牙周炎作為口腔常見疾病，以牙齒松動，牙槽骨喪失為主要特征。牙槽骨吸收的主要原因?yàn)檠乐苎讜r(shí)成骨細(xì)胞、活化的T 細(xì)胞、牙周膜成纖維細(xì)胞和牙齦成纖維細(xì)胞高表達(dá)核因子κB 受體活化因子配體（receptor activator of nuclear factor-κB li-gand，RANKL），RANKL 與破骨細(xì)胞前體表面的核因子κB 受體活化因子（receptor activator of nuclear factor-kappa B，RANK）相互作用后，激活多個(gè)調(diào)控破骨細(xì)胞發(fā)生的轉(zhuǎn)錄因子，進(jìn)而刺激破骨細(xì)胞的形成和分化。此外，蛋白酶如組織蛋白酶K（ca-thepsin K，CTSK），基質(zhì)金屬蛋白酶-9（matrix metal-loprotein-9，MMP-9）以及浸潤型白細(xì)胞產(chǎn)生的炎癥介質(zhì)如白介素-1（interleukin-1，IL-1）和前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）也可促進(jìn)破骨細(xì)胞生成，加重牙周炎牙槽骨吸收

。

近年研究發(fā)現(xiàn)在炎癥性疾病中，蛋白聚糖也發(fā)揮調(diào)控作用

。蛋白聚糖是一類糖鏈與肽鏈以共價(jià)鍵結(jié)合的生物大分子，廣泛存在于細(xì)胞內(nèi)外及細(xì)胞表面

。蛋白聚糖中的糖鏈可分為半乳糖胺聚糖和葡萄糖胺聚糖，前者包括硫酸軟骨素、硫酸皮膚素，后者包括肝素、硫酸乙酰肝素、硫酸角質(zhì)素以及透明質(zhì)酸。以核心蛋白為基礎(chǔ)的蛋白聚糖包括聚集蛋白聚糖、多能蛋白聚糖、飾膠蛋白聚糖、雙鏈蛋白聚糖、纖調(diào)蛋白聚糖和凝膠蛋白聚糖。此外，近來發(fā)現(xiàn)牙本質(zhì)細(xì)胞外基質(zhì)中含有大量新型蛋白聚糖，例如牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1（dentin matrix protein 1，DMP1）的糖基化形式DMP1-PG

。

牙周組織中含有多種蛋白聚糖，如神經(jīng)膠質(zhì)抗原-2、血栓調(diào)節(jié)蛋白、小亮氨酸蛋白聚糖等，參與細(xì)胞增殖、遷移、黏附等多種生物學(xué)過程，影響牙周組織的發(fā)育和創(chuàng)傷應(yīng)答

。研究表明，在炎癥期間，蛋白聚糖對長骨及關(guān)節(jié)軟骨有調(diào)控作用，如DMP1 的糖基化形式可以促進(jìn)長骨缺損后的骨重建以及髁突骨關(guān)節(jié)炎中軟骨修復(fù)。多配體蛋白聚糖4（syndecan4, SDC4）可以促進(jìn)骨折后長骨愈合

。然而，蛋白聚糖在牙周炎牙槽骨吸收中作用尚未報(bào)道，基于此筆者選取與破骨形成以及炎癥發(fā)展密切相關(guān)的細(xì)胞外蛋白聚集蛋白聚糖（ag-grecan，ACAN）、雙鏈蛋白聚糖（biglycan，BGN）、飾膠蛋白聚糖（decorin，DCN）和多能蛋白聚糖（versi-can，VCAN），通過建立小鼠牙周炎模型，觀察小鼠牙槽骨內(nèi)蛋白聚糖的變化，以及蛋白聚糖與破骨、炎癥之間的相關(guān)性，探討蛋白聚糖在牙周炎牙槽骨吸收中的作用。

師：細(xì)讀“勘測線路”部分，文中哪一處你最感動，你想對詹天佑說些什么？并把自己的體會用點(diǎn)評形式寫在書上。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

