張羽 楊靜 田嵐

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)多發(fā)于女性，屬于進(jìn)行性炎癥肝病[1]。AIH患者早期沒有明顯癥狀，臨床缺乏有效的早期診斷指標(biāo)[2]。T、B淋巴細(xì)胞異常激活及單核巨噬系統(tǒng)的活化與AIH的發(fā)生關(guān)系密切[3-4]。OX40在激活的 CD4+、CD8+T 淋巴細(xì)胞表面表達(dá)，OX40L多表達(dá)于激活的單核巨噬細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞，OX40/OX40L在自身免疫性疾病的發(fā)生中具有關(guān)鍵作用[5-6]。然而，關(guān)于AIH患者外周血OX40/OX40L變化及臨床意義尚未完全清楚，故本研究開展上述問題的探討，詳情如下。

資料與方法

一、研究對(duì)象

選取2019年7月至2020年12月綿陽市中心醫(yī)院收治的85例AIH患者(研究組)及同時(shí)間段體檢的62例健康人群(對(duì)照組)為研究對(duì)象，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①研究組均符合《2019年美國肝病學(xué)會(huì)實(shí)踐指引和指南:成人和兒童自身免疫性肝炎的診斷與治療》[7]中關(guān)于成人AIH診斷標(biāo)準(zhǔn)者；研究組患者均為首次確診者；對(duì)照組近3個(gè)月未發(fā)生疾?。缓炇鹧芯恐橥鈺?。

排除標(biāo)準(zhǔn)：伴有惡性腫瘤、心肝腎等重要臟器功能障礙、血液系統(tǒng)疾病及免疫缺陷者；近1個(gè)月內(nèi)接受過激素、受體抑制劑等藥物治療者；處于哺乳期、孕期者；其他類型肝臟疾病、藥物性肝損傷患者等；參與其他研究者。

二、指標(biāo)檢測(cè)方法

研究組治療前、對(duì)照組體檢時(shí)空腹采血3 mL，乙二胺四乙酸抗凝，抗凝全血分別加入2支試管，之后在1支試管中加入抗人CD4-FITC、抗人OX40-PERCP抗體，另1支試管加入抗人CD19-FITC、抗人OX40L-PERCP，最后避光孵育、離心、棄上清、洗滌，采用用美國貝克曼庫爾特公司的FACSCalibur式流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血OX40、OX40L情況。

三、資料收集

收集性別、年齡、吸煙史、飲酒史、合并癥、T淋巴細(xì)胞亞群、血清C反應(yīng)蛋白含量、外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-4、白細(xì)胞介素-21、趨化因子、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、外周血OX40、OX40L陽性表達(dá)等資料。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、兩組資料

兩組性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、合并癥、吸煙史、飲酒史對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，兩組趨化因子、T淋巴細(xì)胞亞群、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、C反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-4、白細(xì)胞介素-21、OX40、OX40L對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組資料(±s)

二、 影響AIH發(fā)生的多因素分析

以AIH是否發(fā)生為因變量(未發(fā)生=0，發(fā)生=1)，T淋巴細(xì)胞亞群比例、C反應(yīng)蛋白、趨化因子、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-4、白細(xì)胞介素-21、OX40、OX40L為自變量，將自變量賦值為連續(xù)變量行Logistic回歸分析，顯示OX40、OX40L、白細(xì)胞介素-21是AIH發(fā)生的影響因素(P<0.05)，見表2。

續(xù)表1

表2 AIH的多因素分析

三、OX40/OX40L預(yù)測(cè)AIH發(fā)生的診斷價(jià)值

ROC曲線分析結(jié)果顯示，OX40、OX40L及二者聯(lián)合對(duì)AIH的發(fā)生具有一定診斷效能，其AUC分別為0.804、0.789、0.914，OX40聯(lián)合OX40L的AUC最大，具體見表3與圖1。

表3 OX40/OX40L預(yù)測(cè)AIH發(fā)生的診斷價(jià)值

圖1 OX40、OX40L及二者聯(lián)合對(duì)AIH診斷的ROC曲線

討 論

AIH患者病情惡化可形成暴發(fā)性肝衰竭、肝癌，早期有效診斷對(duì)于及時(shí)開展醫(yī)療措施極其重要[8-9]。AIH早期癥狀不明顯，多數(shù)患者確診時(shí)已展為肝炎。故臨床急需尋找有效的診斷指標(biāo)以便早日診斷AIH，及時(shí)阻斷疾病進(jìn)展，改善預(yù)后。

本研究發(fā)現(xiàn)OX40、OX40L水平是AIH發(fā)生的影響因素。AIH的發(fā)生與機(jī)體T淋巴細(xì)胞功能亢進(jìn)、B淋巴細(xì)胞抗體分泌異常密切相關(guān)[10-11]。OX40在激活的 CD4+、CD8+ T 淋巴細(xì)胞表面表達(dá)，OX40L多表達(dá)于激活的單核巨噬細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞，OX40/OX40L通路活化后，刺激CD4+ T淋巴細(xì)胞遷移、分化，CD8+ T淋巴細(xì)胞生理功能增強(qiáng)，B淋巴細(xì)胞異常增殖、分化，產(chǎn)生自身抗體。OX40 /OX40L可刺激機(jī)體OX40+ CD4+ T淋巴細(xì)胞過度表達(dá)，導(dǎo)致炎癥因子過度分泌，加重機(jī)體炎癥反應(yīng)，當(dāng)OX40通路受到有效抑制后，機(jī)體促炎反應(yīng)明顯減弱[12-13]。OX40 /OX40L表達(dá)高，機(jī)體CD4+ T淋巴細(xì)胞生理功能則過度強(qiáng)化，自身抗體、炎性細(xì)胞因子異常分泌，且CD4+ 、B淋巴細(xì)胞表面應(yīng)答協(xié)同刺激分子共同作用，免疫系統(tǒng)功能發(fā)生改變，導(dǎo)致機(jī)體過度免疫應(yīng)答、自身抗體分泌過量，增加了自身免疫性疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[14]。ROC曲線分析顯示OX40、OX40L聯(lián)合診斷AIH的AUC最大，提示OX40、OX40L聯(lián)合診斷AIH的價(jià)值高于單獨(dú)診斷。臨床檢測(cè)外周血OX40/OX40L變化有助于監(jiān)測(cè)自身免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展情況，二者聯(lián)合可全面發(fā)揮優(yōu)勢(shì)，診斷價(jià)值較高[15]。

綜上，建議臨床動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)外周血OX40/OX40L變化，有助于早期診斷AIH。OX40 /OX40L在AIH中的具體作用機(jī)制需后續(xù)多中心、大樣本量研究。