陳佳萍 李享 劉紅旭 來曉磊

摘要目的：基于文獻(xiàn)探討中醫(yī)藥治療冠狀動(dòng)脈微血管疾病（CMVD）的證治特征及用藥規(guī)律，并借助網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)探討核心藥對(duì)治療CMVD的作用機(jī)制。方法：系統(tǒng)檢索中國(guó)知網(wǎng)、萬方、維普、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫、PubMed數(shù)據(jù)庫自建庫以來至2022年11月1日收錄的有關(guān)CMVD中醫(yī)診治研究的文獻(xiàn)，對(duì)中醫(yī)證治規(guī)律進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)，并挖掘中藥復(fù)方的核心藥對(duì)，利用TCMSP、GeneCards、DisGeNET、TTD、OMIM、STRING、Metascape數(shù)據(jù)庫和Cytoscape軟件分析核心藥對(duì)與疾病間互作關(guān)系及相關(guān)通路，最后使用分子對(duì)接技術(shù)對(duì)核心化學(xué)成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行對(duì)接驗(yàn)證。結(jié)果：獲得符合要求的文獻(xiàn)160篇，CMVD中醫(yī)證型主要為氣虛血瘀證，中藥復(fù)方涉及藥物89味，支持度最高的藥對(duì)為黃芪丹參。黃芪丹參中槲皮素、木犀草素、山柰酚、異鼠李素等成分可通過作用于白細(xì)胞介素6（IL6）、胱天蛋白酶3（CASP3）、缺氧誘導(dǎo)因子1A（HIF1A）、過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARG）等多個(gè)靶點(diǎn)影響糖尿病并發(fā)癥中的晚期糖基化產(chǎn)物（AGE）晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（RAGE）通路、缺氧誘導(dǎo)因子1（HIF1）通路、核轉(zhuǎn)錄因子κB（NFκB）通路等來干預(yù)CMVD。分子對(duì)接結(jié)果顯示核心活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)對(duì)接良好。結(jié)論：中醫(yī)藥治療CMVD多以益氣活血法為主，其核心藥對(duì)黃芪丹參治療CMVD的潛在作用機(jī)制可能與抗炎癥反應(yīng)、改善氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡相關(guān)。

關(guān)鍵詞冠狀動(dòng)脈微血管疾?。恢嗅t(yī)藥；證治規(guī)律；網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)；分子對(duì)接；黃芪；丹參

doi：10.12102/j.issn.16721349.2024.06.001

冠狀動(dòng)脈微血管疾?。╟oronarymicrovasculardisease，CMVD）是指在多種致病因素的作用下，冠狀前小動(dòng)脈（內(nèi)徑0.1～0.5mm）和小動(dòng)脈（內(nèi)徑＜0.1mm）的結(jié)構(gòu)和（或）功能異常所致的勞力性心絞痛或心肌缺血客觀證據(jù)的臨床綜合征（臨床癥候群）［1］，包括心臟X綜合征、微血管性心絞痛、冠狀動(dòng)脈慢血流等［2］。CMVD是目前心血管領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)與難點(diǎn)［3］。目前，臨床治療CMVD的藥物是基于冠心病的常規(guī)療法，包括抗血小板聚集、降脂、抗心肌缺血等。多種緩解心絞痛的新型藥物如雷諾嗪［4］、尼可地爾［5］、曲美他嗪［6］等也被用于治療CMVD，雖具有一定臨床療效，但許多病人仍因反復(fù)住院和冠狀動(dòng)脈造影檢查而影響生活質(zhì)量［7］。中醫(yī)辨證論治在治療CMVD方面具有一定優(yōu)勢(shì)［8］，但中藥成分繁雜，作用機(jī)制尚不明晰。本研究基于數(shù)據(jù)挖掘與網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)歸納分析中醫(yī)藥治療CMVD的證治規(guī)律及常用中藥，探索高頻藥對(duì)的活性成分、靶點(diǎn)以及對(duì)疾病的作用機(jī)制，為CMVD的臨床治療和實(shí)驗(yàn)研究提供參考。

