張慶功 梁萌青 徐后國 衛(wèi)育良

紅鰭東方鲀幼魚對飼料中蛋氨酸需求的研究*

張慶功1,2梁萌青2①徐后國2衛(wèi)育良2

(1. 上海海洋大學水產(chǎn)與生命學院 上海 201306；2. 中國水產(chǎn)科學研究院黃海水產(chǎn)研究所 青島 266071)

在半精制飼料中分別添加0、0.30%、0.60%、0.90%、1.20%、1.50%蛋氨酸制成6組等氮等脂飼料，各組蛋氨酸的實際含量分別為0.61%、0.85%、1.10%、1.39%、1.60%、1.84%，對初始體重為(13.83±0.63) g的紅鰭東方鲀()幼魚在室內(nèi)流水系統(tǒng)中進行了76 d的喂養(yǎng)實驗，探討其蛋氨酸的需求量。研究表明，當飼料中蛋氨酸水平由0.61%升高至1.60%時，紅鰭東方鲀的特定生長率(Specific growth rate, SGR)、飼料效率(Feed efficiency, FE)、蛋白效率比(Protein efficiency ratio, PER)均顯著升高(<0.05)，且都在1.60%組取得最大值。其中，特定生長率在1.39%、1.60%實驗組無顯著差異(>0.05)，但隨著蛋氨酸的進一步升高，特定生長率、飼料效率、蛋白效率比均呈現(xiàn)出下降的趨勢；蛋氨酸水平對于蛋白沉積率沒有顯著影響(>0.05)；飼料中蛋氨酸水平對全魚粗脂肪含量呈現(xiàn)出先升高再降低的趨勢，但各組間粗蛋白、水分和粗灰分無顯著差異(>0.05)；隨著蛋氨酸水平升高，肝體比(Hepatosomatic index, HSI)和臟體比(Viscerosomatic index, VSI)呈現(xiàn)先升高再下降，在蛋氨酸含量為1.60%時達到最高，顯著高于蛋氨酸0.61%組(<0.05)，與其他組無顯著差異；血清中甘油三酯、膽汁酸的含量，隨著蛋氨酸水平的升高呈現(xiàn)出先升高再降低的趨勢，飼料蛋氨酸水平對血清中總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、總蛋白水平及谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性無顯著影響(>0.05)。以特定生長率為評價指標進行一元二次回歸曲線分析，得出體重為(13.83~82.47) g的紅鰭東方鲀幼魚的蛋氨酸需求量為1.38%，占飼料蛋白質(zhì)的2.71%。

紅鰭東方鲀幼魚；蛋氨酸需求量；生長性能；體組成；生理生化指標

紅鰭東方鲀()俗稱河豚，目前對于河鲀營養(yǎng)學方面的研究主要需求集中在蛋白質(zhì)(王淑敏, 2008; Sungsam, 2009)和脂肪(孫陽等, 2013; Takii, 1995)等方面，對于蛋氨酸適宜需求量的研究還未見報道。鑒于此，本研究采用劑量-效應法，探討不同蛋氨酸水平對于紅鰭東方鲀生長性能、魚體組成和相關(guān)生化指標的影響，為河鲀專用配合飼料的研發(fā)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗設計

本實驗通過向基礎飼料中等梯度添加0.3%、0.6%、0.9%、1.2%、1.5%的DL-蛋氨酸。其中，蛋氨酸的有效含量為99.3%。以谷氨酸作為蛋氨酸的等氮替代物，配制成6種不同蛋氨酸梯度水平的等氮等脂的半精制飼料，實驗飼料配方及氨基酸組成如表1、表2。其中，蛋白、脂肪水平分別參照Kin等(2009)和Kikuchi等(2009)，氨基酸混合物的添加參照紅鰭東方鲀肌肉氨基酸組成(高露姣等，2011)。經(jīng)測定，各組飼料的實際蛋氨酸含量分別為0.61%、0.85%、1.10%、1.39%、1.60%、1.84%，對應占飼料蛋白質(zhì)的1.20%、1.67%、2.16%、2.72%、3.14%、3.61%。飼料原料經(jīng)粉碎過80目篩，按照從小量到大量的順序，逐步混合均勻，加水攪勻后通過小型顆粒飼料機制成直徑為3~4 mm，長度為3~5 mm的顆粒飼料，55℃烘干后，保存于–20℃冰箱中。

