劉麗榮 胡家沅

【摘要】 目的：探究痰嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）、血清EOS表達(dá)水平與慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者病情及預(yù)后的關(guān)系。方法：選取2020年6月—2022年6月瑞金市人民醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科收治的62例COPD患者作為病例組，依據(jù)不同疾病進(jìn)展將病例組患者再次分為急性加重期組（30例）和穩(wěn)定期組（32例），依據(jù)預(yù)后情況將病例組患者分為死亡組（12例）和生存組（50例），另選取同期來(lái)本院體檢的健康者30例作為對(duì)照組，比較各組痰EOS、血清EOS表達(dá)水平，分析上述指標(biāo)與COPD嚴(yán)重程度的關(guān)系。結(jié)果：在痰EOS、血清EOS表達(dá)水平比較上，急性加重期組>穩(wěn)定期組>對(duì)照組（P<0.05）。病例組GOLD分級(jí)Ⅲ+Ⅳ級(jí)患者痰EOS、血清EOS表達(dá)水平均高于Ⅰ+Ⅱ級(jí)患者（P<0.05）。病例組死亡患者痰EOS、血清EOS表達(dá)水平均高于生存患者（P<0.05）。痰EOS的cut off值為19.55×105/mL時(shí)，其診斷COPD患者預(yù)后的敏感度、特異度、AUC分別為83.33%、76.00%、0.850[95%CI（0.737，0.928）]；血清EOS的cut off值為276.23×105/mL時(shí)，其診斷COPD患者預(yù)后的敏感度、特異度、AUC分別為75.00%、62.00%、0.747[95%CI（0.620，0.849）]。結(jié)論：痰EOS、血清EOS表達(dá)水平可反映COPD的病情進(jìn)展情況，可用于臨床COPD患者的預(yù)后評(píng)估。

【關(guān)鍵詞】 慢性阻塞性肺疾病 誘導(dǎo)痰 嗜酸性粒細(xì)胞 血清

Exploration of the Relationship between the Expression of Levels of Eosinophils in Sputum and Serum and the Condition and Prognosis of COPD Patients/LIU Lirong， HU Jiayuan. //Medical Innovation of China， 2024， 21（12）： -134

[Abstract] Objective： To explore the relationship between the expression of sputum eosinophils （EOS） and serum EOS expression levels and the condition and prognosis of patients with chronic obstructive pulmonary disease （COPD）. Method： A total of 62 patients with COPD admitted to Department of Respiratory and Critical Care Medicine， Ruijin People's Hospital from June 2020 to June 2022 were selected as the case group. The patients in the case group were again divided into acute exacerbation group （30 cases） and stable stage group （32 cases） according to the progress of the disease. The patients in the case group were divided into death group （12 cases） and survival group （50 cases） according to the prognosis. In addition， 30 healthy people who came to our hospital for physical examination at the same time were selected as the control group， and the expression levels of EOS in sputum and serum in each group were compared， the relationship between the above indicators and the severity of COPD were analyzed. Result： In terms of the expression levels of sputum EOS and serum EOS， the acute exacerbation group > stable stage group > control group （P<0.05）. The expression levels of EOS in sputum and serum of patients with GOLD grade Ⅲ + Ⅳ in the case group were higher than those of patients with GOLD grade Ⅰ + Ⅱ （P<0.05）. The expression levels of EOS in sputum and serum of the deceased patients in the case group were higher than those of the surviving patients （P<0.05）. The cut off value of sputum EOS was 19.55×105/mL， its sensitivity， specificity and AUC for diagnosis of COPD were 83.33%， 76.00% and 0.850 [95%CI （0.737， 0.928）]; the cut off value of serum EOS was 276.23×105/mL， its sensitivity， specificity and AUC for diagnosis of COPD were 75.00%， 62.00% and 0.747 [95%CI （0.620， 0.849）]. Conclusion： The expression of EOS in sputum and serum can reflect the progress of COPD and can be used in the prognosis evaluation of clinical COPD patients.

