初 陽 ，陳 濤 ，2，馮婉玉 *

（1.中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥學(xué)部，遼寧沈陽 110001；2.重慶市巴南區(qū)第三人民醫(yī)院藥劑科，重慶 401338）

正交試驗(yàn)優(yōu)選透明質(zhì)酸鈉乳膏的處方工藝

初 陽1，陳 濤1，2，馮婉玉1*

（1.中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥學(xué)部，遼寧沈陽 110001；2.重慶市巴南區(qū)第三人民醫(yī)院藥劑科，重慶 401338）

目的：優(yōu)選透明質(zhì)酸鈉乳膏劑的最優(yōu)處方。方法：以乳膏劑的外觀考察、穩(wěn)定性考察、穩(wěn)定常數(shù)測定及顯微鏡法觀察作為考察指標(biāo)，采用單因素考察和正交試驗(yàn)優(yōu)選最優(yōu)處方。結(jié)果：橄欖油、液體石蠟、硬脂酸的投藥比例為1∶0.8∶1，在水相中加入主藥。結(jié)論：該工藝制得乳膏劑膏體柔軟細(xì)膩，光亮美觀，涂展好，滲透快，穩(wěn)定性好，顯微鏡觀察粒子均勻。

透明質(zhì)酸鈉乳膏；單因素考察；正交試驗(yàn)

透明質(zhì)酸（Hyaluronic acid，HA）又叫玻尿酸，是一種酸性黏多糖。它能夠吸收自身500倍以上的水分，為彈力纖維和膠原纖維提供充足的水分環(huán)境，從而保持肌膚彈性和張力[1-2]。將透明質(zhì)酸鈉制成乳膏制劑，既可幫助患者延緩皮膚衰老，補(bǔ)充皮膚水分；又可幫助外傷患者傷口愈合，防止瘢痕產(chǎn)生[3-4]。雖然已有上市的含透明質(zhì)酸的化妝品[5]，但透明質(zhì)酸僅作為保濕劑出現(xiàn)，并非主要成分，因此藥用效果不明顯；同時(shí)化妝品花費(fèi)較高，含量較少，也不適合大規(guī)模藥用。因此，進(jìn)行透明質(zhì)酸鈉乳膏劑處方工藝研究，探討工業(yè)化生產(chǎn)藥用透明質(zhì)酸鈉乳膏劑工藝。

1 材料與方法

1.1 試劑

透明質(zhì)酸鈉 （山東福瑞達(dá)生物化工有限公司，批號(hào)：0911062，外用級(jí)）；硬脂酸（湖南爾康制藥有限公司，批號(hào)：20090202）；液體石蠟 （湖南爾康制藥有限公司，批號(hào)：20091201）；橄欖油 （上海日尚日用品有限公司，批號(hào)：20090130）；甘油（沈陽紅旗制藥有限公司，批號(hào)：0912011）；三乙醇胺（西安東寶天元科技實(shí)業(yè)公司，批號(hào)：20090201）；海藻酸鈉（天津市遠(yuǎn)航化學(xué)品有限公司）。

1.2 儀器

HS-6型熱恒溫箱 （太倉市華利達(dá)實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；HP8453型紫外分光光度器 （美國安捷倫公司）；AE200型電子分析天平 （遼寧省科學(xué)器材總公司）；TGL-16B型離心機(jī)（北京京立離心機(jī)有限公司）；DGF30/7-IA-HG101-1A型電熱鼓風(fēng)干燥箱（南京實(shí)驗(yàn)儀器廠）。

2 處方設(shè)計(jì)

2.1 基礎(chǔ)處方工藝

分別稱量油相（硬脂酸3 g、橄欖油2.5 g、液體石蠟2 g）和水相（甘油2.5 g、三乙醇胺0.2 g、海藻酸鈉0.15 g、防腐劑適量、純化水5 ml、透明質(zhì)酸鈉0.2 g），置于燒杯中，使油相達(dá)75℃，水相達(dá)90℃，充分?jǐn)嚢枳屍淙芑?，再將油相緩緩加入水相中進(jìn)行乳化，乳化時(shí)保持一定溫度并不斷勻速攪拌成乳膏狀，冷凝，即得。

2.2 考察指標(biāo)

2.2.1 外觀考察 將乳膏分別置于常溫，30℃條件下3個(gè)月，考察膏體稠度、光澤性、涂展性、滲透性。

2.2.2 穩(wěn)定性考察 （離心實(shí)驗(yàn)）[6]將乳劑置10 cm離心管中以3 750 r/min速度離心5 h，相當(dāng)于放置1年的自然分層效果，此法可用于對(duì)乳劑的穩(wěn)定性考察。