1.2 實驗魚和養(yǎng)殖管理

紅鰭東方鲀?yōu)楹ｊ桙S海水產(chǎn)有限公司的當年魚苗。投喂對照組實驗飼料馴化7 d，使其適應養(yǎng)殖系統(tǒng)和實驗飼料。實驗開始時，統(tǒng)一讓實驗魚饑餓24 h，隨后隨機挑選體質(zhì)健康、體格均勻的魚。稱重后放入18個桶(500 L)中，每個桶中放入30尾魚[平均體重為(13.83±0.61) g]。將6種飼料隨機分派到18個桶，每種飼料3個重復。實驗期間，每天分別于07:00、12:00、16:00、20:00表觀飽食投喂，投喂量按實驗魚體重的3%投喂，收集殘餌并計數(shù)，每2 d刷桶1次，保持桶壁和桶底清潔，實驗持續(xù)67 d。

養(yǎng)殖用水為淺井海水，經(jīng)二級沉淀、砂濾后進入蓄水池，采用室內(nèi)流水系統(tǒng)(每天流水總量為4 m3)，并換1/2水；實驗期間，溶氧高于6 mg/L，采取紙板遮擋窗戶以降低室內(nèi)光線強度。實驗期間，水溫為22℃~27℃，鹽度為24~26，pH為7.90~8.05。

1.3 實驗取樣

實驗開始前隨機取10尾紅鰭東方鲀幼魚作為初始魚，用于常規(guī)營養(yǎng)成分分析。實驗結(jié)束時，饑餓24 h，然后對每桶魚進行計數(shù)、稱重。每桶隨機取 4尾實驗魚，-20℃保存，用于體成分分析；每缸隨機取6尾魚，尾靜脈取血，血樣暫存于1.5 ml離心管中，靜置過夜后3000 r/min離心獲得血清樣，保存于-20℃冰箱備用。取6尾魚在冰盤上解剖，取出肝臟和肌肉，分裝于2個冷凍管，迅速放入液氮 中，之后轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱中，用以實驗相關(guān)要求的測定。

1.4 生化分析

實驗飼料、飼料原料和魚體的粗蛋白、粗脂肪、灰分、水分的測定，均參照(AOAC, 1995)方法進行，水分含量用(105±2)℃常溫干燥法；粗灰分含量用馬弗爐550℃高溫灼燒法；粗脂肪含量用索氏抽提法測定(Foss Tecator, Hoganas, 瑞典)；粗蛋白的含量用凱氏定氮儀測定(VELP, UDK142 automatic distillation unit, VELP, Usmate, MB, 意大利)。飼料氨基酸分析采用鹽酸水解法通過氨基酸分析儀(日立 L-8900，日本)測定。

血清酶活利用深圳邁瑞(Mindray)公司生產(chǎn)的 LX-20 型 Beckman 全自動生化分析儀及其配套試劑進行分析。肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶酶活均采用南京建成生物工程研究所研制的試劑盒。

1.5 計算方法及統(tǒng)計分析方法

特定生長率(Specific growth rate, SGR, %/d)= 100×[ln(終末體重)-ln(初始體重)]/實驗天數(shù)

攝食率(Feeding intake,FI, %/d)=100×總干物質(zhì)攝食量/[實驗天數(shù)×(初始體重+終末體重)/2]

飼料效率(Feed efficiency, FE)=魚體增重(濕重)/總干物質(zhì)攝食量

蛋白效率比(Protein efficiency ratio, PER)=(終末體重-初始體重)/蛋白攝入量

蛋白質(zhì)沉積率(Protein productive value, PPV, %)= 100×魚體蛋白質(zhì)貯存量/蛋白攝入量

肥滿度(Condition factor, CF)=體重/體長3(體重單位：g；體長單位：cm)

肝體比(Hepatosomatic index, HSI, %) = 100 ×肝重/魚體重

臟體比(Viscerosomatic index,VSI, %) = 100 ×內(nèi)臟重/魚體重

實驗數(shù)據(jù)以平均值±標準誤(Mean±SE)表示，使用SPSS 16.0進行單因素方差分析(One-way ANOVA)，當差異達到顯著水平(<0.05)，則采用鄧肯多重比較(Duncan’s multiple range tests)。

表1 實驗飼料配方及化學組成(%干物質(zhì))

Tab.1 Formulation and chemical composition of the experimental diet (% dry matter)

*1：氨基酸混合物為每kg飼料提供以下氨基酸：精氨酸7.7 g；組氨酸1.2 g；異亮氨酸7.1 g；亮氨酸11.8 g；賴氨酸15.5 g；半胱氨酸6.7 g；苯丙氨酸2.3 g；蘇氨酸6.2 g；色氨酸1.5 g；纈氨酸8.1 g；牛磺酸5 g；羥脯氨酸5 g