[Key words] Chronic obstructive pulmonary disease Induced sputum Eosinophils Serum

First-author's address： Department of Respiratory and Critical Care Medicine， Ruijin People's Hospital， Ruijin 342500， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2024.12.030

慢性阻塞性肺疾?。–OPD）為一種以氣流阻塞為特征的慢性炎癥，肺臟為其主要累及臟器，隨著疾病的進(jìn)展可發(fā)展為肺心病、呼吸衰竭等多種慢性病，與有害氣體、顆粒引起的異常炎癥反應(yīng)緊密相關(guān)[1]。患者多表現(xiàn)出呼吸困難、喘息、胸悶及咳痰等癥狀，極大地影響著其生活質(zhì)量[2]。同時(shí)，COPD疾病后期會(huì)引發(fā)諸如心血管病、高血壓及骨質(zhì)疏松等并發(fā)癥，嚴(yán)重影響著患者的健康[3]。因此，如何更早地預(yù)測(cè)COPD患者疾病預(yù)后，對(duì)患者予以針對(duì)性的個(gè)體化治療，臨床意義重大。氣道炎癥在COPD發(fā)病過(guò)程中持續(xù)存在，嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）為人體固有的免疫炎癥細(xì)胞，其能夠調(diào)節(jié)固有免疫應(yīng)答，促進(jìn)炎癥介質(zhì)的釋放，加重氣道炎癥反應(yīng)及組織損傷[4]。數(shù)據(jù)顯示，COPD患者中有32%～40%存在EOS升高，同時(shí)血清EOS可以預(yù)測(cè)COPD患者能否從糖皮質(zhì)激素治療中獲益[5-6]。目前已經(jīng)被報(bào)道過(guò)的氣道炎癥指標(biāo)包括血清EOS及痰EOS等[7]，其中痰EOS因?yàn)闊o(wú)創(chuàng)性在氣道炎癥的觀察中使用頻次較高，而有學(xué)者則認(rèn)為外周血EOS比例≥2%是一個(gè)能預(yù)測(cè)COPD患者未來(lái)急性加重風(fēng)險(xiǎn)的臨界值指標(biāo)[8]?，F(xiàn)階段臨床對(duì)于痰EOS、血清EOS表達(dá)與COPD病情關(guān)系的研究報(bào)道均較少見。本研究特對(duì)COPD患者痰EOS、血清EOS表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，旨在研究上述指標(biāo)水平與COPD嚴(yán)重程度的關(guān)系，以期為臨床CPOD診斷與治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年6月—2022年6月瑞金市人民醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科收治的62例COPD患者作為病例組，病例組按照慢性阻塞性肺疾病全球倡議（GOLD）分級(jí)分為Ⅰ+Ⅱ級(jí)31例，Ⅲ+Ⅳ級(jí)31例。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①確診COPD[9]，并經(jīng)胸部X線檢查未見感染灶，肺紋理增粗不典型；②研究所需資料完善。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①入組前1個(gè)月內(nèi)接受過(guò)影響誘導(dǎo)痰EOS、血清EOS表達(dá)的治療手段；②合并其他呼吸系統(tǒng)疾??；③有結(jié)核病史或艾滋病感染。依據(jù)不同COPD進(jìn)展將病例組分為急性加重期組（30例）和穩(wěn)定期組（32例）。另選取同期來(lái)本院體檢的健康者30例作為對(duì)照組。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)吸煙飲酒史、無(wú)過(guò)敏性疾病史、近4周內(nèi)無(wú)呼吸道感染史。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：臨床資料不完善、年齡<18歲、處于妊娠期或哺乳期。本研究已經(jīng)瑞金市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批。研究對(duì)象均知情同意本研究。

1.2 方法

1.2.1 痰標(biāo)本收集及測(cè)定 受檢者均預(yù)防性吸入400 μg沙丁胺醇，超聲霧化吸入2%、3%、4%高滲鹽水各10 mL，霧化7 min。用無(wú)菌干燥培養(yǎng)皿收集咳出痰液，挑取出黏液部分在4 ℃、1 500 r/min離心2 min，上清液存于無(wú)菌干燥試管中待測(cè)，其余部分予以二硫蘇糖醇處置，沉淀則用1 000 μL磷酸鹽緩沖液處理，細(xì)胞離心涂片器行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

1.2.2 血清標(biāo)本 采集受檢者空腹外周靜脈血3 mL，通過(guò)流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)來(lái)檢測(cè)細(xì)胞計(jì)數(shù)。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）分析急性加重期組、穩(wěn)定期組及對(duì)照組痰EOS、血清EOS表達(dá)水平。（2）病例組不同GOLD分級(jí)患者痰EOS、血清EOS表達(dá)水平。（3）對(duì)病例組患者出院后進(jìn)行為期1年的隨訪，記錄病例組患者出院后1年的生存情況，依據(jù)病例組患者預(yù)后情況分為生存組和死亡組，比較兩組痰EOS、血清EOS表達(dá)水平。（4）分析痰EOS、血清EOS在COPD患者預(yù)后中的診斷效能。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 20.0軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以（x±s）表示，兩組樣本行t檢驗(yàn)，三組樣本采用單因素方差分析，組間兩兩比較行LSD-t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，行字2檢驗(yàn)；繪制ROC曲線分析痰EOS、血清EOS表達(dá)在COPD患者預(yù)后中的診斷效能。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 各組基線資料比較

