武琳 木蘭 桂崢 于晶峰

全溝硬蜱(ixodes persulcatus)屬于蛛形綱、寄螨目、蜱總科、硬蜱科，在我國(guó)東北、內(nèi)蒙古、新疆、寧夏等地多有分布。全溝硬蜱是野生小型哺乳動(dòng)物及鳥類的重要寄生蜱，是我國(guó)森林腦炎的主要生物傳播媒介。人經(jīng)攜帶病毒的蜱叮咬后，森腦病毒可隨之侵入人體，且可以在全溝硬蜱的體內(nèi)繁殖，因此，蜱既是森腦病毒的傳播媒介，也是其儲(chǔ)存宿主。森林腦炎主要分布于我國(guó)的東北森林，且受森林分布的驅(qū)動(dòng)，不過在新疆自治區(qū)和云南省也有發(fā)現(xiàn)。中國(guó)東北（黑龍江、吉林省、內(nèi)陸東北部和內(nèi)蒙古自治區(qū)）被認(rèn)為是森林腦炎最重要和典型的流行地區(qū)，疫區(qū)內(nèi)存在三個(gè)自然疫源地，分別是大興安嶺疫源地，小興安嶺疫源地及長(zhǎng)白山疫源地，近年我國(guó)的森林腦炎發(fā)病率呈顯著上升趨勢(shì)[1]。

1 全溝硬蜱

1.1 生活史及其攜帶病原體 全溝硬蜱的生活史分為卵、幼蜱、若蜱和成蜱4期。在自然環(huán)境的條件下，全溝硬蜱完成一代生活史約需3年，通常在4月中、下旬開始活動(dòng)，5月達(dá)密度高峰，6月后少見，7月末基本消失。全溝硬蜱多棲息在森林、草原、荒漠等草木茂盛處，幼蜱、若蜱及成蜱在白天均可見其活動(dòng)，不過蜱的活動(dòng)范圍較小，一般為數(shù)十米。全溝硬蜱在生活史各期(卵除外)均需要吸血，完成一代生活史至少需要一個(gè)以上宿主。全溝硬蜱的宿主范圍廣，包括家養(yǎng)或野生的有蹄類動(dòng)物、人、犬及其他小型哺乳動(dòng)物。在我國(guó)新疆、內(nèi)蒙古、東北3省、河北省北部等地區(qū)均為優(yōu)勢(shì)蜱種[2]。目前，已在采集的全溝硬蜱體內(nèi)檢出伯氏疏螺旋體、森林腦炎病毒、斑點(diǎn)熱群立克次體、粒細(xì)胞埃立克體等多種病原體，而在蜱傳疾病中最常見的是由伯氏疏螺旋體引起的萊姆病和TBEV引起的森林腦炎[3]。

1.2 生物學(xué)特性 在長(zhǎng)期的進(jìn)化過程中，蜱蟲的唾液腺、中腸及血淋巴等器官中富含多種調(diào)節(jié)免疫功能的蛋白質(zhì)及各種生物因子，這些分子可以調(diào)節(jié)宿主的止血、炎癥及免疫反應(yīng)[3]。蜱的唾液因子的表達(dá)經(jīng)歷了重要的動(dòng)態(tài)的時(shí)間調(diào)節(jié)，在攝食過程中不同的因子被表達(dá)和分泌，蜱蟲唾液中蛋白酶的存在使得蜱蟲能夠積極地降解宿主蛋白質(zhì)。金屬蛋白酶被認(rèn)為是蜱蟲的血液喂養(yǎng)和其他生理功能所必需的，蜱主要使用復(fù)合蛋白酶樣金屬蛋白酶，直接降解纖維蛋白原和細(xì)胞外間質(zhì)蛋白，金屬蛋白酶的上調(diào)增強(qiáng)了蜱唾液的抗凝血作用，是蜱蟲攝食過程中操縱宿主防御和支持蜱嗜血細(xì)胞所需的功能性成分[4]。

2 森林腦炎病毒

2.1 分型及流行分布 TBEV是一種具有高度人畜共患病潛力的病原體，通常分為三種主要亞型：歐洲亞型(TBEV-Eu)、西伯利亞亞型(TBEV-Sib)和遠(yuǎn)東亞型(TBEV-FE)。歐洲亞型主要分布于歐洲大陸，且主要集中在瑞典，丹麥，德國(guó)等歐洲國(guó)家，蓖籽硬蜱為其主要傳播媒介；遠(yuǎn)東亞型主要分布于俄羅斯的東部，中國(guó)的東北，蒙古國(guó)北部等亞洲國(guó)家；西伯利亞亞型主要分布于西伯利亞地區(qū)，全溝硬蜱為后兩者的主要傳播媒介。其中，遠(yuǎn)東亞型臨床癥狀相對(duì)較重，病死率達(dá)20%～40%[6]。

