【摘要】 目的：研究依達(dá)拉奉右莰醇聯(lián)合丹紅注射液治療急性腦梗死（ACI）患者的臨床效果及對患者血液流變學(xué)與血清miR-34c水平的影響。方法：選取2021年8月—2023年2月104例入住在贛南醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院的ACI患者作為研究對象，隨機(jī)分為單一組和聯(lián)合組。兩組均進(jìn)行常規(guī)治療，在此基礎(chǔ)上，單一組給予丹紅注射液治療，聯(lián)合組給予依達(dá)拉奉右莰醇聯(lián)合丹紅注射液治療，兩組均治療2周。觀察患者治療后臨床療效、治療前后的神經(jīng)功能、日常生活能力、血液流變學(xué)各指標(biāo)和不良反應(yīng)，抽取血樣檢測血清超氧化物歧化酶（SOD）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）和miR-34c水平的變化。結(jié)果：治療后聯(lián)合組總有效率為90.38%，明顯高于單一組的75.00%，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）。治療1、2周后，兩組NIHSS評分、血液流變學(xué)各指標(biāo)和hs-CRP水平均明顯降低，且聯(lián)合組均顯著低于單一組（Plt;0.05）；而Barthel指數(shù)評分、血清SOD和miR-34c水平均明顯升高，且聯(lián)合組均顯著高于單一組（Plt;0.05）。兩組的不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）。結(jié)論：使用達(dá)拉奉右莰醇聯(lián)合丹紅注射液治療ACI患者可以增強(qiáng)治療效果和日常生活能力，改善患者的神經(jīng)功能和血液流變學(xué)參數(shù)，并且能夠提高血清miR-34c水平以抑制炎癥反應(yīng)。

【關(guān)鍵詞】 依達(dá)拉奉右莰醇 丹紅注射液 急性腦梗死 血液流變學(xué) miR-34c

Effect of Edaravone Dexborneol Combined with Danhong in the Treatment of Acute Cerebral Infarction Patients and Its Influence on Hemorheology and miR-34c/WU Jiajian， QIU Chongrong， CHEN Hui， HUANG Zichen. //Medical Innovation of China， 2024， 21（28）： 0-034

[Abstract] Objective： To investigate the clinical efficacy of Edaravone Dexborneol and Danhong Injection in the treatment of patients with acute cerebral infarction （ACI） and their effects on hemorheology and serum miR-34c levels. Method： Between August 2021 and February 2023， 104 ACI patients admitted to the Third Affiliated Hospital of Gannan Medical University were selected as the study subjects and randomly divided into the single group and the combination group. Both groups received routine treatment， and on the basis of routine treatment， the single group received Danhong Injection treatment while the combination group received Edaravone Dexborneol and Danhong Injection treatment. Both groups were treated for 2 weeks. The clinical efficacy， neurologic function， activities of daily living， hemorheology indexes before and after treatment， and adverse reactions were observed in the patients. Blood samples were collected to detect the changes in serum superoxide dismutase （SOD）， high-sensitivity C reactive protein （hs-CRP） and miR-34c levels. Result： The total effective rate of the combination group after treatment was 90.38%， significantly higher than 75.00% of the single group， the difference between two groups was statistically significant （Plt;0.05）. After 1 week and 2 weeks of treatment， the NIHSS scores， various indicators of hemorheology and hs-CRP levels in both groups were significantly reduced， and those of the combination group were significantly lower than those of the single group （Plt;0.05）; the Barthel index score， serum SOD and miR-34c levels were significantly increased， and those of the combination were significantly higher than those of the single group （Plt;0.05）. There were no statistically significant differences in the incidences of adverse reactions between two groups （Pgt;0.05）. Conclusion： The combination of Edaravone Dexborneol and Danhong Injection in the treatment of patients with ACI can improve the clinical efficacy and activities of daily living， improve neurologic function and hemorheology， and upregulate serum miR-34c levels to inhibit inflammatory responses.