急性加重期組男18例，女12例；年齡48～75歲，平均（68.23±3.19）歲；體重指數(shù)18.23～24.18 kg/m2，

平均（22.65±2.23）kg/m2；病程2～7年，平均（4.25±1.00）年；GOLD分級(jí)：Ⅰ+Ⅱ級(jí)14例，Ⅲ+Ⅳ級(jí)16例。穩(wěn)定期組男20例，女12例；年齡48～74歲，平均（68.31±3.10）歲；體重指數(shù)18.00～24.20 kg/m2，平均（22.50±2.41）kg/m2；病程2～7年，平均（4.44±0.98）年；GOLD分級(jí)：Ⅰ+Ⅱ級(jí)17例，Ⅲ+Ⅳ級(jí)15例。對(duì)照組男18例，女12例；年齡47～76歲，平均（68.10±3.40）歲；體重指數(shù)18.34～24.11 kg/m2，平均（22.43±2.50）kg/m2。急性加重期組、穩(wěn)定期組和對(duì)照組性別、年齡及體重指數(shù)均衡可比（P>0.05）。

2.2 各組EOS水平比較

在痰EOS、血清EOS表達(dá)水平比較上，急性加重期組>穩(wěn)定期組>對(duì)照組（P<0.05），見表1。

2.3 病例組不同GOLD分級(jí)患者EOS表達(dá)水平比較

病例組GOLD分級(jí)Ⅲ～Ⅳ級(jí)患者痰EOS、血清EOS表達(dá)水平均高于Ⅰ～Ⅱ級(jí)患者（P<0.05），見表2。

2.4 不同預(yù)后患者EOS表達(dá)水平比較

病例組死亡患者痰EOS、血清EOS表達(dá)水平均高于生存患者（P<0.05），見表3。

表2 病例組不同GOLD分級(jí)患者EOS表達(dá)水平比較

2.5 痰EOS、血清EOS表達(dá)對(duì)COPD患者預(yù)后的診斷價(jià)值

痰EOS的cut off值為19.55×105/mL時(shí)，其診斷COPD患者預(yù)后的敏感度、特異度、AUC分別為83.33%、76.00%、0.850[95%CI（0.737，0.928）]；血清EOS的cut off值為276.23×105/mL時(shí)，其診斷COPD患者預(yù)后的敏感度、特異度、AUC分別為75.00%、62.00%、0.747[95%CI（0.620，0.849）]。見圖1及表4。

圖1 痰EOS、血清EOS表達(dá)對(duì)COPD患者預(yù)后的診斷價(jià)值

3 討論

COPD屬臨床常見的肺部疾病，特征表現(xiàn)為不完全可逆的慢性進(jìn)行性的氣流受限[10]。由于患者肺功能的衰退，加之COPD急性加重易導(dǎo)致患者反復(fù)住院，嚴(yán)重影響著患者的生命質(zhì)量，近年COPD的發(fā)病率顯著上升，給患者及社會(huì)帶來(lái)巨大的壓力[11]。目前臨床主要通過(guò)藥物及控制飲食來(lái)延緩COPD患者疾病進(jìn)展，但部分患者仍舊存在復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)，預(yù)后較差[12]。COPD的肺內(nèi)炎癥反應(yīng)主要以中性粒細(xì)胞，CD8+T細(xì)胞及肺泡巨噬細(xì)胞介導(dǎo)為主，通過(guò)釋放諸如白三烯B4、白介素-8等炎性介質(zhì)，破壞肺組織結(jié)構(gòu)，加速中性粒細(xì)胞炎癥反應(yīng)的出現(xiàn)，反復(fù)作用肺組織與氣道，引發(fā)肺氣腫與通氣功能的障礙[13]。到2020年COPD已成為第三位死因疾病，因此降低COPD病死率是現(xiàn)階段臨床工作的重點(diǎn)，同時(shí)臨床迫切需要一個(gè)高敏感度、高特異度的客觀標(biāo)志物來(lái)輔助臨床診療COPD。