1資料與方法

1.1檢索策略

系統(tǒng)檢索中國(guó)知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)庫、維普數(shù)據(jù)庫、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫（CBM）、PubMed數(shù)據(jù)庫自建庫至2022年11月1日收錄的有關(guān)CMVD中醫(yī)證治研究的文獻(xiàn)。檢索詞為冠狀動(dòng)脈微血管疾病、微血管性心絞痛、心臟X綜合征、微循環(huán)障礙、coronarymicrovasculardisease、microvascularangina、cardiacsyndromeX、microcirculationdysfunction，并含中醫(yī)、中藥、中西醫(yī)結(jié)合、traditionalChinesemedicine等。采用主題詞與自由詞相結(jié)合的方式進(jìn)行檢索。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1納入標(biāo)準(zhǔn)

1）研究類型：臨床研究。2）研究對(duì)象：經(jīng)微循環(huán)功能評(píng)價(jià)［冠狀動(dòng)脈微血管阻力指數(shù)＞25或冠狀動(dòng)脈血流儲(chǔ)備分?jǐn)?shù)＜2或心肌梗死溶栓試驗(yàn)（TIMI）血流計(jì)幀法＞25幀］明確診斷為CMVD［1］；試驗(yàn)組采用中醫(yī)辨證分型或使用中藥湯劑、中成藥、中藥注射液聯(lián)合常規(guī)西藥治療，對(duì)照組采用常規(guī)西藥治療（抗血小板聚集、降脂、抗心肌缺血等）。3）所載中藥方劑均為具有完整藥物組成的口服處方，且被證實(shí)治療有效。

1.2.2排除標(biāo)準(zhǔn)

文獻(xiàn)綜述、系統(tǒng)評(píng)價(jià)、專家經(jīng)驗(yàn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等；重復(fù)報(bào)道文獻(xiàn)；所載方劑組成重復(fù)的文獻(xiàn)；試驗(yàn)組或?qū)φ战M聯(lián)合多種中成藥或非口服中藥制劑、使用其他中醫(yī)療法。

1.3數(shù)據(jù)提取及規(guī)范化

依據(jù)王永炎等提出的證候要素［9］提取及合并納入文獻(xiàn)中所提及的證型。參考《中華人民共和國(guó)藥典》（2020年版）［10］及《中華本草》［11］規(guī)范納入的中藥名稱，如“烏稍蛇”統(tǒng)一為“烏梢蛇”。文獻(xiàn)篩選和數(shù)據(jù)錄入均由2名研究者獨(dú)立進(jìn)行并交叉核對(duì)，以確保數(shù)據(jù)的確鑿和完整，如有分歧則通過討論或與第3名研究者商討解決。

1.4數(shù)據(jù)挖掘工具

運(yùn)用Excel2016進(jìn)行頻次分析，應(yīng)用SPSSModeler18軟件對(duì)中藥處方中的藥物進(jìn)行關(guān)聯(lián)規(guī)則分析。利用Cytoscape3.7.1軟件繪制藥物關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)圖。

1.5核心藥對(duì)成分與疾病靶點(diǎn)的篩選

通過TCMSP數(shù)據(jù)庫（https：//old.tcmspe.com/tcmsp.php）［12］收集核心藥對(duì)的成分，其中口服生物利用度（oralbioavailability，OB）≥30%，類藥性（druglikeness，DL）≥0.18為篩選條件［13］。根據(jù)藥物成分獲取藥物作用靶點(diǎn)，并將后者上傳至UniProt平臺(tái)（https：//www.uniprot.org/）統(tǒng)一轉(zhuǎn)換為GeneSymbol。在GeneCards（https：//www.genecards.org/）［14］、DisGeNET（https：//www.disgenet.org/）［15］、TTD（http：//db.idrblab.net/ttd）［16］及OMIM數(shù)據(jù)庫（https：//www.omim.org/）［17］中以“coronarymicrovasculardisease”“coronarymicrovasculardysfunction”“cardiacsyndromeX”“microvascularangina”進(jìn)行檢索獲取疾病靶點(diǎn)。

1.6“藥物成分靶點(diǎn)疾病”網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建

借助Venn作圖網(wǎng)站（https：//www.bioinformatics.com.cn/static/others/jvenn/example.html）［18］獲取疾病與藥物的交集靶點(diǎn)，并導(dǎo)入Cytoscape3.7.1軟件，組建“藥物成分靶點(diǎn)疾病”網(wǎng)絡(luò)，將度值（Degree）位于前10位的成分定義為主要活性成分［19］。

1.7蛋白相互作用（proteinproteininteraction，PPI）網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治?/p>