本實(shí)驗(yàn)使用SPF 級C57BL/6J 小鼠（實(shí)驗(yàn)動物合格證號：［2021］-DW-034，上海南方模式動物研究中心，中國），所有小鼠飼養(yǎng)于同濟(jì)大學(xué)附屬口腔醫(yī)院SPF 級動物房（12 h 光照/12 h 無光飼養(yǎng)環(huán)境，室內(nèi)溫度保持25 ℃，相對濕度55%），本實(shí)驗(yàn)經(jīng)同濟(jì)大學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)（批準(zhǔn)號：TJLAC-017-027）。

1.2 主要試劑和儀器

例1 (2018年四川達(dá)州)如圖1，二次函數(shù)y=ax2+bx+c的圖象與x軸交于點(diǎn)A(-1，0)，與y軸的交點(diǎn)B在(0，2)與(0，3)之間(不包括這兩點(diǎn))，對稱軸為直線x=2．下列結(jié)論：①abc<0；②9a+3b+c>0；③若點(diǎn)點(diǎn)是函數(shù)圖象上的兩點(diǎn)，則y1

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

相較對照側(cè)，牙周炎側(cè)頰側(cè)牙槽骨吸收增多，吸收形成篩網(wǎng)狀，牙根暴露，牙槽嵴高度降低，釉牙骨質(zhì)界到牙槽嵴頂?shù)木嚯x增大（

= 20.09，

＜0.001），骨體積分?jǐn)?shù)下降（

= 4.295，

= 0.013），骨小梁厚度下降（

= 3.839，

= 0.019），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見圖1。

1.3.1 Micro-CT 分析 Micro-CT 掃描小鼠上頜骨。Mimics 13.0 軟件分析圖像，選取上頜骨第二磨牙頰側(cè)牙槽骨面3D 重建。Image 軟件計(jì)算上頜第二磨牙釉牙骨質(zhì)界到牙槽嵴頂?shù)木嚯x。

1.3.3 RT-qPCR 提取小鼠上頜第一磨牙與第二磨牙牙槽骨，放入Trizol 震碎，使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒將RNA 逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，RT-qPCR 檢查蛋白聚糖合成相關(guān)基因（ACAN、BGN、VCAN、DCN）以及破骨相關(guān)基因（CTSK、MMP-9、RANKL）與炎癥相關(guān)基因白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β），白介素-6（inter-leukin-6，IL-6），腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis fac-tor α，TNF-α）的變化。以GAPDH 作為內(nèi)參，引物序列見表1。10 μL 反應(yīng)體系：2 倍Master mix 5 μL，正、反向引物各0.5 μL，cDNA 0.5 μL，PCR 級水3.5 μL。擴(kuò)增程序：50 ℃120 s，95 ℃600 s；95 ℃15 s，60 ℃20 s，72 ℃30 s，60 個(gè)循環(huán)；95 ℃10 s；65 ℃60 s；97 ℃1 s。2

法計(jì)算目的基因相對表達(dá)量。

1.3.2 組織學(xué)染色 14 d 收樣后用4%多聚甲醛灌流固定，4%多聚甲醛4 ℃浸泡上頜骨24 ～ 48 h 后取出，放入10%EDTA 室溫脫鈣2 ～ 4 周，脫鈣液每1 ～ 2 d 更換一次。脫鈣完成之后，脫水浸蠟，包埋，石蠟切片（厚度：4 μm），進(jìn)行HE 和TRAP 染色。直立顯微鏡下觀察并拍照。

2.融入EOP后原高職公共英語教學(xué)生態(tài)失調(diào)現(xiàn)象引發(fā)的影響研究。高職公共英語融入EOP后，由于教學(xué)內(nèi)容的改變，勢必會引起其教學(xué)生態(tài)中的各因子不再平衡，這種失調(diào)現(xiàn)象會引發(fā)各種不良影響，分析其不良影響可能帶來的后果，提出消除不良影響的必要性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 20.0 與GraphPad Prism 8.0 軟件進(jìn)行分析，兩組間比較采用獨(dú)立樣本

檢驗(yàn)，

＜0.05 認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過Pearson 相關(guān)系數(shù)分析檢驗(yàn)相關(guān)性，

