高麗 李文華 谷麗麗

作者單位?河南省直第三人民醫(yī)院（鄭州 450000），E-mail：gaoliqm1985@163.com

引用信息?高麗，李文華，谷麗麗.急性腦梗死病人血清miR-25表達(dá)水平及其對(duì)近期預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2024，22（7）：1327-1330.

摘要?目的：探討急性腦梗死病人血清miR-25表達(dá)及其對(duì)近期預(yù)后不良的預(yù)測(cè)價(jià)值。方法：將2020年5月—2022年1月本院收治的179例急性腦梗死病人設(shè)為研究組，另將同期在本院體檢的163例健康體檢者設(shè)為對(duì)照組，均行血清miR-25表達(dá)水平檢測(cè)并對(duì)比。隨訪3個(gè)月，根據(jù)改良Rankin量表（mRS）評(píng)分將研究組分為預(yù)后良好組（mRS評(píng)分≤2分）和預(yù)后不良組（mRS評(píng)分＞2分），對(duì)比預(yù)后良好組與預(yù)后不良組血清miR-25表達(dá)水平。采用Logistic回歸分析法分析急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的影響因素；采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清miR-25表達(dá)水平對(duì)急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的預(yù)測(cè)價(jià)值。結(jié)果：研究組血清miR-25表達(dá)水平低于對(duì)照組（P＜0.05）。急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的發(fā)生率為42.46%，預(yù)后不良組年齡、心房顫動(dòng)比例、入院美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院卒中量表（NIHSS）評(píng)分、梗死體積、發(fā)病至治療時(shí)間、血清胱抑素C（CysC）水平均高于預(yù)后良好組，血清miR-25表達(dá)水平低于預(yù)后良好組（P＜0.05）。年齡、心房顫動(dòng)、入院NIHSS評(píng)分、梗死體積、發(fā)病至治療時(shí)間、血清CysC水平、血清miR-25表達(dá)水平均是急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的影響因素（P＜0.05）。血清miR-25表達(dá)水平預(yù)測(cè)急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的最佳截?cái)嘀?、敏感度、特異度、ROC曲線下面積（AUC）分別是0.640、72.37%、65.05%、0.731。結(jié)論：急性腦梗死病人血清miR-25表達(dá)水平降低，且為急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的影響因素，對(duì)近期預(yù)后不良有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值。

關(guān)鍵詞?急性腦梗死；血清miR-25；預(yù)后不良；影響因素；預(yù)測(cè)價(jià)值

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.07.032

急性腦梗死是指因腦血流減少或中斷所導(dǎo)致的腦組織缺血性壞死，臨床多表現(xiàn)為頭痛、頭暈、吞咽困難、言語(yǔ)不清等癥狀，且隨著病情的進(jìn)一步發(fā)展，可引起偏癱、意識(shí)障礙、呼吸驟停等，嚴(yán)重威脅著病人的生命安全［1］。急性腦梗死起病突然且病情進(jìn)展較快，若不能及時(shí)診治，則預(yù)后較差，后期病死率、致殘率較高［2］。因此，尋找能有效預(yù)測(cè)急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的相關(guān)指標(biāo)以指導(dǎo)臨床干預(yù)具有重要意義。微小RNA（miRNA）因其檢測(cè)精準(zhǔn)、不易降解的特點(diǎn)已作為多種疾病的生物標(biāo)志物被廣泛研究，既往報(bào)道顯示，miR-409-3p、miR-133等miRNA已應(yīng)用到急性腦梗死的相關(guān)研究中［3-4］。miR-25作為miRNA家族中的一員，已有研究證實(shí)，其在心腦血管中發(fā)揮著重要作用［5］。Guo等［6］研究發(fā)現(xiàn)缺血皮質(zhì)中miR-25的增加能促進(jìn)腦缺血后成人神經(jīng)干細(xì)胞的增殖，提示miR-25能修復(fù)腦神經(jīng)損傷；Kuang等［7］研究顯示，miR-25能提高自噬通量，進(jìn)而誘導(dǎo)臨床腦卒中模型的神經(jīng)保護(hù)。以上研究均表明，miR-25對(duì)腦損傷病人的神經(jīng)功能有保護(hù)及修復(fù)的功能，但miR-25在急性腦梗死病人體內(nèi)的表達(dá)情況及其對(duì)病人近期預(yù)后不良的預(yù)測(cè)效能相關(guān)研究較少。鑒于此，本研究選取179例急性腦梗死病人，通過(guò)檢測(cè)血清miR-25表達(dá)水平，探討其與急性腦梗死近期預(yù)后不良的關(guān)系，并分析其預(yù)測(cè)價(jià)值，以為臨床預(yù)防急性腦梗死病人近期預(yù)后不良提供參考依據(jù)。