將獲得的交集基因?qū)隨TRING在線平臺(tái)（https：//stringdb.org/）［20］獲取PPI網(wǎng)絡(luò)，將該網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape進(jìn)行拓?fù)浞治?，基于附帶工具CytoNCA分析交集靶點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)拓?fù)湫再|(zhì)參數(shù)，根據(jù)Degree值、介度（betweennesscentrality）和緊密度（closenesscentrality）等篩選關(guān)鍵靶點(diǎn)［21］。

1.8基因本體（GO）富集分析和京都基因與基因組百科全書（KEGG）通路富集分析

將獲得的交集基因?qū)隡etascape數(shù)據(jù)庫（https：//metascape.org/gp/index.html）［22］，物種選擇為“智人”，其余保持默認(rèn)，進(jìn)行GO及KEGG分析。

1.9分子對(duì)接

從TCMSP數(shù)據(jù)庫和PDB數(shù)據(jù)庫（http：//www1.rcsb.org）獲取主要成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)的化學(xué)結(jié)構(gòu)及三維結(jié)構(gòu)，運(yùn)用AutoDockTools1.5.7軟件將化合物和蛋白進(jìn)行分子蛋白對(duì)接，后使用PyMOL2.5軟件進(jìn)行可視化處理。

2結(jié)果

2.1文獻(xiàn)篩選流程

共檢索到相關(guān)文獻(xiàn)2264篇，剔除重復(fù)文獻(xiàn)，并根據(jù)納入及排除標(biāo)準(zhǔn)篩選，最終獲得文獻(xiàn)160篇，具體文獻(xiàn)篩選流程見圖1。

2.2CMVD的中醫(yī)證型和證素

2.2.1中醫(yī)證型

明確提及中醫(yī)證型的文獻(xiàn)有46篇，共涉及3468例病人、14種證型。居首位的證型為氣虛血瘀證，為1220例（35.18%），其他依次為痰瘀互結(jié)證、心血瘀阻證、氣虛血瘀痰阻證、氣滯血瘀證、陽虛血瘀證、氣陰兩虛證、痰濁阻閉證、脾虛痰濁血瘀證等。詳見表1。

2.2.2中醫(yī)證候要素

對(duì)CMVD的證候要素進(jìn)行提取，虛性證素包括氣虛、陰虛、脾虛、陽虛4種，實(shí)性證素包括血瘀、痰濁、氣滯、寒凝、痰火5種，3468例CMVD病人證素中，血瘀占比最高，為79.73%，其次為氣虛（50.61%）、痰濁（36.68%）。詳見表2。

2.3CMVD的治療用藥

2.3.1中成藥的應(yīng)用

160篇文獻(xiàn)中有77項(xiàng)研究運(yùn)用中成藥，涉及25種中成藥，其中使用頻次最高的為通心絡(luò)膠囊（28.57%），其次為麝香保心丸（20.78%），其他依次為復(fù)方丹參滴丸、麝香通心滴丸、芪參益氣滴丸、寬胸氣霧劑、蒲參膠囊。步長(zhǎng)腦心通膠囊、丹蔞片、燈盞生脈膠囊、冠心丹參滴丸、冠心舒通膠囊、諾迪康膠囊、芪參膠囊、芪藶強(qiáng)心膠囊、通脈養(yǎng)心丸、心可舒片、心血通口服液、養(yǎng)心氏片、益心通膠囊、益心通絡(luò)膠囊、銀丹心腦通軟膠囊、參元丹、黃蛭口服液、益心通痹合劑各使用1次（1.30%）。詳見表3。

2.3.2中藥注射液的應(yīng)用

160篇文獻(xiàn)中有39項(xiàng)研究運(yùn)用中藥注射液，涉及15種，使用頻次最高的為丹紅注射液（25.64%），其他依次為丹參多酚酸鹽注射液、參附注射液、參麥注射液、疏血通注射液、丹參注射液丹參酮ⅡA磺酸鈉注射液。川芎嗪注射液、丹參（凍干）注射液、丹參川芎嗪注射液、生脈注射液、血必凈注射液、銀杏達(dá)莫注射液、注射用益氣復(fù)脈（凍干）、刺五加注射液各使用1次（2.56%）。詳見表4。