*2：維生素混合物(mg/kg混合物)：硫胺素，2.5 mg；核黃素，4.5 mg；鹽酸吡哆醇，2 mg；維生素B12，0.01 mg；生物素，0.12 mg；維生素K3，1 mg；肌醇，80 mg；泛酸，6 mg；煙酸，20 mg；葉酸，2 mg；維生素A，3.2 mg；維生素D，0.5 mg；維生素E，12 mg；次粉867 mg

*3：礦物質(zhì)混合物(mg/kg 混合物)：氟化鈉，0.2 mg；碘化鉀，0.08 mg；氯化鈷，5 mg；硫酸銅，1 mg；硫酸鐵，8 mg；硫酸鋅，5 mg；硫酸鎂，120 mg；磷酸二氫鈣，300 mg；氯化鈉，10 mg；沸石粉，551 mg

*1: Amino acid mixture provides the following amino acids for every kg feed: arginine 7.7 g; histidine 1.2 g; isoleucine 7.1 g; leucine 11.8 g; lysine 15.5 g; cysteine 6.7 g; phenylalanine 2.3 g; threonine 6.2 g; tryptophan 1.5 g; valine 8.1 g; taurine 5 g; hydroxyproline 5 g

*2: Vitamin premix (mg/kg premix): thiamine 2.5 mg; riboflavin 4.5 mg; pyridoxine 2 mg; vitamin B120.01 mg; biotin 0.12 mg; menadione 1 mg; inositol 80 mg; pantothenate 6 mg; tocopherol acetate 20 mg; folic acid 2 mg; vitamin A 3.2 mg; vitamin D 0.5 mg; vitamin E 12 mg; wheat flour 867 mg

*3: Mineral premix (mg/kg premix): NaF 0.2 mg; KI 0.08mg; CoCl2·6H2O 5mg; CuSO4·5H2O 1mg; FeSO4·7H2O 8 mg; ZnSO4·7H2O 5 mg; MnSO4·4H2O 120 mg; Ca(H2PO4)2·H2O 300 mg; NaCl 10mg ; Mordenzeo 551 mg

表2 實驗飼料的氨基酸組成(%干物質(zhì))

Tab.2 The amino acid composition of the experiment diets (% dry matter)

2 結(jié)果

2.1 飼料中蛋氨酸水平對紅鰭東方鲀生長、飼料利用和魚體組成的影響

表3為飼料蛋氨酸水平對紅鰭東方鲀生長性能的影響，飼料中的蛋氨酸水平顯著影響紅鰭東方鲀的成活率、攝食率、特定生長率、飼料效率和蛋白質(zhì)效率(<0.05)。特定生長率、飼料效率和蛋白效率比隨著蛋氨酸水平的升高先升高后下降，到蛋氨酸水平為1.60% 時達到最高，顯著高于0.61%處理組(<0.05)。其中，特定生長率在1.39%組和1.60%組無顯著差異；對于成活率，1.10%處理組顯著高于1.60%處理組(<0.05)，其他各組無顯著差異(>0.05)；攝食率隨飼料蛋氨酸水平的升高先升高后下降，蛋氨酸1.39%處理組達到最高，顯著高于0.61%處理組(<0.05)，與其他各組無顯著差異(>0.05)；飼料蛋氨酸水平對蛋白沉積率沒有顯著影響(>0.05)。

表3 飼料蛋氨酸水平對紅鰭東方鲀生長性能的影響

Tab.3 Effect of dietary methionine levels on growth performance of T. rubripes

注: 同一列數(shù)值中右上角不同小寫字母表示組間存在顯著差異(0.05)，下同

Note: Data within the same column with different superscripts are significantly different (<0.05), the same as below

表4為飼料蛋氨酸水平對魚體組成和形體指標的影響。飼料的蛋氨酸水平對全魚的粗蛋白、灰分、肥滿度無顯著影響(>0.05)；對于魚體粗脂肪、肝體比、臟體比，蛋氨酸1.60%組顯著高于0.61%處理組(<0.05)，但隨著蛋氨酸水平的進一步升高，呈現(xiàn)出下降的趨勢，但與其他各組差異不顯著(>0.05)。

將紅鰭東方鲀的特定生長率數(shù)據(jù)與飼料中的蛋氨酸水平進行二次回歸曲線分析，得到特定生長率與蛋氨酸水平的二次曲線關(guān)系為：=–0.5262+1.455+1.449(2= 0.8787)。由圖1可知，當?shù)鞍彼崴綖?.38%，即占飼料蛋白的2.71%時，紅鰭東方鲀的特定生長率達到最高。

表4 飼料蛋氨酸水平對魚體組成和形體指標的影響(%濕重)

