黨利敏 馬虎林

結(jié)直腸癌目前在全球癌癥發(fā)病率中排名第三,在癌癥相關(guān)死亡中排名第二,2020年全球結(jié)直腸癌新發(fā)病例1 931 590例,死亡935 173例,分別占癌癥發(fā)病和死亡總數(shù)的10.0%和9.4%[1]?；熉?lián)合或不聯(lián)合靶向治療是轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌(mCRC)的基本治療方法。由于化療藥物的不良反應(yīng)和腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)特性,傳統(tǒng)策略難以突破。了解腫瘤微環(huán)境(TME)中癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞之間的相互作用是癌癥免疫治療的關(guān)鍵所在。癌癥發(fā)展過(guò)程中癌細(xì)胞與免疫系統(tǒng)之間的相互作用被概括為“癌癥免疫編輯”假說(shuō),由免疫消除、免疫平衡和免疫逃逸三階段組成[2]。免疫抑制機(jī)制為腫瘤細(xì)胞早期的無(wú)序性生長(zhǎng)提供了先決條件,而調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)在此機(jī)制中發(fā)揮著不可替代的作用。雖然 Treg 細(xì)胞對(duì)于維持免疫穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要,但它們?cè)谝种瓢┌Y免疫中的抗腫瘤免疫反應(yīng)方面也起著核心作用。因此可通過(guò)耗竭Treg細(xì)胞來(lái)增加癌癥免疫療法的效果[3]。盡管已經(jīng)對(duì) Treg 細(xì)胞靶向治療的療效進(jìn)行了臨床前試驗(yàn)及臨床實(shí)驗(yàn),但 Treg 細(xì)胞耗竭引起的自身免疫性疾病仍然不容忽視[4-5]。Treg 細(xì)胞耗竭不僅會(huì)導(dǎo)致腫瘤浸潤(rùn)部位 Treg 細(xì)胞的丟失,還會(huì)導(dǎo)致外周 Treg 細(xì)胞的丟失,這可能會(huì)損害對(duì)自身抗原的免疫耐受性,從而導(dǎo)致自身免疫性疾病的發(fā)生。因此,最佳的 Treg 細(xì)胞靶向免疫療法應(yīng)選擇性地從 TME 中去除 Treg 細(xì)胞,同時(shí)保留外周 Treg 細(xì)胞,以預(yù)防自身免疫性疾病。隨著免疫檢查點(diǎn)阻斷(ICB)治療研究的深入,結(jié)直腸癌免疫耐藥機(jī)制逐漸明朗,新的預(yù)測(cè)性生物標(biāo)志物不斷涌現(xiàn)。目前正在積極開(kāi)展檢查免疫檢查點(diǎn)效果的臨床試驗(yàn),以期對(duì) mCRC 患者產(chǎn)生持久效果?；蚋淖?例如癌細(xì)胞中的驅(qū)動(dòng)基因改變,通過(guò)影響細(xì)胞因子/趨化因子環(huán)境和代謝微環(huán)境來(lái)募集和激活免疫抑制細(xì)胞,從而調(diào)節(jié) TME 中的免疫反應(yīng)[3]。因此,闡明癌細(xì)胞中的基因改變與癌癥患者個(gè)體的免疫反應(yīng)之間的關(guān)系可能有助于“免疫精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)”的發(fā)展,“免疫精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)”目前在分子靶向治療領(lǐng)域不斷發(fā)展,并可擴(kuò)展至癌癥免疫治療。本文通過(guò)總結(jié)Treg細(xì)胞的功能和表型,探討基于Treg細(xì)胞靶向治療結(jié)直腸癌的“免疫精準(zhǔn)醫(yī)療”的發(fā)展。

