天津市靜海區(qū)疾病預防控制中心 （天津 300000）

內(nèi)容提要： 目的：分析研究高效液相色譜法在測定飲料中8種食品添加劑的應用效果。方法：基于Waters的超高效液相色譜儀，采用梯度洗脫技術對飲料中的新紅、苯甲酸、檸檬黃等食品添加劑進行檢測。結果：8種食品添加劑線性相關系數(shù)均大于0.9990，檢出限在0.14～0.32mg/kg范圍內(nèi)，標準偏差SD值位于0.025～0.044之間，RSD值在0.128%～0.250%范圍內(nèi)，回收率位于94.8%～107.7%范圍內(nèi)。結論：高效液相色譜法速度快、可操作性強，檢測精度高，在飲料添加劑檢測方面具有較好的應用效果。

隨著人們生活水平的不斷提升，飲料已經(jīng)逐步成為人們的日常餐飲選擇。為了提升飲料的口感和色澤，通常會加入一定的食品添加劑，比如新紅、苯甲酸、檸檬黃等[1]。如果食品添加劑超標，會給人類的身體健康帶來負面影響，嚴重者會危及生命。本文利用高效液相色譜法對飲料中的8種添加劑進行檢測，詳細報道如下。

1.材料與方法

1.1 儀器和試劑

液相色譜色譜儀選為Waters的超高效液相色譜儀，離心機為GL-20G-Ⅱ高速冷凍離心機。試劑為1.00mg/mL山梨酸溶液、1.00mg/mL苯甲酸溶液、1.00mg/mL糖精酸鈉溶液、100mg/L新紅溶液、1.00mg/mL赤蘚紅溶液、1.00mg/mL檸檬黃溶液、1.00mg/mL亮藍溶液、5.0mg/mL日落黃溶液標準物質。色譜純選為甲醇和色譜純、優(yōu)級純?yōu)橐宜徜@、實驗用水為18MΩ·cm的超純水。

1.2 樣品處理

精密量取10g碳酸類飲料樣品，微熱至50°C去除CO2后靜置，待溫度降至室溫后定容至25mL，離心5min后過濾上清液。果汁類、固體類飲料樣品處理方法同上。

1.3 色譜條件

色譜柱為C18柱（250mm×4.6mm，5μm），最佳檢測波長選擇為230nm，柱溫30°C。流動相為0.002mol/L甲醇-乙酸銨，流速0.8mL/min。

2.結果與討論

2.1 線性范圍及檢出限

利用紫外檢測器，在最佳色譜條件下對待檢測溶液進行檢測，得到不同添加劑的線性關系方程。結果顯示，新紅、檸檬黃、苯甲酸、山梨酸、日落黃、糖精鈉、亮藍、赤蘚紅等8種添加劑的線性相關系數(shù)均大于0.9990，依次為0.99996、0.99959、0.99991、0.99987、0.99997、0.99988、0.99986、0.99983。檢出限在0.14～0.32mg/kg范圍內(nèi)，上述8種添加劑的檢出限依次為0.20、0.14、0.21、0.29、0.31、0.32、0.28、026。

2.2 精密度、準確度實驗

針對上述樣品重復測定7次，結果顯示新紅、檸檬黃、苯甲酸、山梨酸、日落黃、糖精鈉、亮藍、赤蘚紅等8種添加劑SD值位于0.025～0.044之間；上述8種添加劑RSD值位于0.128%～0.250%之間，即實驗精密度良好，詳細見表1所示。

應用高效液相色譜法在20μg/L濃度下開展添加回收率測試，結果顯示回收率位于94.8%～107.7%范圍內(nèi)。選擇相同濃度的標準樣品進行對照測定，對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理，對照品測定結果與樣品測定結果無顯著差異（P＜0.05）。

2.3 樣品測定

選取處理的飲料樣品（可樂、果汁、固體飲料）進行色譜條件測定，其中可樂樣品中糖精鈉峰值較高；果汁樣品中可檢測出苯甲酸、亮藍等添加劑，苯甲酸對應的峰值較高；固體飲料可檢測出山梨酸、日落黃等添加劑，山梨酸對應的峰值較高。

3.討論

在飲料生產(chǎn)、加工、儲存過程中，加入適量的食品添加劑能夠提高飲料的色澤、口味以及保險周期，可以說食品添加劑與飲料有著密切的聯(lián)系。但是，在實際中食品添加劑使用超出控制范圍的現(xiàn)象時有發(fā)生，如果引用過量，可能致癌、致畸，極大地影響了消費者的身體健康，甚至威脅生命安全[2]。

為解決這一問題，我國已經(jīng)出臺相關法律法規(guī)，明確規(guī)定了食品添加劑的使用范圍和劑量。常見的食品添加劑可以分為防腐劑、甜味劑、著色劑等幾大類[3]。其中，防腐劑能夠抑制微生物的生長，延長飲料的保質期，常見的防腐劑有包括有機防腐劑和無機防腐劑，其中前者比較有代表性的是苯甲酸、山梨酸等，飲料工業(yè)中使用普遍，后者比較有代表性的是亞硫酸鹽等[4]。以苯甲酸為例，該添加劑進入人體后會對人體產(chǎn)生較大的副作用，歐美等國已禁止將其列入食用防腐劑的范疇，我國規(guī)定苯甲酸的使用上限是0.2g/Kg。與苯甲酸相比，山梨酸副作用較低，但是食用過多會影響機體的正常新陳代謝，增加機體的代謝負擔[5]。甜味劑包括天然調味劑和人工合成調味劑，前者包括甘草、甜葉菊等，后者包括糖精鈉、甜蜜素等。從我國的飲食結構來看，甜味劑無處不在，研究顯示，甜蜜素過量使用會導致肝功能超負荷，嚴重者可能導致食用者患癌。此外，酸味劑也是常見的食品添加劑之一，酸味劑不僅可以賦予飲料適度的酸味，還能抑制微生物的生長，常見的酸味劑有醋酸、檸檬酸、乳酸等[6]。

為防止濫用食品添加劑，保證公眾健康，我國政府出臺了食品衛(wèi)生檢測國家標準，但是該標準只能針對一種或者一類食品添加劑，對于復合添加劑尚缺乏明確的標準[7]。目前業(yè)內(nèi)常采用氣相色譜、液相色譜、氣相色譜質譜聯(lián)用等技術進行食品添加劑的檢測，其中質譜技術具有較高的專一性，能避免其他基質和雜質的干擾，色譜技術分離效率高，液相色譜法檢測靈敏度高、重復性高、并且不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性等因素的制約，應用范圍廣[8]。本文構建了高效液相色譜法對飲料中的8種添加劑進行檢測，結果顯示新紅、檸檬黃、苯甲酸、山梨酸、日落黃、糖精鈉、亮藍、赤蘚紅等8種食品添加劑線性相關系數(shù)均大于0.9990，檢出限在0.14～0.32mg/kg范圍內(nèi)，標準偏差SD值位于0.025～0.044之間，RSD值在0.128%～0.250%范圍內(nèi)，回收率位于94.8%～107.7%范圍內(nèi)。高效液相色譜法可操作性強，檢測精度高，能滿足相關食品添加劑的國家標準要求，在飲料添加劑檢測方面具有較好的應用效果。

表1. 8種食品添加劑測定實驗精密度測定結果