Tab.4 Effect of dietary methionine levels on body composition and physical indicators of T. rubripes (%wet weight)

圖1 紅鰭東方鲀特定生長率與飼料中蛋氨酸水平的二次曲線關(guān)系

2.2 飼料中蛋氨酸水平對紅鰭東方鲀血清、肝臟相關(guān)生化指標的影響

表5為飼料蛋氨酸水平對紅鰭東方鲀血清和肝臟生理生化指標的影響。如表5所示，飼料蛋氨酸水平對肝臟中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶沒有顯著影響(>0.05)，1.10%處理組中的肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于0.85%和1.60%處理組(<0.05)，與其他處理組無顯著差異；飼料蛋氨酸水平顯著影響血清中甘油三酯的含量，蛋氨酸含量為1.39%的處理組最高，蛋氨酸含量為1.10%、1.39%、1.60%處理組顯著高于1.84%處理組(<0.05)，其他各組間無顯著差異(>0.05)；飼料蛋氨酸水平還對血清中的膽汁酸含量產(chǎn)生顯著影響，蛋氨酸含量為1.39%、1.60%處理組顯著高于0.61%、0.85%、1.84%處理組(<0.05)，其他組間無顯著差異(>0.05)；飼料蛋氨酸水平還對血清中的血糖含量產(chǎn)生顯著差異，0.61%組顯著高于0.85%、1.10%、1.60%、1.84%處理組(<0.05)；蛋氨酸水平對紅鰭東方鲀中血清中的總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、總蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶無顯著影響(>0.05)。

表6為飼料蛋氨酸水平對紅鰭東方鲀肌肉氨基酸組成的影響。如表6所示，飼料蛋氨酸水平對肌肉中的半胱氨酸的含量沒有顯著影響(>0.05)，對其他的氨基酸均隨飼料蛋氨酸水平增加先升高，然后趨于平穩(wěn)。

3 討論

3.1 飼料中不同蛋氨酸水平對紅鰭東方鲀生長和飼料利用的影響

表5 飼料蛋氨酸水平對紅鰭東方鲀血清和肝臟生理生化指標的影響

Tab.5 Effect of dietary methionine levels on physiological and biochemical parameters in serum and liver

表6 飼料蛋氨酸水平對紅鰭東方鲀肌肉氨基酸組成的影響(%)

Tab.6 Effects of dietary methionine levels on amino acid composition in muscle of T. rubripes

由于蛋氨酸能夠轉(zhuǎn)化成半胱氨酸，所以，半胱氨酸的含量會影響魚類對于蛋氨酸的需要量。因此，有研究者認為將此表示為動物對于含硫氨基酸的總需要量或者表述為蛋氨酸+半胱氨酸的形式。但有一些研究發(fā)現(xiàn)，飼料中的半胱氨酸的含量低于3g/kg(0.3%)時，才能作為魚類含硫氨基酸的有效補給源，這就表明當半胱氨酸的含量超過該用量時，半胱氨酸就不存在節(jié)省蛋氨酸需要量的作用(Kim, 1992; Pack, 1995)。在本研究中，半胱氨酸的含量為0.86%左右，占飼料蛋白的1.67%左右。本次結(jié)果顯示，初始體重為13.83g的紅鰭東方鲀，以特定生長率為評價指標通過二次曲線回歸分析，得出對蛋氨酸的需求量為占飼料干物質(zhì)的1.38%，占飼料蛋白的2.71%(胱氨酸0.86%，占飼料蛋白的1.67%)。高于初始體重為11.61g，以特定生長率為評價指標的軍曹魚(Zhou, 2006)蛋氨酸需求量占飼料蛋白2.64%(胱氨酸1.49%)；同樣也低于初始重量為1.23g，以特定生長率為評價指標，得出蛋氨酸需求量占飼料蛋白的大黃魚(Mai, 2006)的3.34%(胱氨酸0.67%)；同初始體重為37.88g，以特定生長率為評價指標得出蛋氨酸需求量占飼料蛋白的大口黑鱸(陳乃松等, 2010)的2.75%(胱氨酸0.30%)接近?，F(xiàn)有報道的魚類蛋氨酸的需求量的差異是多方面的因素，其一可能是不同種屬間的差異，同時也可能是受到不同養(yǎng)殖環(huán)境的影響，如魚的大小、年齡、水溫、養(yǎng)殖密度和飼料的種類，水流、投喂頻率、氨基酸模式和飼料中其他營養(yǎng)物質(zhì)的相互作用等(Chiu, 1988; Cowey, 1995; Simmons, 2015)。

