謝明晏 張正 黃瑤 張志鵬 胡瑤 程學(xué)仁

摘 要 目的：建立大薊不同藥用部位的高效液相色譜（HPLC）特征圖譜，并結(jié)合化學(xué)識(shí)別方法全面比較大薊不同藥用部位化學(xué)成分的差異，為大薊藥材的質(zhì)量控制及評(píng)價(jià)提供參考。方法：采用HPLC法分別對(duì)大薊藥材（即地上部分）、葉、花、主莖和側(cè)莖進(jìn)行測(cè)定，按《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)》（2012A版）對(duì)色譜圖進(jìn)行匹配生成各藥用部位的HPLC特征圖譜，通過(guò)單因素方差分析共有特征峰峰面積差異，通過(guò)與對(duì)照品比對(duì)進(jìn)行色譜峰指認(rèn)，并結(jié)合主成分分析和聚類(lèi)分析對(duì)大薊不同藥用部位進(jìn)行化學(xué)模式識(shí)別研究。結(jié)果：分別建立了大薊藥材、葉、花、主莖、側(cè)莖的HPLC特征圖譜，大薊藥材、葉和花的圖譜中共確定了15個(gè)共有峰，主莖、側(cè)莖的圖譜中共確定了11個(gè)共有峰（7、9、12、13號(hào)峰缺失），不同藥用部位之間化學(xué)成分含量差異較大;指認(rèn)峰1、2、3、10、11分別為新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、蒙花苷和柳穿魚(yú)葉苷。主成分分析和聚類(lèi)分析結(jié)果顯示，大薊花與莖的化學(xué)模式識(shí)別聚類(lèi)區(qū)別清晰，可分別聚為一類(lèi);但大薊葉分布較為分散，難以很好地聚類(lèi)。結(jié)論：建立的HPLC特征圖譜-化學(xué)模式識(shí)別分析模型能夠整體、全面、真實(shí)地反映大薊不同藥用部位之間的差異，對(duì)大薊藥材的基源鑒別、質(zhì)量控制及整體性評(píng)價(jià)具有重要意義。

關(guān)鍵詞 大薊;藥用部位;特征圖譜;方差分析;主成分分析;聚類(lèi)分析

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To establish HPLC characteristic chromatogram of different medicinal parts of Cirsium japonicum， and to compare the difference of chemical components in different medicinal parts of C. japonicum according to chemical identification method， and to provide reference for quality control and evaluation of C. japonicum. METHODS： Medicinal material（overground part）， leaves， flower， main stem and lateral stem of C. japonicum were determined by HPLC. According to the? ?TCM Chromatographic Fingerprint Similarity Evaluation System （2012A edition）， the chromatograms were matched to generate the HPLC characteristic chromatogram of each medicinal part. The differences of common characteristic peak area were analyzed according to variance analysis of single factor. The chromatographic peaks were identified by comparison of reference substance. Meanwhile， the chemical pattern recognition was performed to research the different medicinal parts of C. japonicum according to principal component analysis （PCA） and cluster analysis. RESULTS： HPLC characteristic chromatograms of medicinal material， leaves， flower， main stem and lateral stem from C. japonicum were established respectively， and 15 common peaks were confirmed for medicinal material， leaves and flower of C. japonicum; 11 common peaks were confirmed in chromatograms of main stem and lateral stem from C. japonicum （absence of No. 7， 9， 12， 13 peak）. The contents of chemical components were different greatly among different medicinal parts. No. 1， 2， 3， 10， 11 peaks were identified as neochlorogenic acid， chlorogenic acid， cryptochlorogenic acid， linarin and pectolinarin. Results of PCA and cluster analysis showed that chemical pattern recognition and clustering of the flower and stem of C. japonicum were distinct and can be clustered into one category respectively. However， the leaves distribution of C. japonicum was relatively scattered， so it was difficult to cluster. CONCLUSIONS： Established HPLC characteristic chromatogram-chemical pattern recognition can reflect the differences of different medicinal parts of C. japonicum integrally， comprehensively and truly， which has vital significance for origin indentification， quality control and overall evaluation of C. japonicum.

