【關(guān)鍵詞】抗著絲粒蛋白F抗體；乳腺癌；診斷；分期；預(yù)后

【中圖分類號(hào)】R392.7 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【收稿日期】2023-12-31

乳腺癌是嚴(yán)重威脅女性身心健康的惡性腫瘤，世界衛(wèi)生組織公布的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示乳腺癌已成為全球女性的首發(fā)惡性腫瘤[1]。目前，乳腺癌最主要的診斷手段仍然是活組織病理學(xué)檢查，但其具有侵入性，并且病理樣本的取樣與臨床醫(yī)生的技能操作水平密切相關(guān)，存在取樣誤差的可能。血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)是乳腺癌早期診斷的重要輔助檢查，具有無創(chuàng)性、報(bào)告時(shí)間快等優(yōu)點(diǎn)，受到臨床的廣泛應(yīng)用[2]。但是，由于不同的腫瘤標(biāo)志物診斷乳腺癌的靈敏度和特異性存在差異，因此多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)能提高乳腺癌的診斷效能。

乳腺癌的早期診斷和治療對(duì)于提高患者的治愈率和長(zhǎng)期生存率具有重要意義。血清糖類抗原153（carbohydrate antigen 153，CA153）是目前臨床應(yīng)用較多的乳腺癌血清學(xué)標(biāo)志物，但是CA153診斷乳腺癌靈敏度較低，只有不足10% 的早期乳腺癌和30%～75%的晚期乳腺癌患者中出現(xiàn)陽性結(jié)果[3]，必須聯(lián)合其他血清學(xué)指標(biāo)共同檢測(cè)，從而減少乳腺癌的漏診率[4]。著絲粒蛋白F（centromere protein F，CENPF）是一種相對(duì)分子質(zhì)量為367 kD的細(xì)胞周期調(diào)控的關(guān)鍵蛋白，CENPF的異常表會(huì)促進(jìn)染色體的不正確分離，增加腫瘤的增殖活性從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生[5-6]。血清anti-CENPF是針對(duì)CENPF產(chǎn)生的自身抗體，可出現(xiàn)在多種惡性腫瘤患者血清中，有研究顯示約50% anti-CENPF陽性者患有惡性腫瘤[7]，證實(shí)了血清anti-CENPF與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。因此，本研究旨在探討血清anti-CENPF、CA153及聯(lián)合檢測(cè)在乳腺癌診斷中的價(jià)值，并進(jìn)一步分析anti-CENPF與乳腺癌臨床特征、病理特征及臨床預(yù)后之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

隨機(jī)選取2022年1月至2023年6月在重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院首次明確診斷并且未進(jìn)行過任何治療的100例乳腺癌患者作為BC組，BC組所有病例均經(jīng)過乳腺組織學(xué)穿刺活檢確診乳腺癌。選擇同期就診的40例乳腺良性病變患者作為non-BC組、40例健康體檢者作為HC組，收集3組血清樣本。BC 組病例的納入根據(jù)2019 版世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）乳腺腫瘤組織學(xué)分型標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行[8]。臨床分期依據(jù)AJCC第8版乳腺癌分期執(zhí)行，分為：Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期[9]。non-BC組為35～56歲女性，血常規(guī)、凝血象和肝腎功能正常，無惡性腫瘤疾病史。包括30例乳腺纖維腺瘤，5例乳腺囊性增生病，5例乳腺囊腫。HC組為25～65歲體檢女性，無心血管及乳腺疾病和任何腫瘤病史，血清腫瘤標(biāo)志物陰性。本研究已獲得重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（審批編號(hào)：K2023-373號(hào)）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

分別抽取BC組治療前、non-BC組和HC組外周靜脈血4 mL，3 000 r / min 離心10 min后留取上清液于-80 ℃凍存。anti-CENPF采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)參考試劑說明書進(jìn)行檢測(cè)，試劑廠家為福建睿信生物科技有限公司。CA153采用Roche cobas e602全自動(dòng)免疫分析儀及原裝配套試劑檢測(cè)。

1.3 臨床病理特征

1.3.1 臨床特征 包括腫瘤組織學(xué)分型、腫瘤大小、有/無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有/無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移以及臨床分期。

1.3.2 病理特征 包括雌激素受體（receptors estrogen，ER）、孕激素受體（receptors progesterone，PR）、人表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor-2，HER-2）及Ki-67表達(dá)水平。