2.2 分子結(jié)構(gòu) TBEV 為單股正鏈RNA，長(zhǎng)約11 kb，分子量為4×106 U。在RNA的3′端非編碼區(qū)核苷酸的變化及其長(zhǎng)短在病毒的毒力變化和變異中起著較為重要的作用[7]。病毒粒子直徑約為50 nm，核衣殼由單個(gè)正鏈RNA和衣殼蛋白C組成?；蚪M包含一個(gè)編碼3 414個(gè)氨基酸(AA)的多蛋白的開放閱讀框架(ORF)，通過細(xì)胞和病毒蛋白酶將其轉(zhuǎn)錄后加工成三種結(jié)構(gòu)蛋白(C，M和E)和七 種 非 結(jié) 構(gòu) 蛋 白(NS1，NS2A，NS2B，NS3，NS4A，NS4B和NS5)[8]。

2.3 影響TBEV毒力的因素

2.3.1 非結(jié)構(gòu)蛋白 非結(jié)構(gòu)蛋白具有多種酶的功能，并且在調(diào)節(jié)固有免疫反應(yīng)中發(fā)揮作用。NS5蛋白是黃病毒中最大的(900aa，103 kDa)，也是最保守的，它包含兩個(gè)結(jié)構(gòu)域，一個(gè)C-末端依賴RNA的RNA聚合酶(RdRp)結(jié)構(gòu)域和一個(gè)N-末端甲基轉(zhuǎn)移酶核心，這使得NS5能夠表現(xiàn)出RNA基因組50端帽子結(jié)構(gòu)甲基化所需的甲基轉(zhuǎn)移酶活性。在感染周期中，NS3和NS5(RdRp)蛋白形成聚合酶復(fù)合物，可能通過NS1和NS2A蛋白與膜結(jié)合。NS3蛋白與NS2B蛋白結(jié)合，為新合成的病毒多蛋白的切割提供病毒特異性絲氨酸蛋白酶活性[7]。

2.3.2 結(jié)構(gòu)蛋白E蛋白 E蛋白(496aa，50 kDa)是病毒顆粒的主要表面蛋白，能刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體，決定著病毒的毒力與細(xì)胞嗜性[9]。這種蛋白與未知的細(xì)胞受體相互作用，并介導(dǎo)病毒- 細(xì)胞膜融合。在哺乳動(dòng)物宿主中，E蛋白也誘導(dǎo)產(chǎn)生參與保護(hù)性免疫反應(yīng)的病毒中和抗體，其外部可訪問區(qū)由三個(gè)不同的結(jié)構(gòu)域(DI，DII和DIII)組成，它們是中和抗體的主要靶標(biāo)[8]。其中結(jié)構(gòu)域DIII是一個(gè)免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域，被認(rèn)為與宿主細(xì)胞上的細(xì)胞受體相互作用。在病毒成熟期間，E蛋白的這三個(gè)結(jié)構(gòu)域之間的旋轉(zhuǎn)導(dǎo)致了該蛋白的成熟[10]。

E蛋白在病毒進(jìn)入和膜融合中的基本作用可以表明它是一個(gè)重要的抗病毒靶點(diǎn)[11]。通過改變E蛋白可以實(shí)現(xiàn)TBEV毒力的改變，如增加位于E蛋白表面的糖胺聚糖結(jié)合親和力, 糖胺酸結(jié)合親和力的增加似乎是神經(jīng)侵襲性衰減的主要機(jī)制。糖基化缺失影響E蛋白在分泌過程中的構(gòu)象，減少分泌病毒的感染性和TBEV對(duì)小鼠的致病性的影響[12]。

3 全溝硬蜱與森林腦炎病毒

蜱媒傳染病與蜱的季節(jié)消長(zhǎng)活動(dòng)相關(guān)，氣象因素如月平均溫度、相對(duì)濕度、風(fēng)速等影響蜱蟲的活動(dòng)，從而導(dǎo)致蜱媒傳染疾病跟隨其變化而變化[13]。不同的自然生態(tài)條件，則決定了林區(qū)蜱種的不同分布[14]。TBE自然疫源地的形成、發(fā)展和穩(wěn)定性取決于溫度、空氣和土壤相對(duì)濕度、硬蜱及免疫宿主和病毒的流行程度等多種生態(tài)因素的一致性，宿主種類豐富，多重傳播環(huán)境，以及TBEV對(duì)不同宿主的適應(yīng)性，有利于寄生系統(tǒng)的長(zhǎng)期穩(wěn)定。

在過去的10年中，我們對(duì)于病媒- 宿主- 病原體相互作用的認(rèn)識(shí)緩慢增長(zhǎng)，這種相互作用始于病原體在血液中侵入病媒并附著在蜱的中腸，隨后穿過蜱的唾液腺，并在蜱蟲進(jìn)食的過程中通過傳播到新的哺乳動(dòng)物宿主而完成其生命周期。劉雙軍等人[15]通過肌注模擬蜱蟲叮咬小鼠，得出結(jié)論，TBEV會(huì)在局部增殖隨后進(jìn)入血液循環(huán)，產(chǎn)生病毒血癥，最后侵襲神經(jīng)細(xì)胞導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂。隨著氣溫升高，蜱蟲生活條件改善，其棲息地的擴(kuò)張與TBE的發(fā)病率同步增長(zhǎng)，全溝硬蜱與森林腦炎的流行密不可分，因此更深入了解全溝硬蜱與TBEV的關(guān)系，對(duì)今后蜱傳疾病的防治有著重要意義。