2.2.3 穩(wěn)定常數(shù)測定[6]乳劑離心前后光密度變化百分率稱為穩(wěn)定常數(shù)，用Ke表示，其表達(dá)式如下：

式中，A0：未離心乳劑稀釋液的吸光度；A：離心后乳劑稀釋液的吸光度，Ke值愈小乳劑愈穩(wěn)定。此法是研究乳劑穩(wěn)定性的定量方法。

2.2.4 顯微鏡法測定[6]用10×10倍數(shù)的光學(xué)顯微鏡觀察粒子狀態(tài)，考察乳劑是否均勻。

2.3 單因素考察

2.3.1 主藥加入方式考察 所用藥品量為基礎(chǔ)處方量，通過改變主藥加入方式對(duì)乳膏劑進(jìn)行外觀考察，見表1。

由表1可知，不同的主藥加入方式可影響乳膏劑的外觀。

2.3.2 水相中甘油量的考察 基礎(chǔ)處方中甘油量定于1.5 g、2.5 g、

4 g，其他藥品量為基礎(chǔ)處方中藥品量，主藥加入方式暫定為加入水相。外觀考察結(jié)果見表2。

表2 水相中甘油量的考察Tab.2 Investigation of the glycerol in aqueous phase

由表2看出，甘油的加入量對(duì)透明質(zhì)酸鈉乳膏劑的外觀影響不大。

2.3.3 油相中橄欖油和液體石蠟比例考察 水相比例不變，主藥加入方式定為水相，乳化劑固定在2.5 g。分別改變橄欖油和液體石蠟的比例，分3個(gè)水平考察，其結(jié)果見表3。

表3 油相中橄欖油和液體石蠟比例的考察Tab.3 Ratio investigation of olive oil and liquid paraffin in oil phase

由表3可知，油相中橄欖油和液體石蠟的比例不同，對(duì)透明質(zhì)酸鈉乳膏劑的外觀有較大影響。

2.3.4 乳化劑量考察 水相和油相（橄∶液=1∶0.8）的比例保持不變，主藥加入方式為水相。通過改變?nèi)榛瘎┑牧?，?個(gè)水平考察，結(jié)果見表4。

表4 乳化劑量考察Tab.4 Investigation examine the amount of emulsifier

由表4看出，硬脂酸的加入量不同，對(duì)透明質(zhì)酸鈉乳膏劑的外觀有較大影響。

2.4 正交試驗(yàn)

通過上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，水相中甘油量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響小，故在后面的正交試驗(yàn)因素水平設(shè)計(jì)中不作考慮；而油相各成分比例和主藥加入方式及乳化劑的量對(duì)結(jié)果有明顯的影響。所以將油相配比、乳化劑用量、主藥的加入方式作為正交試驗(yàn)的3個(gè)因素，選用L9（34）正交表進(jìn)行試驗(yàn)，見表5。

表5 正交試驗(yàn)因素水平表Tab.5 Orthogonal factor level table

2.5 考察指標(biāo)結(jié)果與評(píng)分

對(duì)上述正交因素進(jìn)行外觀綜合考察、穩(wěn)定性考察、穩(wěn)定常數(shù)測定、顯微鏡觀察，得到結(jié)果與評(píng)分見表6～9、圖1。

表6 外觀考察結(jié)果與評(píng)分（放置3個(gè)月）Tab.6 Results and score of the exterior inspection （for 3 months）

2.6 正交試驗(yàn)結(jié)果

通過正交試驗(yàn)直觀分析結(jié)果顯示，A、C因素對(duì)透明質(zhì)酸軟膏穩(wěn)定性的影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B因素對(duì)其穩(wěn)定性相對(duì)較小。影響其穩(wěn)定性和外觀性狀的主次因素順序?yàn)锳＞C＞B。根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果，選擇有較好的穩(wěn)定性又有較理想的外觀性狀，其處方配比和工藝條件是A1B1C1。

2.7 工藝確定

通過正交試驗(yàn)，該處方最優(yōu)配方及工藝為乳化劑硬脂酸為2.5 g、油相中橄欖油為2.5 g、液體石蠟為2.0 g、水相中甘油為 5.06 g、三乙醇胺 0.2 g、海藻酸鈉 0.15 g、純化水 5 ml、透明質(zhì)酸鈉0.20 g、防腐劑適量；主藥加入方式為水相。水相油相分別加熱到規(guī)定溫度，再將油相緩慢倒入水相中進(jìn)行乳化，乳化時(shí)保持一定溫度，攪拌均勻，待膏體成型后，冷卻，即可。