KEYWORDS? ?Cirsium japonicum; Medicinal parts; Charac- teristic chromatogram; Variance analysis; Principal component analysis; Cluster analysis

大薊為菊科植物薊（Cirsium japonicum Fisch. ex DC.）的干燥地上部分，其味甘、苦，性涼，有涼血止血、散瘀解毒消癰之功效，主治衄血、吐血、尿血、便血、崩漏、外傷出血、癰腫瘡毒等病癥[1]，為臨床常用止血藥。研究表明，大薊的化學(xué)成分主要為黃酮類(lèi)、甾醇類(lèi)、木脂素類(lèi)、長(zhǎng)鏈炔烯醇類(lèi)、苷類(lèi)及揮發(fā)油類(lèi)等，具有凝血止血、抗腫瘤等藥理作用，并且其發(fā)揮止血凝血作用的主要活性成分為柳穿魚(yú)葉苷和蒙花苷等黃酮類(lèi)成分[2-7]。

大薊在中國(guó)大部分地區(qū)均有分布，由于其產(chǎn)地眾多、生產(chǎn)環(huán)境多樣，不同地區(qū)大薊的植物形態(tài)有一定差異，形成了眾多同種不同型的大薊藥材[8]。而古代本草關(guān)于大薊的記載十分簡(jiǎn)略，僅以葉裂和有針刺為特征，導(dǎo)致目前市場(chǎng)上大薊藥材較為混亂，基源鑒定十分困難[9]。1985-2000年版的《中國(guó)藥典》規(guī)定，大薊藥用部位為干燥地上部分或根。后因其不同部位組織特征差異顯著，藥理作用差異較大，自2005年版《中國(guó)藥典》開(kāi)始，將大薊藥用部位改為地上部分，除去了地下部分——大薊根。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，大薊地上部分中莖、葉具有較顯著的止血功效;并且大薊葉提取物可抑制脂肪的形成，具有潛在的肥胖癥治療功效[2，10]。但目前，關(guān)于大薊藥材和不同藥用部位的研究較少，僅是基于柳穿魚(yú)葉苷和蒙花苷的含量研究[11]，無(wú)法全面表征大薊藥材質(zhì)量和不同藥用部位化學(xué)成分的差異性。因此，本研究采用高效液相色譜（HPLC）法，分別建立大薊藥材（即地上部分）、葉、花、主莖、側(cè)莖的特征圖譜，并結(jié)合主成分分析和聚類(lèi)分析對(duì)大薊不同藥用部位進(jìn)行化學(xué)模式識(shí)別研究，全面比較大薊不同藥用部位化學(xué)成分的差異，為大薊藥材的質(zhì)量控制及評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

ARC型HPLC儀（美國(guó)Waters公司）;KQ-500DE型數(shù)控超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）;ME204E型萬(wàn)分之一天平（瑞士Mettler Toledo公司）;MiliQ Direct 8型超純水機(jī)（德國(guó)Merck股份有限公司）;111B型二兩裝高速中藥粉碎機(jī)（浙江瑞安市永歷制藥機(jī)械有限公司）;HWS-28型電熱恒溫水浴鍋（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）。

