劉琳琳，朱連連，王谷強(qiáng)，張小波，竇德強(qiáng)*

(1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，大連116600；2.遼寧林下柱參有限公司，丹東118000；3.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院，北京100700)

石柱參，也稱柱參，為栽培人參之冠，歷經(jīng)400余年的選育，其形態(tài)特征和藥用價(jià)值均與野山參相似，素有“柱參不到不開(kāi)行”的說(shuō)法，在我國(guó)栽培人參中占有重要地位。石柱參種源為長(zhǎng)脖人參品系，人工栽培或林下播種在以石柱村為核心區(qū)域的遼寧寬甸沙性棕壤土山區(qū)的人參，俗稱“寬甸路或石柱參”。根莖長(zhǎng)，主體小，多兩支根，須根少而細(xì)長(zhǎng)[1]。石柱子村位于北緯 40°43'00"，東經(jīng) 125°29'30"，年平均氣溫 6.5 ℃，年日照2400 h，年降雨量1100 mm以上，無(wú)霜期140天，有霧天氣達(dá)150天以上。四季分明，冷熱適度，雨量充沛。土壤為酸性棕壤土，其母巖為酸性巖類的花崗巖和片麻巖。為低山丘陵赤栃林區(qū)，天陽(yáng)地陰，風(fēng)調(diào)雨順，是石柱參生長(zhǎng)發(fā)育的唯一佳境?，F(xiàn)泛指寬甸境內(nèi)的人參。從地理位置上看遼寧寬甸與桓仁都處于長(zhǎng)白山余脈，并與集安接壤，而寬甸和集安都與朝鮮接壤，其地理氣候獨(dú)特，均是理想的人參栽培地區(qū)。2012年8月3日，“寬甸石柱人參”獲得國(guó)家農(nóng)業(yè)部的農(nóng)產(chǎn)品地理標(biāo)志產(chǎn)品；2013年1月28日，“石柱參”獲得國(guó)家質(zhì)檢總局地理標(biāo)識(shí)商標(biāo)；2013年5月21日，“遼寧寬甸柱參傳統(tǒng)栽培體系”被我國(guó)農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)為“中國(guó)重要農(nóng)業(yè)文化遺產(chǎn)”[2]。石柱參在我國(guó)人參產(chǎn)業(yè)中具有一定的地位，其質(zhì)量也越來(lái)越受到人們的重視。

石柱參屬于長(zhǎng)脖品系，根據(jù)性狀特征，品系內(nèi)又細(xì)分竹節(jié)蘆、線蘆、草蘆及圓膀圓蘆四個(gè)品類（圖1～圖4），即四種農(nóng)家類型。竹節(jié)蘆：形如竹節(jié)的蘆。蘆碗間距小而緊密的為小竹節(jié)，蘆碗間距較大的為大竹節(jié)；線蘆：根莖細(xì)長(zhǎng)如線的蘆；草蘆：蘆較粗，馬牙蘆碗，排列有序的蘆；圓膀圓蘆：主根圓膀，相連圓蘆的蘆。根據(jù)生長(zhǎng)環(huán)境和栽培方式的不同，目前石柱參多分為：石柱林下山參、石柱園參以及移山參，本研究取樣均為石柱林下山參。

圖1 竹節(jié)蘆

圖2 線蘆

圖3 草蘆

圖4 圓膀圓蘆

1 材料

1.1 藥材與試劑

人參皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Ro、Rb2、Rb3 及Rd對(duì)照品均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；色譜純乙腈 （Duksan，韓國(guó)德山）；色譜純甲醇（Oceanpak alexative chemical，瑞典）；其他試劑均為分析純。石柱參經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院竇德強(qiáng)教授、王冰教授鑒定，確定為五加科植物人參（Panax ginseng C.A.Mey）的干燥根和根莖，均產(chǎn)自遼寧省丹東市寬甸滿族自治縣石柱村，詳見(jiàn)表1。

表1 石柱參樣品信息

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

Agilent1260高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫科技有限公司）；萬(wàn)分之一分析天平 （Acculab型 Sartorius group）；十萬(wàn)分之一分析天平 （CP225D型 Sartorius group）；KQ-2500E數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；索氏提取器等。