1 TME中的 Treg 細(xì)胞

1.1 Treg 細(xì)胞的特征 Treg 細(xì)胞最初被認(rèn)定為 CD4+T 細(xì)胞中的胸腺來(lái)源的免疫抑制細(xì)胞,在小鼠中具有高表達(dá)的 CD25 [白細(xì)胞介素 (IL)-2 受體 α 鏈][5],后來(lái)在人類(lèi)中得以發(fā)現(xiàn)。叉頭轉(zhuǎn)錄因子(Foxp3)是叉頭轉(zhuǎn)錄因子的一個(gè)亞家族成員,是Treg細(xì)胞最關(guān)鍵的細(xì)胞內(nèi)標(biāo)志物,也是Treg 細(xì)胞的主要調(diào)節(jié)因子[6-7]。目前,Treg細(xì)胞根據(jù)其發(fā)育部位分為天然調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和外周誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞[8-10]。研究發(fā)現(xiàn),相比正常結(jié)腸組織,腫瘤浸潤(rùn)組織中Treg細(xì)胞明顯增多,且與腫瘤的TNM分期呈正相關(guān),同時(shí)腫瘤組織CD4+T細(xì)胞中Foxp3、IL-10、TGF-β1的mRNA表達(dá)水平明顯升高[11],然而,外周誘導(dǎo)的 Treg 細(xì)胞的體內(nèi)功能和穩(wěn)定性尚不清楚,尤其是在人類(lèi)中。此外,人類(lèi) CD4+Foxp3+T 細(xì)胞在功能和表型上存在異質(zhì)性,因?yàn)槌Ｒ?guī) CD4+T細(xì)胞在 TCR 刺激后瞬時(shí)表達(dá) Foxp3[12-13],盡管Treg 細(xì)胞可被鑒定為表達(dá) Foxp3 的 CD4+小鼠中的 T 細(xì)胞。因此,有必要將人類(lèi)的 Treg 細(xì)胞與表達(dá) Foxp3 的常規(guī) T 細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。根據(jù) CD4、CD45RA、CD25 和(或)Foxp3的表達(dá),人類(lèi)表達(dá) Foxp3 的 CD4+T 細(xì)胞可分為幼稚/靜息 Treg 細(xì)胞、效應(yīng)/活化 Treg (eTreg) 細(xì)胞以及非Treg細(xì)胞。Foxp3+T 細(xì)胞很容易通過(guò) TCR 刺激從常規(guī) T 細(xì)胞中誘導(dǎo)出來(lái),但這類(lèi)細(xì)胞僅產(chǎn)生炎性細(xì)胞因子而不具備免疫抑制功能;然而,某些細(xì)胞因子或特定的微生物群會(huì)從 CD4+CD25-T 細(xì)胞誘導(dǎo)出具有免疫抑制功能的 Treg 細(xì)胞。相反,非 Treg 細(xì)胞不具備免疫抑制功能,而是產(chǎn)生炎性細(xì)胞因子,包括干擾素 (IFN)-γ 和 IL-17等[14-15]。