1.2 藥品與試劑

10批大薊藥材分別于2018年采集自江蘇和安徽，經(jīng)廣東一方制藥有限公司魏梅主任藥師鑒定均為菊科植物薊（C. japonicum Fisch. ex DC.）的干燥地上部分，將每批藥材的葉、花、主莖、側(cè)莖分開(kāi)，將藥材和不同藥用部位分別粉碎、過(guò)篩后備用（來(lái)源信息詳見(jiàn)表1，將編號(hào)S1～S10藥材對(duì)應(yīng)的葉記為S11～S20，對(duì)應(yīng)的花記為S21～S30，對(duì)應(yīng)的主莖記為S31～S40，對(duì)應(yīng)的側(cè)莖記為S41～S50）;柳穿魚(yú)葉苷對(duì)照品（批號(hào)：111728-201703，純度：99.6%）、綠原酸對(duì)照品（批號(hào)：110753-201817，純度：96.8%）、蒙花苷對(duì)照品（批號(hào)：111528-201509，純度：97.5%）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院;新綠原酸對(duì)照品（批號(hào)：wkq18030107，純度：≥98%）、隱綠原酸對(duì)照品（批號(hào)：wkq16081903，純度：≥98%）均購(gòu)自四川省維克奇生物科技有限公司;甲醇、乙腈、磷酸為色譜純，其余試劑均為分析純，水為實(shí)驗(yàn)室自制超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Waters XBridge C18（250 mm×4.6 mm，5? ? ? μm）;流動(dòng)相：乙腈-甲醇（4 ∶ 1，V/V）（A）-0.1%磷酸（B），梯度洗脫（0～16 min，91%B→83%B;16～18 min，83%B→79%B;18～36 min，79%B→72%B;36～46 min，72%B→5%B）;檢測(cè)波長(zhǎng)：330 nm;柱溫：30 ℃;流速：1.0 mL/min;進(jìn)樣量：10 μL。

2.2 混合對(duì)照品溶液的制備

分別取新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、蒙花苷、柳穿魚(yú)葉苷對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加70%甲醇溶解，制成每1 mL中分別含新綠原酸88.278 μg、綠原酸29.958 μg、隱綠原酸52.431 μg、蒙花苷21.561 μg和柳穿魚(yú)葉苷87.768 μg的混合對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取樣品粉末約0.5 g，精密稱(chēng)定，置于具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇100 mL，稱(chēng)定質(zhì)量，加熱回流1 h，放冷，再稱(chēng)定質(zhì)量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，用0.22 μm濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 精密度試驗(yàn) 精密稱(chēng)取編號(hào)為S7的藥材樣品（地上部分，下同），按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖。以11號(hào)峰（柳穿魚(yú)葉苷峰）為參照峰，計(jì)算得各特征峰的相對(duì)保留時(shí)間及相對(duì)峰面積的RSD均小于3%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.4.2 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密稱(chēng)取編號(hào)為S7的藥材樣品，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，分別于室溫下放置0、2、4、8、12、24 h時(shí)，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖。以11號(hào)峰（柳穿魚(yú)葉苷峰）為參照峰，計(jì)算得各特征峰的相對(duì)保留時(shí)間及相對(duì)峰面積的RSD均小于3%（n=6），表明供試品溶液在室溫條件下放置24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4.3 重復(fù)性試驗(yàn) 精密稱(chēng)取編號(hào)為S7的藥材樣品6份，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖。以11號(hào)峰（柳穿魚(yú)葉苷峰）為參照峰，計(jì)算得各特征峰的相對(duì)保留時(shí)間及相對(duì)峰面積的RSD均小于3%（n=6），表明該方法的重復(fù)性良好。

2.5 HPLC特征圖譜研究

2.5.1 HPLC特征圖譜的建立 按“2.3”項(xiàng)下方法分別制備10批大薊藥材、葉、花、主莖、側(cè)莖的供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖。采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)》（2012A版）分別進(jìn)行色譜峰匹配，建立大薊藥材及不同藥用部位的特征圖譜。以S1號(hào)圖譜作為參照?qǐng)D譜，設(shè)置時(shí)間窗寬度為0.1 min，通過(guò)多點(diǎn)校正、全譜峰匹配分別生成10批大薊藥材、葉、花、主莖和側(cè)莖的共有特征圖譜，同時(shí)采用中位數(shù)法分別生成對(duì)照特征圖譜。10批大薊藥材、葉、花、主莖和側(cè)莖的共有特征圖譜詳見(jiàn)圖1，對(duì)照特征圖譜詳見(jiàn)圖2。