[Key words] Edaravone Dexborneol Danhong Injection Acute cerebral infarction Hemorheology miR-34c

First-author's address： Department of Internal Medicine Ⅰ， the Third Affiliated Hospital of Gannan Medical University， Ganzhou 341000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2024.28.007

腦梗死是因腦部動脈狹窄或閉塞導(dǎo)致腦部血液循環(huán)障礙，又被稱為缺血性腦卒中，而急性腦梗死（acute cerebral infarction，ACI）則是表現(xiàn)發(fā)病突然、病情變化迅速。ACI可損傷神經(jīng)功能，臨床表現(xiàn)偏癱嚴(yán)重時(shí)可昏迷，若得不到及時(shí)治療可能造成不可逆轉(zhuǎn)的損傷、發(fā)生嚴(yán)重并發(fā)癥甚至死亡[1]。目前對于ACI主要是疏通患者腦血管，可通過溶栓、抗凝治療等手段，同時(shí)保護(hù)患者梗死缺血的腦組織以防進(jìn)一步惡化，但以上治療效果并不佳[2]。故尋找更為有效的治療方式對ACI患者而言十分重要。丹紅注射液是一種中藥制劑，是從丹參和紅花中提取出的有效成分制成。具有抗血栓形成、緩解微小血管的收縮、促進(jìn)血液在微小血管中的流動和保護(hù)腦缺血等作用[3]。而依達(dá)拉奉右莰醇是由依達(dá)拉奉與右莰醇共同構(gòu)成的由我國自主研發(fā)的近來興起的治療ACI的腦神經(jīng)保護(hù)劑，研究表明其具有雙重作用，一方面可以減輕炎癥反應(yīng)，另一方面可以清除有害的自由基，其療效仍需被證實(shí)[4]。因此，本研究擬以ACI患者為研究對象，探討依達(dá)拉奉右莰醇聯(lián)合丹紅注射液治療ACI患者的效果及對血液流變學(xué)與血清miR-34c水平的影響，旨為治療ACI提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021年8月—2023年2月收治于贛南醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院的104例ACI患者作為研究對象，隨機(jī)分為單一組和聯(lián)合組。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合文獻(xiàn)[5]《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》中關(guān)于ACI的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且顱腦CT和顱腦MRI影像確診符合新發(fā)梗死灶。②腦梗死發(fā)病時(shí)間lt;16 h。③臨床資料完整且依從性良好。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①血液系統(tǒng)或免疫系統(tǒng)存在異常情況。②過敏體質(zhì)，對本研究藥物有禁忌證。③嚴(yán)重的心、肝、腎功能不全等多臟器功能異常。④處于妊娠期或哺乳期女性。贛南醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)了該研究。嚴(yán)格遵循了患者自愿參加的原則，同時(shí)獲得患者或患者家屬簽名的知情同意書。

1.2 方法

（1）兩組患者入院后都接受了常規(guī)治療，包括控制血糖水平、對高血壓患者進(jìn)行適當(dāng)?shù)慕祲捍胧ó?dāng)收縮壓超過180 mmHg時(shí)）、調(diào)節(jié)血脂水平，并在必要時(shí)給予阿司匹林和氯吡格雷等針對癥狀的治療，伴顱內(nèi)壓高者給予脫水降壓治療等。（2）單一組在以上基礎(chǔ)上給予丹紅注射液治療：丹紅注射液（生產(chǎn)廠家：山東丹紅制藥有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z20026866，規(guī)格：10 mL/支）20 mL加入5%葡萄糖注射液250 mL稀釋后緩慢滴注，1次/d，連續(xù)治療14 d。（3）聯(lián)合組在常規(guī)治療和單一組用藥基礎(chǔ)上給予依達(dá)拉奉右莰醇注射用濃溶液（生產(chǎn)廠家：海南先聲藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20200007，規(guī)格：5 mL：依達(dá)拉奉10 mg與右莰醇2.5 mg）15 mL加入0.9%氯化鈉注射液100 mL稀釋后靜脈滴注，1次/d，連續(xù)治療14 d。

