陶累累，陳 平，戴夕超，黃桂春，劉小北，陳龍邦

0 引 言

肺癌是目前全球范圍內(nèi)發(fā)病率與致死率均位居前列的惡性腫瘤，其中非小細(xì)胞肺癌約占80%[1]。非小細(xì)胞肺癌主要包括腺癌、鱗癌和大細(xì)胞癌等，其中又以肺腺癌發(fā)病率最高[2]。早期肺腺癌缺乏特異性癥狀及腫瘤標(biāo)志物，絕大多患者確診時(shí)已處于晚期，并常伴有淋巴結(jié)及其他部位的多發(fā)轉(zhuǎn)移。探索新的腫瘤標(biāo)志物對(duì)肺腺癌患者精準(zhǔn)及個(gè)體治療具有重要意義[3]。炎癥因子，如細(xì)胞因子、趨化因子等在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用。目前研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞、趨化因子等在腫瘤細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的表型形成中起著重要的介導(dǎo)作用，也被認(rèn)為是具有潛力的腫瘤標(biāo)志物[4]。白細(xì)胞介素11(IL-11)是細(xì)胞因子IL-6的家庭成員，是STAT3信號(hào)通路的關(guān)鍵調(diào)控分子，可促使STAT3磷酸化進(jìn)而發(fā)揮轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用，進(jìn)而影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展[5]。研究表明，IL-11參與胃癌、腸癌、生殖系腫瘤等多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展[6]；但I(xiàn)L-11在肺腺癌中的研究鮮有報(bào)道。本研究旨在通過(guò)檢測(cè)晚期肺腺癌患者血清中IL-11的表達(dá)水平，分析其肺腺癌臨床病理特征及預(yù)后之間的關(guān)系，為晚期肺腺癌患者的診斷及預(yù)后預(yù)測(cè)提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性分析2015年1月-2017年1月間在我院接受治療的232例肺腺癌初診，且未經(jīng)治療患者血清標(biāo)本。采集患者清晨空腹外周血，并保存于-80℃冰箱。納入標(biāo)準(zhǔn)：①手術(shù)或穿刺病理明確診斷為原發(fā)性肺腺癌；②臨床分期為I-IV期；③標(biāo)本采集前未接受過(guò)抗腫瘤治療，包括化療、放療、靶向治療等。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不完整；②伴有免疫系統(tǒng)疾病的患者。采集標(biāo)本均獲患者知情同意。最終納入232例患者中，男113例、女119例，年齡21～79歲，中位年齡57歲。同時(shí)采集20例健康志愿者血清作為參照，其中男12例，女8例，年齡27～78歲，中位年齡56歲。

1.2主要試劑及試驗(yàn)方法人白細(xì)胞介素-11 ELISA檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自博欣盛生物技術(shù)有限公司。收集的血清標(biāo)本存于-80℃冰箱，實(shí)驗(yàn)前取出平衡至室溫進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。ELISA實(shí)驗(yàn)操作步驟參照試劑盒說(shuō)明書(shū)，最終測(cè)得各標(biāo)準(zhǔn)品及標(biāo)本的OD(A450)值。①各樣本的A值=各標(biāo)準(zhǔn)品及標(biāo)本A值-空白孔A值。②以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)A值作縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得出相應(yīng)計(jì)算公式。根據(jù)各樣品所測(cè)得的A值，計(jì)算IL-11濃度用于后續(xù)分析。

1.3各組血清IL-11表達(dá)水平的分析①肺腺癌患者與正常健康體檢人群的血清IL-11的表達(dá)水平比較：隨機(jī)抽取的20例肺腺癌患者，與收集的20例正常健康體檢人群血清IL-11表達(dá)水平進(jìn)行比較分析。②分析所有肺腺癌組患者IL-11血清表達(dá)值，選取中位數(shù)作為界值，將患者分為高表達(dá)組(IL-11表達(dá)量>中位數(shù))和低表達(dá)組(IL-11表達(dá)量≤中位數(shù))進(jìn)行后續(xù)生存分析。

1.4隨訪采用追蹤病歷、電話及門(mén)診就診等方式進(jìn)行隨訪。隨訪日期截至2018年12月31日。以無(wú)進(jìn)展生存時(shí)間(progress free survival, PFS)作為隨訪時(shí)間。PFS定義患者確診至首次疾病進(jìn)展的時(shí)間。

