李亞杰，劉禹辰，曾 丹，宋鳳格，寧中華*

（1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，北京 100193；2.河北省蛋雞繁育工程技術(shù)研究中心，河北邯鄲 057153；3.河北省農(nóng)業(yè)廣播電視學(xué)校衡水市分校，河北衡水 053000）

畜禽飼糧中添加合成氨基酸可以提高蛋白質(zhì)的消化率，降低糞便中氮的排出，節(jié)約飼料中蛋白質(zhì)的使用并且促進機體生長代謝，提高生產(chǎn)性能[1-2]。絲氨酸（L-Serine）又名β羥基丙氨酸，是機體中非必需氨基酸的一種。非必需氨基酸（如絲氨酸、酪氨酸和胱氨酸）由于能相應(yīng)代替部分甘氨酸、苯丙氨酸以及蛋氨酸，在飼料中添加可以促進家禽生長[2-3]。Niknafs等[4]報道，家禽鮮味受體對絲氨酸具有敏感性，飼糧中添加絲氨酸可刺激蛋雞采食。Baker等[5]研究表明，飼料中適量添加絲氨酸可以明顯提高肉雞日增重，并替代部分甘氨酸的使用。絲氨酸對家禽的生長以及代謝有著非常重要的意義。

暗斑蛋是一種蛋殼質(zhì)量問題，與蛋殼膜的厚度和完整度有關(guān)，也與蛋殼的完整性有關(guān)，其表面顯現(xiàn)出淺褐色斑點，形狀多樣，為點狀、片狀、帶狀等，嚴(yán)重影響雞蛋外觀，減少消費欲望[6]。絲氨酸是蛋殼骨橋蛋白（OPN）中含量最高的氨基酸。OPN是一種具有多種功能分泌型鈣結(jié)合磷化糖蛋白，主要分布于蛋殼的柵欄層最外部、殼膜以及乳突層，同時位于非礦化殼膜纖維的核心[7-8]。Chien等[9]研究表明，OPN優(yōu)先結(jié)合方解石，并通過影響晶體生長和形態(tài)來指導(dǎo)方解石取向，從而維持蛋殼微觀隔室以及氣孔的通暢，改善蛋殼微觀結(jié)構(gòu)。推測添加絲氨酸可以增加蛋殼中OPN含量，從而改善蛋殼晶體生長，可能對暗斑蛋的生成有所抑制。因此，本試驗通過在粉殼商品代蛋雞的基礎(chǔ)飼糧中添加L-絲氨酸，探究其對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)以及暗斑蛋不同儲存時間產(chǎn)生率的影響，旨在為氨基酸飼料添加劑應(yīng)用于蛋雞生產(chǎn)提供切實可行的理論參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計及試驗飼糧 選用144只生產(chǎn)性能相似、體重相近的285日齡“農(nóng)大3號”商品蛋雞，隨機分為3個處理組，每個處理組4個重復(fù)，每個重復(fù)12只蛋雞。飼養(yǎng)試驗在河南鶴壁柳江生態(tài)牧業(yè)第七生產(chǎn)基地試驗用雞舍中進行。試驗預(yù)試期6 d，正試期42 d。

對照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，其余2個組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加500 mg/kg和1 000 mg/kg L-絲氨酸。試驗所用L-絲氨酸購自北京雪杰特科技有限公司（CHEJETER，含量≥99.0%，cas56-45-1，BR）。各組基礎(chǔ)飼糧主要原料組成和其他營養(yǎng)指標(biāo)相同且滿足《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 33—2004），飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)成分

1.2 飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)條件為3層階梯式籠養(yǎng)，配備乳頭飲水器，每籠安置3只蛋雞。試驗各組每天08:00及17:00人工喂料，自由飲水。實行16L:8D光照制度。試驗雞舍并非全封閉雞舍，雞舍環(huán)境溫度會受外界溫度影響，溫度為9～13℃。各處理組蛋雞均遠(yuǎn)離通風(fēng)口飼養(yǎng)，盡量避免環(huán)境因素的影響。

1.3 檢測指標(biāo)與方法

1.3.1 生產(chǎn)性能 每天記錄各重復(fù)產(chǎn)蛋數(shù)、總蛋重、破蛋數(shù)、死淘數(shù)，試驗結(jié)束后統(tǒng)計入料量和料槽以及所有剩余料量。計算產(chǎn)蛋率、破蛋率、累積死淘率、平均蛋重、采食量和料蛋比。采食量以及蛋重計量工具為威恒ACS-30電子秤（分度值:10 g），廣東威恒電子衡器有限公司。