2.5.2 HPLC特征圖譜的分析 由圖2顯示，大薊不同藥用部位對(duì)照特征圖譜存在明顯差異。大薊花和葉的對(duì)照特征圖譜中均具有與大薊藥材相同的15個(gè)特征峰;大薊主莖和側(cè)莖征特對(duì)照?qǐng)D譜中均有4個(gè)共有峰（峰7、9、12、13）缺失，提示這4個(gè)特征峰為大薊花和葉的主要標(biāo)志成分，確定的11個(gè)特征峰同時(shí)也為花和葉所共有。

采用SPSS 20.0軟件對(duì)10批大薊藥材及不同藥用部位特征峰的峰面積進(jìn)行單因素方差分析。結(jié)果顯示，大薊藥材與葉以及大薊主莖與側(cè)莖的各特征峰峰面積差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），但大薊藥材與花的特征峰11和12，與主莖的特征峰7、9～13，以及與側(cè)莖的特征峰5、7、9、12、13的峰面積差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;大薊葉與花的特征峰6、9～13、15，以及與主莖和側(cè)莖的特征峰6、7、9～13、15的峰面積差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;大薊花與主莖的特征峰7、9、12～14，以及與側(cè)莖的特征峰7、9、12、13的峰面積差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），這表明大薊不同藥用部位之間化學(xué)成分的含量差異較大。10批大薊不同藥用部位特征圖譜共有峰峰面積的方差分析結(jié)果詳見(jiàn)表2。

2.5.3 色譜峰的指認(rèn) 取“2.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖。通過(guò)與對(duì)照品圖譜比對(duì)，指認(rèn)了峰1為新綠原酸、峰2為綠原酸、峰3為隱綠原酸、峰10為蒙花苷、峰11為柳穿魚(yú)葉苷?；旌蠈?duì)照品溶液的色譜圖詳見(jiàn)圖3。

2.6 化學(xué)模式識(shí)別研究

2.6.1 主成分分析 主成分分析是一種多元統(tǒng)計(jì)分析方法，其利用方差最大原則，可對(duì)原始數(shù)據(jù)中的多個(gè)自變量進(jìn)行數(shù)據(jù)的降維，尋找少數(shù)幾個(gè)由原始變量線性組合的主成分，然后采用少數(shù)綜合變量來(lái)代替原始的眾多變量，常被用來(lái)篩選含復(fù)雜組分的不同樣本間具有顯著性差異的組分，具有可信度高、靈活性強(qiáng)、側(cè)重于綜合評(píng)價(jià)信息的貢獻(xiàn)影響力的特點(diǎn)，近年來(lái)在中藥鑒定、質(zhì)量評(píng)價(jià)和品種分類(lèi)等方面多有應(yīng)用[12-13]。本研究分別以大薊不同藥用部位（花、主莖、側(cè)莖和葉）的15個(gè)特征峰峰面積作為變量（缺失特征峰面積記為0），使用SPSS 20.0軟件進(jìn)行主成分分析。以特征值大于1為判斷標(biāo)準(zhǔn)，共提取出3個(gè)主成分，這3個(gè)主成分對(duì)總方差的累積貢獻(xiàn)率達(dá)87.411%（主成分1、2、3的特征值分別為6.866、3.645、2.601，累積貢獻(xiàn)率分別為45.776%、70.074%、87.411%），說(shuō)明其可較好地反映大薊不同藥用部位的總體成分信息。三維得分散點(diǎn)圖顯示，大薊花與主莖、側(cè)莖、葉之間區(qū)分界線較為清晰，沒(méi)有互相重疊的區(qū)域，可單獨(dú)聚為一類(lèi)，表明大薊花與大薊葉、主莖、側(cè)莖差異明顯;大薊主莖和側(cè)莖的樣本聚集在一起，無(wú)法區(qū)分，表明主莖和側(cè)莖之間無(wú)明顯差異;大薊葉樣本較為分散，無(wú)法較好地聚類(lèi)，且部分樣本與主莖和側(cè)莖樣本聚集在一起，表明大薊葉的批間差異較大。特征值和累積貢獻(xiàn)率結(jié)果詳見(jiàn)表3，大薊不同藥用部位樣品主成分分析三維得分散點(diǎn)圖詳見(jiàn)圖4。