1.3.3 分子分型 基于IHC4多變量模型將BC組分為L(zhǎng)uminalA型[ER和（或）PR陽性，并且PR陽性率≥20％，HER-2陰性且Ki-67lt;14%]、Luminal B型[ER和（或）PR陽性，HER-2陽性，Ki-67任何水平，或者ER和（或）PR陽性，HER-2陰性，Ki-67gt;14％]、HER-2過表達(dá)型（ER陰性、PR陰性、HER-2陽性）和TNBC（ER陰性、PR陰性、HER-2陰性）[10-11]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS26.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，2組數(shù)據(jù)差異比較使用t 檢驗(yàn)，多組數(shù)據(jù)差異比較使用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t 檢驗(yàn)。采用logistic回歸模型擬合聯(lián)合檢測(cè)的ROC曲線，并采用Z 檢驗(yàn)比較anti-CENPF、CA153以及聯(lián)合檢測(cè)的曲線下面積（area under the curve，AUC）。兩變量間的相關(guān)性研究采用Spearman相關(guān)分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 各組血清anti-CENPF水平比較

如圖1所示，anti-CENPF濃度在BC組、non-BC組和HC組的分布上，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=5.958，P=0.003）。同時(shí)組間兩兩比較顯示BC 組血清anti-CENPF 水平明顯高于non-BC和HC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t_D=2.282、3.134，均Plt;0.05）。相對(duì)于HC組，non-BC組患者血清anti-CENPF含量升高，但沒有明顯差異（t_D=0.712，Pgt;0.05）。

2.2 anti-CENPF、CA153及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)乳腺癌的診斷價(jià)值

ROC曲線顯示anti-CENPF診斷乳腺癌的AUC為0.714（P=0.000），CA153的AUC為0.672（P=0.000），以anti-CENPF和CA153為自變量，建立logistic回歸模型，擬合兩者聯(lián)合檢測(cè)的ROC曲線下面積為0.739（P=0.000）。經(jīng)Z 檢驗(yàn)比較分析聯(lián)合檢測(cè)的AUC大于CA153單獨(dú)檢測(cè)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=2.497，P=0.013），而anti-CENPF 單獨(dú)檢測(cè)的AUC 與CA153單獨(dú)和聯(lián)合檢測(cè)之間相比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=0.747、-0.666，均Pgt;0.05），見圖2和表1。

2.3 anti-CENPF 與乳腺癌臨床特征和免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性

BC組100例乳腺癌患者中包含6例導(dǎo)管原位癌、2例乳頭狀腫瘤、1例黏液表皮樣癌和91例浸潤(rùn)性乳腺癌，不同組織學(xué)分型的乳腺癌患者血清中anti-CENPF濃度比較無明顯差異。血清anti-CENPF 水平在不同ER、PR狀態(tài)乳腺癌患者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同腫瘤大小之間的anti-CENPF水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩兩比較顯示gt;5 cm的乳腺癌患者血清中anti-CENPF 濃度高于≤2 cm 組（t_D=2.621，P=0.010）。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或者HER-2陰性的乳腺癌患者血清anti-CENPF濃度明顯升高（Plt;0.05，表2）。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌患者血清中anti-CENPF 濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=7.871，P=0.000），組間兩兩比較顯示Ⅳ期和Ⅲ期血清anti-CENPF濃度高于Ⅰ期和Ⅱ期，見圖3。Spearman相關(guān)性分析顯示血清anti-CENPF濃度與Ki-67表達(dá)水平?jīng)]有相關(guān)性（P=0.787）。

2.4 anti-CENPF與乳腺癌分子分型的相關(guān)性

BC組HER2過表達(dá)型、Luminal A 型、Luminal B 型和三陰性乳腺癌患者分別有20例、21例、43例和16例。單因素方差分析顯示anti-CENPF濃度在這4組的分布上，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=3.297，P=0.024）。同時(shí)組間兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)后顯示HER-2過表達(dá)型、Luminal B型血清anti-CENPF水平低于TNBC患者（圖4）。由于本研究納入的LuminalA 型和Luminal B 型乳腺癌患者ER 均為陽性，而Luminal B型又包括HER-2陽性和HER-2陰性2種類型，因此進(jìn)一步將ER陽性的BC患者又分為了HER-2陽性和HER-2陰性2組，并比較2組間的anti-CENPF水平，結(jié)果顯示HER-2陰性組的anti-CENPF濃度明顯高于HER-2陽性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.287，P=0.026，圖5）。