3.2 蛋氨酸水平對于魚體組成和形體指標的影響

本研究中，蛋氨酸水平對于魚體粗蛋白、灰分、水分沒有顯著性差異(>0.05)，但對魚體的粗脂肪含量產(chǎn)生了顯著差異，表明了蛋氨酸可能參與了紅鰭東方鲀體內(nèi)的脂肪調(diào)控過程，同在大菱鲆()中(Ma, 2013)的發(fā)現(xiàn)相似，隨著蛋氨酸的水平的上升，魚體粗脂肪也隨之增高；但是在大黃魚(Mai, 2006)和軍曹魚(Zhou, 2006)的蛋氨酸需求研究中蛋氨酸水平并沒有顯著影響魚體粗脂肪含量；而在斜帶石斑魚()(Luo, 2005)中發(fā)現(xiàn)，蛋氨酸水平的升高會降低魚體粗脂肪的含量。本研究發(fā)現(xiàn)，魚體中的肝體比和臟體比隨著蛋氨酸水平呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢，蛋氨酸水平為1.60%時達到最高。這與在大菱鲆中(Klatt, 2016)的發(fā)現(xiàn)一致，肝體比會隨著蛋氨酸水平的上升而隨之增大；與在大口黑鱸(陳乃松等, 2010))和大西洋鮭()(Espe, 2008)研究中的不一致，飼料的蛋氨酸水平較低時，肝體比、臟體比較大。Espe等(2008)認為蛋氨酸引起的肝體比降低是對機體的有益行為；Walton等(1982)在虹鱒中的研究認為，肝體比的增加是因為飼料中過多的游離氨基酸轉(zhuǎn)化為肝糖原的結(jié)果。

魚體對于蛋白質(zhì)的沉積是通過外源氨基酸的供給來合成的。本研究中，肌肉中的氨基酸基本呈現(xiàn)出一種先升高再趨于平穩(wěn)的趨勢。Alam(2015)，研究證實，飼料的不同氨基酸模式會影響到牙鲆() 的生長和體蛋白結(jié)合態(tài)氨基酸的組成。在大黃魚(Mai, 2006)的研究中發(fā)現(xiàn)，肌肉中的蛋氨酸水平會隨著飼料中蛋氨酸水平的升高呈現(xiàn)出一種先升高后穩(wěn)定的趨勢；在胭脂魚() (林郁蔥，2012)中發(fā)現(xiàn)，肌肉中的精氨酸、組氨酸、亮氨酸和賴氨酸都會隨著飼料中蛋氨酸水平的增加而呈現(xiàn)出一種先升后降的趨勢；在吉富羅非魚() (向梟等, 2014)中，肌肉中的半胱氨酸、絲氨酸和組氨酸沒有表現(xiàn)出顯著差異，其余的氨基酸含量都基本呈現(xiàn)了一種先升高后降低的趨勢，上述結(jié)果與本研究結(jié)果基本一致。魚體肌肉中各種氨基酸含量的上升，說明了隨著飼料中蛋氨酸含量的上升，飼料中的氨基酸含量會趨于平衡，所攝食的這些的氨基酸就能夠更大比例的用于體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成。

3.3 蛋氨酸水平對血清和肝臟中相關(guān)生化指標的影響

通過研究膽汁酸、甘油三酯、血糖、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇來研究飼料中蛋氨酸水平對紅鰭東方鲀機體脂肪代謝的影響。膽汁酸是膽固醇代謝過程產(chǎn)生的一系列固醇類物質(zhì)，膽汁酸能促進脂肪乳化，促進脂類物質(zhì)的消化吸收，調(diào)節(jié)脂類代謝(Romański, 2007; Sirvent, 2004)。在牛蛙(shaw)(胡田恩等, 2015)中發(fā)現(xiàn)，添加適量膽汁酸能夠降低血清中血糖的含量，在本研究中，也發(fā)現(xiàn)了隨著蛋氨酸水平的升高，膽汁酸含量會上升，血清中的血糖則呈現(xiàn)出下降的趨勢。血清中甘油三酯含量的上升，表明蛋氨酸水平的上升能夠加速脂肪代謝的過程，同羅非魚(向梟等, 2014)相似，適量的蛋氨酸能夠顯著提高甘油三酯的含量，但在異育銀鯽() (Wang, 2016)中發(fā)現(xiàn)，隨著蛋氨酸含量的上升，血清中的甘油三酯則沒有顯著差異。血清中的血糖，隨著蛋氨酸水平的增加則呈現(xiàn)了一種降低的趨勢，這同胭脂魚(林郁蔥, 2012)中隨著蛋氨酸水平的升高，血清中的血糖含量呈現(xiàn)的趨勢一致。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶常用來評價機體肝臟功能的受損情況，其酶活性升高說明肝臟功能出現(xiàn)了問題。在本研究中，血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶均無顯著差異，但是在肝臟中的谷草轉(zhuǎn)氨酶則呈現(xiàn)了一種先升高再降低的趨勢，這同在異育銀鯽(Wang, 2016)中的發(fā)現(xiàn)類似，隨著蛋氨酸水平的升高，也是呈現(xiàn)了一種先升高再降低的趨勢，說明蛋氨酸的升高會加速脂肪調(diào)控，加大肝臟的負擔；有研究證明，在蛋氨酸不足或者過量時，都會影響魚類的轉(zhuǎn)氨酶活性，例如建鯉(Feng, 2011)和金鯧魚()(Niu, 2013)。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，飼料中的蛋氨酸水平對紅鰭東方鲀幼魚的生長、飼料利用效率、蛋白質(zhì)效率產(chǎn)生了顯著的影響。在本次實驗中，以特定生長率為評價指標，經(jīng)過二次回歸曲線分析：體重為(13.83~82.47) g的紅鰭東方鲀幼魚對飼料中的蛋氨酸需求量為1.38%，占飼料蛋白的2.71%。

