陳思宇， 王 靜， 徐松濤， 田 雪， 石 西 ， 李學軍

（1.河南師范大學水產(chǎn)學院，河南省水產(chǎn)動物養(yǎng)殖工程技術研究中心，河南 新鄉(xiāng) 453007；2.平度市水利水產(chǎn)局，山東 青島 266700）

優(yōu)質仔魚的培育是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康持續(xù)發(fā)展的關鍵技術之一，因此，除了適宜的生長環(huán)境外，選擇最佳的開口餌料對獲得健康活潑、 品質優(yōu)良的仔魚就顯得尤為重要（陳建華等，2017；杜強等，2017；Leita～o 等，2011）。 研究表明， 豐年蟲幼體（Artemia）含有豐富多樣的營養(yǎng)成分，是業(yè)界公認的促進魚蝦蟹苗種健康生長和良好發(fā)育的優(yōu)質開口料，但同時也存在難以保鮮和貯存、誘發(fā)魚苗疾病等缺點，且對生存環(huán)境的品質要求較高，因此，在實際的養(yǎng)殖中常投喂冷凍生物餌料（邢明威等，2022；Stappen 等，2020；Lavens 和Sorgeloos，2000）。凍干生物餌料脫殼豐年蟲卵通過冷凍干燥工藝有效殺菌后， 既最大限度的保留了活餌料的成分和鮮味，又具有良好的復水性，便于投喂，安全有效；逐漸引起了國內外學者們的高度重視，而淇河鯽仔魚在該方面的研究還較少（Chen 等，2019）。 傳統(tǒng)的蛋黃豆?jié){培育法在大宗淡水魚苗種繁育中應用十分廣泛，但存在容易酸化水體、造成營養(yǎng)損失等問題 （李德發(fā)，2019；Venou 等，2006）。 商業(yè)開口料具有營養(yǎng)全面、 餌料轉化率高等優(yōu)點，但開口性差、長期投喂易污染水質。近年來， 隨著規(guī)?；B(yǎng)殖的需要和飼料工藝的成熟， 商業(yè)開口料已被成功應用到魚蝦蟹苗種繁育中，并且效果顯著，但對淇河鯽仔魚的研究報道相對匱乏（Aya 等，2021）。

淇河鯽（Carassius auratus）俗稱“雙背鯽”，其厚度是普通鯽的兩倍， 是一種天然雌核發(fā)育的三倍體雜食性淡水魚，其生長快、營養(yǎng)全面、食性廣且抗逆性強，是一種經(jīng)濟性狀優(yōu)良，適合集約化養(yǎng)殖的地方特色物種（Wang 等，2021；Wu 等，2021；董傳舉等，2020；Wang 等，2020）。 為此，國內外科研人員在病害免疫（Zhu 等，2022）、養(yǎng)殖技術（汪桂宇等，2020）、遺傳育種（Shi 等，2022）等相關領域對淇河鯽展開研究和技術推廣，但目前仍處于初級階段。近些年來，由于棲息地環(huán)境的污染、過度捕撈、傳染性疾病和低質量養(yǎng)殖等因素，導致淇河鯽出現(xiàn)了成熟個體小型化、性成熟早、平均魚齡下降等現(xiàn)象，此外，淇河鯽的野生種質資源也出現(xiàn)了嚴重衰退的跡象 （Gao 等，2020；Wang等，2017；Zhang 等，2017）。 為此，2007 年農(nóng)業(yè)部批準設立淇河鯽魚國家級水產(chǎn)種質資源保護區(qū)，2018 年農(nóng)業(yè)部批準同意對保護區(qū)面積范圍和功能分區(qū)進行調整。

因此，為了保護淇河鯽的種質資源，促進淇河鯽苗種繁育和養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展， 有必要對其仔魚的開口餌料展開試驗。 本試驗結合淇河鯽的生物習性， 選用了5 種常見易得的淡水魚開口餌料對出膜4 d 后的淇河鯽仔魚進行了為期25 d 的培育試驗，試驗結束后對仔魚的攝食率、生長性能、成活率和形態(tài)指標進行測定與分析， 旨在初步探討出淇河鯽仔魚最佳開口餌料的投喂方案， 以期為淇河鯽苗種培育中餌料的選擇提供技術借鑒。