作為白細(xì)胞的分類之一，EOS在血常規(guī)檢查中使用頻次較高，機(jī)體的過(guò)敏反應(yīng)及對(duì)寄生蟲的免疫反應(yīng)均有其參與[14]，其占白細(xì)胞計(jì)數(shù)的1%～4%，能被粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等刺激并促進(jìn)其分化，在哮喘及COPD患者氣道上皮中均能夠因趨化因子上調(diào)，導(dǎo)致其水平的升高。當(dāng)氣道及肺部的EOS水平升高后，其衍生的相關(guān)細(xì)胞因子可介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致持續(xù)的炎癥反應(yīng)及組織損傷[15]。研究發(fā)現(xiàn)，COPD患者的氣道炎癥反應(yīng)中EOS的作用較為突出[16]。臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，在COPD患者的誘導(dǎo)痰中，EOS陽(yáng)離子蛋白以及髓過(guò)氧化酶的水平升高，說(shuō)明在COPD患者誘導(dǎo)痰內(nèi)是有EOS的存在。正常情況下，人體血液中的EOS含量較少且大部分存在骨髓及組織中，而在患病的狀態(tài)下，EOS則在組織中匯聚，通過(guò)細(xì)胞因子、趨化因子的分泌及脫粒反應(yīng)來(lái)參與炎癥進(jìn)展[17]。在變態(tài)反應(yīng)性疾病、寄生蟲病及皮膚病中均發(fā)現(xiàn)了外周血EOS表達(dá)的升高。既往有學(xué)者認(rèn)為，EOS的升高是判別支氣管哮喘與COPD的一個(gè)特征性指標(biāo)，但隨著后續(xù)實(shí)踐的深入，發(fā)現(xiàn)在排除哮喘后，仍舊有一部分的COPD患者其外周血EOS升高[18-19]。本研究中，在痰EOS、血清EOS表達(dá)水平比較上，急性加重期組>穩(wěn)定期組>對(duì)照組（P<0.05），推測(cè)痰EOS、血清EOS可能參與了COPD的發(fā)生與發(fā)展，進(jìn)一步研究表明，病例組GOLD分級(jí)Ⅲ+Ⅳ級(jí)患者痰EOS、血清EOS表達(dá)水平均高于Ⅰ+Ⅱ級(jí)患者（P<0.05），提示痰EOS、血清EOS的表達(dá)與COPD病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。分析原因可能是痰EOS、血清EOS在活化后促進(jìn)了諸多炎癥介質(zhì)的釋放，進(jìn)而損傷上皮氣道[20]，加之EOS分泌出轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β以促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖和膠原蛋白合成，加重氣道纖維化及氣道的重塑，進(jìn)而加重COPD病情。本研究還發(fā)現(xiàn)，病例組死亡患者痰EOS、血清EOS表達(dá)水平均高于生存患者（P<0.05），進(jìn)一步證實(shí)了COPD病情越嚴(yán)重，痰EOS、血清EOS的表達(dá)水平則越高，因此上述指標(biāo)可用以反映COPD患者病情的嚴(yán)重與否。為進(jìn)一步分析痰EOS、血清EOS表達(dá)對(duì)COPD患者預(yù)后的診斷價(jià)值，本研究繪制ROC曲線發(fā)現(xiàn)，痰EOS的cut off值為19.55×105/mL時(shí)，其診斷COPD患者預(yù)后的AUC為0.850，血清EOS的cut off值為276.23×105/mL時(shí)，其診斷COPD患者預(yù)后的AUC為0.747，痰EOS診斷COPD患者預(yù)后的AUC大于血清EOS，說(shuō)明痰EOS診斷COPD患者預(yù)后的效能高于血清EOS，臨床在對(duì)COPD患者EOS表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)可優(yōu)先對(duì)誘導(dǎo)痰進(jìn)行標(biāo)本采集，通過(guò)痰EOS表達(dá)情況來(lái)預(yù)測(cè)COPD患者的病情及預(yù)后情況。

綜上所述，COPD患者的痰EOS、血清EOS均呈異常高表達(dá)情況，二者的表達(dá)水平可反映COPD患者的病情進(jìn)展情況及預(yù)后，在臨床COPD病情的評(píng)估、診療及預(yù)后判斷中均有較高的應(yīng)用價(jià)值，臨床可將二者作為判定COPD患者病情及預(yù)后的輔助指標(biāo)。

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（收稿日期：2023-11-02） （本文編輯：占匯娟）