2.3.3中藥湯劑的應(yīng)用

共檢索到運(yùn)用中藥湯劑的文獻(xiàn)44篇，涵蓋18種中藥湯劑，使用頻次最高的為益氣活血復(fù)方（31.82%），其次為化瘀祛痰方（15.91%），其他依次為瓜蔞薤白半夏湯、血府逐瘀湯、補(bǔ)陽還五湯。保元湯合桂枝茯苓丸，參丹開痹合劑、丹參飲、當(dāng)歸補(bǔ)血湯、當(dāng)歸四逆湯、通痹冠脈丸、通絡(luò)化瘀止痙湯、溫陽活血方、益心飲、活血逐瘀湯、鹿紅方、通陽散結(jié)方、消溶穩(wěn)斑方各使用1次（2.27%）。詳見表5。

2.4關(guān)聯(lián)規(guī)則

使用SPSSModeler18.1軟件對(duì)44個(gè)藥物處方（涉及89味中藥）進(jìn)行關(guān)聯(lián)規(guī)則分析，使用網(wǎng)絡(luò)圖進(jìn)行藥物關(guān)聯(lián)展示。關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)圖中實(shí)線條越粗，藥物間相關(guān)性越強(qiáng)，網(wǎng)絡(luò)圖詳見圖2。在SPSSModeler18.1軟件中利用Apriori算法將中藥進(jìn)行關(guān)聯(lián)程度分析，其中最低支持度設(shè)置為10%，最小規(guī)則置信度設(shè)置為80%，最大前項(xiàng)數(shù)為2，得到458條關(guān)聯(lián)規(guī)則。根據(jù)支持度大小排序，得出頻次≥15次的14個(gè)核心藥物組合，位居首位的強(qiáng)關(guān)聯(lián)藥對(duì)是黃芪丹參。詳見表6。

2.5黃芪、丹參化學(xué)成分及共作用靶點(diǎn)篩選

經(jīng)TCMSP數(shù)據(jù)庫設(shè)置OB、DL參數(shù)，得到黃芪、丹參潛在活性成分85個(gè)，其中丹參65個(gè)，黃芪25個(gè)，共獲取靶點(diǎn)113個(gè)。部分活性成分見表7。通過GeneCards、DisGeNET、TTD及OMIM數(shù)據(jù)庫檢索合并及刪除重復(fù)靶點(diǎn)后，共獲得737個(gè)CMVD相關(guān)靶點(diǎn)。

2.6黃芪丹參成分靶點(diǎn)的預(yù)測(cè)及“成分靶點(diǎn)疾病”網(wǎng)絡(luò)圖的建立

運(yùn)用Venn圖將黃芪丹參的有效成分作用靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)取交集，獲得CMVD和黃芪丹參的共有靶點(diǎn)37個(gè)，詳見圖3。利用Cytoscape軟件構(gòu)建的“藥物成分靶點(diǎn)”的可視化網(wǎng)絡(luò)見圖4，Degree值居前10位的有效成分信息見表8。

2.7PPI網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治?/p>

將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)平臺(tái)，應(yīng)用Cytoscape軟件將得到的結(jié)果進(jìn)行可視化分析，節(jié)點(diǎn)越大表明度值越大，并使用CytoNCA進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋮?shù)計(jì)算，篩選出BC、DC、CC大于1倍中位數(shù)的核心靶點(diǎn)，詳見表9、圖5。

2.8黃芪丹參治療CMVD的GO與KEGG富集分析

將37個(gè)交集靶點(diǎn)導(dǎo)入Metascape數(shù)據(jù)庫中，進(jìn)行GO及KEGG富集分析。取P＜0.01的前10個(gè)GO條目繪制條形圖，詳見圖6。得到生物學(xué)過程（biologicalprocess，BP）、細(xì)胞成分（cellularcomponent，CC）、分子功能（molecularfunction，MF）分析結(jié)果，顯示BP主要富集在對(duì)化學(xué)應(yīng)激、激素、缺氧的應(yīng)答、調(diào)控凋亡信號(hào)通路、正向調(diào)節(jié)細(xì)胞遷移等，CC主要富集在膜筏、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)復(fù)合體、受體復(fù)合體等，MF主要富集在參與了轉(zhuǎn)錄共調(diào)節(jié)結(jié)合、核受體活性、蛋白質(zhì)同二聚化活性、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合等。KEGG富集結(jié)果顯示，有關(guān)基因主要富集在癌癥、癌癥中的蛋白聚糖、糖尿病并發(fā)癥中的晚期糖基化產(chǎn)物（AGE）晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（RAGE）通路、缺氧誘導(dǎo)因子1（HIF1）通路、核轉(zhuǎn)錄因子κB（NFκB）通路等信號(hào)通路，詳見圖7。