1.2 Treg 細(xì)胞的免疫抑制 Treg 細(xì)胞的免疫抑制功能通過(guò)多種機(jī)制介導(dǎo),包括共刺激信號(hào)的下調(diào)[16],IL-2 的消耗,分泌免疫抑制細(xì)胞因子(例如 IL-10 和 IL-35)[17]以及免疫抑制代謝物的產(chǎn)生。CTLA-4 對(duì)于 Treg 細(xì)胞抑制至關(guān)重要,它可以避免異常的自身免疫反應(yīng)并防止免疫反應(yīng)的過(guò)度激活以保護(hù)宿主免受自身免疫攻擊[18]。樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)與活化的eTreg細(xì)胞表達(dá)的CTLA-4結(jié)合,從而降低APC的CD80/86表達(dá),阻礙APC的成熟、下調(diào)APC上CD80/86的表達(dá)[19]。IL-2 是效應(yīng) T 細(xì)胞(包括 CD8+T 細(xì)胞)激活和存活所必需的。高親和力 IL-2 受體由3個(gè)亞基組成:α 鏈、β鏈和γ鏈,分別對(duì)應(yīng)CD25、CD122和CD132,大多數(shù)Treg 細(xì)胞表達(dá)高親和力CD25,因?yàn)?IL-2 受體信號(hào)對(duì)于 Treg 細(xì)胞功能維持及Foxp3 的誘導(dǎo)是不可或缺的[20]。Treg 細(xì)胞主要通過(guò)高親和力 IL-2 受體消耗 IL-2,幾乎不產(chǎn)生 IL-2,從而限制了TME中 IL-2 的數(shù)量。因此,效應(yīng)T細(xì)胞由于缺乏對(duì)其激活至關(guān)重要的IL-2而變得功能失調(diào)。IL-10和IL-35通過(guò)下調(diào)APC上主要組織相容性復(fù)合體(MHC)和共刺激分子的表達(dá)抑制效應(yīng)T細(xì)胞的功能和增殖[21]。Treg 細(xì)胞抑制抗腫瘤免疫反應(yīng),特別是腫瘤抗原特異性效應(yīng) T 細(xì)胞反應(yīng)。Treg 細(xì)胞在某些化學(xué)因子的趨化下聚集于TME中,在局部增殖分化成一個(gè)激活的亞群,強(qiáng)烈抑制腫瘤抗原特異性效應(yīng) T 細(xì)胞的激活和擴(kuò)增[22]。值得注意的是, TME 中的Treg 細(xì)胞比例的增高和效應(yīng) T 細(xì)胞(如 CD8+T 細(xì)胞)的增多與各種類(lèi)型癌癥患者的不良預(yù)后相關(guān)(包括黑色素瘤、非小細(xì)胞癌、胃癌和卵巢癌)[10,23]。但在結(jié)直腸癌中,腫瘤浸潤(rùn)性 Foxp3+T 細(xì)胞的預(yù)后價(jià)值仍存在爭(zhēng)議。然而,非 Treg 細(xì)胞的 Foxp3 低表達(dá)可能會(huì)誤導(dǎo)只針對(duì)Foxp3 表達(dá)的分析,因?yàn)槿祟?lèi) Foxp3+T 細(xì)胞同時(shí)包含 eTreg 細(xì)胞和非 Treg 細(xì)胞[3]。一些結(jié)直腸癌患者在 TME 中蓄積了較多 Foxp3+非 Treg 細(xì)胞,并伴有高水平的炎癥細(xì)胞因子,包括腫瘤壞死因子 (TNF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 (TGF)-β 和 IL-12,它們與良好的預(yù)后相關(guān)。與此同時(shí),TME 中存在大量真正的 Treg 細(xì)胞,尤其是 eTreg 細(xì)胞,與不良預(yù)后相關(guān),一些患者中幾乎檢測(cè)不到 Foxp3+非 Treg細(xì)胞,對(duì)上述其他類(lèi)型癌的研究中也證實(shí)了這一點(diǎn)[24]。除此之外,一些報(bào)告觀點(diǎn)指出,顆粒酶依賴性靶細(xì)胞殺傷是 Treg細(xì)胞介導(dǎo)的免疫抑制的另一種機(jī)制,此機(jī)制通過(guò)顆粒酶和穿孔素的分泌,介導(dǎo)自然殺傷細(xì)胞和細(xì)胞毒性 T 淋巴細(xì)胞 (CTL)進(jìn)行細(xì)胞溶解[25]。

Treg 細(xì)胞以抗原特異性方式在 TME 中擴(kuò)增,并具有不同于一般 CD4+T 細(xì)胞的 T 細(xì)胞受體 (TCR) 庫(kù)[26]。此外,最近研究表明,TME 中存在大量高度活化的和具有分化表型的 Treg 細(xì)胞[27]。Treg細(xì)胞通過(guò)缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)的功能強(qiáng)烈抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)。在代謝方面,抗腫瘤免疫細(xì)胞CD8+T 細(xì)胞主要采用糖酵解途徑進(jìn)行激活,癌細(xì)胞消耗葡萄糖可降低TME中的血糖水平(Warburg 效應(yīng)),從而阻礙CD8+T 細(xì)胞激活進(jìn)程[28]。同時(shí),Treg 細(xì)胞在 TME 中處理豐富的乳酸[29]和脂肪酸[30]進(jìn)行增殖并發(fā)揮其免疫抑制功能。在葡萄糖代謝升高的 TME 中,例如在肝轉(zhuǎn)移病灶,Treg 細(xì)胞被大量乳酸激活。因此,Treg 細(xì)胞獲得高 PD-1 表達(dá),并被抗 PD-1 mAb 治療進(jìn)一步激活,導(dǎo)致對(duì) PD-1/PD-L1 阻斷療法產(chǎn)生耐藥性[31]。