表7 離心實(shí)驗(yàn)結(jié)果與評(píng)分Tab.7 Results and score of the centrifugal experiment

表8 穩(wěn)定常數(shù)的測定結(jié)果與評(píng)分Tab.8 Results and score of the stability constant

2.8 加速試驗(yàn)

將最優(yōu)處方乳膏劑以軟管封裝，在溫度（30±2）℃、相對(duì)濕度（65±5）%的條件[7]下放置 6個(gè)月，觀察乳膏劑外觀，外觀顯示乳膏劑無變化。

3 討論

目前關(guān)于透明質(zhì)酸鈉乳劑的研究較少，僅有周福富等[8]對(duì)透明質(zhì)酸鈉乳劑的處方進(jìn)行了研究，主要是對(duì)乳化劑的考察以及乳劑的穩(wěn)定性考察。本實(shí)驗(yàn)中，透明質(zhì)酸鈉乳劑加入了橄欖油以及海藻酸鈉，在保濕的同時(shí)，還可以起到滋潤護(hù)膚的功效；同時(shí)本實(shí)驗(yàn)從宏觀（外觀觀察、離心實(shí)驗(yàn)以及穩(wěn)定常數(shù)的測定）和微觀（顯微鏡粒子觀察）四個(gè)方面全面考察了乳劑的質(zhì)量，從中篩選出了最優(yōu)處方。

表 9 L9（34）正交試驗(yàn)Tab.9 L9 （34） Orthogonal test

海藻酸鈉為親水性膠體，易溶于水形成黏稠溶液。利用其增稠穩(wěn)定性能，可用作化妝品增稠劑、穩(wěn)定劑。在本處方中用作增加水相黏度的輔助乳化劑。

橄欖油富含抗氧化物質(zhì)及抑制活性氧的功效，能滲透進(jìn)肌膚的基底層，送去營養(yǎng)成分，從而促進(jìn)新陳代謝。橄欖油還含有多種人體所需的營養(yǎng)成分，不含香精和化學(xué)物質(zhì)，其脂肪酸和多種天然脂溶性維生素對(duì)滋養(yǎng)肌膚十分有利，在本處方中作為油相。

處方中乳化劑的設(shè)計(jì)：要作出穩(wěn)定的透明質(zhì)酸軟膏，處方設(shè)計(jì)中要考慮各成分的HLB值 （親水親油平衡值）等因素，其中乳化劑的選擇及比例的確定是關(guān)鍵。HLB值在3～6的表面活性劑適合用作W/O型乳化劑，HLB值在8～18的表面活性劑適合用作O/W型乳化劑。通過計(jì)算，硬脂酸三乙醇胺乳化劑的HLB值為16.7，可作O/W型乳化劑。

[1]凌沛學(xué).透明質(zhì)酸[M].北京:中國輕工業(yè)出版社,2000:1-2.

[2]黃思玲,郭學(xué)平,楊桂蘭,等.透明質(zhì)酸近兩年的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].食品與藥品,2009,11(1):50-53.

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Optimization of the formulation and technology of Hyaluronic Acid Sodium Cream by orthogonal test

CHU Yang1,CHEN Tao1,2,FENG Wanyu1*
(1.Department of Pharmacy,the First Affiliated Hospital of China Medical University,Liaoning Province,Shenyang 110001,China;2.Department of Pharmacy,Chongqing Ba'nan District Third People＇s Hospital,Chongqing 401338,China)

Objective:To select the prescription technology of Hyaluronic acid sodium Cream.Methods:Tade the appearance of cream,stability,stability constant and the microscope observation as the indexes,used single factor and orthogonal design the optimal prescription.Results:The proportion of olive oil,liquid paraffin,stearic acid is 1 ∶0.8∶1,joined the main medicine in the aqueous phase.Conclusion:The resulting product is soft,delicate,bright,beautiful,painted a good show,infiltrate fast,stable,uniform particles are observed.

Hyaluric acid sodium Cream;Single factor study;Orthogonal design

R943

A

1673-7210（2011）02（c）-057-04

初陽（1980-），女，遼寧沈陽人，碩士學(xué)歷，講師，藥劑學(xué)專業(yè)。[通訊作者] 馮婉玉（1960-），女，教授，博士。

2010-12-02）