3討論

anti-CENPF是與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的血清學(xué)標(biāo)志物，因此本研究檢測(cè)了BC組、non-BC組和HC組的血清anti-CENPF濃度，結(jié)果顯示BC組血清anti-CENPF水平高于non-BC組和HC組（Plt;0.05）。同時(shí)，本課題組以病理學(xué)診斷作為金標(biāo)準(zhǔn)繪制ROC曲線，結(jié)果顯示anti-CENPF 檢測(cè)診斷乳腺癌的AUC為0.714，證明anti-CENPF對(duì)乳腺癌有較好的診斷價(jià)值，但是其診斷靈敏度高、特異性較低。而傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物CA153對(duì)乳腺癌診斷的特異性高但靈敏度較低。anti-CENPF聯(lián)合CA153檢測(cè)的AUC與CA153單獨(dú)檢測(cè)相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.013），可將診斷乳腺癌的靈敏度由33.0%提高到75.0%，減少了部分因CA153假陰性結(jié)果導(dǎo)致的患者漏診。這些結(jié)果提示血清anti-CENPF的表達(dá)升高對(duì)于乳腺癌的診斷具有重要價(jià)值，具備成為乳腺癌檢測(cè)標(biāo)志物的潛力，與CA153聯(lián)合檢測(cè)可進(jìn)一步提高對(duì)乳腺癌的診斷效能。

在分析血清anti-CENPF濃度與乳腺癌患者不同病理特征之間的關(guān)系時(shí)，我們發(fā)現(xiàn)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或者HER-2 陰性的乳腺癌患者血清anti-CENPF濃度明顯升高。不同腫瘤大小之間的anti-CENPF水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Ⅳ期和Ⅲ期乳腺癌患者血清anti-CENPF濃度也明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期。腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移均是乳腺癌AJCC臨床分期的重要指標(biāo)，說明了血清anti-CENPF濃度與乳腺癌臨床分期相關(guān)，可作為臨床分期重要的參考指標(biāo)。乳腺癌患者臨床分期與預(yù)后密切相關(guān)，分期越晚，預(yù)后越差。特別是出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移之后，部分患者已經(jīng)喪失了手術(shù)機(jī)會(huì)，因此Ⅳ期乳腺癌患者平均中位生存時(shí)間只有2～3年[12]。本研究中，血清anti-CENPF濃度在Ⅲ期和Ⅳ期乳腺癌患者中明顯升高，說明乳腺癌患者血清anti-CENPF濃度越高，預(yù)后越差。

第8版AJCC癌癥分期系統(tǒng)提出預(yù)后分期包括解剖學(xué)TNM分期、腫瘤組織學(xué)分級(jí)（G）、生物標(biāo)志物（ER和PR、HER-2）的表達(dá)狀態(tài)及多基因檢測(cè)復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)[13]。由于本研究部分患者缺乏腫瘤組織學(xué)分級(jí)的相關(guān)信息，無法用預(yù)后分期對(duì)患者進(jìn)行預(yù)后判斷。但有研究顯示在預(yù)后分期統(tǒng)計(jì)中發(fā)現(xiàn)，HER-2過表達(dá)型乳腺癌患者會(huì)出現(xiàn)預(yù)后分期降期，這與HER-2 陽性BC 患者可以抗 HER-2 靶向治療有關(guān)[14]。而三陰型乳腺癌患者，多數(shù)組織學(xué)分化不良，且臨床上缺乏內(nèi)分泌治療及抗HER-2治療的靶點(diǎn)，化療是主要的治療手段，因此預(yù)后最差[15]。本研究中，預(yù)后最好的HER-2過表達(dá)型BC患者血清anti-CENPF 濃度最低，而預(yù)后最差的TNBC 患者血清anti-CENPF濃度最高，并且HER-2過表達(dá)型BC患者血清anti-CENPF水平低于TNBC患者（P=0.005）。同時(shí)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)在Luminal A型和Luminal B型的乳腺癌患者中，HER-2 陰性組的anti-CENPF濃度也高于HER-2陽性組（P=0.026）。這些結(jié)果都也間接證實(shí)了血清anti-CENPF水平可能與乳腺癌預(yù)后呈負(fù)相關(guān)。

綜上所述，anti-CENPF是一個(gè)輔助診斷乳腺癌良好的血清學(xué)指標(biāo)，血清anti-CENPF聯(lián)合CA153檢測(cè)可提高對(duì)乳腺癌的診斷效能。血清anti-CENPF與乳腺癌臨床分期和分子分型都存在相關(guān)性，并且anti-CENPF水平可能與乳腺癌預(yù)后呈負(fù)相關(guān)，有望成為乳腺癌潛在的疾病標(biāo)志物。