朱 婷 孫曉沖 呂艷關(guān)

揚(yáng)州大學(xué)附屬淮安市婦幼保健院檢驗(yàn)科，江蘇淮安 223002

乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌是一組異型腫瘤，在浸潤(rùn)性乳 腺癌分類中占比最大。近年來，乳腺癌發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，嚴(yán)重危害著女性的身體和心理健康[1-2]。相關(guān)研究提示，乳腺癌具有高度的異質(zhì)性，其發(fā)生和發(fā)展是一個(gè)多因素、多階段的過程，因而具有廣泛的臨床及病理特征[3]。人類表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，Her-2）是一種具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，其在細(xì)胞內(nèi)外分別執(zhí)行不同的生理功能，可引起細(xì)胞的增殖、分化和遷移，促進(jìn)新生血管的生成，增加腫瘤細(xì)胞的侵襲性[4]。此外，Her-2 的過表達(dá)與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移均相關(guān)，因而是其進(jìn)展過程中最有用的預(yù)后指標(biāo)[5]。細(xì)胞增殖被認(rèn)為是腫瘤發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的重要原因之一，細(xì)胞增殖指數(shù)Ki-67 作為與細(xì)胞增殖有關(guān)的核抗原，對(duì)于細(xì)胞增殖和凋亡的判斷具有重要的價(jià)值，同時(shí)其在乳腺癌的治療和預(yù)后方面也具有十分重要的作用[6-7]。本研究旨在探討Her-2 和Ki-67 在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中的表達(dá)及其臨床病理意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年1 月至2020 年1 月?lián)P州大學(xué)附屬淮安市婦幼保健院病理科乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌包埋石蠟塊標(biāo)本91 例作為實(shí)驗(yàn)組，隨機(jī)選擇30 例距離腫瘤組織5 cm 以上的正常乳腺組織作為對(duì)照組。所有患者均為女性，年齡29～77 歲；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42 例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移49 例；腫瘤直徑＜2 cm 16 例，≥2 cm 75 例；TNM 分期Ⅰ或Ⅱ期71 例，Ⅲ或Ⅳ期20 例。患者均為經(jīng)術(shù)后病理確診且未行放化療的初診患者，排除合并肝臟、腎臟、婦科及心血管系統(tǒng)等其他方面疾病。

1.2 方法

術(shù)后將腫瘤組織標(biāo)本立即使用10%甲醛溶液固定，石蠟包埋，4 μm 厚連續(xù)切片，采用免疫組織化學(xué)方法完成乳腺癌組織中Her-2 和K-i67 表達(dá)的測(cè)定。一抗Her-2（貨號(hào)：E31575）及相關(guān)試劑購于羅氏診斷產(chǎn)品有限公司，一抗Ki-67（批號(hào)：2011110672m）購于邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司，所有步驟均嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

1.3 結(jié)果判斷

Her-2 表達(dá)以細(xì)胞膜出現(xiàn)清晰棕色顆粒為陽性，每張切片任選10 個(gè)高倍視野，根據(jù)切片所選視野中陽性細(xì)胞占全部細(xì)胞比例分為：陽性＜10%為陰性（-），≥10%為陽性（+）[8]。Ki-67 表達(dá)以細(xì)胞核出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒為陽性[9]，選取任意5 個(gè)高倍視野（400 倍），計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞占全部細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)：Ki-67≥14%為陽性（+），Ki-67＜14%為陰性（-）[10-11]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用例數(shù)和百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性分析選擇Spearman 檢驗(yàn)。以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組Her-2 和Ki-67 在乳腺組織中表達(dá)的比較

實(shí)驗(yàn)組Her-2 陽性表達(dá)率為40.7%（37/91），高于對(duì)照組的10%（3/30）；Ki-67 陽性表達(dá)率為74.7%（68/91），高于對(duì)照組的6.7%（2/30），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。見圖1。

圖1 乳腺癌部分免疫組化（100×）

2.2 乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者Her-2 和Ki-67 表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者Her-2 和Ki-67 的表達(dá)與TNM 分期相關(guān)（P ＜0.05），而與年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑無關(guān)（P ＞0.05）。見表1。