2.9分子對(duì)接結(jié)果

將篩選得到的10個(gè)主要活性成分的分子配體與8個(gè)核心靶點(diǎn)進(jìn)行對(duì)接，結(jié)果以熱圖形式展示（見圖8），通常結(jié)合能＜0表明靶蛋白與小分子可以自由結(jié)合，結(jié)合能越低表明受體與配體之間的親和力越大，二者越可能發(fā)生相互作用［23］。部分分子對(duì)接結(jié)合模式見圖9，其中黃色虛線表示氫鍵，綠色表示化學(xué)成分結(jié)構(gòu)，藍(lán)色表示靶點(diǎn)蛋白，玫紅色表示結(jié)合位點(diǎn)，分子對(duì)接結(jié)果顯示成分與靶點(diǎn)能夠較好結(jié)合，其中，來自丹參的丹參新醌D與各個(gè)靶點(diǎn)的親和力均較好，可能在黃芪丹參干預(yù)CMVD中發(fā)揮較為重要的作用。

3討論

CMVD歸屬于中醫(yī)學(xué)“胸痹”“心痛”范疇的一個(gè)特殊疾病類型，中醫(yī)歷史文獻(xiàn)無CMVD對(duì)應(yīng)的疾病名稱，但臨床特征與“胸痹”“心痛”對(duì)應(yīng)，大多數(shù)情況下胸痛發(fā)作時(shí)間較常見的心絞痛癥狀持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，且不易被常規(guī)緩解心絞痛藥物緩解。本研究通過對(duì)中醫(yī)藥治療CMVD的相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘，發(fā)現(xiàn)CMVD病人證型以氣虛血瘀證為主，證素分布主要為血瘀、氣虛及痰濁。臨床上常用通心絡(luò)膠囊、丹紅注射液治療CMVD，常用的中藥湯劑有益氣活血復(fù)方、化瘀祛痰復(fù)方等，根據(jù)關(guān)聯(lián)規(guī)則及支持度大小，得出黃芪丹參是中藥復(fù)方中出現(xiàn)頻次較高的藥對(duì)。臨床藥理學(xué)研究顯示，黃芪及其化合物具有抗炎、抗纖維化、抗氧化應(yīng)激、促進(jìn)血管生成、調(diào)節(jié)糖脂代謝等多重作用［24］。丹參具有抗心肌缺血、降低心臟耗氧量、抗血小板聚集和抑制血栓形成等作用［25］。黃芪、丹參合用能上調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、縮小心肌梗死范圍［26］。因此，對(duì)于黃芪丹參治療CMVD的作用機(jī)制值得進(jìn)一步探索。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究結(jié)果顯示，槲皮素、木犀草素、山柰酚、異鼠李素等為黃芪丹參的主要活性成分。槲皮素具有抗氧化、抗炎、抗細(xì)胞凋亡、舒張血管等心臟保護(hù)作用［27］。木犀草素能通過改善心肌收縮功能、抑制炎癥反應(yīng)和細(xì)胞死亡進(jìn)而保護(hù)缺血/再灌注的心?。?8］。山柰酚具有心臟保護(hù)、抗炎、抗氧化等作用，研究發(fā)現(xiàn)山柰酚可通過抑制Toll樣受體4（TLR4）/NFκB信號(hào)通路發(fā)揮抗心肌細(xì)胞凋亡作用［29］。異鼠李素能通過減弱細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激對(duì)缺血/再灌注所致的損傷心肌起到保護(hù)作用。

通過“成分靶點(diǎn)疾病”網(wǎng)絡(luò)圖、PPI網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治鰣D的靶點(diǎn)篩選，考慮黃芪丹參治療CMVD可能與IL6、CASP3、HIF1A、PPARG等靶點(diǎn)關(guān)系緊密。IL6是由間質(zhì)細(xì)胞、上皮細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生的促炎細(xì)胞因子，通過炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，使微血管平滑肌細(xì)胞異常增殖和遷移，進(jìn)而改變微血管結(jié)構(gòu)，限制了血管在應(yīng)激狀態(tài)下的舒張［30］。CASP3是細(xì)胞凋亡的重要介質(zhì)，在內(nèi)源性或外源性的細(xì)胞凋亡過程中發(fā)揮核心作用［31］。HIF1A是一種關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，能調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡［32］、血管生成［33］以及器官和組織對(duì)微循環(huán)缺氧的反應(yīng)［34］等。PPARG能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)代謝與抗炎來延緩動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程［35］。由此可見，黃芪丹參治療CMVD可能與抗炎癥反應(yīng)、改善氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡等方式有關(guān)。通過分子對(duì)接模擬發(fā)現(xiàn)主要活性成分與靶點(diǎn)蛋白之間結(jié)合力較好，進(jìn)一步提高該網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究結(jié)果的可信度。其中，丹參新醌D與各靶點(diǎn)結(jié)合較好，但目前關(guān)于該成分的相關(guān)研究較少，還有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