2.6.2 聚類(lèi)分析 聚類(lèi)分析是一種無(wú)監(jiān)督模式識(shí)別方法，將樣本數(shù)據(jù)在沒(méi)有先驗(yàn)知識(shí)的前提下，基于樣品所表現(xiàn)的變量特征，按照相似度進(jìn)行歸類(lèi)，可直觀地得到樣本分類(lèi)結(jié)果[14]。本研究以10批藥材的4個(gè)藥用部位，即大薊葉、花、主莖、側(cè)莖的峰面積為原始數(shù)據(jù)，使用SPSS 20.0軟件進(jìn)行聚類(lèi)分析。采用組間平均數(shù)聯(lián)接法，以Euclidean平方距離為度量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果顯示，大薊花可聚為一類(lèi);主莖與側(cè)莖可聚為一類(lèi);部分批次的葉可單獨(dú)聚為一類(lèi)，但也有部分批次分散在主莖和側(cè)莖類(lèi)別之中，無(wú)法較好地聚類(lèi)。大薊不同藥用部位特征圖譜聚類(lèi)分析樹(shù)狀圖詳見(jiàn)圖5。

3 討論

3.1 提取溶劑和提取時(shí)間的優(yōu)化

本研究考察了不同提取溶劑（50%甲醇、70%甲醇、甲醇、70%乙醇、乙醇）、不同提取方式（回流、超聲）及不同提取時(shí)間（0.5、1、1.5 h）對(duì)大薊藥材特征圖譜的影響。結(jié)果，當(dāng)提取溶劑為70%甲醇、加熱回流1 h時(shí)，樣品提取完全，得到的樣品色譜峰峰形較好，色譜峰信息較豐富，故確定樣品提取條件為70%甲醇加熱回流1 h。

3.2 大薊不同藥用部位化學(xué)化成分的差異分析

研究發(fā)現(xiàn)，大薊不同藥用部位化學(xué)成分含量有較大差異[2，11]，筆者推斷其不同部位的具體應(yīng)用與某些成分的含量差異具有一定相關(guān)性。本研究通過(guò)對(duì)大薊不同藥用部位特征圖譜與混合對(duì)照品特征圖譜比較，指認(rèn)了峰1為新綠原酸、峰2為綠原酸、峰3為隱綠原酸、峰10為蒙花苷、峰11為柳穿魚(yú)葉苷。大薊不同部位化學(xué)成分組成和含量均存在顯著差異，其中大薊花、葉和莖（主莖、側(cè)莖）差異性較為明顯，主莖和側(cè)莖中缺失的共有峰（峰7、9、12、13）雖然均存在花和葉中，但葉中含量偏低，而花中的含量較高，表明大薊藥材中此4種成分主要來(lái)自花。相關(guān)研究表明，蒙花苷和柳穿魚(yú)葉苷具有明顯的止血功效，止血機(jī)制可能是通過(guò)增加機(jī)體纖維蛋白原含量，影響抗凝系統(tǒng)發(fā)揮作用[15]。本研究比較了不同藥用部位中蒙花苷和柳穿魚(yú)葉苷成分分布情況，結(jié)果大薊葉中以上2種成分含量顯著高于其他部位，與文獻(xiàn)中大薊植株的蒙花苷和柳穿魚(yú)葉苷主要分布在莖葉中的報(bào)道結(jié)果[10]較為一致，根據(jù)這一特點(diǎn)，可考慮以大薊葉作為原料開(kāi)發(fā)止血藥物。結(jié)合以上研究結(jié)果，建議大薊采收時(shí)應(yīng)在葉子茂盛的夏季，且采收過(guò)程盡可能保證花朵的完整性，確保藥材整體的質(zhì)量和藥效。另外，因大薊藥材包括了花、葉、主莖及側(cè)莖等部位，共同分析時(shí)無(wú)法較好地找到分類(lèi)規(guī)律，故未對(duì)地上部分進(jìn)行模式分析。主成分分析和聚類(lèi)分析結(jié)果均顯示，不同批次的大薊葉分布較為分散，難以很好地聚為一類(lèi)，分析原因可能是葉的生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)，不同采收時(shí)期、不同生長(zhǎng)環(huán)境均會(huì)影響成分的積累，后期將對(duì)影響葉片成分積累的主要因素進(jìn)行研究。