表1 Her-2 和Ki-67 表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

2.3 Her-2 和Ki-67 表達(dá)的相關(guān)性分析

Her-2 陽性表達(dá)而Ki-67 陰性表達(dá)4 例；Her-2陰性表達(dá)而Ki-67 陽性表達(dá)35 例；Her-2 和Ki-67共同陽性表達(dá)33 例，Her-2 和Ki-67 共同陰性表達(dá)19 例。Spearman 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，Her-2 和Ki-67 表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.275,P ＜0.05）。

3 討論

乳腺癌是世界上最常見的癌癥之一，女性發(fā)病率很高。雖然手術(shù)切除、化療、放療和分子靶向治療可以延緩乳腺癌的進(jìn)展，但預(yù)后仍較差[12]。復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是乳腺癌患者死亡率提高的重要原因，因此早期發(fā)現(xiàn)并及時(shí)治療復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移灶是延長(zhǎng)乳腺癌患者生存期的關(guān)鍵[13-14]。

Her-2 是一種酪氨酸蛋白，在細(xì)胞內(nèi)外區(qū)域分別執(zhí)行不同的生理功能，胞外區(qū)能夠與相應(yīng)配體結(jié)合獲得激活信號(hào)，而胞內(nèi)區(qū)具有酪氨酸酶活性和ATP 結(jié)合位點(diǎn)，通過PI3K-Akt 途徑降解抑癌基因p53 的表達(dá)，抑制細(xì)胞凋亡，增加腫瘤細(xì)胞的侵襲性[15-16]。因此，Her-2 是腫瘤診斷及治療研究中的一個(gè)重要靶點(diǎn)，對(duì)于乳腺癌患者預(yù)后的判斷非常重要，其過表達(dá)可刺激腫瘤細(xì)胞增長(zhǎng)，進(jìn)而增加細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力[17-19]。韓冬艷等[20]研究顯示，Her-2 過表達(dá)與患者腫瘤分化程度、異型性及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有關(guān)，而與年齡及腫瘤大小無關(guān)，Her-2 表達(dá)越高，患者預(yù)后越差。Ki-67是一種表達(dá)于增殖細(xì)胞的核抗原，與細(xì)胞有絲分裂有關(guān)，主要用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的增殖活性，其增殖指數(shù)高低與包括乳腺癌在內(nèi)的多種惡性腫瘤進(jìn)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)，因而常用于腫瘤預(yù)后的判斷[21-27]。Mlco 等[28]研究顯示，Ki-67 表達(dá)與乳腺癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，其高表達(dá)可用于浸潤(rùn)性乳腺癌的早期識(shí)別，并能評(píng)估患者的惡性程度及預(yù)后。本研究結(jié)果顯示，乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者Her-2 和Ki-67 陽性表達(dá)率增高，Her-2和Ki-67 表達(dá)與患者TNM 分期相關(guān)，提示Her-2和Ki-67 陽性表達(dá)能反映乳腺癌細(xì)胞的增殖活性和速度，其表達(dá)水平越高，越易發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。但是，Her-2 和Ki-67 表達(dá)與年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小無關(guān)。分析其原因可能是：隨機(jī)入選標(biāo)本存在生物學(xué)差異，組織內(nèi)部基因結(jié)構(gòu)因人而異。此外，各病理中心缺乏統(tǒng)一的臨界值判定標(biāo)準(zhǔn)及讀片的主觀性，這可能都是導(dǎo)致部分結(jié)果不一致的原因。本研究中，Her-2和Ki-67 在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中的表達(dá)呈正相關(guān)，提示兩者共同促進(jìn)乳腺癌的發(fā)展。Shokouh 等[29]發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織中Her-2 表達(dá)與Ki-67 表達(dá)呈正相關(guān)，Her-2表達(dá)水平越高，Ki-67 表達(dá)則越強(qiáng)，其結(jié)果與本實(shí)驗(yàn)一致。

綜上所述，本研究顯示，術(shù)前乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者Her-2 和Ki-67 陽性表達(dá)增高且呈正相關(guān)，共同促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移，其表達(dá)越高預(yù)示惡性程度越大，有助于乳腺癌患者預(yù)后的臨床判斷。