何金娜

（粵北人民醫(yī)院生殖中心，廣東 韶關 512025）

控制性促排卵（controlled ovarian hyperstimulation，COH）治療是人類輔助生殖技術（assisted reproductive technology，ART）中的重要環(huán)節(jié)，這一階段的診療直接影響患者后續(xù)的診療效果，也是輔助生殖技術能否成功的關鍵。在當下臨床診療過程中能夠發(fā)現，不孕不育患者正在逐漸增長，選擇合理有效的診療形式是提升不孕不育癥患者診療質量的基礎性原則。在臨床診療過程中，大多數專家按照輔助生殖促排卵藥物治療標準進行藥品選擇，力求促進卵泡趨同發(fā)育，進而能夠獲得質量優(yōu)良、數量穩(wěn)定的成熟卵子[1]。但是，患者自身的體質不同，接受藥物治療之后會產生不同的效果，導致患者出現不同的診療現象。在實驗室數據反饋中，卵子成熟度不佳（卵母細胞MⅡ率偏低）與受精及胚胎發(fā)育結局不良之間具有十分密切的關系。對患者的卵母細胞MⅡ率對ICSI受精及胚胎發(fā)育相關診療數據進行研究，為臨床診療提供相關的數據支持與指導[2]。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院在2018年12月至2020年5月之間行ICSI周期的患者30例，患者均使用了GnRH-a促排卵的ICSI治療?；颊呒{入標準：使用GnRH-a相似或者是衍生檢驗形式進行檢驗；獲得卵子數量為5～25枚；男性手淫取精?；颊吲懦龢藴蕿椋郝炎映墒熘笖滴催_到10%以上。將入選患者30例，根據患者自身的情況劃分成為A、B、C、D、E 5個組別，開展相應研究。

1.2 入選人群促排卵方案 促排卵方案可以通過GnRH-a衍生，并在此基礎上進行深化改良，使其可以應用在不同方案中，實現應用效果最大化。在衍生過程中，需要確定各類標準方案及常規(guī)長方案，在GnRH-a使垂體降調節(jié)后，可以在此基礎上設計D2超長方案及改良超長方案，根據黃體生成素（luteinizing hormone，LH）＜5 mIU/mL，雌二醇（estradiol，E2）＜50 pg/mL，內膜厚度＜6 mm改良超超長方案。當2個以上卵泡（包含2個）直徑≥18 mm時，需要給與外源性促性腺激素2～6支，以此促進卵泡發(fā)育，在此過程中需要根據卵泡發(fā)育情況進行適當的調整，并時刻觀察性激素水平，結合當前實際情況合理調整。在停用外源性促性腺激素時，適時予以人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotrophin，hCG）10000 IU肌內注射。

1.3 試驗方法 注射HCG 36～38 h后取卵。獲得的卵丘細胞經洗滌后，放置于授精液，于37 ℃，6%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2～3 h，脫顆粒后，培養(yǎng)1～2 h，行ICSI。精液處理使用密度梯度離心或直接洗滌[3]。

1.4 胚胎觀察評分 ICSI后16～18 h，觀察受精情況，43～45 h觀察卵裂情況，67～69 h觀察胚胎發(fā)育情況。參考1999年Veek提出5級評分標準，對胚胎進行分級，其中來源于正常受精卵的發(fā)育速率正常的7～9細胞、卵裂球形態(tài)及胚胎碎片Ⅰ級或Ⅱ級或融合器的胚胎，為優(yōu)質卵裂期胚胎。

1.5 統(tǒng)計學分析 采用SPSS25.0計算數據，“%”代表計數資料（受精及胚胎發(fā)育情況），采用χ2檢驗，（）代表計量資料（患者基線資料），采用t檢驗，P＜0.05表示數據差異。

2 結果

2.1 各組患者基本資料比較 患者均使用了GnRH-a促排卵的ICSI治療。患者組別劃分以卵母細胞MⅡ率為基準，其中A組患者MⅡ率＞90%，B組患者MⅡ率高于80%～90%，C組患者MⅡ率高于70%～80%，D組MⅡ率高于50%～70%，E組MⅡ率于10%～50%。由于A組患者的卵母細胞MⅡ率為95.68%，則將A組患者相關數據作為研究基準，對比以上5組患者的周期數、年齡、體質量指數（body mass index，BMI）、不孕年限、獲卵數，詳細數據比較如下。數據分析結果并不存在統(tǒng)計學差異，即P＞0.05。見表1。

表1 各組患者基本資料對比（）

表1 各組患者基本資料對比（）

2.2 各組受精及胚胎發(fā)育情況分析 5組患者隨著卵母細胞MⅡ率的數值變化，患者的受精率、2PN受精率、卵裂率、2PN卵裂率、優(yōu)胚率也呈現逐漸降低的趨勢，二者之間具有明顯正相關關系。