1.3 Treg 細(xì)胞的激活/分化 TME 中 Treg 細(xì)胞的激活/分化已通過(guò)在單細(xì)胞水平上對(duì)分子表達(dá)進(jìn)行多項(xiàng)綜合分析得到解決。ScRNAseq 分析表明,人類(lèi)腫瘤浸潤(rùn)性 Treg 細(xì)胞高度表達(dá)TNFRSF9,并且SOX4、HIVEP1和IRF4被確定為有助于表達(dá) TNFRSF9 的 Treg 細(xì)胞發(fā)育的轉(zhuǎn)錄因子[32]。此外,與黑色素瘤患者的CD8+T細(xì)胞和傳統(tǒng)CD4+T細(xì)胞相比,Treg細(xì)胞中趨化因子受體8(CCR8)、TNFRSF1B、TNFRSF18和TNFRSF4的基因表達(dá)水平更高[33]。而高頻率表達(dá)IL10、IKZF3和LAG3的 CD38+Treg 細(xì)胞與結(jié)直腸癌患者的不良預(yù)后相關(guān)[34]。通過(guò)一系列單細(xì)胞基因表達(dá)和表觀基因組分析,已經(jīng)證明轉(zhuǎn)錄因子 BATF 對(duì)于非小細(xì)胞肺癌 (NSCLC) 患者 TME 中 Treg 細(xì)胞的激活/分化至關(guān)重要[27]。其他轉(zhuǎn)錄因子(如 NR4A1 和 IRF4)對(duì) Treg 細(xì)胞的激活和分化同樣重要,以上二者與BATF共同作用,在腫瘤浸潤(rùn)的 eTreg 細(xì)胞中發(fā)揮“超級(jí)增強(qiáng)子”[35]的作用。

2 Treg 細(xì)胞與ICB

2.1 Treg 細(xì)胞靶向癌癥免疫療法 鑒于 Treg 細(xì)胞作為抗腫瘤免疫的免疫抑制劑的重要作用,各種 Treg 細(xì)胞靶向免疫療法已經(jīng)在臨床前和臨床研究中進(jìn)行了測(cè)試[36]。使用抗 CD25 抗體的 Treg 細(xì)胞靶向免疫療法的療效因癌癥類(lèi)型的不同而有所差異。此外,改變抗CD25抗體的亞類(lèi)可以進(jìn)一步增強(qiáng)抗腫瘤作用。如使用鼠的IgG2a 和 κ 恒定區(qū)替換原始 αCD25 的恒定區(qū),可以增強(qiáng)抗體依賴性細(xì)胞毒性 (ADCC) 活性,并有效消除小鼠中的腫瘤浸潤(rùn) Treg 細(xì)胞[37]。雖然 Treg 細(xì)胞耗竭或調(diào)節(jié) Treg 細(xì)胞的免疫抑制是增強(qiáng)潛在抗腫瘤免疫力的有前途的策略,但 Treg 細(xì)胞靶向免疫療法可能并非對(duì)所有腫瘤都有效。對(duì)Treg細(xì)胞生存和生長(zhǎng)至關(guān)重要的腫瘤需要通過(guò)生物標(biāo)志物來(lái)定義。此外,全身性Treg細(xì)胞耗竭可能會(huì)增加免疫相關(guān)不良事件(irAE)的風(fēng)險(xiǎn),如自身免疫[38]。為確保 Treg 細(xì)胞靶向免疫療法的安全性,應(yīng)采用 TME 中的選擇性 eTreg 細(xì)胞耗竭而非全身性 Treg 細(xì)胞耗竭,以提高抗腫瘤功效而,避免誘導(dǎo)有害的 irAE。為此,目前已經(jīng)使用全面的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)表達(dá)測(cè)定,特別是在單細(xì)胞水平上,對(duì)TME中Treg細(xì)胞具有選擇性表達(dá)模式的一些分子進(jìn)行了廣泛的檢測(cè)。例如,趨化因子受體4(CCR4)由eTreg細(xì)胞選擇性表達(dá);因此,抗CCR4抗體可以通過(guò)單獨(dú)消耗eTreg細(xì)胞的同時(shí)保留幼稚的Treg細(xì)胞來(lái)激活腫瘤抗原特異性CD8+T細(xì)胞[39]。此外,其他分子(如 CCR8 和 GARP)已從腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞的批量和單細(xì)胞 RNA 測(cè)序 (scRNAseq) 中被鑒定為腫瘤浸潤(rùn) Treg 細(xì)胞的特異性標(biāo)記,從而為新型 Treg 細(xì)胞免疫療法靶向藥物的開(kāi)發(fā)奠定基礎(chǔ)[40-41]。目前Treg被認(rèn)為是實(shí)現(xiàn)放療成功的重大障礙,因此建議將基于Treg細(xì)胞的免疫療法與放療結(jié)合使用,以實(shí)現(xiàn)最大的治療效果。