1 材料與方法

1.1 試驗魚 試驗所用的淇河鯽仔魚來自于河南師范大學水產(chǎn)基地。 利用促黃體素釋放激素（LHRH-A2） 和地歐酮（DOM） 對雌雄親魚進行催產(chǎn)，出現(xiàn)追尾現(xiàn)象后采用干法授精的方式進行人工授精，然后在流水環(huán)境下將受精卵孵化成淇河鯽幼苗（董傳舉等，2019）；幼苗出膜4 d 后，選擇健康活潑且大小規(guī)格一致的個體用于試驗， 初始體長為（5.67±0.12）mm，初始體重為（1.9±0.2）mg。

1.2 試驗餌料 本試驗選用豐年蟲幼體、 熟蛋黃、豆?jié){、商業(yè)開口料、脫殼豐年蟲卵5 種內陸淡水養(yǎng)殖易得常用的開口餌料。 豐年蟲幼體為凍干豐年蟲卵經(jīng)人工配制的海水孵化， 去除卵殼和未孵化蟲卵后獲得無節(jié)幼體；雞蛋煮熟后去除蛋清，用紗布包住蛋黃揉碎， 經(jīng)100 目篩絹過濾后即得到蛋黃漿；將黃豆浸泡過夜后，利用豆?jié){機打碎，經(jīng)100 目篩絹過濾后即得到豆?jié){； 商業(yè)開口料為通威開口樂微粒子飼料， 購買自河南通威飼料有限公司（河南新鄉(xiāng)）；脫殼豐年蟲卵購自無棣縣尚嘉水族館（山東濱州）。

1.3 試驗方法 試驗在河南師范大學水產(chǎn)學院水產(chǎn)動物遺傳育種實驗室中進行。 試驗設定5 個不同開口餌料的試驗組：豐年蟲幼體組、蛋黃組、豆?jié){組、 商業(yè)開口料組和脫殼豐年蟲卵組。 試驗前，先將所有魚苗放入同一圓形養(yǎng)殖桶（200 L）中暫養(yǎng)1 d。 每個試驗組設置3 個平行，每個平行隨機投放50 尾淇河鯽仔魚，共計750 尾。 試驗容器為塑料養(yǎng)殖缸（圓柱形，容積約4.5 L），每個養(yǎng)殖缸中加入水的體積為3.0 L，試驗用水為曝氣自來水。 每日于8:30、12:30、17:30 各投喂1 次，以保證飼養(yǎng)缸內餌料充足。 在每次投喂前使用吸管清除殘餌和糞便，以保持良好水質。 試驗期間，每天換水1/3， 采用充氣泵連續(xù)微充氧并保持水體溶氧≥5 mg/L，水溫維持在23 ～25 ℃，pH 為7.1 ～7.5。 試驗持續(xù)25 d。

1.4 觀察和測定 試驗開始前， 隨機抽取30 尾仔魚，測定初始體長和初始體重。試驗參照林貞賢（2015）描述的方法統(tǒng)計開口攝食率：各試驗組投喂24 h 后， 于每個養(yǎng)殖缸中隨機抽取30 尾仔魚置于帶水的培養(yǎng)皿內， 用顯微鏡仔細觀察仔魚食道內是否有餌料，并做好相關記錄。 試驗開始后，每天記錄各平行試驗組仔魚的死亡數(shù)量， 用于計算成活率。 試驗過程中，分別在第5、10、15、20、25天，于每個養(yǎng)殖缸內隨機抽取5 尾仔魚，測定體長和體重。 體長和體重的測量采取以下方式：將仔魚從養(yǎng)殖缸中取出，置于吸水紙上，使用游標卡尺小心迅速測量每尾仔魚的體長 （精確到0.01 mm）；使用分析天平精確稱量經(jīng)濾紙吸收水分后的5 尾仔魚的總體重（精確到0.0001 g），稱量后迅速放回對應的養(yǎng)殖缸內，5 尾仔魚總體重除以5 即為每個養(yǎng)殖缸中仔魚的體重。

1.5 數(shù)據(jù)處理與參數(shù)計算 采用SPSS Statistics 21.0 軟件對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。 首先，對數(shù)據(jù)進行正態(tài)分布和方差齊性檢驗；然后，采用單因素方差分析（One-Way ANOVA） 比較不同試驗組間的差異，若組間差異顯著，再利用Tukey’s 法進行多重比較，顯著性水平為P＜0.05。 數(shù)據(jù)以“平均值±標準差”表示。 相關參數(shù)的計算公式如下：