GO富集結(jié)果表明，黃芪丹參的作用靶點(diǎn)主要分布在膜筏、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)復(fù)合體、受體復(fù)合體，這可能與該藥對(duì)成分所參與的多個(gè)生物學(xué)過程相關(guān)。核心藥對(duì)對(duì)化學(xué)應(yīng)激、激素、缺氧的應(yīng)答及調(diào)控凋亡信號(hào)通路等均有影響，這與CMVD血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡［36］、慢性低級(jí)別炎癥［37］、線粒體功能紊亂［38］等病理機(jī)制相吻合。

KEGG富集分析發(fā)現(xiàn)，癌癥信號(hào)通路、糖尿病并發(fā)癥中的AGERAGE信號(hào)、腫瘤中的蛋白多糖、HIF1、NFκB等信號(hào)通路可能為核心藥對(duì)治療CMVD關(guān)鍵的信號(hào)通路。其中，AGE與相應(yīng)的跨膜細(xì)胞受體相結(jié)合，能減少一氧化氮（NO）合成，抑制和滅活NO，導(dǎo)致內(nèi)皮損傷，其還能誘發(fā)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡［39］。HIF1是介導(dǎo)缺血性心臟缺氧信號(hào)傳導(dǎo)的主要轉(zhuǎn)錄因子［40］，心肌缺血性損傷后HIF1靶基因的表達(dá)能調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和糖酵解酶的表達(dá)［33，41］，維持內(nèi)環(huán)境的氧穩(wěn)態(tài)，同時(shí)其在炎癥中也發(fā)揮重要作用［42］。NFκB通過在細(xì)胞因子、微生物抗原和細(xì)胞內(nèi)應(yīng)激等各種刺激下調(diào)節(jié)一系列炎癥介質(zhì)的表達(dá)［43］，有研究顯示，通過調(diào)節(jié)NFκB/結(jié)節(jié)樣受體蛋白3的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，能改善CMVD大鼠的心功能不全和心肌損傷，抑制心肌細(xì)胞焦亡［44］。

4結(jié)論

本研究首先運(yùn)用數(shù)據(jù)挖掘?qū)χ嗅t(yī)藥干預(yù)CMVD的證治規(guī)律進(jìn)行探討，發(fā)現(xiàn)氣虛血瘀證為CMVD病人的常見證型，治療上以益氣活血為要，黃芪丹參是中藥復(fù)方干預(yù)CMVD的核心藥對(duì)。但中醫(yī)臨床上診治CMVD仍需辨證論治，需遵循“有是證，加是藥”的原則。然后運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法發(fā)現(xiàn)了黃芪丹參藥對(duì)可能通過槲皮素、木犀草素、山柰酚、異鼠李素等關(guān)鍵成分，作用于IL6、CASP3、HIF1A、PPARG等靶點(diǎn)，通過糖尿病并發(fā)癥中的AGERAGE通路、HIF1通路、NFκB通路等干預(yù)CMVD，并通過分子對(duì)接技術(shù)可視化主要活性成分與靶點(diǎn)蛋白之間的結(jié)合能力與三維空間結(jié)構(gòu)，但鑒于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的局限性及黃芪丹參核心藥對(duì)煎煮后有效成分的復(fù)雜性與多變性，后期仍需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)及臨床驗(yàn)證。

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（收稿日期：20230514）

（本文編輯郭懷?。?/p>

基金項(xiàng)目國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（No.8210151350）

作者單位首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京中醫(yī)醫(yī)院（北京100010）

通訊作者劉紅旭，Email：liuhongxu@bjzhongyi.com

引用信息陳佳萍，李享，劉紅旭，等.中醫(yī)藥治療冠狀動(dòng)脈微血管疾病證治規(guī)律及作用機(jī)制研究［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2024，22（6）：961970.