卵子受精問題的研究中，C組與D組患者受精率明顯低于A組患者，并且3組患者之間的數據對比具有明顯的統(tǒng)計學意義，即P＜0.05。在此基礎上，2PN受精率與受精率變化趨勢具有相似性，但是差異性并不是十分明顯，不過二者之間的數據對比具有明顯的統(tǒng)計學意義，即P＜0.05。

在卵裂數據對比中能夠看出，卵裂率及2PN卵裂率之間的變化趨勢具有極強的相似性，并且B組、C組患者與A組患者的數據對比僅存在細微差異，然而D組患者數值則明顯降低，以上數據對比均具有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。其中E組患者數據對比并未出現明顯變化，或許是由E組患者樣本自身問題導致的，然而數據對比仍舊存在統(tǒng)計學意義，并不影響最終結果。

胚胎發(fā)育問題研究中，從A組到E組，優(yōu)胚率（2PN優(yōu)胚數/2PN卵裂數）逐步降低，至D組出現顯著性差異（P＜0.05）。見表2。

表2 各組受精及胚胎發(fā)育情況分析（%）

2.3 卵母細胞MⅡ率不同對GnRH-a降調方案人群受精及胚胎發(fā)育的影響 GnRH-a降調節(jié)是目前最常用的超促排卵方案。上述結果表明，隨著卵母細胞MⅡ率逐漸降低至D組以下（即≤70%），對卵子受精、卵裂及胚胎的發(fā)育影響較大。為了進一步研究卵母細胞MⅡ率是否對不同GnRH-a降調節(jié)方案人群受精及胚胎發(fā)育產生同樣的影響，將卵母細胞MⅡ率數值為70%作為研究的節(jié)點之一，將分析對象分為高成熟率組，即卵母細胞成熟率＞70%；低成熟率組，即卵母細胞成熟率≤70%。比較發(fā)現，在兩組患者年齡、BMI、不孕年限、平均獲卵數等基礎資料無顯著差異的前提下，高成熟率組的受精率、2PN受精率、卵裂率、2PN卵裂率、優(yōu)胚率均顯著性的高于低成熟率組（P＜0.05）。

3 討論

眾所周知，卵母細胞的成熟包括細胞核成熟和細胞質成熟兩個方面?，F階段對細胞核成熟的判斷方式有所差異，也缺少相應的直觀性的判斷方式，主要基于剝除顆粒細胞后觀察第一極體排出，也就是本文研究中的MⅡ卵的比例。一部分患者的卵母細胞MⅡ率數值較低的患者卵泡發(fā)育具有階段性，并未完全成熟，則可以對成熟卵子進行ICSI注射，即便如此，也無法保障細胞能夠完全成熟，導致受精不成功的現象。相關研究能夠表明，只有細胞核與細胞質完全成熟之后的卵子，才能夠受精成功[5-6]。鑒于此，在本文的研究中針對患者不同成熟程度的卵母細胞，進行受精之后的成功情況進行分析。

患者均使用了GnRH-a促排卵的ICSI治療?；颊呓M別劃分以卵母細胞MⅡ率為基準，其中A組患者MⅡ率＞90%、B組患者MⅡ率高于80%～90%、C組患者MⅡ率高于70%～80%、D組MⅡ率高于50%～70%、E組MⅡ率于10%～50%，在研究的過程中首先對標準診療方案的患者進行分析，研究不同成熟程度中卵母細胞的受精及胚胎發(fā)育情況，確?；颊呋举Y料和生理情況并無明顯差異的狀態(tài)下（P＞0.05），開始后續(xù)研究[7-8]。本文研究顯示，患者的受精率、2PN受精率、卵裂率、2PN卵裂率、優(yōu)胚率與卵母細胞MⅡ率之間呈現正相關關系，隨著卵母細胞MⅡ率數值提升，以上的相關數據也呈現較好的發(fā)展趨勢。這與醫(yī)療衛(wèi)生領域的一部分專家研究結果能夠吻合。國內的一部分學者研究也能夠表明，隨著卵母細胞MⅡ率數值下降，患者的受精率、2PN受精率、卵裂率、2PN卵裂率、優(yōu)胚率均呈現不斷下降的趨勢。并且，進一步研究能夠看出受精率降低原因基本上與2PN受精率的降低具有直接關系，各個組別的患者受精率并不存在明顯差異[9-10]。

ICSI治療后，當卵母細胞MⅡ率≤70%的情況下，受精與胚胎發(fā)育效果較差，并且GnRH-a降調節(jié)方案診療過程中受精率與優(yōu)質胚胎成活率明顯降低。因此，應當對這類患者實行ICSI補救，針對患者的個體體征、病情進展、診療與護理需求進行全方位的診療設定，提升整體診療形式的科學性和穩(wěn)定性，避免診療局限造成的患者病癥加劇和診療不當的現象。由于本文中研究的診療形式仍舊屬于世界領域中進行不孕不育治療的前沿手段，需要在臨床使用的過程中加以關注，進步一研究具有顯著效果的診療措施。