1?資料與方法

1.1?一般資料

選取2020年5月—2022年1月本院收治的179例急性腦梗死病人設(shè)為研究組，另選取同期在本院體檢的163名健康體檢者設(shè)為對(duì)照組。研究組，男102例，女77例；年齡42～78（64.92±9.26）歲。對(duì)照組，男85名，女78名；年齡38～76（63.15±8.75）歲。兩組性別、年齡比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。研究組納入標(biāo)準(zhǔn)：1）符合《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南2018》［8］中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)：急性起病；一側(cè)面部或肢體無(wú)力、語(yǔ)言障礙等局灶性神經(jīng)功能缺損，少數(shù)表現(xiàn)為全面性神經(jīng)功能缺損；入院后影像學(xué)檢查顯示責(zé)任病灶或癥狀/體征持續(xù)超過(guò)24 h；排除非血管性病因；頭部CT/磁共振成像（MRI）排除腦出血；2）初次發(fā)作；3）于發(fā)病后24 h內(nèi)就診；4）病人知曉本研究并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：1）合并有惡性腫瘤或心血管疾??；2）存在顱內(nèi)感染、腦出血、顱內(nèi)腫瘤等其他顱內(nèi)疾病；3）存在嚴(yán)重的器官功能不全；4）入院前1周使用過(guò)抗凝藥物；5）既往有意識(shí)障礙或精神病史；6）妊娠或哺乳期婦女。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

1.2?方法

1.2.1?一般資料收集

1）收集病人的年齡、吸煙史、飲酒史、高血壓病史、心房顫動(dòng)病史等資料，詢問(wèn)記錄病人的發(fā)病至治療時(shí)間，并在病人入院時(shí)行神經(jīng)功能缺損［美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表（NIHSS）］［9］評(píng)定：量表共11項(xiàng)評(píng)估項(xiàng)目，評(píng)分范圍0～42分，分?jǐn)?shù)越高表示神經(jīng)功能受損越嚴(yán)重。2）根據(jù)病人的頭部CT計(jì)算梗死體積：梗死體積＝長(zhǎng)×寬×層數(shù)×π/6。3）抽取病人入院后第2天空腹靜脈血5 mL，室溫下靜置30 min后用離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速3 000 r/min，時(shí)間10 min，取上清液置于－20 ℃環(huán)境中低溫保存待測(cè)，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清中的空腹血糖（FBG）、血肌酐（Scr）、胱抑素C（CysC）水平，試劑盒由上海機(jī)純實(shí)業(yè)有限公司提供。

1.2.2?血清miR-25表達(dá)水平檢測(cè)

采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qRT-PCR）法檢測(cè)兩組受試者的血清miR-25表達(dá)水平。提取待測(cè)血清中的總RNA，測(cè)定RNA的濃度及純度；反應(yīng)體系：PrimeScript RT Enzyme Mix 1 μL，5×PrimeScript Buffer 7 μL，RNA模板6 μL，無(wú)RNA酶水2 μL，總反應(yīng)體積25 μL，反應(yīng)條件為40 ℃ 60 min，85 ℃ 4 min；以U6為內(nèi)參，正向引物0.8 μL，反向引物0.8 μL，合成的cDNA為模板，反應(yīng)體系為SYRR Green Mix 9 μL，cDNA模板2 μL，無(wú)RNA酶水7 μL，Rox Reference Dye 0.4 μL，反應(yīng)總體積20 μL，反應(yīng)條件為95 ℃ 10 min，95 ℃ 5 s，60 ℃ 60 s，共40個(gè)循環(huán)，進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)。U6正向引物序列為5′-TGACTTACGTGTACTCCGTG-3′，反向引物序列為5′-GGCTAGCGTGCATAGGAGTC-3′；miR-25正向引物序列為5′-GCGGCACGTGATATCCCGTG-3′，反向引物序列為5′-CCGCTGATCACGTACATGCA-3′。采用2－△△CT法計(jì)算血清miR-25相對(duì)表達(dá)量。