1.3 觀察指標(biāo)及評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

（1）臨床療效評價(jià)：在患者治療結(jié)束后進(jìn)行療效判定。依據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表（national institutes of health stroke scale，NIHSS）評分評價(jià)療效，痊愈：癥狀消失，日常生活可以自理，NIHSS評分改善超90%；顯著有效：癥狀得以明顯改善，日常生活大部分自理，NIHSS評分改善超60%；有效：癥狀輕微改善，日常生活少部分自理，NIHSS評分改善超20%；無效：癥狀無改善甚至加重，日常生活不能自理?？傆行?（痊愈例數(shù)+顯著有效例數(shù)+有效例數(shù)）/總例數(shù)×100%[6]。（2）神經(jīng)功能和日常生活能力評價(jià)：觀察兩組治療前、治療1周、治療2周的NIHSS評分和Barthel指數(shù)評分。NIHSS評分評價(jià)神經(jīng)功能，從輕、中、重型分?jǐn)?shù)范圍為0～45分。分?jǐn)?shù)越高代表神經(jīng)功能障礙程度高[7]。Barthel指數(shù)評價(jià)日常生活能力，從無獨(dú)立能力、全部日常生活皆需幫助到無需他人幫助，對應(yīng)0～100分。分值越高代表自理能力越高。（3）血液流變學(xué)各指標(biāo)、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、超敏C反應(yīng)蛋白（high sensitivity C reactive protein，hs-CRP）和血清miR-34c水平檢測：在治療前、治療1周和治療2周抽取所有患者清晨空腹肘正中靜脈血，30 min內(nèi)離心（3 000 r/min）15 min，將血清分離出-70 ℃保存待測。使用血液流變學(xué)檢測儀器LYB-N6B型全自動學(xué)變儀（北京普利生儀器有限公司）檢測血液流變學(xué)各指標(biāo)（紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白原、血漿黏度、全血高切黏度和全血低切黏度）；采用比色法測定SOD（上?？道噬锟萍加邢薰荆?、采用酶聯(lián)免疫吸附法測定hs-CRP（江蘇基蛋生物科技股份有限公司），嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作；采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription-polymerase chain reac-tion，RT-PCR）檢測血清miR-34c表達(dá)水平。PCR反應(yīng)步驟：95 ℃預(yù)變性5 min；95 ℃變性30 s，60 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，共40個循環(huán)；72 ℃再延伸10 min。每份標(biāo)本重復(fù)檢驗(yàn)3次，最終取3次平均值。U6RNA上游引物序列：5'-CTCGCTTCGGCAGCACA-3'，下游引物：5'-ACGCTTCACGAATTTGCGT-3'；miR-34c上游引物：5'-AGTTACTAGGCAGTGTAGT-3'，下游引物：5'-TCTTTTTACCTGGCCGTGTG-3'。上海桑尼生物科技有限公司合成相關(guān)引物，miR-34c相對表達(dá)水平采用2-ΔΔCt法計(jì)算[8]。（4）比較兩組不良反應(yīng)發(fā)生情況：包括惡心嘔吐、發(fā)熱、肝功能異常、彌漫性血管內(nèi)凝血（disseminated intravascular coagulation，DIC）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)經(jīng)Excel整理數(shù)據(jù)，采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。計(jì)量資料用（x±s）表示，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布時(shí)兩組比較用t檢驗(yàn)或采用字2檢驗(yàn)。重復(fù)測量數(shù)據(jù)采用重復(fù)測量方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用Bonferroni法。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組基線資料比較

單一組52例，男19例（36.54%），女33例（63.46%）；年齡56～72歲，平均（63.63±4.35）歲；體重指數(shù)（BMI）21～23 kg/m2，平均（22.00±0.79）kg/m2；高血壓20例（38.46%）；冠心病22例（42.31%）；糖尿病30例（57.69%）；吸煙或飲酒史18例（34.62%）；急性腦卒中Org 10172治療試驗(yàn)（trial of Org 10172 in acute stroke treatment，TOAST）分型：大動脈粥樣硬化（LAA）20例（38.46%），心源性（CE）16例（30.77%），小動脈閉塞（SAA）9例（17.31%），其他7例（13.46%）。聯(lián)合組52例，男23例（44.23%），女29例（55.77%）；年齡55～72歲，平均（63.63±5.28）歲；BMI 20～24 kg/m2，平均（22.12±1.33）kg/m2；高血壓19例（36.54%）；冠心病25例（48.08%）；糖尿病28例（53.85%）；吸煙或飲酒史21例（40.38%）；TOAST分型：LAA 22例（42.31%），CE 18例（34.62%），SAA 7例（13.46%），其他5例（9.62%）。兩組的性別、年齡、BMI等差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），具有對比性。