Alam MS, Teshima S, Ishikawa M,. Methionine requirement of juvenile Japanese flounderestimated by the oxidation of radioactive methionine. Aquaculture Nutrition, 2015, 7(3): 201–209

AOAC. Official methods of analysis of the association of official analytical chemists ,14thedn. Williams S(Eds), Association of Official Analytical Chemists, Arlington, VA. 1984, 1141

Baker DH. Comparative species utilization and toxicity of sulfur amino acids. Journal of Nutrition, 2006, 136(6 Suppl): 1636S

Brosnan JT, Brosnan ME. The sulfur-containing amino acids: An overview. Journal of Nutrition, 2006, 136(6 Suppl): 1636S

Chen NS, Ma JZ, Zhou HY,. Assessment of dietary methionine requirement in largemouth bass,. Journal of Fisheries of China, 2010, 34(8): 1244– 1253 [陳乃松, 馬建忠, 周恒永, 等. 大口黑鱸對飼料中蛋氨酸需求量的評定. 水產(chǎn)學報, 2010, 34(8): 1244–1253]

Chiu YN, Austic RE, Rumsey GL. Effect of feeding level and dietary electrolytes on the arginine requirement of rainbow trout (). Aquaculture, 1988, 69(1–2): 79–91

Cowey CB. Protein and amino acid requirements: A critique of methods. Journal of Applied Ichthyology, 1995, 11(3–4): 199–204

Cowey CB. Nutrition: Estimating requirements of rainbow trout. Aquaculture, 1992, 100(1–3): 177–189

Espe M, Hevr?y EM, Liaset B,. Methionine intake affect hepatic sulphur metabolism in Atlantic salmon,. Aquaculture, 2008, 274(1): 132–141

Feng L, Xiao WW, Liu Y,Methionine hydroxy analogue prevents oxidative damage and improves antioxidant status of intestine and hepatopancreas for juvenile Jian carp (var. Jian). Aquaculture Nutrition, 2011, 17(6): 595–604

Gao LJ, Huang YQ, Xia LJ,, Comparison of flesh quality of farmed fugu,from different culture models. Journal of Fisheries of China, 2011, 35(11): 1668–1676[高露姣, 黃艷青, 夏連軍, 等. 不同養(yǎng)殖模式下紅鰭東方鲀的品質(zhì)比較. 水產(chǎn)學報, 2011, 35(11): 1668–1676]

Goff JB, Dmiii G. Evaluation of different sulfur amino acid compounds in the diet of red drum,, and sparing value of cystine for methionine. Aquaculture, 2004, 241(1–4): 465–477

Harding DE, Jr AO, Wilson RP. Sulfur amino acid requirement of channel catfish:L-methionine and L-cystine. The Journal of nutrition, 1977, 107(11): 2031–2035

Hu TE, Wang L, Zhang CX,. Effects of dietary bile acid supplementation on the growth,whole-body composition and apparent nutrient digestibility of Bullfrog (). Acta Hydrobiology Sinica, 2015, 39(4): 677–685 [胡田恩, 王玲, 張春曉,等. 飼料中添加膽汁酸對牛蛙生長性能、體組成和營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響. 水生生物學報, 2015, 39(4): 677–685]

Kikuchi K, Furuta T, Iwata N,Effect of dietary lipid levels on the growth, feed utilization, body composition and blood characteristics of tiger puffer. Aquaculture, 2009, 298(1–2): 111–117