1.2.3?研究方法

依據(jù)《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南2018》中的治療流程統(tǒng)一給予入院病人吸氧、心電監(jiān)護(hù)、血壓及血糖控制等基礎(chǔ)治療，并給予改善腦循環(huán)、降脂及神經(jīng)保護(hù)等特異性治療。于病人入院后90 d應(yīng)用改良Rankin（mRS）量表［10］評(píng)價(jià)病人的預(yù)后情況，≤2分者納入預(yù)后良好組，＞2分者納入預(yù)后不良組。比較研究組與對(duì)照組、預(yù)后不良組與預(yù)后良好組血清miR-25表達(dá)水平。

1.3?統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 25.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）描述，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；定性資料以例數(shù)、百分比（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；采用Logistic多元回歸分析急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的影響因素；采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清miR-25表達(dá)水平對(duì)急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的預(yù)測(cè)價(jià)值。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2?結(jié)?果

2.1?研究組與對(duì)照組血清miR-25表達(dá)水平比較

研究組血清miR-25表達(dá)水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見(jiàn)表1。

表1?研究組與對(duì)照組血清miR-25表達(dá)水平比較（x±s）

組別樣本量miR-25

研究組1790.64±0.05

對(duì)照組1630.88±0.12

注：兩組比較，t＝－24.525，P＜0.05。

2.2?預(yù)后不良組與預(yù)后良好組一般資料及血清miR-25表達(dá)水平比較

179例急性腦梗死病人中，預(yù)后不良76例，發(fā)生率為42.46%。預(yù)后不良組年齡、心房顫動(dòng)比例、入院NIHSS評(píng)分、梗死體積、發(fā)病至治療時(shí)間、血清CysC水平均高于預(yù)后良好組，血清miR-25表達(dá)水平低于預(yù)后良好組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見(jiàn)表2。

2.3?急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的影響因素

以年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓、心房顫動(dòng)、入院NIHSS評(píng)分、梗死體積、發(fā)病至治療時(shí)間、FBG、CysC、Scr、miR-25為自變量，以近期預(yù)后不良為因變量，變量賦值見(jiàn)表3。Logistic回歸分析結(jié)果顯示：年齡、心房顫動(dòng)、入院NIHSS評(píng)分、梗死體積、發(fā)病至治療時(shí)間、血清CysC水平、血清miR-25表達(dá)水平均是急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的影響因素（P＜0.05）。詳見(jiàn)表4。

2.4?血清miR-25表達(dá)水平對(duì)急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的預(yù)測(cè)價(jià)值

血清miR-25表達(dá)水平預(yù)測(cè)急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的最佳截?cái)嘀禐?.640，敏感度為72.37%，特異度為65.05%，AUC為0.731［95%CI（0.659，0.794］。詳見(jiàn)圖1。

3?討?論

近年來(lái)，隨著生活習(xí)慣、社會(huì)環(huán)境等變化，急性腦梗死在40～80歲的中老年人群中呈高發(fā)狀態(tài)。既往調(diào)查發(fā)現(xiàn)，急性腦梗死難以治愈且病情發(fā)展較快，若不及時(shí)診治，病死率可達(dá)25%左右，且多數(shù)病人預(yù)后不良，致殘率較高［11］。本研究中急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的發(fā)生率為42.46%，與段慶希等［12］報(bào)道的41.67%相當(dāng)，提示急性腦梗死病人近期預(yù)后不良比例較高，探討其影響因素及相關(guān)預(yù)測(cè)因子十分必要。