＜0.05 認(rèn)為具有相關(guān)性。

90°，進(jìn)而得△FMK∽△DFA，則由于DA=4，AF=2，所以問題轉(zhuǎn)化為求即的值．而所以得故M點(diǎn)的坐標(biāo)為至于求點(diǎn)N的坐標(biāo)又體現(xiàn)了建立平面直角坐標(biāo)系的優(yōu)越性了，若仿照點(diǎn)E、M的坐標(biāo)求法，向坐標(biāo)軸作垂線，坐標(biāo)相當(dāng)難求．但注意到點(diǎn)F、D的坐標(biāo)分別為(2，0)，(0，4)，根據(jù)待定系數(shù)法易求直線EF、DM的解析式分別為y=3x-6和y=-x+4，聯(lián)立解方程組便可輕而易舉地求得點(diǎn)N的坐標(biāo)為再由兩點(diǎn)之間的距離公式，得問題迎刃而解．

6-0 無菌縫線（上海元象生物公司，中國）；HE染色試劑盒（上海生工生物公司，中國）；TRAP 染色試劑盒（Sigma 公司，美國）；逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（Taka-ra 公司，日本）；TRIZOL 試劑（Thermo Fish，美國）；QPCR SYBR Green Master Mix（上海翊圣生物公司，中國）；PCR 引物（上海生工生物公司，中國）；Micro-CT 系統(tǒng)（μCT50，Scanco Medical 公司，瑞士）；直立顯微鏡（尼康公司，日本）。

2 結(jié) 果

2.1 牙周炎模型構(gòu)建

選取12 只8 周齡雄性小鼠，采用絲線結(jié)扎法構(gòu)建小鼠牙周炎模型

：1%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，將小鼠仰臥位固定于手術(shù)臺，暴露口腔，選用6-0 無菌縫線建模，繞右側(cè)第二磨牙頸部一圈，在頰側(cè)打三重結(jié)，左側(cè)不建模作為對照。術(shù)后密切觀察小鼠生存率以及絲線是否滑脫，建模后14 d收樣。

SPWM是調(diào)制波與載波在交點(diǎn)時(shí)刻產(chǎn)生的控制信號，控制功率器件的通斷，得到一系列等幅不等寬的脈沖序列[6]。調(diào)制波在微控制器中是正弦函數(shù)，載波是通用定時(shí)器的寄存器加減產(chǎn)生虛擬三角波[7]，SPWM波形的算法采用規(guī)則采樣法[4]，如圖6所示。

2.2 牙周炎牙槽骨吸收活躍，破骨與炎癥相關(guān)基因上調(diào)

通過對牙周炎牙槽骨組織中的蛋白聚糖合成相關(guān)基因ACAN、BGN、VCAN、DCN 及炎癥相關(guān)基因IL-1β、IL-6、TNF-α 的表達(dá)水平分別進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ACAN 與IL-1β（

= 0.094）、IL-6（

= 0.227）、TNF-α（

= 0.137）、BGN 與IL-1β（

=0.129）、IL-6（

= 0.209）、TNF-α（

= 0.540）、VCAN與IL-1β（

= 0.056）、IL-6（

= 0.162）、TNF-α（

= 0.069）的表達(dá)均無相關(guān)性。而DCN 與IL-1β（

=-0.911，

=0.031）、IL-6（

=-0.1000，

=0.001）、TNF-α（

=-0.901，

= 0.036）的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性，見圖5。

隨著“二孩兒”政策的落地，許多家庭都增加了新的成員，然而問題來了,原本已經(jīng)可以安享晚年的老人，有可能需要再次“上崗”……

2.3 牙周炎牙槽骨組織中的蛋白聚糖含量改變

通過提取上頜骨RNA 檢測多種與蛋白聚糖合成相關(guān)基因，發(fā)現(xiàn)相較對照側(cè)，牙周炎側(cè)ACAN（

= 5.984，

＜0.001）、BGN（

= 5.984，

＜0.001）、DCN（

= 14.73，

＜0.001）表達(dá)下調(diào)，而VCAN（

=6.233，

＜0.001）的表達(dá)上調(diào)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見圖3。

牙周炎側(cè)CTSK（

= 4.507，

= 0.011）、MMP-9（

= 6.652，

＜0.001）、RANKL（

= 6.730，

＜0.001）等破骨細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)明顯上調(diào)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖2c）。牙周炎側(cè)炎癥相關(guān)基因IL-1β（