2 結(jié) 果

2.1 肺腺癌患者與正常健康體檢人群的血清IL-11的表達(dá)情況肺腺癌患者血清IL-11表達(dá)濃度[33.49(23.34,42.36)pg/mL]高于健康體檢人群[6.39(3.24,10.2)pg/mL]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H=26.70，P<0.05)。

2.2肺腺癌患者血清IL-11表達(dá)水平與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系結(jié)果發(fā)現(xiàn)，IL-11的高表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤體積、分化程度，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等因素?zé)o關(guān)，而與臨床分期相關(guān)(P<0.05)，見(jiàn)表1。進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析顯示，TNM分期Ⅲ+Ⅳ期的肺腺癌患者血清IL-11表達(dá)水平高于分期較早(Ⅰ+Ⅱ)的患者[39.47(33.59，52.58)pg/mLvs33.05(28.96，39.58)pg/mL，P<0.05]。

表 1 肺腺癌患者血清標(biāo)本IL-11表達(dá)水平與臨床參數(shù)之間的關(guān)系[n(%)]

2.3肺腺癌血清IL-11的表達(dá)水平與患者預(yù)后之間的關(guān)系IL-11低表達(dá)組的中位PFS較高表達(dá)組顯著延長(zhǎng)(χ2=25.499，P<0.01)，見(jiàn)圖2。進(jìn)一步利用Cox多因素回歸分析，發(fā)現(xiàn)IL-11的表達(dá)水平是肺腺癌獨(dú)立預(yù)后因素(HR=0.592, 95%CI：0.446～0.785，P=0.000)，見(jiàn)表2。以上結(jié)果提示IL-11高表達(dá)是肺腺癌患者預(yù)后不良因素。

圖 2 肺腺癌患者血清IL-11表達(dá)水平與PFS之間的生存分析

表 2 COX回歸多因素生存分析

3 討 論

非小細(xì)胞肺癌是目前全世界范圍內(nèi)發(fā)病率與致死率均居前列的惡性腫瘤，其中又以肺腺癌最為常見(jiàn)[7]。盡管近年來(lái)在基因檢測(cè)指導(dǎo)下的分子靶向治療及免疫治療使一部分肺腺癌患者生存獲得明顯改善，但絕大部分患者就診時(shí)已存在局部或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，病情進(jìn)展至晚期，失去治愈的機(jī)會(huì)[8]。現(xiàn)階段仍缺乏肺腺癌早期診斷的腫瘤相關(guān)指標(biāo)，Cyfra211、CEA等腫瘤標(biāo)志物雖然能夠在肺癌診斷過(guò)程中提供參考作用，但診斷特異性較低[9]。本研究對(duì)于肺腺癌血清IL-11表達(dá)水平檢測(cè)，不僅為肺腺癌提供可參考的血清學(xué)標(biāo)志，同時(shí)也為肺腺癌提供潛在治療靶點(diǎn)。

IL-11細(xì)胞因子IL-6家族成員，最初發(fā)現(xiàn)造血系統(tǒng)方面有重要功能，對(duì)造血干細(xì)胞、巨核細(xì)胞等多細(xì)胞起調(diào)控作用[10]。大量的臨床試驗(yàn)也證明重組白細(xì)胞介素-11(rhIL-11)可用于治療放化療后血小板減少癥[11]。隨著近年來(lái)研究的不斷深入，IL-11與惡性腫瘤之間的關(guān)系也受到廣泛的重視。研究發(fā)現(xiàn)，IL-11與腫瘤的不良預(yù)后密切相關(guān)，胃癌[12]和子宮內(nèi)膜癌[13]中IL-11的高表達(dá)與腫瘤分級(jí)有關(guān)，而在乳腺癌[14]、肝癌[15]中IL-11的升高的與骨轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[16]。而IL-11在胃腸炎癥向腫瘤轉(zhuǎn)化過(guò)程中起著關(guān)鍵性調(diào)節(jié)作用，參與胃癌和腸癌發(fā)生、發(fā)展；阻斷IL-11可以抑制腫瘤細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移[17]。