1.3.2 蛋品質(zhì) 試驗結(jié)束后各處理組隨機取32枚雞蛋（即每個重復(fù)隨機取8枚雞蛋）測定其蛋品質(zhì)。使用蛋殼顏色測定儀測定蛋殼顏色L、a、b 值（柯尼卡美能達(dá)CM-2600d），明亮指數(shù)L代表亮度軸，0為黑，100為白；色品指數(shù)a代表紅綠軸，正值為紅，負(fù)值為綠；色品指數(shù)b代表黃藍(lán)軸，正值為黃，負(fù)值為藍(lán)。使用蛋形指數(shù)測定儀測定雞蛋長徑、短徑，并計算蛋形指數(shù)（長徑/短徑）。用蛋黃分蛋器分離出蛋黃，電子天平測定蛋重、蛋黃重、蛋殼重，計算蛋白重（蛋白重=蛋重-蛋黃重-蛋殼重），使用蛋殼強度測定儀（Robotmation公司）測定蛋殼強度，使用EMT-5200蛋品測定儀測定蛋白高度、蛋黃顏色、哈氏單位。

1.3.3 暗斑蛋 第41周齡和第46周齡時連續(xù)收集各處理組3 d所產(chǎn)的全部雞蛋，標(biāo)注日期和組別，儲存于室內(nèi)，室內(nèi)溫度為16～20℃，濕度為40%～50%，在收集雞蛋后1 d和7 d觀察暗斑蛋產(chǎn)生狀況。在暗室內(nèi)使用照蛋器照蛋，根據(jù)整個雞蛋蛋殼表面暗斑大小和密集程度對雞蛋進行分級，共有4個等級，1級為雞蛋上暗斑最少且密度最小，4級為蛋殼暗斑面積大且密集，對每個等級的雞蛋進行計數(shù)。將1級與2級蛋判定為正常蛋，3級、4級蛋判定為暗斑蛋。

1.4 統(tǒng)計分析 各項目數(shù)據(jù)使用Excel進行記錄整理。生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)的各項指標(biāo)使用SAS 9.4中的GLM過程進行比較，差異顯著者進行Duncan′s檢驗組間差異，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。破蛋率、軟殼蛋率和暗斑蛋率先對整體進行卡方檢驗，若P＜0.05則進行卡方分割檢驗各組間差異，根據(jù)檢驗次數(shù)對α值進行調(diào)整。

2 結(jié) 果

2.1 不同水平絲氨酸對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 試驗前各處理組平均蛋重、產(chǎn)蛋率和平均體重均無顯著差異（P＞0.05），符合進行試驗要求。

如表2所示，各組間料蛋比、平均體重、累積軟殼蛋率以及累積破殼蛋率均無顯著差異（P＞0.05）。500 mg/kg絲氨酸組產(chǎn)蛋率極顯著高于1 000 mg/kg絲氨酸組和對照組（P＜0.01），1 000 mg/kg絲氨酸組產(chǎn)蛋率與對照組無顯著差異（P＞0.05）。500、1 000 mg/kg絲氨酸組蛋雞日采食量和蛋重均極顯著高于對照組（P＜0.01），而500 mg/kg絲氨酸組蛋雞與1 000 mg/kg絲氨酸組蛋雞日采食量和蛋重?zé)o顯著差異（P＞0.05）。

表2 不同水平絲氨酸對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 不同水平絲氨酸對蛋品質(zhì)的影響 如表3所示，各組間蛋重、蛋白高度、哈氏單位、蛋殼強度和蛋殼厚度均無顯著差異（P＞0.05）。500 mg/kg絲氨酸組的蛋黃顏色、蛋殼比例與對照組無顯著差異（P＞0.05）。1 000 mg/kg絲氨酸組的蛋黃顏色極顯著高于其余各組，而其蛋殼比例極顯著低于其余各組（P＜0.01）。

表3 不同水平絲氨酸對蛋品質(zhì)的影響

2.3 不同水平絲氨酸對暗斑蛋的影響 如表4所示，41周齡所產(chǎn)雞蛋放置1 d和7 d的暗斑蛋產(chǎn)生率各組間無顯著差異（P＞0.05），46周齡所產(chǎn)雞蛋放置1 d各組暗斑蛋產(chǎn)生率無顯著差異（P＞0.05），放置7 d后1 000 mg/kg絲氨酸組暗斑蛋產(chǎn)生率極顯著低于500 mg/kg絲氨酸組和對照組（P＜0.01），對照組和500 mg/kg絲氨酸組的暗斑蛋產(chǎn)生率無顯著差異（P＞0.05）。