2.2 兩組臨床療效比較

與單一組相比，聯(lián)合組的總有效率明顯更高（字2=4.300，P=0.038），見表1。

2.3 兩組各時(shí)間段NIHSS評分和Barthel指數(shù)評分比較

治療1、2周后，兩組NIHSS評分逐漸明顯降低，且聯(lián)合組均顯著低于單一組（Plt;0.05）；而兩組Barthel指數(shù)評分逐漸明顯升高，且聯(lián)合組均顯著高于單一組（Plt;0.05）。見表2。

2.4 兩組各時(shí)間段血液流變學(xué)各指標(biāo)比較

治療1、2周后，兩組血液流變學(xué)各指標(biāo)均逐漸明顯降低，且聯(lián)合組均顯著低于單一組（Plt;0.05），見表3。

2.5 兩組各時(shí)間段SOD、hs-CRP和miR-34c水平比較

治療1、2周后，兩組血清SOD和miR-34c水平均逐漸明顯升高，且聯(lián)合組均顯著高于單一組（Plt;0.05）；而兩組hs-CRP水平均逐漸明顯降低，且聯(lián)合組顯著低于單一組（Plt;0.05）。見表4。

2.6 兩組不良反應(yīng)發(fā)生情況比較

兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），見表5。

3 討論

ACI具有較高的發(fā)生率與致死率，其發(fā)病機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜，主要是由于血管、血液和血流動力學(xué)方面出現(xiàn)異常變化，導(dǎo)致小動脈阻塞、心源性血栓形成或大動脈粥樣硬化等病理現(xiàn)象[9]。其對大腦的影響取決于梗死的時(shí)間與程度，對其及時(shí)治療有利于患者的恢復(fù)與預(yù)后。治療ACI時(shí)的基本原則是應(yīng)快速恢復(fù)缺血區(qū)域的血流（溶栓）、通過血管擴(kuò)張劑、抗血小板聚集劑等改善腦部微循環(huán)、保護(hù)腦細(xì)胞等，最大限度地減少腦損傷并促進(jìn)患者的康復(fù)[10]。

丹紅注射液具有調(diào)養(yǎng)血管，保護(hù)心臟健康，促進(jìn)血液流動等，可用于治療腦梗死、心絞痛等疾病。對于ACI患者的治療依達(dá)拉奉和右莰醇有一定的作用：依達(dá)拉奉右莰醇由4︰1的配比組合而成，依達(dá)拉奉是一種抗氧化劑，可以幫助清除自由基，防止脂質(zhì)過氧化，從而保護(hù)腦細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和血管內(nèi)皮功能免受氧化損傷。而右莰醇被認(rèn)為具有多種生物活性，包括抗氧化、抗炎和抗癌等作用。研究發(fā)現(xiàn)右莰醇可以抑制炎癥反應(yīng)，減少炎癥蛋白和細(xì)胞因子的表達(dá)，從而具有一定的抗炎作用。這種抗炎作用可能對一些炎癥相關(guān)疾病的治療具有潛在的益處。二者4︰1的配比協(xié)同作用，最大程度發(fā)揮保護(hù)神經(jīng)功能作用[11-12]。本研究結(jié)果顯示治療后聯(lián)合組總有效率為90.38%，明顯高于單一組的75.00%，且在治療1周與2周后，與單一組相比，聯(lián)合組的NIHSS評分均明顯低，而Barthel指數(shù)評分均明顯高。表明依達(dá)拉奉右莰醇聯(lián)合丹紅注射液起到協(xié)同效應(yīng)能夠更好地改善ACI患者的臨床癥狀提高治療效果，與單獨(dú)使用丹紅注射液相比聯(lián)合用藥更能改善患者神經(jīng)功能癥狀和提高患者日常生活能力。同時(shí)兩組的不良反應(yīng)發(fā)生率比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），兩組不良反應(yīng)發(fā)生率均較低，具有較好的安全性，這與胡凱[13]研究一致。