開口攝食率/%=（攝食個體數(shù)/總個體數(shù)）×100；

存活率/%=（存活個體數(shù)/初始個體數(shù)）×100；

日增體重/mg=（末體重-初體重）/總天數(shù)；

日增體長/mm=（末體長-初體長）/總天數(shù)；

體重增長率/%=（末體重-初體重）/初體重×100；

體長增長率/%=（末體長-初體長）/初體長×100；

體重特定生長率/（%/d） =（ln 末體重-ln 初體重）/總天數(shù)×100；

體長特定生長率/（%/d） =（ln 末體長-ln 初體長）/總天數(shù)×100；

肥滿度/%=（體重/體長3）×100。

2 結果

2.1 不同開口餌料對淇河鯽仔魚開口攝食率的影響 投喂24 h 后，各餌料組的開口攝食率都很高，均達到88%以上（圖1）。 其中，蛋黃組的開口攝食率最高，達到了100%，其次是商業(yè)開口料組（97.8%）、脫殼豐年蟲卵組（93.3%）、豐年蟲幼體組（90.0%）、豆?jié){組（88.9%），但各個餌料組之間的差異不顯著（P＞0.05）。

圖1 不同開口餌料對淇河鯽仔魚開口攝食率的影響

2.2 不同開口餌料對淇河鯽仔魚存活率的影響培養(yǎng)25 d 后， 豐年蟲幼體組的存活率最高，為（40.67±6.11）%，顯著高于蛋黃組和豆?jié){組（P＜0.05），但是與脫殼豐年蟲卵組和商業(yè)開口料組無顯著性差異（P＞0.05）。在培養(yǎng)初期（Day5），豆?jié){組的存活率較高，但隨著培養(yǎng)時間的延長，存活率顯著降低。在0 ～15 d，各餌料組的存活率呈現(xiàn)出明顯的下降趨勢，15 d 后， 各組的存活率基本保持穩(wěn)定（圖2）。

圖2 不同開口餌料對淇河鯽仔魚存活率的影響

2.3 不同開口餌料對淇河鯽仔魚體型、體重和體長的影響 試驗結束后， 利用豐年蟲幼體培養(yǎng)的仔魚在體型上明顯大于其他餌料培養(yǎng)的仔魚（圖3）。在體重方面，豐年蟲幼體組的體重表現(xiàn)出明顯快速的增長速度，經(jīng)過25 d 的培養(yǎng)，其體重增長了39.10 倍。 在每個養(yǎng)殖階段，豐年蟲幼體組的體重均顯著大于其他四個餌料組（P＜0.05）。 25 d后，豐年蟲幼體組的平均體重分別為蛋黃組、豆?jié){組、 商業(yè)開口料組和脫殼豐年蟲卵組的8.08、17.32、10.60、11.37 倍； 蛋黃組的體重顯著高于豆?jié){組（P＜0.05），而與商業(yè)開口料組和脫殼豐年蟲卵組無顯著差異（P＞0.05）（圖4a）。 試驗結束后，豐年蟲幼體組的日增體重（圖4b）和體重增長率（圖4c）均顯著高于其他四個餌料組（P＜0.05）；蛋黃組的日增體重和體重增長率顯著高于豆?jié){組（P＜0.05）。 在體長方面，豐年蟲幼體組的體長增長速度最快， 經(jīng)過25 d 的培養(yǎng)， 其體長增長了1.65 倍。在每個養(yǎng)殖階段，豐年蟲幼體組的體長均顯著大于其他四個餌料組（P＜0.05）（圖5a）。25 d后，豐年蟲幼體組的平均體長分別為蛋黃組、豆?jié){組、 商業(yè)開口料組和脫殼豐年蟲卵組的1.49、1.74、1.55、1.83 倍。 試驗結束后，豐年蟲幼體組的日增體長（圖5b） 和體長增長率（圖5c） 均顯著高于其他四個餌料組（P＜0.05），而蛋黃組和商業(yè)開口料組的體長、 日增體長和體長增長率均顯著高于豆?jié){組和脫殼豐年蟲卵組（P＜0.05） 。