= 7.874，

＜0.001）、IL-6（

= 5.996，

=0.04）、TNF-α（

= 4.642，

= 0.002）表達(dá)也明顯上升，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖2d），說明牙周炎模型構(gòu)建成功。

2.4 牙周炎牙槽骨組織中的蛋白聚糖與破骨相關(guān)基因的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性

通過對牙周炎牙槽骨組織中的蛋白聚糖合成相關(guān)基因ACAN、BGN、VCAN、DCN 及破骨相關(guān)基因CTSK、MMP-9、RANKL 的表達(dá)水平分別進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ACAN 與RANKL（

=-0.982，

= 0.003）的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性，與CTSK（

=0.179）、MMP-9（

= 0.677）的表達(dá)無相關(guān)性。BGN與CTSK（

=-0.100，

=0.017）、MMP-9（

=-0.897，

= 0.039）、RANKL（

= 0.004）的表達(dá)均具有負(fù)相關(guān)性。VCAN 與CTSK（

= 0.173）、MMP-9（

=0.164）、RANKL（

= 0.432）的表達(dá)均無相關(guān)性。DCN 與MMP-9（

=-0.975，

=0.005)的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性，與CTSK（

=0.085）、RANKL（

=0.106）的表達(dá)無相關(guān)性，見圖4。

2.5 牙周炎牙槽骨組織中的蛋白聚糖與炎癥相關(guān)基因的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性

HE 染色結(jié)果顯示，相較對照側(cè)，牙周炎側(cè)牙齦乳頭形態(tài)破壞、退縮，牙周韌帶排列紊亂，纖維組織腔隙增多。第一磨牙遠(yuǎn)中根與第二磨牙近中根之間炎癥細(xì)胞浸潤增多，牙槽骨高度下降，吸收增多（圖2a）。通過TRAP 染色，發(fā)現(xiàn)牙周炎側(cè)牙槽骨中TRAP 陽性的破骨細(xì)胞數(shù)目明顯增加（圖2b）。

3 討 論

牙周炎是一種不可逆的非特異性炎性疾病，起因?yàn)檠谰呷肭盅乐芙M織，其代謝產(chǎn)物刺激機(jī)體免疫應(yīng)答并引起牙周組織破壞

。通過絲線結(jié)扎法在7 d 后可引發(fā)急性牙槽骨丟失，是研究牙周炎的重要模型

。在牙周炎中，牙周組織的破壞與大分子蛋白例如細(xì)胞外基質(zhì)蛋白、蛋白聚糖等的表達(dá)變化密切相關(guān)

。蛋白聚糖作為可以介導(dǎo)炎癥過程的大分子蛋白，參與炎癥介質(zhì)的濃度梯度形成、白細(xì)胞募集和細(xì)胞外基質(zhì)重塑，進(jìn)而調(diào)節(jié)牙周炎的病理進(jìn)程

。

其中，細(xì)胞外基質(zhì)蛋白聚糖在骨代謝或炎癥發(fā)展中至關(guān)重要。研究表明，ACAN 可以激活關(guān)節(jié)傷害感受器中的Toll 樣受體-2（Toll-like receptors-2，TLR-2），從而調(diào)控骨關(guān)節(jié)炎發(fā)展

。BGN 與纖調(diào)蛋白聚糖由成骨細(xì)胞生成并分泌，以劑量依賴性的方式直接結(jié)合TNF-α，抑制其激活RANK，從而抑制破骨細(xì)胞形成

。VCAN 間接通過透明質(zhì)酸或者直接通過CD44，P-選擇素糖蛋白配體-1（P-selectinglycoproteinligand-1，PSGL-1）以及TLR 受體與炎癥因子相互作用，激活炎癥因子IL-6、TNF-α和NF-κB

。DCN 通過調(diào)節(jié)干擾素影響淋巴細(xì)胞進(jìn)入炎癥組織，從而調(diào)控免疫過程中的遲發(fā)性超敏反應(yīng)，并且DCN 的過表達(dá)會抑制小鼠血管的炎癥性病變

