陳明星

【摘要】 目的：探討免疫熒光法聯(lián)合免疫膠體金法在尿生殖道沙眼衣原體感染診斷中的應(yīng)用及其臨床價(jià)值。方法：選取2017年1月-2018年8月來本院接受沙眼衣原體感染檢測(cè)的疑似尿生殖道沙眼衣原體感染患者1 100例，分別采用免疫熒光法和免疫膠體金法進(jìn)行檢測(cè)，分析不同檢測(cè)方法的診斷價(jià)值。結(jié)果：最終確診有70例患者為陽性;免疫熒光法、免疫膠體金法、聯(lián)合檢測(cè)陽性檢出率分別為6.2%、5.5%、6.4%，三組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度、特異度、診斷符合度均高于單一檢測(cè)，且免疫熒光法上述指標(biāo)均高于免疫膠體金法，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;聯(lián)合檢測(cè)的Youden指數(shù)均高于單一檢測(cè)，且免疫熒光法高于免疫膠體金法（P<0.05）;陽性患者發(fā)病情況會(huì)受到避孕方式、宮頸情況、性伴侶個(gè)數(shù)的影響（P<0.05）。結(jié)論：在對(duì)沙眼衣原體感染的診斷過程中，免疫熒光法的診斷價(jià)值高于免疫膠體金法，且免疫熒光法與免疫膠體金法聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值高于單一檢測(cè)，臨床上應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 免疫熒光法; 免疫膠體金法; 沙眼衣原體感染; 檢出率

【Abstract】 Objective：To explore the application and clinical value of immunofluorescence method combined with immunogold gold method in the diagnosis of urinary genital tract infection of chlamydia trachomatis.Method：A total of 1 100 cases of suspected urogenital Chlamydia trachomatis infection in urogenital tract who were tested for chlamydia trachomatis infection in our hospital from January 2017 to August 2018 were selected，and tested by immunofluorescence method and immunogold gold method respectively.The diagnostic value of different detection methods was analyzed.Result：70 patients were positive.The positive rates of immunofluorescence method，immunogold gold method and combined detection were 6.2%，5.5% and 6.4% respectively，there was no significant difference among the three groups（P>0.05）.The sensitivity，specificity and diagnostic coincidence of combined detection were higher than those of single detection，and the above indexes of immunofluorescence method were higher than those of immunogold gold method，the differences were statistically significant（P<0.05）.Youden index of combined detection was higher than that of single detection，and the immunofluorescence method was higher than that of immunogold gold method（P<0.05）.The incidence of positive patients was affected by contraceptive methods，cervical condition and number of sexual partners（P<0.05）.Conclusion：In the diagnosis of chlamydia trachomatis infection，the diagnostic value of immunofluorescence method is higher than that of immunogold gold method，and the diagnostic value of combined detection is higher than that of single detection，which should be further popularized and applied in clinic.

【Key words】 Immunofluorescence; Immunogold gold method; Infection of chlamydia trachomatis; Detection rateFirst-authors address：Duanzhou District Maternal and Child Health Hospital，Zhaoqing 526040，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.15.034

由沙眼衣原體引起的尿生殖道沙眼衣原體感染屬于性傳播疾病，主要臨床表現(xiàn)為泌尿生殖道部位炎癥，是比較常見的女性疾病之一[1]。隨疾病發(fā)展，嚴(yán)重時(shí)可能會(huì)導(dǎo)致輸卵管性不孕、輸卵管妊娠或妊娠期出現(xiàn)早產(chǎn)、流產(chǎn)等，目前對(duì)于該病癥并沒有明確的治療方案，但是臨床實(shí)踐證明，越早診斷，越有利于患者的恢復(fù)[2]。該病癥在感染后，有70%以上的患者并無自覺癥狀，所以對(duì)于該病癥的診斷非常困難，很容易因診斷不及時(shí)而造成不良后果[3]。目前臨床對(duì)于該病癥診斷的金標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)胞培養(yǎng)法，但是該操作的要求比較高，檢測(cè)費(fèi)用昂貴，且該檢測(cè)出結(jié)果比較慢，因此在實(shí)際應(yīng)用中受到約束[4]。本研究選取來本院進(jìn)行沙眼衣原體感染檢查的患者1 100例觀察對(duì)象，分別采用免疫熒光法和免疫膠體金法進(jìn)行檢測(cè)，判斷兩種檢測(cè)方法在臨床應(yīng)用中的參考價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月-2018年8月來本院接受沙眼衣原體感染檢測(cè)的疑似尿生殖道沙眼衣原體感染患者1 100例，年齡23～55歲，平均（35.3±3.2）歲，分別采用免疫熒光法和免疫膠體金法進(jìn)行檢測(cè)。納入標(biāo)準(zhǔn)：均有性生活史;無明顯自覺癥狀;在入組前2周內(nèi)未接受陰道灌洗和抗菌治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并有子宮腫瘤;臨床資料不完整;存在溝通障礙。本次研究是在獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)的前提下開展，患者對(duì)于本次研究內(nèi)容知情，并且在同意書上簽字。