研究結(jié)果亦表明，治療后聯(lián)合組的血液流變學(xué)各指標(biāo)和hs-CRP水平均低于單一組，而血清SOD水平高于單一組。說明依達(dá)拉奉右莰醇聯(lián)合丹紅注射液能夠顯著改善血液流變學(xué)，降低血液黏稠度，抑制炎癥反應(yīng)，疏通腦血管梗死。究其原因可能是氧化應(yīng)激與ACI發(fā)生密切相關(guān)。氧自由基會破壞腦梗死患者的蛋白質(zhì)、核酸以致造成細(xì)胞損害并引發(fā)細(xì)胞壞死。SOD是一種抗氧化酶，能夠催化超氧自由基（一種高度活性的氧化物質(zhì)）的轉(zhuǎn)化，將其轉(zhuǎn)化為較穩(wěn)定的氧分子和過氧化氫。過多的超氧自由基會導(dǎo)致氧化應(yīng)激，進(jìn)而對細(xì)胞和組織造成損害。SOD的主要作用是清除超氧自由基，維持氧化與抗氧化平衡，保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激的傷害，其活性水平可以間接反映機(jī)體清除自由基的能力[14]。而依達(dá)拉奉作為一種清除體內(nèi)自由基的藥物可通過上調(diào)SOD活性、改善血液流變學(xué)各指標(biāo)，有效地減少腦梗死后氧化反應(yīng)的發(fā)生，延緩神經(jīng)細(xì)胞的損傷，并保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞[15-16]。丹紅中丹參其主要成分為丹參酚酸和丹參酮，可改善腦梗死患者微循環(huán)，減輕炎癥反應(yīng)；紅花具有通絡(luò)化瘀效果，其主要成分為紅花黃色素、紅花多糖和紅花甙，對血管具有擴(kuò)張作用，同時(shí)可降低血漿黏度及抑制纖維蛋白的水平，降低炎癥反應(yīng)[17]。有研究發(fā)現(xiàn)，ACI的發(fā)生發(fā)展與炎癥因子密切相關(guān)，

hs-CRP在急性炎癥狀態(tài)下迅速上升，與炎癥反應(yīng)和組織損傷程度相關(guān)。本研究表明依達(dá)拉奉右莰醇聯(lián)合丹紅注射液可降低hs-CRP水平而減輕炎癥反應(yīng)，右莰醇還可以激活γ-氨基丁酸A型受體（gamma-aminobutyricacid type A receptor，GABAAR），這是一種神經(jīng)遞質(zhì)受體，具有抗神經(jīng)元凋亡和減少細(xì)胞死亡的作用。這可能是右莰醇保護(hù)血腦屏障的機(jī)制之一[18]。microRNAs（miRNAs）是一類短小的非編碼RNA分子，近年來的研究發(fā)現(xiàn)，miRNAs在人體血液中具有RNA酶耐受性并且相對穩(wěn)定，可通過血液樣本被檢測到，外周血液中miRNAs的異常表達(dá)可以作為疾病的潛在生物標(biāo)志物[19]。近來研究提示，ACI患者外周血miRNAs會呈現(xiàn)異常表達(dá)，其可能參與了大腦缺血缺氧的過程[20]。本研究結(jié)果表明，治療1、2周后聯(lián)合組的miR-34c水平均較單一組高，說明依達(dá)拉奉右莰醇聯(lián)合丹紅注射液能夠上調(diào)miR-34c水平，其表達(dá)上升在ACI治療中發(fā)揮著重要作用。原因可能是miRNAs與炎癥細(xì)胞和介質(zhì)的表達(dá)存在關(guān)聯(lián)，這一點(diǎn)在大鼠腦缺血缺氧模型的研究中也得到了驗(yàn)證。研究結(jié)果顯示，miR-34c通過抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生，顯著降低了大鼠的神經(jīng)功能缺損評分[21]。

綜上所述，對于ACI而言，依達(dá)拉奉右莰醇聯(lián)合丹紅注射液治療能明顯提高臨床效果且無嚴(yán)重不良反應(yīng)，改善血液流變學(xué)和神經(jīng)功能，以及減輕炎癥反應(yīng)。本研究尚存在樣本量較少等不足，同時(shí)可進(jìn)一步探討miR-34c調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的機(jī)制，提供可靠的參考價(jià)值。

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（收稿日期：2024-02-19） （本文編輯：占匯娟）