本研究通過(guò)收集肺腺癌患者血清樣本，以健康人群血清對(duì)照，檢測(cè)兩者中IL-11表達(dá)水平，結(jié)果闡明肺腺癌患者的血清中IL-11明顯高于正常健康人群，提示IL-11的表達(dá)與肺腺癌的發(fā)生發(fā)展存在一定的關(guān)系。在此基礎(chǔ)上，我們以入組人群的IL-11表達(dá)水平的中位數(shù)38.15pg/mL為界，將入組人群分為IL-11高表達(dá)與低表達(dá)組。進(jìn)一步分析其高、低表達(dá)與肺腺癌患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系，結(jié)果顯示肺腺癌臨床分期與IL-11表達(dá)高低密切相關(guān)，隨著腫瘤的進(jìn)展，分期越晚表達(dá)水平越高，提示IL-11表達(dá)水平升高可能提示肺腺癌病情進(jìn)展，惡性程度增加。生存分析顯示IL-11高表達(dá)的PFS明顯短于IL-11低表達(dá)組，提示IL-11高表達(dá)組的患者預(yù)后相對(duì)較差，這一結(jié)果也與腫瘤分期對(duì)患者預(yù)后的影響相一致，即分期越晚預(yù)后越差。同時(shí)，Cox多因素風(fēng)險(xiǎn)回歸分析也提示IL-11表達(dá)是肺腺癌患者生存獨(dú)立預(yù)后因素。

盡管IL-11的表達(dá)異常在多種腫瘤中被證實(shí)，但其具體調(diào)控腫瘤惡性表型的具體機(jī)制仍不清楚。有研究表明，腫瘤組織中IL-11的表達(dá)主要來(lái)源于腫瘤的間質(zhì)細(xì)胞，并作用于腫瘤細(xì)胞IL-11Rα受體結(jié)合發(fā)揮其生理學(xué)效能。IL-11首先識(shí)別IL-11Rα，而IL-11 Rα具有配體結(jié)合能力，gp130參與和高親合位點(diǎn)形成向細(xì)胞內(nèi)傳遞信號(hào)并激活下游通路，使細(xì)胞獲得增殖和活化的信號(hào)，進(jìn)而影響腫瘤惡性表型的形成[18]。目前IL-11具體通過(guò)何種機(jī)制影響肺腺癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制仍不清楚，未來(lái)需借助細(xì)胞及動(dòng)物模型進(jìn)行更深入研究。本研究也存在一定局限性：①納入研究的肺腺癌患者人群隨訪時(shí)間較短，患者的遠(yuǎn)期療效，如總體生存期觀察不足；②僅收集入組的肺腺癌患者治療前血清，考慮到治療方案可能對(duì)患者PFS的影響，如能進(jìn)一步結(jié)合治療前后血清IL-11動(dòng)態(tài)變化，可能更具有參考意義；③目前臨床上，IL-11未像CEA等腫瘤標(biāo)志物作為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，只限于實(shí)驗(yàn)室研究，未來(lái)需要繼續(xù)擴(kuò)大研究的病例樣本量，以獲得更好的研究結(jié)果；④研究結(jié)果中，隨機(jī)抽取的肺腺癌患者血清樣本的IL-11表達(dá)水平均值與納入研究的所有肺腺癌患者IL-11表達(dá)水平的均值存在較大差異，考慮可能與肺腺癌的異質(zhì)性有關(guān)。肺腺癌是一組高度異質(zhì)性的疾病，其發(fā)生發(fā)展與不同基因的表達(dá)水平密切相關(guān)[19]。本研究納入的患者未進(jìn)行驅(qū)動(dòng)基因檢測(cè)，缺少相關(guān)分子表達(dá)的資料，而IL-11表達(dá)水平的差異是否與肺腺癌不同的分子分型有關(guān)仍不清楚，仍需未來(lái)在肺腺癌分子分型的基礎(chǔ)上進(jìn)行更深入的分析。

綜上，本研究證實(shí)IL-11在肺腺癌患者血清表達(dá)上調(diào)，且表達(dá)水平與肺腺癌惡性程度與預(yù)后相關(guān)，提示IL-11可能與肺腺癌發(fā)生發(fā)展有關(guān)，是具有潛力的肺腺癌預(yù)測(cè)的分子標(biāo)志物。