圖3 不同餌料組淇河鯽仔魚的生長差異

圖4 不同開口餌料對淇河鯽仔魚體重的影響

圖5 不同開口餌料對淇河鯽仔魚體長的影響

2.4 不同開口餌料對淇河鯽仔魚特定生長率的影響 在每個培養(yǎng)時期，豐年蟲幼體組的體重特定生長率（表1） 和體長特定生長率（表2） 均顯著高于其他四個餌料組（P＜0.05）。 25 d 后，豐年蟲幼體組的體重特定生長率分別是蛋黃組、 豆?jié){組、商業(yè)開口料組和脫殼豐年蟲卵組的2.24、4.56、2.94、3.25 倍。蛋黃組的體重特定生長率在各個培養(yǎng)時期都比較穩(wěn)定，商業(yè)開口料組和脫殼豐年蟲卵組的體重特定生長率在培養(yǎng)初期較低，而隨著培養(yǎng)時間的推移，其數(shù)值呈現(xiàn)上升的趨勢，而豆?jié){組的體重特定生長率一直處于較低水平。豆?jié){組和商業(yè)開口料組的體長特定生長率在培養(yǎng)初期較低，隨著培養(yǎng)時間延長，其數(shù)值呈上升趨勢，然后維持穩(wěn)定。

表1 不同開口餌料對淇河鯽仔魚體重特定生長率的影響%/d

表2 不同開口餌料對淇河鯽仔魚體長特定增長率的影響%/d

2.5 不同開口餌料對淇河鯽仔魚肥滿度的影響在培養(yǎng)初期（5 d），豐年蟲幼體組的肥滿度顯著小于豆?jié){組和商業(yè)開口料組（P＜0.05），而與蛋黃組和脫殼豐年蟲卵組無顯著性差異（P＞0.05）。隨著培養(yǎng)時間的延長（10 ～25 d），豐年蟲幼體組的肥滿度顯著大于其他四個餌料組（P＜0.05）。試驗結束時， 脫殼豐年蟲卵組的肥滿度顯著小于豐年蟲幼體組，而大于其他三個餌料組（P＜0.05）；其中豆?jié){組的肥滿度最?。ū?）。

表3 不同開口餌料對淇河鯽仔魚肥滿度的影響%

3 討論

3.1 不同餌料對淇河鯽仔魚開口攝食的影響當內源物質消耗殆盡，消化管與口腔逐漸連通后，仔魚必須攝取理想的外源物質， 以便進一步生長發(fā)育， 這就是仔魚的開口攝食期（Sarasquete 等，1995；朱成德，1986）。開口攝食的優(yōu)劣直接影響仔魚的生長和存活， 而引起開口攝食變化的關鍵因素之一就是其攝食對象（秦志清等，2020）。本研究中，24 h 內， 各個餌料組的開口攝食率均達到88%以上， 說明大部分淇河鯽仔魚的食道已完全打開， 可以較好的攝入這幾種餌料 （劉婷等，2021）。 其中，以蛋黃組的開口效果最好，開口攝食率為100%，豐年蟲幼體組次之，豆?jié){組最低，這可能是由于餌料的形狀、密度、粒徑和分布等對攝食成功率產(chǎn)生了影響，這與陳斌等（2020）對似鮈（Pseudogobio vaillanti）仔魚的開口餌料試驗結果相一致。張建明（2019）研究發(fā)現(xiàn)，鮮活生物餌料中的營養(yǎng)成分對仔魚的攝食率有顯著影響， 本試驗中各個餌料組攝食率沒有顯著差異， 蛋黃組的攝食率僅略高于豐年蟲幼體組， 這可能與仔魚初期游泳能力較弱有關。有研究報道，仔魚攝食的速率和頻率與餌料下沉速度有關（周暉等，2016），該結果在本研究中得到證實。 邢明威等（2022）分析發(fā)現(xiàn)，環(huán)境因素（如水體堿度、溫度）會對餌料的特性造成一定的影響， 這些因素可能會刺激相關餌料加速降解和下沉，不利于仔魚攝食。 此外，凍干豐年蟲卵經(jīng)鹽水孵化后， 可能初期對弱堿性的試驗水體較為陌生，產(chǎn)生了應激反應，導致仔魚難以捕捉他們，但隨著時間的推移逐漸適應下來，這可能解釋了本次試驗的結果。蛋黃漿攝食效果很好，但長期使用容易污染水質。因此，這意味著利用豐年蟲幼體去養(yǎng)殖淇河鯽仔魚， 可以提高仔魚的攝食能力，進而促進苗種的生長與發(fā)育。