Kim KI, Kayes TB, Amundson CH. Requirements for sulfur amino acids and utilization of D-methionine by rainbow trout (). Aquaculture, 1992, 101(1–2): 95–103

Kim SS, Lee KJ. Dietary protein requirement of juvenile tiger puffer (). Aquaculture, 2009, 287(1–2): 219–222

Klatt SF, Danwitz AV, Hasler M,. Determination of the lower and upper critical concentration of Methionine + Cystine in diets of juvenile turbot (). Aquaculture, 2016(452): 12–23

Lin YC. Study on lysine and methionine requirements for juvenile Chinese sucker,. Master's Thesis of Huazhong Agricultural University, 2012 [林郁蔥. 胭脂魚幼魚對賴氨酸和蛋氨酸的最適需要量. 華中農(nóng)業(yè)大學碩士研究生學位論文, 2012]

Luo Z, Liu YJ, Mai KS,l. Dietary L-methionine requirement of juvenile grouperat a constant dietary cystine level. Aquaculture, 2005, 249(1–4): 409–418

Ma R, Hou H, Mai KS,. Comparative study on the effects of L-methionine or 2-hydroxy-4-(methylthio) butanoic acid as dietary methionine source on growth performance and anti-oxidative responses of turbot (). Aquaculture, 2013, 412–413(6): 136–143

Mai, KS, Wan, JL, Ai, QH,. Dietary methionine requirement of juvenile yellow croaker. Aquaculture,2006, 251: 564–572

Murthy HS, Varghese TJ. Total sulphur amino acid requirement of the Indian major carp,(Hamilton). Aquaculture Nutrition, 2015, 4(1): 61–65

National Research Council (NRC). Nutrient requirements of Fishes. National Academy of Sciences, Washington, DC. 1993

Niu J, Du Q, Lin HZ,. Quantitative dietary methionine requirement of juvenile golden pompanoat a constant dietary cystine level. Aquaculture Nutrition, 2013, 19(5): 677–686

Pack M, Rodehutscord M, Jacobs S,. Amino acid requirements of rainbow trout () II. Protein deposition as function of dietary methionine, threonine and arginine. Journal of Applied Ichthyology, 1995, 11(3–4): 390–393

Poppi DA, Quinton VM, Hua K,. Development of a test diet for assessing the bioavailability of arginine in feather meal fed to rainbow trout (). Aquaculture, 2011, 314(1–4): 100–109

Ren H, Zhan XA. Advances in amino acid nutrition of aquatic animals. Feed Research, 2006(2): 41–43 [任和, 占秀安. 水產(chǎn)動物氨基酸營養(yǎng)研究進展. 飼料研究, 2006(2): 41–43]

Romański KW. The role and mechanism of action of bile acids in the digestive system - Bile acids in the gut. Advances in Clinical & Experimental Medicine, 2008, 17(1): 83–89

Ruchimat T, Masumoto T, Hosokawa H.. Quantitative methionine requirement of yellowtail (). Aquaculture 1997, 150(1–2): 113–122

Sungsam K. Dietary protein requirement of juvenile tiger puffer (). Aquaculture, 2009, 287(1–2): 219–222

Sun Y, Jiang ZQ, Li YQ,.Effects of dietary lipid on the liver antioxidant capacity and histology ofjuvenile. Journal of Guangdong Ocean University, 2013, 33(3): 27–32[孫陽, 姜志強, 李艷秋, 等. 飼料脂肪水平對紅鰭東方鲀幼魚肝臟抗氧化酶活力及組織結(jié)構(gòu)的影響. 廣東海洋大學學報, 2013, 33(3): 27–32]

Simmons L, Moccia RD, Bureau DP,. Dietary methionine requirement of juvenile Arctic charr(L.). Aquaculture Nutrition, 2015, 5(2): 93–100

Sirvent A, Claudel T, Martin G,. The farnesoid X receptor induces very low density lipoprotein receptor gene expression. FEBS Letters, 2004, 566(1–3): 173–177

Takii K, Ukawa M, Nakamura M,. Suitable lipid level in brown fish meal diet for tiger puffer (). Fisheries Science, 1995, 61(5): 841–844

Walton MJ, Cowey CB, Adron JW. Methionine metabolism in rainbow trout fed diets of differing methionine and cystine content. Journal of Nutrition, 1982, 112(8): 1525–35

Wang XM. Study on the optimum dietary protein level of juvenile tiger puffer,. Master's Thesis of Hebei2008, 14–27 [王淑敏．紅鰭東方鲀幼魚飼料最適蛋白質(zhì)含量的研究. 河北師范大學碩士研究生學位論文, 2008, 14–27]