2.2 Treg 細(xì)胞耗竭與ICB ICB治療可以通過(guò)針對(duì)腫瘤引起的免疫缺陷來(lái)激活腫瘤病灶的免疫反應(yīng)并修復(fù)現(xiàn)有的免疫反應(yīng)。該療法下的患者可能會(huì)獲得持久療效,但長(zhǎng)期療效受限于治療過(guò)程中出現(xiàn)的耐藥機(jī)制。如在PD-1阻斷治療中,Treg細(xì)胞的生存和增殖功能依賴于TCR和CD28信號(hào)分子,故而PD-1阻斷可能激活Treg細(xì)胞的免疫抑制功能。同樣,PD-1 缺陷的 Treg 細(xì)胞具有很強(qiáng)的免疫抑制活性,以保護(hù)自身免疫表型[42],并且抑制 PD-1/PD-L1 信號(hào)傳導(dǎo)會(huì)導(dǎo)致早期 Treg 細(xì)胞動(dòng)員的增加,從而抑制感染引起的急性炎癥。有研究表明,在一些進(jìn)行抗 PD-1 mAb 治療的胃癌患者中,Treg 細(xì)胞介導(dǎo)的免疫抑制活性增強(qiáng),從而導(dǎo)致 PD-1 阻斷治療期間病情的過(guò)度進(jìn)展[43]。TME中的效應(yīng)T細(xì)胞和Treg細(xì)胞表達(dá)PD-1的平衡與PD-1/PD-L1阻斷療法的療效密切相關(guān),從而成為預(yù)測(cè)PD-1/PD療效的生物標(biāo)志物。此外,抗 GITR 抗體、抗 4-1BB 抗體或抗 GARP 抗體與抗 PD-1 抗體聯(lián)合消除 Treg 細(xì)胞可增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)的效果[44]。幾種影響Treg 細(xì)胞存活和功能的關(guān)鍵信號(hào)分子(如PI3K、c-Rel和LCK )抑制劑可增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)[45]。例如,PI3K 抑制劑通過(guò)選擇性耗竭Treg 細(xì)胞來(lái)增加具備腫瘤抗原特異性記憶 CD8+T 細(xì)胞的數(shù)量[46]。另一份報(bào)告表明,CARMA1-BCL10-MALT1 (CBM) 信號(hào)體復(fù)合物的功能障礙可通過(guò)將 Treg 細(xì)胞功能從免疫抑制改變?yōu)槊庖呒せ顏?lái)改善 PD-1 阻斷的臨床效果[47]?？偠灾?Treg 細(xì)胞靶向免疫療法不僅具有作為單一療法的潛力,而且還具有與 ICI (免疫檢查點(diǎn)抑制劑)聯(lián)合使用的潛力,包括 PD-1/PD-L1 阻斷療法。通過(guò)對(duì)腫瘤浸潤(rùn)性Tregs進(jìn)行的單細(xì)胞 RNA 測(cè)序,發(fā)現(xiàn)2個(gè)主要的腫瘤浸潤(rùn)性Tregs亞群,其中CCR8與 Treg 激活標(biāo)記物結(jié)合的獨(dú)特表達(dá)為高選擇性生物標(biāo)記物的靶向治療提供了可能。使用新生成的抗CCR8納米抗體-Fc融合體選擇性耗竭 CCR8+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,可導(dǎo)致腫瘤生長(zhǎng)顯著減緩,并表現(xiàn)出與抗PD-1療法協(xié)同的作用,從而提高抗腫瘤免疫的有效性和安全性[47]。同時(shí)也有研究顯示,CCR8+Treg的耗竭誘導(dǎo)了強(qiáng)效且更不易耗竭的CD4+和CD8+效應(yīng)T細(xì)胞,上調(diào)CD80/CD86在抗原呈遞細(xì)胞(APC)上的表達(dá),促進(jìn)腫瘤抗原特異性效應(yīng)/記憶CD8+T細(xì)胞的形成[48]。使用細(xì)胞消耗型抗 CCR8 單克隆抗體 (mAb) 選擇性地消除了多克隆腫瘤 Tregs,激發(fā)了抗腫瘤免疫反應(yīng),從而治愈了小鼠體內(nèi)已形成的腫瘤,并且不會(huì)引發(fā)有害的自身免疫反應(yīng)或免疫疾病?？傊?研究證實(shí) CCR8 是腫瘤組織中克隆性擴(kuò)展 Tregs的標(biāo)志物,抗 CCR8 mAb 治療在短期內(nèi)選擇性消除此類(lèi)多克隆 Tregs,可激發(fā)并維持較強(qiáng)的抗腫瘤免疫反應(yīng)[49]。

