張 洋 石志超

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院中醫(yī)科，遼寧 大連 116000；2.大連市中醫(yī)醫(yī)院石志超名老中醫(yī)工作室，遼寧 大連 116000)

心衰是當(dāng)今世界上最嚴(yán)重的疾病之一，5年內(nèi)生存率為50%左右，低于癌癥五年生存率；如伴有其他并發(fā)癥其生存率更低。心衰作為臨床多種心血管疾病的終末期表現(xiàn)，因其致殘率、病死率高，治療棘手，而成為了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究的重點(diǎn)與難點(diǎn)。心衰被世界著名心臟病學(xué)家Braunwald教授喻為“心臟病最后的大戰(zhàn)場(chǎng)”。近半個(gè)世紀(jì)來(lái)對(duì)心衰的防治一直是心血管領(lǐng)域中基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)研究的重點(diǎn)課題之一?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)是一組超過(guò)20種的鋅依賴(lài)酶家族，因其需要Zn2+、Ca2+等金屬離子作為輔助因子而得名。MMPs是一個(gè)較為龐大的家族，迄今為止被發(fā)現(xiàn)MMPs已有20余種。其中基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)作為MMPs家族中重要成員之一，心肌中的MMP-2是降解心肌細(xì)胞外基質(zhì)組分的主要酶類(lèi)；心衰發(fā)生時(shí)，心肌組織中MMP-2表達(dá)升高，促使心肌膠原蛋白纖維化增加，導(dǎo)致心肌抗?fàn)坷?、彈性作用喪失，引起心肌?xì)胞拉長(zhǎng)、室壁變薄、左心室擴(kuò)大，引起心功能下降，最終導(dǎo)致心室重構(gòu)[1,2]。賴(lài)諾普利為血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑，是目前治療心衰的基石性藥物，研究[3,4]表明其具有抑制MMP-2、抑制心室重構(gòu)及改善心功能等作用。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，氣血不足是心衰發(fā)生發(fā)展的基礎(chǔ)，故益氣養(yǎng)血為其有效治則，而中藥生血寶合劑具有益氣生血、滋補(bǔ)心腎的功效。本研究旨在觀察中藥生血寶合劑對(duì)心衰大鼠心功能及MMP-2的表達(dá)影響，為中醫(yī)藥治療心衰提供新策略、新方藥。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選用12周齡，普通級(jí)，健康、雄性SD大鼠100只，體質(zhì)量220～260 g。實(shí)驗(yàn)所需動(dòng)物由遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司提供[SCXK(遼)2013-0002]。

1.2 造模與分組 隨機(jī)選取10只未予任何處理的大鼠為空白對(duì)照組。90只大鼠7 d適應(yīng)性喂養(yǎng)后，采用用注射用鹽酸阿霉素10 mg/支，深圳萬(wàn)樂(lè)藥業(yè)有限公司(國(guó)藥準(zhǔn)字號(hào)H44024359)，于每日腹腔注射鹽酸阿霉素0.5 mg/kg，共注射4周；行心臟超聲檢測(cè)大鼠左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)；以L(fǎng)VEF≤50%作為心衰成功造模的標(biāo)準(zhǔn)。將造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組、賴(lài)諾普利組、生血寶合劑組，每組10只大鼠，余造模成功大鼠退出本次實(shí)驗(yàn)。

1.3 藥物與給藥劑量 生血寶合劑(每瓶100 mL)，由清華德人西安幸福制藥有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20050770。賴(lài)諾普利片(每片10 mg)，由上海信誼萬(wàn)象藥業(yè)股份有限公司提供，國(guó)藥準(zhǔn)字H10960265?？瞻讓?duì)照組與模型組灌胃蒸餾水1.8mL/次，日2次。各給藥組大鼠按人鼠劑量換算，給藥劑量(g/kg)=給出的人的劑量(g)×系數(shù)(0.018)/所求動(dòng)物體質(zhì)量(kg)，灌胃給藥。各給藥組，給藥為9.2 g生藥/kg/d，日2次；西藥組，1.5 mg生藥/kg/d，日2次[5]。上述各組均灌胃6周。

