姬曼曼 陳淑霞

商丘市第一人民醫(yī)院血液內(nèi)科 河南商丘 476000

多發(fā)性骨髓瘤為一種惡性漿細(xì)胞病變,是僅次于淋巴瘤的血液系統(tǒng)惡性腫瘤,可對骨髓造血系統(tǒng)造成嚴(yán)重影響［1］。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示,多發(fā)性骨髓瘤多發(fā)于老年人群,約占所有腫瘤1.5%［2］,其早期無明顯臨床癥狀,隨病情進(jìn)展可出現(xiàn)高鈣血癥、貧血、溶骨性損傷等,因此及時(shí)對多發(fā)性骨髓瘤病情進(jìn)行準(zhǔn)確評估,制定相應(yīng)干預(yù)方案至關(guān)重要。細(xì)胞分子遺傳學(xué)為目前評估多發(fā)性骨髓瘤的主要方案,但其檢查難度大、費(fèi)用昂貴,存在一定局限性［3］。外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查已廣泛應(yīng)用于臨床腫瘤評估診斷中,可通過檢測WBC、T淋巴細(xì)胞等評估機(jī)體免疫功能、炎癥狀態(tài)等,從而反映疾病進(jìn)展情況,具有簡便快捷、可重復(fù)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)［4］。但目前臨床關(guān)于外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查應(yīng)用于多發(fā)性骨髓瘤相關(guān)研究較少,基于此,本研究旨在分析外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查與新診斷多發(fā)性骨髓瘤患者ISS分期的相關(guān)性及臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年10月～2022年4月商丘市第一人民醫(yī)院收治的88例新診斷多發(fā)性骨髓瘤患者作為研究對象,其中男52例,女36例,年齡59～72歲,平均(65.28±2.14)歲;體質(zhì)量指數(shù)20.3～25.8kg/m2,平均(23.05±1.12)kg/m2;ISS分期:Ⅰ期29例,Ⅱ期33例,Ⅲ期26例;血清免疫球蛋白分型:IgG型48例,IgA型12例,IgM型5例,IgD型3例,Kappa輕鏈型7例,Lambda輕鏈型13例;貧血62例,骨痛66例,骨破壞63例,骨功能障礙55例。本研究經(jīng)我院倫理委員會審核批準(zhǔn)(批準(zhǔn)文號:201903012)。

1.2納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn):均符合《中國多發(fā)性骨髓診治指南(2020年)修訂》中多發(fā)性骨髓瘤相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］;均為初次診斷;住院時(shí)間均>1個(gè)月;可接受本研究檢查方案;患者及家屬知曉本研究。并簽訂知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):合并其他惡性腫瘤者;合并原發(fā)性、繼發(fā)性血小板減少癥者;入院前1個(gè)月存在放化療史者;合并心、肺、肝、腎等重大臟器功能障礙者;合并全身性感染疾病、自身免疫性疾病者;合并精神異常或無法配合本研究者。

1.3方法

1.3.1生化指標(biāo)測定 分別于患者入院時(shí)、入院1個(gè)月后采集外周靜脈血3mL,37℃,離心10min,3500r/min(r=8cm),分離血清、血漿于-20℃冰箱保存待測。采用日本日立760型全自動生化分析儀測定WBC、中性粒細(xì)胞絕對計(jì)數(shù)(ANC)、淋巴細(xì)胞絕對計(jì)數(shù)(ALC)、誘導(dǎo)T細(xì)胞/抑制T細(xì)胞(CD4+/CD8+)、Th1/Th2;分離外周血單個(gè)核細(xì)胞,將其銀染,經(jīng)KL分析系統(tǒng)計(jì)算淋巴細(xì)胞銀染核仁區(qū)(AgNORs);采用酶聯(lián)免疫吸附法測定轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)水平,儀器選用HED-SY96S型酶標(biāo)儀,試劑盒購于武漢生源科技公司。所有操作均嚴(yán)格按照儀器及試劑盒相關(guān)說明進(jìn)行。

1.3.2分組方法 根據(jù)入院時(shí)ISS分期進(jìn)行分組,Ⅰ期:血清白蛋白≥35 g/L,血清β2微球蛋白<3.50 mg/L;Ⅱ期:不符合Ⅰ期和Ⅲ期的所有患者;Ⅲ期:血清β2微球蛋白≥5.50 mg/L。

1.3.3預(yù)后評估 患者癥狀緩解后出院,出院后每隔1個(gè)月入院復(fù)查一次,檢查患者骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)、外周血細(xì)胞形態(tài)。根據(jù)是否發(fā)生復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移評估預(yù)后,其中發(fā)生復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移評估為預(yù)后不良,未發(fā)生復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移評估為預(yù)后良好。復(fù)發(fā):經(jīng)檢查發(fā)現(xiàn)存在貧血,骨髓檢查發(fā)現(xiàn)異常的漿細(xì)胞增生,IgG、IgM、IgA等免疫球蛋白異常,存在大量蛋白尿,血清尿素氮、肌酐升高。

2 結(jié)果

2.1不同ISS分期患者入院時(shí)外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查指標(biāo)比較 入院時(shí)WBC、ANC比較:Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期;ALC、CD4+/CD8+比較:Ⅲ期<Ⅱ期<Ⅰ期,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 不同ISS分期患者入院時(shí)外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查比較

2.2不同ISS分期患者入院時(shí)免疫功能指標(biāo)比較 入院時(shí)Th1/Th2、AgNORs比較:Ⅲ期<Ⅱ期<Ⅰ期;血清TGF-β比較:Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同ISS分期患者入院時(shí)免疫功能指標(biāo)比較