。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在小鼠牙周炎牙槽骨中ACAN、BGN、DCN 表達(dá)下調(diào)，而VCAN 的表達(dá)上調(diào)，提示上述4 種蛋白聚糖與牙周炎的發(fā)展可能相關(guān)。

雖然前期研究發(fā)現(xiàn)蛋白聚糖可調(diào)控炎癥時(shí)牙周組織的代謝，但其在牙周炎牙槽骨吸收中的作用尚不明確?；罨腡 細(xì)胞表達(dá)的MMP-9、RANKL 以及破骨細(xì)胞表達(dá)的CTSK 促進(jìn)骨吸收。筆者發(fā)現(xiàn)牙周炎中ACAN 與RANKL 的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性，BGN 與CTSK、MMP-9、RANKL 的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性，DCN 與MMP-9 的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性，提示牙周炎中蛋白聚糖ACAN、BGN 與DCN 與牙周炎牙槽骨吸收可能相關(guān)，以及BGN 對CTSK、MMP-9、RANKL 可能潛在的負(fù)調(diào)控作用。

IL-1 和IL-6 促進(jìn)多型核白細(xì)胞和單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞黏附內(nèi)皮細(xì)胞，刺激前列腺素E2 的產(chǎn)生和溶酶體酶的釋放，進(jìn)而促進(jìn)牙周組織破壞

。TNF-α 通過上調(diào)可以降解基底膜的金屬蛋白酶，加速牙周炎進(jìn)展或者通過激活RANK，參與骨代謝和破骨細(xì)胞分化

。此外，研究表明炎癥因子白介素會下調(diào)DCN 在成纖維細(xì)胞中的表達(dá)

。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，DCN 與IL-1β、IL-6、TNF-α 的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性，提示牙周炎中DCN 的表達(dá)與牙槽骨吸收及牙周組織破壞有相關(guān)性，以及IL-1β、IL-6、TNF-α對DCN 可能潛在的負(fù)調(diào)控作用。

綜上，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明蛋白聚糖在小鼠牙周炎牙槽骨內(nèi)的表達(dá)量改變，并且與破骨相關(guān)因子、炎癥相關(guān)因子的表達(dá)量具有負(fù)相關(guān)性。為從蛋白聚糖的角度了解牙周炎的致病機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，以及對控制牙周炎牙槽骨吸收的臨床問題給予新思路。然而本實(shí)驗(yàn)對蛋白聚糖ACAN，DCN 的下降與牙周炎牙槽骨吸收的作用機(jī)制尚無具體論證，以及蛋白聚糖ACAN、BGN、ACAN 和DCN 在牙周炎側(cè)牙槽骨吸收，牙周組織破壞中的作用機(jī)制和關(guān)鍵信號通路還需進(jìn)一步探究。

Wang SY performed the experiment and wrote the article. Zhang F peformed the experiment and revised the arti-cle. Wang XK and Sun Y designed the study and reviewed the article.All authors read and approved the final manuscript as submitted.

[1] Tsukasaki M. RANKL and osteoimmunology in periodontitis[J]. J Bone Miner Metab,2021,39(1):82-90.doi:10.1007/s00774-020-01165-3.

[2] Schaefer L, Tredup C, Gubbiotti MA, et al. Proteoglycan neofunc-tions: regulation of inflammation and autophagy in cancer biology[J].FEBS J,2017,284(1):10-26.doi:10.1111/febs.13963.

[3] Schwartz NB, Domowicz MS. Proteoglycans in brain development and pathogenesis[J]. FEBS Lett, 2018, 592(23): 3791-3805. doi:10.1002/1873-3468.13026.

[4] Iozzo RV, Schaefer L. Proteoglycan form and function: a compre-hensive nomenclature of proteoglycans[J]. Matrix Biol, 2015, 42:11-55.doi:10.1016/j.matbio.2015.02.003.

[5] Chen Y,Guan Q,Han X,et al.Proteoglycans in the periodontium:a review with emphasis on specific distributions,functions,and po-tential applications[J]. J Periodontal Res, 2021, 56(4): 617-632.doi:10.1111/jre.12847.