1.4 檢測(cè)指標(biāo) 給藥6周后，各組大鼠行多普勒超聲心動(dòng)圖機(jī)(型號(hào)SONO S5500，廠家Agilnet公司)檢測(cè)心功能(LVEDd、LVEDs、FS、EF)；取心肌組織90 mg，用于PCR技術(shù)檢測(cè)MMP-2的表達(dá)。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠心功能檢測(cè)結(jié)果 與模型組比，生血寶合劑組LVEDd、LVEDs明顯下降，F(xiàn)S、EF明顯升高(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠心功能變化情況

2.2 各組大鼠心肌MMP-2表達(dá) 與模型組比，生血寶合劑組MMP-2表達(dá)明顯下降(P<0.01)。見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠心肌中 MMP-2表達(dá)分)

3 討論

通過(guò)對(duì)古籍及相關(guān)文獻(xiàn)查閱發(fā)現(xiàn)，“心衰”一詞共有出現(xiàn)20余次，在理法、方藥、養(yǎng)生中均有涉及。心衰一詞首見(jiàn)于春秋戰(zhàn)國(guó)時(shí)期韓非子所著《韓非子·解老》，載“由是觀之，禮繁者，實(shí)心衰也”。其文獻(xiàn)中所記載的“心衰”是指人情感或感情的悲傷、衰落、枯竭而言。其與相對(duì)疾病而言的心衰無(wú)相關(guān)性?！靶乃ァ弊鳛椴∶滓?jiàn)于西晉王叔和《脈經(jīng)·脾胃部第三》，載“心衰則伏，肝微則沉，故令脈伏而沉”。唐代孫思邈《備急千金要方·脾臟方》載: “脾者土也，敦而?！?心衰則伏，肝微則沉，故令脈伏而沉”。孫思邈關(guān)于“心衰”的記載描述與王叔和《脈經(jīng)》中的記載一致；由此可見(jiàn)孫思邈對(duì)于“心衰”的描述是源于《脈經(jīng)·脾胃部第三》。北宋趙佶《政和圣劑總錄·心臟門(mén)·心臟統(tǒng)論》曰: “心衰則健忘，心熱則多汗”。明代《養(yǎng)生導(dǎo)引秘籍》載：“腎旺心衰，減咸增苦”。清代《形色外診簡(jiǎn)摩》載：“面起浮光，久啞，無(wú)外邪實(shí)證者，心衰肺癟，所謂聲嘶血敗，久病不治也”?！夺t(yī)述·臟腑》記載“心主脈，爪甲色不華，則心衰矣”?！杜R癥驗(yàn)舌法·方略》載“濟(jì)生歸脾湯去木香加丹皮麥冬方主治心衰火盛……”。此外“心衰”在《黃帝素問(wèn)宣明論方》《普濟(jì)方》等書(shū)中亦有多次提及[6]。心衰其病機(jī)之根為陽(yáng)微陰弦、本虛標(biāo)實(shí)之證候。本虛以心腎氣虛為主，標(biāo)實(shí)則以心血虧虛為重。故補(bǔ)益心腎、調(diào)和氣血為其有效治則。

本研究采用鹽酸阿霉素腹腔注射法建立大鼠心衰模型，給予生血寶合劑及賴(lài)諾普利進(jìn)行干預(yù)觀察。行超聲心動(dòng)圖發(fā)現(xiàn)，與模型組比，中藥生血寶合劑組大鼠心功能較模型組有明顯改善。通過(guò)PCR檢查心肌組織中MMP-2發(fā)現(xiàn)，與模型組比，中藥生血寶合劑組心衰大鼠心肌MMP-2的表達(dá)明顯下降(P<0.05)。上述結(jié)果表明中藥生血寶合劑具有改善心衰大鼠心功能及抑制心衰后心肌組織中MMP-2表達(dá)的作用。其作用機(jī)制可能是通過(guò)降低MMP-2活性，提高心肌收縮力，增強(qiáng)心臟輸出量，進(jìn)而達(dá)到抑制心衰的作用。生血寶合劑為棕褐色液體，氣微香，味甜、微苦，其主要成分為黃芪、白芍、桑椹、何首烏、女貞子、墨旱蓮、狗脊等，具有益氣生血，滋補(bǔ)心腎之功效[7]。本研究表明，中藥生血寶合劑中的各味中藥配伍后，在治療心衰過(guò)程中起到了協(xié)同及促進(jìn)作用，為中醫(yī)“氣能生血，血能養(yǎng)氣”的理論提供了科學(xué)客觀的依據(jù) 。