2.3ISS分期與各免疫功能指標(biāo)相關(guān)性分析 經(jīng)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),入院時(shí)WBC、ANC與ISS分期、血清TGF-β呈正相關(guān),與Th1/Th2、AgNORs呈負(fù)相關(guān);ALC、CD4+/CD8+與ISS分期、血清TGF-β呈負(fù)相關(guān),與Th1/Th2、AgNORs呈正相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表3 ISS分期與各免疫功能指標(biāo)相關(guān)性分析

2.4不同預(yù)后患者入院1個(gè)月后外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)指標(biāo)比較 隨訪6個(gè)月后,88例患者中復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移15例。與預(yù)后良好患者比較,預(yù)后不良患者入院1個(gè)月時(shí)WBC、ANC較高,ALC、CD4+/CD8+較低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同預(yù)后患者入院1個(gè)月后外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查比較

2.5預(yù)測價(jià)值分析 經(jīng)ROC曲線分析顯示,入院1個(gè)月后WBC、ANC、ALC、CD4+/CD8+預(yù)測多發(fā)性骨髓瘤患者預(yù)后不良的AUC分別為0.795、0.832、0.856、0.836,各指標(biāo)聯(lián)合預(yù)測AUC為0.927。見表5。

表5 預(yù)測價(jià)值分析

3 討論

多發(fā)性骨髓瘤為一種以惡性漿細(xì)胞增生為特征的惡性腫瘤,可伴隨骨痛、貧血、腎功能障礙等癥狀,且隨漿細(xì)胞增生程度不同,可引起機(jī)體各部位臟器功能受損［6］。因此,盡早評估多發(fā)性骨髓瘤病情、預(yù)測預(yù)后,制定相應(yīng)干預(yù)方案至關(guān)重要。

外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查近年來已逐漸應(yīng)用于多發(fā)性骨髓瘤評估中,其通過顯微鏡或自動化儀器對外周血細(xì)胞形態(tài)及數(shù)量進(jìn)行測量,從而對疾病病情進(jìn)行評估［7］。本研究經(jīng)外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同ISS分期多發(fā)性骨髓瘤患者WBC、ANC、ALC、CD4+/CD8+比較存在差異,且具有顯著相關(guān)性,據(jù)此可推測上述指標(biāo)與多發(fā)性骨髓瘤病情緊密聯(lián)系。有研究顯示,外周血ALC為腫瘤預(yù)后評估的重要免疫標(biāo)志物之一,其表達(dá)隨病情進(jìn)展而波動,與腫瘤患者總體生存期存在緊密聯(lián)系,且高水平ALC為多發(fā)性骨髓瘤患者自體干細(xì)胞移植前延長總體生存期的重要影響因素［8］。國內(nèi)學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)多發(fā)性骨髓瘤患者CD4+細(xì)胞表達(dá)受抑制,而CD8+、淋巴細(xì)胞多表達(dá)正常［9］,因此CD4+/CD8+比值多呈下降趨勢,CD4+、CD8+在維持自身成分免疫耐受時(shí),可阻止機(jī)體對自身同源腫瘤細(xì)胞免疫,致使腫瘤免疫抑制,隨腫瘤發(fā)展,CD4+表達(dá)受抑制程度提高,因此CD4+/CD8+比值與ISS分期存在顯著相關(guān)性。ANC可反映機(jī)體受感染情況,多發(fā)性骨髓瘤患者出現(xiàn)感染時(shí)機(jī)體白細(xì)胞可顯著變化,由于骨髓內(nèi)漿細(xì)胞擠壓白細(xì)胞,致使外周白細(xì)胞減少,如伴隨細(xì)菌性感染,機(jī)體白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞百分比可顯著升高,WBC、ANC隨之升高［10-11］。

近年來隨分子生物學(xué)發(fā)展,臨床發(fā)現(xiàn)多發(fā)性骨髓瘤免疫功能異常與病情密切相關(guān),其中Th1、Th2在細(xì)胞免疫及體液免疫中發(fā)揮重要作用,其比值可反映多發(fā)性骨髓瘤患者抗腫瘤免疫狀態(tài)。AgNORs為RNA聚合酶亞單位之一,可反映rDNA轉(zhuǎn)錄效率,能體現(xiàn)淋巴細(xì)胞活性及機(jī)體細(xì)胞免疫狀態(tài);而TGF-β為腫瘤細(xì)胞及Treg細(xì)胞共同分泌的免疫抑制因子,可反映腫瘤對免疫應(yīng)答的抑制程度,隨腫瘤進(jìn)展,機(jī)體免疫功能發(fā)生顯著變化,上述指標(biāo)隨之改變［12-14］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同ISS分期患者入院時(shí)Th1/Th2、AgNORs、TGF-β比較存在顯著差異,且與外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查指標(biāo)具有顯著相關(guān)性,進(jìn)一步說明外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查對于多發(fā)性骨髓瘤病情、免疫狀態(tài)的評估價(jià)值。

本研究經(jīng)隨訪6個(gè)月后發(fā)現(xiàn),不同預(yù)后患者入院1個(gè)月后外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查指標(biāo)存在差異,進(jìn)一步行ROC分析顯示,WBC、ANC、ALC、CD4+/CD8+各指標(biāo)對多發(fā)性骨髓瘤預(yù)后不良聯(lián)合預(yù)測AUC為0.927,具有較高預(yù)測價(jià)值。

綜上所述,外周血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查對于多發(fā)性骨髓瘤病情、免疫功能具有一定評估價(jià)值,可為臨床制定干預(yù)方案、改善預(yù)后提供依據(jù)。