1.2 方法 借助擴(kuò)陰器張開陰道口，暴露患者宮頸，將宮頸周圍的分泌物擦去，利用女性無菌拭子蘸取生理鹽水，以順時(shí)針方向刮取柱狀上皮細(xì)胞進(jìn)行采樣，在取樣后30 min內(nèi)將樣本在低溫環(huán)境內(nèi)送去檢驗(yàn)，直接進(jìn)行涂片和使用無菌膠管進(jìn)行標(biāo)本前處理（膠管由免疫膠體金試劑盒所提供），檢測(cè)需在2 h內(nèi)完成，操作需嚴(yán)格按照試劑盒說明說進(jìn)行。

1.2.1 免疫膠體金法檢測(cè) 使用免疫膠體金法檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，當(dāng)質(zhì)控線和檢測(cè)線同時(shí)出現(xiàn)紅色的橫條時(shí)，則證明檢測(cè)結(jié)果為陽性;若在檢測(cè)區(qū)未出現(xiàn)紅線，僅在質(zhì)控線處出現(xiàn)紅線，將其判定為陰性;若僅在檢測(cè)區(qū)出現(xiàn)紅線或無紅線者判定為無效。試劑盒由美國進(jìn)口沙眼衣原體檢測(cè)試劑盒 [5]。

1.2.2 免疫熒光法檢測(cè) 當(dāng)上皮細(xì)胞或其細(xì)胞周圍出現(xiàn)草綠色熒光小點(diǎn)，且通過顯微鏡觀察全視野時(shí)間可以超過10 h，則可以將其判定為陽性，反之擇判定為陰性[6]。

1.2.3 免疫熒光法聯(lián)合免疫膠體金法診斷的標(biāo)準(zhǔn) 兩種檢測(cè)其中一種為陽性即為聯(lián)合檢測(cè)陽性;兩種檢測(cè)均為陰性時(shí)即為聯(lián)合檢測(cè)陰性。

1.2.4 補(bǔ)充說明 在進(jìn)行樣本采集時(shí)，患者不可處于月經(jīng)期;樣本中不可含有較多的血液;對(duì)于免疫膠體金法檢測(cè)，兩種試劑盒出現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果不一致時(shí)，應(yīng)將樣本進(jìn)行核酸基因擴(kuò)增檢測(cè)，以方便確診[7]。

1.3 觀察指標(biāo) 本實(shí)驗(yàn)中以擴(kuò)大金標(biāo)準(zhǔn)為最終確診依據(jù)，即陽性：細(xì)胞培養(yǎng)法檢測(cè)為陽性，或細(xì)胞培養(yǎng)法檢測(cè)為陰性而其他兩種方法檢查為陽性;陰性：除卻上述情況則為陰性。對(duì)比免疫熒光法和免疫膠體金法檢測(cè)沙眼衣原體感染的診斷價(jià)值，包括靈敏度、特異度、診斷符合度、Youden指數(shù)，靈敏度=真陽性/（真陽性+假陰性），特異度=真陰性/（真陰性+假陽性），診斷符合度=（真陽性+真陰性）/（真陽性+假陰性+假陽性+真陰性）×100%，Youden指數(shù)=（靈敏度+特異度）-1。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 18.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同方法檢出情況分析 分別采用免疫熒光法和免疫膠體金法進(jìn)行檢測(cè)，最終確診有70例患者為陽性;免疫熒光法陽性檢出率為6.2%（68/1 100），免疫膠體金法陽性檢出率為5.5%（60/1 100），兩種方法聯(lián)合檢測(cè)陽性檢出率為6.4%（70/1 100），三組陽性檢出率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=0.873，P>0.05），見表1。

2.2 不同檢測(cè)方法的診斷價(jià)值分析 聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度、特異度、診斷符合度均高于單一檢測(cè)，且免疫熒光法上述指標(biāo)均高于免疫膠體金法，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;聯(lián)合檢測(cè)的Youden指數(shù)均高于單一檢測(cè)，且免疫熒光法高于免疫膠體金法。見表2。