Wang X, Xue M, Figueiredo-Silva C,. Dietary methionine requirement of the pre-adult gibel carp () at a constant dietary cystine level. Aquaculture Nutrition, 2016, 22(3): 509–516

Xiang X, Zhou XH, Luo L,, Effects of dietary methionine levels on the growth performance, feed utilization and body composition of GIFT tilapia (. Journal of Fisheries of China, 2014, 38(4): 538–549 [向梟, 周興華, 羅莉, 等. 飼料蛋氨酸水平對吉富羅非魚生長、飼料利用率和體成分的影響. 水產(chǎn)學報, 2014, 38(4): 538–549]

Xiao WW, Feng L, Liu Y,. Effects of dietary methionine hydroxyl analogue supplement on growth, protein deposition and intestinal enzymes activities of juvenile jian carp (jian). Aquaculture Nutrition 2010, 17(4): 408–417

Zhou F, Xiao JX, Hua Y,. Dietary L-methionine requirement of juvenile black sea bream () at a constant dietary cystine level. Aquaculture Nutrition, 2011, 17(5): 469–481

Zhou QC, Wu ZH, Tan BP,. Optimal dietary methionine requirement for Juvenile Cobia). Aquaculture, 2006, 258(1–4): 551–557

Dietary Methionine Requirement of Juvenile Tiger Puffer (s)

ZHANG Qinggong1,2, LIANG Mengqing2①, XU Houguo2, WEI Yuliang2

(1. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306; 2. Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071)

A 67-days feeding experiment was conducted to investigate the effects different levels on the growth performance and biochemical parameters of tiger puffer [average body weight: (13.83±0.63) g], and to determine the dietary methionine requirement fortiger puffer. There were six experimental isonitrogenous and isolipidic semipurified diets which were formulated with the graded levels of methionine (0.61%, 0.85%, 1.10%, 1.39%, 1.60%, 1.84%, respectively). Each diet was randomly assigned to triplicate groups, and each group contained 30 individuals. Fish were fed fourth daily(07:00, 12:00, 16:00, 20:00) to apparent satiation. The result showed that no significant differences in protein productive value (PPV) were found among dietary treatments (>0.05). Specific growth rate (SGR), feed conversion ratio(FCR) and protein efficiency ratio (PER) increased with increasing dietary methionine levels from 0.61% to 1.60%(<0.05), the higest group was observed in methionine levels 1.60% group, and there after showed a declining tendency with increasing dietary methionine levels from1.60% to 1.84%. Hepatosomatic index (HSI) and viscerosomatic index (VSI) of the 1.60% methionine diets was significantly higher than that of 0.61% groups (<0.05), with further increase from 1.60% to 1.84%, HSI and VSI decreased. The crude lipid contents of whole body were significantly affected by dietary methionine levels (<0.05), the 1.60% methionine diets was significantly higher than 0.61% groups (< 0.05), with further increase from 1.60% to 1.84%, crude lipid decreased. while moisture, crude protein and ash showed no significant differences (>0.05). Dietary methionine levels significantly influenced the contents of triglyceride, bile acid and blood glucose in serum (<0.05), There were no significant difference in total cholesterol, high density lipoprotein cholesterol, low density lipoprotein cholesterol, total protein, activity of glutamic-pyruvic transaminase and glutamic-oxaloacetic transaminase (>0.05) in serum. Second-order regression analysis on the basis of SGR indicated that the optimum dietary methionine requirements oftiger puffer were estimated to be 1.38% of diet (2.71% of dietary protein).

Tiger puffer (); Methionine requirement; Growth; Body composition; Physiological and biochemical indices

LIANG Mengqing, E-mail: liangmq@ysfri.ac.cn

S963

A

2095-9869(2019)04-0001-10

10.19663/j.issn2095-9869.20180525001

* 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項資金(CARS-47)資助 [This work is supported by China Agriculture Research System (CARS-47)]. 張慶功，E-mail: 592565638@qq.com

梁萌青，研究員，E-mail: liangmq@ysfri.ac.cn

2018-05-25,

2018-07-02

張慶功, 梁萌青, 徐后國, 衛(wèi)育良. 紅鰭東方鲀幼魚對飼料中蛋氨酸需求的研究. 漁業(yè)科學進展, 2019, 40(4): 01–10

Zhang QG, Liang MQ, Xu HG, Wei YL. Dietary methionine requirement of juvenile tiger puffer (). Progress in Fishery Sciences, 2019, 40(4): 01–10

(編輯 江潤林)