2.3 TME中的T細(xì)胞抑制與ICB的耐藥 TME 中的幾種因素會(huì)共同作用抑制免疫功能,包括Treg、IL-10、腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞 (TAM)、髓源性抑制細(xì)胞 (MDSC) 和相關(guān)細(xì)胞因子,這些因素均會(huì)影響 ICB 療效以及導(dǎo)致耐藥性的產(chǎn)生[50]。當(dāng) TME 中存在某些特定的非腫瘤細(xì)胞 (NTC) 時(shí),盡管有足夠的 CD8+T 細(xì)胞浸潤(rùn)和 IFN-γ 反應(yīng),但 ICB 仍會(huì)出現(xiàn)治療耐藥性。具有調(diào)節(jié)局部免疫功能能力的Tregs和MDSCs被認(rèn)為是NTCs的代表。當(dāng) Treg 或 MDSC 存在于 TME 中時(shí),它們會(huì)導(dǎo)致針對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫反應(yīng)降低。研究表明,TME 中 MDSC 或 Treg 的耗竭可以逆轉(zhuǎn) ICB 治療耐藥性,腫瘤細(xì)胞及其周?chē)|(zhì)可以共同調(diào)節(jié)免疫抑制微環(huán)境,從而導(dǎo)致對(duì) ICB 治療產(chǎn)生耐藥性[51-53]。

3 Treg 細(xì)胞在 ICI 免疫治療中的作用

Treg 細(xì)胞靶向免疫療法和 ICI 的組合可以提高治療效果。抗 CTLA-4 mAb 可作用于 CD4+和 CD8+效應(yīng) T 細(xì)胞并重新激活其腫瘤免疫功能,然而,據(jù)報(bào)道,抗 CTLA-4 單克隆抗體的抗腫瘤功效隨著抗 CTLA-4 單克隆抗體 Fc 部分的耗盡而終止,這對(duì)于通過(guò) ADCC 活性耗盡 Treg 細(xì)胞的方法至關(guān)重要,表明Treg細(xì)胞TME 中的耗竭是抗 CTLA-4 mAb 的重要抗腫瘤機(jī)制[54]。目前已經(jīng)成功制備出一種攜帶新的抗CTLA-4抗體的溶瘤病毒,以增強(qiáng)Treg細(xì)胞耗竭的效力[55]。此外,由抗CTLA-4mAb單體和信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α(SIRPα)組成的異二聚體抗體通過(guò)阻斷SIRPα-CD47信號(hào),增強(qiáng)Treg細(xì)胞耗竭效力[56]。因此,抗CTLA-4 mAb的抗腫瘤作用主要是由于其特異的消除了TME中表達(dá)CTLA-4的Treg細(xì)胞。