2.3 受檢人員資料分析 陽性患者發(fā)病情況會(huì)受到避孕方式、宮頸情況、性伴侶個(gè)數(shù)的影響（P<0.05），見表3。

3 討論

在世界范圍內(nèi)，目前由沙眼衣原體所引起的性傳播疾病的患病率一直保持在高水平，而且呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)，特別是在發(fā)達(dá)國家，沙眼衣原體感染可以占到性傳播疾病的首位[8]。近幾年，臨床數(shù)據(jù)顯示，在我國該病癥的發(fā)病率也呈現(xiàn)上升趨勢(shì)[9]。大多患者在感染沙眼衣原體后并沒有明顯的臨床癥狀，所以大多患者在不察覺的情況下使沙眼衣原體在性伴間不斷傳播[10]。隨疾病發(fā)展，很容易引發(fā)尿道炎、宮頸炎以及輸卵管性不孕不育等，使患者生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響[11]。對(duì)于該病癥早期診斷以及對(duì)患者衣原體感染病情進(jìn)行評(píng)估，篩選造成感染發(fā)生的危險(xiǎn)因素以及預(yù)測(cè)指標(biāo)，對(duì)該疾病的發(fā)生進(jìn)行預(yù)防和及時(shí)治療，保障母嬰健康[12]。為了提高檢出率，減少患者感染后并發(fā)癥的發(fā)生，許多學(xué)者曾提出多種衣原體感染檢測(cè)方法，對(duì)目前實(shí)驗(yàn)室創(chuàng)建診斷方法進(jìn)行劃分，主要有以下三類，（1）細(xì)胞生物學(xué)方法：細(xì)胞培養(yǎng);（2）免疫學(xué)方法：免疫熒光檢測(cè)、酶聯(lián)免疫檢測(cè)以及免疫膠體金法檢測(cè);（3）分子生物學(xué)檢測(cè)：核酸探針檢測(cè)、核酸擴(kuò)增檢測(cè)。各種檢測(cè)方法在實(shí)際操作中難易程度不同、檢測(cè)時(shí)靈敏度和特異度也不相同，很多檢測(cè)方法受外界環(huán)境的影響比較大，所以至于哪種方法更適合于在臨床進(jìn)行大規(guī)模的推廣應(yīng)用還沒有確切理論證實(shí)[13]。

本研究主要采用免疫方法其中兩種進(jìn)行檢測(cè)，免疫熒光檢測(cè)和免疫膠體金法檢測(cè)，這種檢測(cè)方法相對(duì)于其他方法操作比較簡單，免疫熒光檢測(cè)是屬于一種病原體定量檢測(cè)方法，研究證明，免疫熒光檢測(cè)法的靈敏度在80%～95%，特異度在98%以上[14]。本研究結(jié)果顯示，免疫熒光檢測(cè)的靈敏度為85.7%，特異度為99.2%，與以往研究結(jié)果相一致。目前在女性尿生殖道沙眼衣原體診斷中免疫熒光檢測(cè)應(yīng)得到廣泛應(yīng)用。本研究通過患者宮頸口分泌物取樣進(jìn)行檢測(cè)，該檢測(cè)方法也可以通過尿液進(jìn)行檢測(cè)，相對(duì)操作比較靈活。但是該操作的大范圍推廣也會(huì)受到一定因素的限制，比如在進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)時(shí)所需檢測(cè)成本比較高，在進(jìn)行檢測(cè)操作時(shí)對(duì)于檢測(cè)人員的專業(yè)水平要求比較高，樣本在送檢過程中，如操作不慎很容易引發(fā)感染，影響檢測(cè)結(jié)果，而且通過該方法進(jìn)行檢測(cè)，無法對(duì)沙眼衣原體的生存與死亡情況進(jìn)行判斷，不能用于患者預(yù)后檢查。

膠體金是屬于病原體定性檢測(cè)方法的一種，采用該方法進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，只有40%～70%的敏感性，但是該檢測(cè)方法的特異度比較高，在檢測(cè)時(shí)特異度為80%以上。本研究結(jié)果顯示，采用免疫膠體金檢測(cè)特異度為98.8%，而該檢測(cè)方法的敏感性僅68.6%，與以往研究所得出結(jié)論一致[15-16]。該操作方法比較簡單，對(duì)于操作人員的素質(zhì)要求不高，而且該檢測(cè)方法結(jié)果出得比較快，但是要想準(zhǔn)確檢測(cè)結(jié)果，需要較多數(shù)量的沙眼衣原體抗原。本研究分析兩種檢測(cè)方法各自優(yōu)缺點(diǎn)，并對(duì)比兩種方法聯(lián)合的檢測(cè)將結(jié)果，結(jié)果顯示，聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度、特異度、診斷符合度均高于單一檢測(cè)，且免疫熒光法上述指標(biāo)均高于免疫膠體金法，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;聯(lián)合檢測(cè)的Youden指數(shù)均高于單一檢測(cè)，且免疫熒光法高于免疫膠體金法。證明通過聯(lián)合兩種檢測(cè)方法可以有效提高診斷符合度，做到對(duì)疾病的早發(fā)現(xiàn)早治療。

綜上所述，在對(duì)沙眼衣原體感染的診斷過程中，免疫熒光法的診斷價(jià)值高于免疫膠體金法，且免疫熒光法與免疫膠體金法聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值高于單一檢測(cè)，臨床上應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步推廣應(yīng)用。

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（收稿日期：2019-02-27） （本文編輯：董悅）