3.2 不同餌料對淇河鯽仔魚存活率和生長的影響 當卵黃囊不再能滿足幼魚生長需要時，仔魚需要從外界攝取營養(yǎng)物質， 而外來餌料的營養(yǎng)組成、粒徑大小、餌料豐度等，對仔魚生長和存活起重要作用 （李姣等，2015；Hoehne-Reitan 和Kjorsvik，2004）。研究顯示，優(yōu)質的開口餌料可在一定程度上顯著提高仔魚的品質，因此仔魚的生長性能可通過投喂高品質的餌料如天然生物餌料而產(chǎn)生積極影響（趙月月等，2018；Izquierdo 等，2001）。 在自然水域中，淇河鯽是典型的雜食性魚類，可憑借發(fā)達的下咽骨和咽齒之間相互協(xié)作去攝食小型蝦類和浮藻（胡鳳霞，2016）。在本研究中，在開口攝食的初期（0 ～15 d）， 各餌料組的存活率都出現(xiàn)了顯著下降的趨勢，而隨著時間的延長（15 ～ 25 d），各餌料組的存活率保持穩(wěn)定；此外，攝食豐年蟲幼體的淇河鯽仔魚在生長性能方面，各個時期的體長、體重的增長率及特定生長率等都顯著高于其他餌料組，在形態(tài)方面（肥滿度）也優(yōu)于其他各組，而豆?jié){組在生長方面表現(xiàn)最差，這與多鱗白甲魚仔魚（Onychostoma macrolepis）（李宏等，2020）、 黑斑原鮡仔魚（Glyptosternum maculatum） （王萬良等，2021）、清水江鯉仔魚（Cyprinus carpio）（杜強等，2019）所進行的開口餌料試驗結果相吻合。 綜上所述，筆者認為產(chǎn)生這一結果的原因可能有以下幾個方面：一是在生長發(fā)育的危險期，淇河鯽仔魚下咽骨和咽齒的形態(tài)結構和功能尚未形成，對餌料的咬合力量和切割能力較弱，這可能導致仔魚無法及時攝入外源營養(yǎng)而引起大量死亡，隨著危險期的過度，仔魚慢慢適應了外源營養(yǎng)，死亡數(shù)大大降低（朱成德，1986）；二是較于豆?jié){、 蛋黃漿和商業(yè)開口料等靜態(tài)餌料，活性餌料豐年蟲幼體可能由于口感更柔軟順滑，質地更適宜，營養(yǎng)和微量元素更全面而優(yōu)于其他餌料（Stappen 等，2020；Lavens 和Sorgeloos，2000）；三是5 種開口餌料顏色亦有差別，可能仔魚在初次攝食后通過習得的經(jīng)驗形成了食物印記，更喜好體色鮮紅的豐年蟲幼體作為理想餌料（Gordon，1967）；四是可能由于豐年蟲幼體中的某些分子所散發(fā)的特有氣味易于喚醒并刺激仔魚先天的索餌行為（Olsén等，2018）；五是在試驗水體中沒有浮游生物，豆?jié){等其他餌料只會逐漸凝固下沉，根據(jù)淇河鯽的攝食習性，長此以往是不可能保證魚苗飼養(yǎng)成活的，所以選擇豐年蟲幼體最佳（趙月月等，2018）；六是仔魚初期口腔的微弱差異、水體溫度、水體體積等內外部因子都會對其生長和存活產(chǎn)生影響，但國內外諸刊中鮮有報道（劉利平等，2017；So/rensen 等，2014）。 此外，豐年蟲幼體組的試驗魚具有最高的存活率、特定生長率和肥滿度，表明活性餌料可能有利于魚苗消化道的發(fā)育和消化吸收功能的完善。

4 結論

本研究結果表明， 利用豐年蟲幼體作為開口餌料，可以顯著提高淇河鯽的開口攝食率、存活率和生長性能， 增強其活力， 并使其具有良好的體型， 是淇河鯽最理想的開口餌料。 蛋黃具有成本低、制作簡單、常見易得等優(yōu)點，作為淇河鯽的開口餌料，其開口攝食率最高，但存活率相對較低，因此在生產(chǎn)中可以配合豐年蟲幼體一起使用。 商業(yè)開口料組和脫殼豐年蟲卵組的存活率較高，但促生長作用較小，可以作為補充餌料。豆?jié){組的存活率、生長率和肥滿度均最低，不適合作為淇河鯽仔魚的開口餌料。