2 方法

石柱參中9種主要人參皂苷的含量測(cè)定參照課題組前期確定的方法[3]。具體操作如下：

2.1 對(duì)照品溶液的制備

精 密 稱 取 人 參 皂 苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Ro、Rb2、Rb3及Rd對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL各含0.2 mg的混合溶液，搖勻，即得。

2.2 供試品溶液的制備

精密稱定一定量石柱參粉末（過(guò)四號(hào)篩），用中性濾紙包好，置索氏提取器中，加三氯甲烷加熱回流3h，棄去三氯甲烷液，藥渣揮干溶劑，連同濾紙筒移入100 mL錐形瓶中，精密加水飽和正丁醇50 mL，密塞，放置過(guò)夜，超聲處理（功率250 W，頻率50 kHz)30 min，濾過(guò)，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液25 mL，置蒸發(fā)皿中蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得[4]。

2.3 色譜條件

Chiral（150mm×4.6mm，5μm）柱，二極管陣列檢測(cè)器（DAD），以乙腈（A）-磷酸水溶液（B，0.1%）為流動(dòng)相梯度洗脫，詳見(jiàn)表2。流速1.0 mL/min；柱溫30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)203 nm，進(jìn)樣量：10 μL。石柱參樣品HPLC色譜圖見(jiàn)下圖5。

表2 HPLC梯度洗脫條件

圖5 供試品HPLC色譜圖

3 結(jié)果

3.1 不同農(nóng)家類型長(zhǎng)脖石柱參人參皂苷含量比較

研究結(jié)果表明，詳見(jiàn)表3。相同生長(zhǎng)年限的線蘆及小竹節(jié)蘆石柱參重量較小，草蘆及圓膀圓蘆石柱參重量較大，詳見(jiàn)圖6；相同生長(zhǎng)年限線蘆及小竹節(jié)蘆石柱參中主要人參皂苷含量之和高于草蘆及圓膀圓蘆類型的石柱參，詳見(jiàn)圖7。

表3 不同農(nóng)家類型長(zhǎng)脖石柱參人參皂苷含量

圖6 不同農(nóng)家類型石柱參主要皂苷含量之和

圖7 不同農(nóng)家類型石柱參重量

3.2 相同品類不同生長(zhǎng)年限人參皂苷含量比較

研究結(jié)果表明，詳見(jiàn)表4，相同品類（竹節(jié)蘆）的石柱參，隨著生長(zhǎng)年限的增加，主要人參皂苷含量之和在最初10年有所增加，12～15年后趨于穩(wěn)定，詳見(jiàn)圖8。

表4 不同生長(zhǎng)年限的竹節(jié)蘆人參皂苷含量

圖8 不同生長(zhǎng)年限竹節(jié)蘆人參皂苷含量

3.3 同株石柱參不同部位人參皂苷含量比較

艼其實(shí)就是人參的根莖部位長(zhǎng)出來(lái)的不定根。隨著生長(zhǎng)年限增加，主根須逐漸衰退，吸收功能下降，加之遇到適宜的土壤、養(yǎng)分激發(fā)艼須快速生長(zhǎng)，吸收養(yǎng)分迅速膨脹，有時(shí)比主根還長(zhǎng)、大。因此“艼變”是人參達(dá)到一定生長(zhǎng)年限才會(huì)出現(xiàn)[5]，其重量也較大，重量則主要集中在艼上，而不是主體。能長(zhǎng)到這么大與優(yōu)越的外界環(huán)境也有關(guān)，是二者結(jié)合的結(jié)果[6]。本實(shí)驗(yàn)對(duì)同株石柱參上大艼主根、大艼須根、小艼、蘆頭、主根及須根進(jìn)行，詳見(jiàn)圖3。人參皂苷含量分析，比較其差異。

圖9 同株石柱參不同部位

同株石柱參不同部位主要皂苷含量之和（表5）：須根＞蘆頭＞小艼＞大艼＞主根，且將大艼的主根和須根進(jìn)行拆分，大艼須根中主要人參皂苷含量之和亦高于大艼主根。結(jié)果表明人參的主根中人參皂苷的含量最少。因此，可以根據(jù)用藥目的的不同，合理使用人參的不同部位。