4 TME中癌基因的改變與Treg細(xì)胞的調(diào)節(jié)

新抗原是由腫瘤細(xì)胞突變基因編碼的新抗原,是一種主要由基因點(diǎn)突變、缺失突變和基因融合產(chǎn)生的異常肽。其結(jié)構(gòu)不同于正常細(xì)胞表達(dá)的結(jié)構(gòu)[57]。在抗腫瘤免疫的壓力下,腫瘤抗原減少或丟失。這個(gè)過(guò)程被稱(chēng)為抗原調(diào)節(jié),使腫瘤細(xì)胞能夠逃避免疫識(shí)別和殺傷。腫瘤疫苗目前也是研究的一大熱點(diǎn)。目的是將腫瘤抗原(包括腫瘤細(xì)胞、腫瘤相關(guān)蛋白或多肽、表達(dá)腫瘤抗原的基因)引入患者體內(nèi),增強(qiáng)免疫原性,激活患者自身免疫系統(tǒng),誘導(dǎo)機(jī)體免疫反應(yīng),從而控制或消除腫瘤[58]。癌細(xì)胞中的基因改變可調(diào)節(jié) TME 中的免疫狀態(tài)。在小鼠癌癥(鱗狀細(xì)胞癌)模型中,粘著斑激酶 (FAK) 通過(guò)調(diào)節(jié)TME中 CCL5 的表達(dá)和 CD8+T細(xì)胞的耗竭來(lái)募集Treg細(xì)胞。FAK 抑制劑通過(guò)抑制 Treg 細(xì)胞募集來(lái)增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)。在人體中,EGFR(表皮生長(zhǎng)因子受體)突變的 NSCLC具有免疫抑制性的 TME(高水平的 Treg 細(xì)胞和低水平的 CD8+T 細(xì)胞)。NSCLC 細(xì)胞增加 CCL22 的表達(dá),吸引 TME 中的 Treg 細(xì)胞,而CD8+T 細(xì)胞通過(guò)抑制 CXCL10 和 CCL5 的產(chǎn)生來(lái)減少Treg細(xì)胞的浸潤(rùn)。EGFR-TKI(酪氨酸激酶抑制劑)治療通過(guò)抑制 NSCLC 細(xì)胞產(chǎn)生 CCL22 來(lái)減少 TME 中的 Treg 細(xì)胞。抑制 EGFR 信號(hào)傳導(dǎo)可提高抗 PD-1 抗體在EGFR突變腫瘤動(dòng)物模型中的治療效果[59]。在胃癌患者中,與CD8+T 細(xì)胞相比,具有RHOA突變的癌細(xì)胞(胃癌的驅(qū)動(dòng)基因)產(chǎn)生的游離脂肪酸被 Treg 細(xì)胞有效吸收,從而導(dǎo)致 TME 中 Treg 細(xì)胞的增加。此外,RHOA突變的癌細(xì)胞產(chǎn)生的 CXCL10 和 CXCL11 水平低于正常細(xì)胞。富集于TME中的 Treg 細(xì)胞在一定程度上削弱了胃癌患者的抗腫瘤免疫反應(yīng)[60]。因此,在一些致癌驅(qū)動(dòng)突變的癌癥中,癌癥免疫療法和調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞內(nèi)在信號(hào)的分子靶向療法相結(jié)合,可能為癌癥免疫療法有效恢復(fù)抗腫瘤免疫反應(yīng)創(chuàng)造條件。

5 未來(lái)與展望

Treg 細(xì)胞對(duì)維持免疫穩(wěn)態(tài)有很大貢獻(xiàn)。在癌癥環(huán)境中,Treg 細(xì)胞還在癌細(xì)胞的免疫逃逸中發(fā)揮重要作用。因此,Treg 細(xì)胞的選擇性耗竭增強(qiáng)了多種癌癥類(lèi)型的抗腫瘤免疫反應(yīng)。然而,通過(guò)Treg 細(xì)胞耗竭提供抗腫瘤免疫力的有效性仍不能保證,并可能誘發(fā)有害的 irAE,因此,迫切需要開(kāi)發(fā)生物標(biāo)志物,通過(guò)分析患者的標(biāo)本來(lái)區(qū)分應(yīng)答者和非應(yīng)答者,并開(kāi)發(fā)新型的選擇性的Treg細(xì)胞靶向療法,而新分子的發(fā)現(xiàn)關(guān)乎在單細(xì)胞水平探索 TME 中 Treg 細(xì)胞的最新實(shí)驗(yàn)技術(shù)。此外,通過(guò)控制趨化因子環(huán)境和代謝微環(huán)境,各種基因改變參與建立免疫抑制性 TME,包括豐富的 Treg 細(xì)胞。未來(lái)可能會(huì)開(kāi)發(fā)出基于癌細(xì)胞基因改變的Treg細(xì)胞靶向治療,誘導(dǎo)Treg細(xì)胞的激活/分化。