表4 不同水平絲氨酸對暗斑蛋產(chǎn)生率的影響 %

3 討 論

3.1 不同水平絲氨酸對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 本試驗中，蛋雞產(chǎn)蛋率整體有所提升，尤其500 mg/kg絲氨酸組蛋雞產(chǎn)蛋率極顯著高于其余各組，說明添加L-絲氨酸對蛋雞生產(chǎn)性能有所提高。Dean等[10]研究表明，甘氨酸對于維持肉雞最優(yōu)生產(chǎn)性能起到關(guān)鍵性作用；而甘氨酸體內(nèi)的合成速度不足以提供機體最大生長潛能，絲氨酸是甘氨酸的前體物質(zhì)，補充絲氨酸可以滿足機體對甘氨酸的需求[11]。絲氨酸還可以緩解應(yīng)激，使蛋雞減少不必要的緊張和消耗[12]，從而提高其生產(chǎn)性能。本試驗中，500 mg/kg絲氨酸組蛋雞生產(chǎn)性能更優(yōu)，可能是添加濃度高于最優(yōu)濃度反而導(dǎo)致雞群生產(chǎn)性能下降。本試驗中絲氨酸組蛋雞日采食量均極顯著高于對照組，這可能是由于家禽口腔中有大約767個味蕾，家禽對于飼料中的氨基酸、脂肪酸、糖以及鹽等有著敏銳的感知能力，家禽的鮮味受體（T1R1/T1R3）對氨基酸（如絲氨酸和丙氨酸）有顯著反應(yīng)，因此添加絲氨酸可以促進食欲，增加采食[4]。本試驗中絲氨酸組蛋重極顯著高于對照組，而蛋殼比例減少，可以推測添加絲氨酸使蛋內(nèi)容物增加，即可食用部分增加，可食用價值增加。

3.2 不同水平絲氨酸對蛋品質(zhì)的影響 蛋黃顏色是衡量雞蛋品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，蛋黃色澤越濃代表雞蛋品質(zhì)越好。蛋黃色澤與葉黃素緊密相關(guān)，葉黃素通過腸道被吸收后在皮下脂肪以及蛋黃中進行沉積[13]。本試驗中，試驗組蛋雞日采食量顯著提升，攝入葉黃素增多，致使小腸對飼料中葉黃素的吸收、輸送以及沉積作用增強，最終作用在雞蛋上表現(xiàn)為蛋黃色澤提升。本試驗中，絲氨酸組蛋殼比例有下降趨勢，其中1 000 mg/kg絲氨酸組極顯著低于其余2組。絲氨酸在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為甘氨酸，補充了機體合成利用甘氨酸的不足。Han等[14]研究表明，飼料添加甘氨酸可以顯著降低蛋殼百分比，并且增加大蛋比例（63～72.9 g），與本研究結(jié)果一致。在蛋品質(zhì)測定中，蛋重各組無顯著差異，而蛋殼比例下降，因此可推測添加絲氨酸組蛋內(nèi)物質(zhì)含量上升，增加雞蛋價值。

3.3 不同水平絲氨酸對暗斑蛋的影響 暗斑蛋是一種蛋殼質(zhì)量問題，長期困擾蛋雞養(yǎng)殖企業(yè)，從20世紀(jì)初到現(xiàn)在依然未能找到解決暗斑蛋的根本方法[6]。張銘容等[15]研究表明，暗斑蛋的暗斑區(qū)域含水量顯著高于正常雞蛋，使光折射率增大從而形成肉眼可見的暗斑。Talbot等[16]研究表明，蛋殼異常導(dǎo)致蛋殼含水量異常，蛋殼含水量與蛋殼暗斑的產(chǎn)生有關(guān)。暗斑會使蛋內(nèi)菌落總數(shù)以及霉菌等微生物增長加快，新鮮度的下降速度隨暗斑覆蓋率的增加不斷加快，縮短雞蛋儲存時間，嚴(yán)重影響雞蛋品質(zhì)和價值[17]。本試驗在冬季進行，干燥低溫的環(huán)境并不適宜觀察暗斑蛋。由于空氣干燥，蛋殼縫隙內(nèi)水分蒸發(fā)比較快，所以存放7 d后暗斑率反而會降低。試驗第46周齡所產(chǎn)雞蛋存放1 d后各組暗斑蛋產(chǎn)生率無顯著差異，而存放7 d后1 000 mg/kg絲氨酸組蛋雞暗斑蛋產(chǎn)生率極顯著低于對照組和500 mg/kg絲氨酸組，說明絲氨酸對蛋殼暗斑形成確實產(chǎn)生積極影響。暗斑蛋的形成至今沒有找到根本原因，先前研究推測暗斑蛋的形成可能是由于蛋殼孔隙率增大以及乳突層結(jié)構(gòu)變異造成，而OPN可以結(jié)合蛋殼中方解石并誘導(dǎo)方解石納米結(jié)構(gòu)，高濃度OPN可以誘導(dǎo)較小納米尺寸的蛋殼微觀結(jié)構(gòu)，從而改善蛋殼微觀結(jié)構(gòu)[6,18]，從而對蛋殼暗斑發(fā)生產(chǎn)生有效遏制。因此，添加適量絲氨酸可以減少儲存7 d后雞蛋暗斑蛋的產(chǎn)生率，但還需對暗斑蛋的代謝機理進一步研究才能闡明。

4 結(jié) 論

飼料中添加L-絲氨酸可以增加蛋雞產(chǎn)蛋率、采食量和平均蛋重；添加1 000 mg/kg L-絲氨酸時可以提高蛋黃顏色，能有效降低存放 7 d后的暗斑蛋產(chǎn)生率，但效果還不太明顯，需要進一步研究。