綜上，本研究分別建立了大薊藥材及其不同藥用部位的HPLC特征圖譜，并結(jié)合主成分分析及聚類(lèi)分析等化學(xué)模式識(shí)別方法和方差分析方法，可較全面地反映大薊不同藥用部位成分的差異。但不同藥用部位化學(xué)成分的差異及所占藥材比例的不同是否會(huì)影響其臨床療效，尚需進(jìn)一步結(jié)合藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)深入研究。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：一部[S]. 2015年版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：25.

[ 2 ] 趙彧，邱明陽(yáng)，劉玉婷，等.大薊化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J].中草藥，2017，48（21）：4584-4590.

[ 3 ] 侯坤，許浚，張鐵軍.薊屬藥用植物的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J].中草藥，2010，41（3）：506-509.

[ 4 ] 蔣秀蕾，范春林，葉文才.大薊化學(xué)成分的研究[J]. 中草藥，2006，37（4）：510-512.

[ 5 ] 顧玉誠(chéng)，屠呦呦.大薊化學(xué)成分的研究[J].中國(guó)中藥雜志，1992，17（8）：489-490、512.

[ 6 ] 李敏，苗明三.大薊的化學(xué)、藥理及臨床應(yīng)用特點(diǎn)[J].中醫(yī)學(xué)報(bào)，2016，31（2）：262-265.

[ 7 ] 陳海芳，陳凱云，袁金斌，等.大薊的止血活性藥效初步研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2010，28（7）：1458-1459.

[ 8 ] 石鑄.中國(guó)菊科菜薊族植物研究：三[J].植物研究，1984，4（2）：59-66.

[ 9 ] 吳蜀星，李治昊，宋良科，等.大薊的基源調(diào)查與鑒定[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2013，27（1）：21-23.

[10] 張丹，周潔.大薊臨床應(yīng)用淺析[J].云南中醫(yī)中藥雜志，2004，25（3）：19-21.

[11] 伍敏生，曹維生，周啟仲.大薊藥用部位成分分析[J].中醫(yī)學(xué)報(bào)，2016，31（12）：1947-1949.

[12] 甄亞欽，馮玉，田偉，等.忍冬不同部位UPLC指紋圖譜及化學(xué)模式識(shí)別研究[J].中草藥，2019，50（18）：4449-4454.

[13] 孫立麗，王萌，任曉亮.化學(xué)模式識(shí)別方法在中藥質(zhì)量控制研究中的應(yīng)用進(jìn)展[J].中草藥，2017，48（20）：4339- 4345.

[14] 邱新華，唐鐵鑫，劉燕，等.幾種模式識(shí)別方法用于中藥揮發(fā)油紅外光譜法鑒別的比較研究[J].中國(guó)藥房，2015，26（21）：2986-2988.

[15] 龔千鋒，鐘凌云，張的鳳，等.大薊飲片、大薊炭的炮制及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[C]//中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第四屆中藥炮制分會(huì)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集.北京：中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中藥炮制分會(huì)，2004：170-172.

（收稿日期：2019-11-13 修回日期：2020-01-10）

（編輯：林 靜）