[6] Bertrand J, Stange R, Hidding H, et al. Syndecan 4 supports bone fracture repair, but not fetal skeletal development, in mice[J]. Ar-thritis Rheum,2013,65(3):743-752.doi:10.1002/art.37817.

[7] Weng Y, Liu Y, Du H, et al. Glycosylation of DMP1 is essential for chondrogenesis of condylar cartilage[J]. J Dent Res, 2017, 96(13):1535-1545.doi:10.1177/0022034517717485.

[8] Xue H, Niu P, Liu Y, et al. Glycosylation of DMP1 promotes bone reconstruction in long bone defects[J].Biochem Biophys Res Com-mun,2020,526(4):1125-1130.doi:10.1016/j.bbrc.2020.04.020.

[9] Li J, Jin F, Cai M, et al. LncRNA nron inhibits bone resorption in periodontitis[J].J Dent Res,2021.doi:10.1177/00220345211019689.

[10] Hajishengallis G. Periodontitis: from microbial immune subver-sion to systemic inflammation[J]. Nat Rev Immunol, 2015, 15(1):30-44.doi:10.1038/nri3785.

[11] Lin P, Niimi H, Ohsugi Y, et al. Application of ligature-induced periodontitis in mice to explore the molecular mechanism of peri-odontal disease[J].Int J Mol Sci,2021,22(16):8900.doi:10.3390/ijms22168900.

[12] Zhang Z, Yang X, Zhang H, et al. The role of extracellular matrix metalloproteinase inducer glycosylation in regulating matrix metal-loproteinases in periodontitis[J]. J Periodontal Res, 2018, 53(3):391-402.doi:10.1111/jre.12524.

[13] Gopal S. Syndecans in inflammation at a glance[J]. Front Immu-nol,2020,11:227.doi:10.3389/fimmu.2020.00227.

[14] Miller RE,Ishihara S,Tran PB,et al.An aggrecan fragment drives osteoarthritis pain through Toll-like receptor 2[J]. JCI Insight,2018,3(6):e95704.doi:10.1172/jci.insight.95704.

[15] Kram V, Kilts TM, Bhattacharyya N, et al. Small leucine rich pro-teoglycans, a novel link to osteoclastogenesis[J]. Sci Rep, 2017, 7(1):12627.doi:10.1038/s41598-017-12651-6.

[16] Wight TN,Kang I,Evanko SP,et al.Versican-a critical extracellu-lar matrix regulator of immunity and inflammation[J].Front Immu-nol,2020,11:512.doi:10.3389/fimmu.2020.00512.

[17] Neill T,Sharpe C,Owens RT,et al.Decorin-evoked paternally ex-pressed gene 3 (PEG3) is an upstream regulator of the transcrip-tion factor EB (TFEB) in endothelial cell autophagy[J]. J Biol Chem, 2017, 292(39): 16211 - 16220. doi: 10.1074/jbc.M116.769950.

[18] Oh E, Choi IK, Hong J, et al. Oncolytic adenovirus coexpressing interleukin-12 and decorin overcomes Treg-mediated immunosup-pression inducing potent antitumor effects in a weakly immunogen-ic tumor model[J]. Oncotarget, 2017, 8(3): 4730 - 4746. doi:10.18632/oncotarget.13972.

[19] Binderman I,Gadban N,Yaffe A.Extracellular ATP is a key mod-ulator of alveolar bone loss in periodontitis[J]. Arch Oral Biol,2017,81:131-135.doi:10.1016/j.archoralbio.2017.05.002.

[20] Plemmenos G,Evangeliou E,Polizogopoulos N,et al.Central regu-latory role of cytokines in periodontitis and targeting options[J].Curr Med Chem, 2021, 28(15): 3032 - 3058. doi: 10.2174/0929867327666200824112732.

[21] Hashimoto-Uoshima M, Noguchi K, Suzuki M, et al. Effects of in-terleukin-4 on proteoglycan accumulation in human gingival fibro-blasts[J]. J Periodontal Res, 2002, 37(1): 42-49. doi: 10.1034/j.1600-0765.2002.00642.x.