4 討論

表5 同株石柱參不同部位人參皂苷含量

明代以后，上黨人參基本滅絕，遼東參興起，至清代以后野生人參已經(jīng)不能滿足人們需求，園參大量興起。因此，人參家種始于明代末年，清代時(shí)人參的種植已經(jīng)發(fā)展到比較成熟的階段[7]。其中，石柱參已有四百多年的歷史[8]。明代以前幾乎沒(méi)有園參，主要以野生人參為主，人們對(duì)優(yōu)良人參主要性狀描述，包括形長(zhǎng)、支大、黃潤(rùn)、須長(zhǎng)、體實(shí)有心、味甘微苦及有余味者佳。所以人參的表觀特征主要由兩個(gè)部分組成。其一，野山參或林下山參的品質(zhì)評(píng)價(jià)以生長(zhǎng)年限為主，生長(zhǎng)年限較長(zhǎng)，人參的重量才能大，故“七兩為參，八兩為寶”，這也是人們對(duì)較大野山參的一個(gè)商業(yè)性的評(píng)價(jià)，同時(shí)也說(shuō)明了野山參能達(dá)到這樣的重量是十分罕見(jiàn)的[6]；然而，由于園參的出現(xiàn)，則不能僅以支大來(lái)作為野山參或林下山參的評(píng)價(jià)指標(biāo)，要參考“年均增重”，以避免一些種植者為了追求更高的經(jīng)濟(jì)利益，使用化肥及農(nóng)藥等人工干預(yù)手段，亦或使用植物激素如膨大劑，能夠促進(jìn)人參根莖短時(shí)間內(nèi)變得膨大粗壯。在《石柱參鑒定及分等質(zhì)量》中石柱生曬參等級(jí)要求，特等品年均增重小于0.3 g，一等品年均增重小于0.4 g[1]。關(guān)艷玲等人認(rèn)為有些老山參，雖然年齡較大但重量都不大，它們的重量增長(zhǎng)基本是圈定在每年增重在1～1.5 g的范圍內(nèi)[6]。根據(jù)本研究樣品信息可知，相同生長(zhǎng)年限（18年）的石柱參，竹節(jié)蘆和線蘆的年均增重均小于0.4 g，其中竹節(jié)蘆的年均增重均小于0.3 g，圓膀圓蘆和草蘆的年均增重在0.4 g～0.6 g之間。相同農(nóng)家類型（竹節(jié)蘆）不同生長(zhǎng)年限的石柱參，除5、12年生的竹節(jié)蘆平均年增重在0.5 g左右外，其余平均年增重均小于0.3 g。同時(shí)研究結(jié)果也表明相同生長(zhǎng)年限，一般石柱參重量越大，人參皂苷含量呈降低的趨勢(shì)。因此，筆者也認(rèn)為目前國(guó)標(biāo)《野山參鑒定及分等質(zhì)量》[9]中野山參的規(guī)格劃分以重量越大，規(guī)格等級(jí)就越高是不合理的。

其二，皮以黃潤(rùn)者為佳。野山參或林下山參只有達(dá)到足夠的生長(zhǎng)年限，表皮才會(huì)“黃潤(rùn)”，年頭較短的林下山參、移山參以及園參很少出現(xiàn)表皮黃潤(rùn)的情況。由于清代以后園參的迅速發(fā)展，人們才又一次沿襲野山參具有的“黃潤(rùn)”等傳統(tǒng)性狀特征標(biāo)準(zhǔn)。石柱參是“兩長(zhǎng)一短”，兩長(zhǎng)是蘆長(zhǎng)、須長(zhǎng)，一短是指主體短，皮色潤(rùn)黃，是生長(zhǎng)在黃油沙土形成的，即由沙性棕壤土類造成的。業(yè)內(nèi)人士皆知，生長(zhǎng)在黑色腐殖土的人參皮色發(fā)白，生長(zhǎng)在棕壤的土里皮色黃潤(rùn)，形似錦繡，屬于錦皮，是最美的皮色。土壤學(xué)家認(rèn)為，人參一般都長(zhǎng)在黃沙土中。黃沙土即螞蟻蛋土，顆粒狀的，土頭比較硬。這樣的土相，含沙性較強(qiáng)，土壤滲透力較強(qiáng)，人參能靠住[2]。綜上，生長(zhǎng)年限和生長(zhǎng)環(huán)境是決定人參品質(zhì)的重要參考因素，其中人參的生長(zhǎng)環(huán)境進(jìn)而影響外觀性狀。