本研究中，研究組血清miR-25表達(dá)水平低于對(duì)照組，提示急性腦梗死病人miR-25含量降低。miRNA是一類長(zhǎng)度在21～25個(gè)核苷酸之間的非編碼微小RNA，其通過(guò)控制轉(zhuǎn)錄和翻譯參與了機(jī)體內(nèi)幾乎所有的生物過(guò)程，既往研究顯示，miRNA在腦動(dòng)脈的生理和病理調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用［13］，因此，miRNA可能為急性腦梗死的生物標(biāo)志物。miR-25是常見(jiàn)的癌癥相關(guān)調(diào)節(jié)因子，在胃癌、肺癌、食管癌、乳腺癌等多種癌癥的發(fā)展中均起著促進(jìn)作用［14］。miR-25在急性腦梗死中的作用機(jī)制尚不明確，但Cao等［15］通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)，用大黃素升高了miR-25的表達(dá)水平，從而減弱了因缺氧引發(fā)的細(xì)胞損傷，推測(cè)miR-25對(duì)腦組織具有保護(hù)作用。此外，本研究發(fā)現(xiàn)預(yù)后不良組血清miR-25表達(dá)水平低于預(yù)后良好組，且經(jīng)進(jìn)一步Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，血清miR-25表達(dá)水平為急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的影響因素。急性腦梗死預(yù)后不良主要為腦組織損傷所致，而Zhou等［16］研究報(bào)道，miR-25可通過(guò)抑制組蛋白去乙?；?（HDAC3）和Ataxin-3（ATXN3）來(lái)預(yù)防腦卒中模型大鼠的神經(jīng)元損傷并能促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)，所以miR-25有助于改善急性腦梗死病人預(yù)后。ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)血清miR-25表達(dá)水平預(yù)測(cè)急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的敏感度為72.37%，特異度為65.05%，AUC為0.731，提示血清miR-25表達(dá)水平對(duì)急性腦梗死病人近期預(yù)后不良具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值。因此，對(duì)于急性腦梗死病人，臨床可采用生物標(biāo)志物預(yù)測(cè)的方式對(duì)其病情進(jìn)行監(jiān)測(cè)，及時(shí)診治，降低其預(yù)后不良的風(fēng)險(xiǎn)。

此外，本研究發(fā)現(xiàn)，年齡、心房顫動(dòng)、入院NIHSS評(píng)分、梗死體積、發(fā)病至治療時(shí)間、CysC均是急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的影響因素。機(jī)體各項(xiàng)功能隨著年齡的增加逐漸減退，使得病人在發(fā)生急性腦梗死后恢復(fù)所需時(shí)間更長(zhǎng)且預(yù)后較差。心房顫動(dòng)易產(chǎn)生房?jī)?nèi)血栓，血栓通過(guò)血液循環(huán)進(jìn)入腦血管造成血管阻塞，發(fā)生腦梗死，既往調(diào)查顯示，心房顫動(dòng)病史的人群發(fā)生急性腦梗死的概率更高且易復(fù)發(fā)［17］。NIHSS評(píng)分能反映急性腦梗死病人神經(jīng)功能的受損程度，NIHSS評(píng)分越高，說(shuō)明受損越嚴(yán)重，預(yù)后越差。梗死體積越大的病人在急性期越易出現(xiàn)腦水腫、顱壓升高、梗死后出血等癥狀，病人死亡率較高且預(yù)后較差［18］。急性腦梗死病情進(jìn)展迅速，病人預(yù)后情況與是否能接受及時(shí)診治關(guān)系密切，發(fā)病至治療時(shí)間間隔越長(zhǎng)，病人病情越嚴(yán)重，預(yù)后效果越差。CysC可通過(guò)促進(jìn)炎癥反應(yīng)和血管損傷來(lái)參與急性腦梗死的發(fā)生發(fā)展，已有研究顯示

，重癥急性腦梗死病人體內(nèi)CysC水平升高［19］。因此，建議臨床加強(qiáng)上述影響因素中可調(diào)控因素的監(jiān)控，以降低急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的比例。

綜上所述，急性腦梗死病人的血清miR-25表達(dá)水平低于健康者，對(duì)于近期預(yù)后不良的病人其水平更低，且為急性腦梗死病人近期預(yù)后不良的影響因素，并對(duì)急性腦梗死病人近期預(yù)后不良有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，可作為臨床監(jiān)控指標(biāo)，指導(dǎo)預(yù)后不良的判斷和治療。

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（收稿日期：2022-08-10）

（本文編輯王麗）