂抹霜膏一天三次。B組每次濕敷30 min，一天三次。C組馬鈴薯泥外敷1h，一天三次。

1.4 靜脈炎造模

兔雙耳備皮，暴露耳緣靜脈。麻醉后，在兔耳緣靜脈距耳尖2cm處穿刺，先推注2mL生理鹽水，再推注長春新堿藥液，劑量為0.2mg/kg，雙側(cè)耳緣靜脈同時注射，兔耳緣靜脈注射速度控制在0.5mL/min，推注2mL生理鹽水沖洗。（F組將長春新堿置換為等量生理鹽水，其他操作相同）最后一次給藥后，分析靜脈炎的嚴重程度。

1.5 觀測指標

穿刺點處采集1mL血液，室溫放置20min，2000～3000r/min離心20min，分離血清，置于-20℃冰箱內(nèi)保存。采用ELISA法測定各組標本中bFGF和TNF-α表達含量。

1.6 統(tǒng)計學處理

組間分析單因素方差分析，兩兩比較時，選用最小顯著差異法LSD進行檢測。結(jié)果用平均值±標準差（Mean±SD）表示。P＜0.05視為具有顯著差異，P＜0.01視為具有極其顯著差異（*，P＜0.05；**，P＜0.010）。

2.實驗結(jié)果

表1和圖1為各組血清bFGF表達水平，表2和圖2為各組血清TNF-α表達水平。結(jié)果可見，與F組相比，A組兔子血清bFGF、TNF-α表達水平均顯著增加。與A組相比，藥物外敷后，B、C、D1、D2、E1、E2組兔子血清bFGF、TNF-α表達水平均有不同程度的降低。200mg/kg α-茄堿霜膏效果優(yōu)于100mg/kg α-茄堿霜膏；200mg/kg α-卡茄堿霜膏優(yōu)于100mg/kg α-卡茄堿霜膏。

圖1 各組血清bFGF表達水平（n=8）

表1 各組血清bFGF表達水平濃度

表2 各組血清TNF-α表達水平濃度

圖2 各組血清TNF-α表達水平（n=8）

3.討論

3.1 馬鈴薯糖苷生物堿在防治化療性靜脈炎中的研究

新鮮馬鈴薯外敷是一種防治輸液性靜脈炎的常見手段，操作簡單、經(jīng)濟實用、療效良好。其特有的馬鈴薯糖苷生物堿，有效緩解局部無菌性炎癥，緩解痙攣、減少滲出[2]。石喜妹[3]應用不同的外敷方法防治靜脈炎，觀察發(fā)現(xiàn)新鮮馬鈴薯片持續(xù)外敷可有效預防靜脈炎的發(fā)生，優(yōu)于硫酸鎂外敷。然而，新鮮馬鈴薯應用不便，有效物質(zhì)不明確，質(zhì)量標準可控性差，不能長期保存，缺乏直接的實驗依據(jù)。

α-茄堿和α-卡茄堿是馬鈴薯糖苷生物堿的主要形式，具有廣泛的藥理學活性：①抗病原微生物。能夠抑制病原微生物生長，抗病毒、抗真菌、抗癌細胞等[4]；②增強機體免疫力。作為新型的免疫佐劑，增強細胞的免疫反應；③抗炎鎮(zhèn)痛作用。對局部水腫情況產(chǎn)生明顯的抑制作用，對透明質(zhì)酸酶活性起抑制作用，提高機體的抗過敏、抗組胺作用等。

3.2 化療性靜脈炎模型兔血清中bFGF及TNF-α表達水平的意義

化療性靜脈炎的血管伴隨著各類細胞因子的釋放?；瘜W刺激會引起靜脈管壁的通透性增加，激活炎癥介質(zhì)對血管內(nèi)皮造成損害，引起血管內(nèi)皮細胞凋亡，炎性細胞的浸潤。檢測靜脈炎發(fā)展情況的細胞因子主要分為兩類，一類是血管生成因子，bFGF、VEGF等；一類是炎癥因子，TNF-α、IL-6等。正常血管中存在少量的bFGF和VEGF，當血管受損時，表達會有不同程度增高。黃山[5]等通過檢測炎癥因子TNF-α來分析冠狀動脈血管狹窄及阻塞情況，判斷其是否存在功能性的改變。本課題組選擇檢測血清中bFGF及TNF-α表達水平，來反應局部靜脈的炎癥程度。

3.3 血清中bFGF和TNF-α表達水平的差異分析

A組作為造模組，局部血清中bFGF和TNF-α表達濃度分別為45.876±2.316pg/ml和67.958±8.887pg/ml遠高于F組。兩者表達濃度的升高直接反應局部靜脈炎的程度。B組硫酸鎂濕敷、C組新鮮馬鈴薯外敷、D組α-茄堿霜膏外涂、E組α-卡茄堿霜膏外涂后，兔耳緣靜脈穿刺血清中bFGF和TNF-α表達水平顯著低于A組。選用的不同藥物外敷，均能在一定程度上控制化療性靜脈炎的局部炎癥反應。D組和E組各采用100 mg/kg和200 mg/kg兩種不同濃度的糖苷生物堿霜膏外敷，bFGF和TNF-α表達水平顯示，高濃度組表達水平低于低濃度組，說明高濃度的馬鈴薯糖苷生物堿，更有利于控制局部靜脈炎的癥狀。

綜上所述，馬鈴薯糖苷生物堿（α-茄堿和α-卡茄堿）外敷能明顯改善兔耳緣靜脈化療性靜脈炎的局部癥狀，有效改善組織發(fā)紅、腫脹、疼痛、血管硬化等癥狀，有效控制血清中bFGF和TNF-α的表達水平。相比于新鮮馬鈴薯外敷，有效物質(zhì)明確，質(zhì)量標準可控，能長期保存，對臨床防治化療性靜脈炎外敷制劑的開發(fā)應用提供新思路。讓病人有較好的血管條件去接受化療計劃，保證所制定的化療方案順利實施。