張仙土　付承林　鄭煒智

[摘要] 目的 觀察Survivin在多發(fā)性骨髓瘤中的表達(dá)及其與VEGF的相關(guān)性。 方法 選擇2011年1月～2012年6月在我院就診的MM患者40例，所有患者均符合張之南主編的《血液病診斷和療效標(biāo)準(zhǔn)》（1998年）中提出的MM診斷標(biāo)準(zhǔn)及療效標(biāo)準(zhǔn)，采用免疫組化S-P法檢測(cè)多發(fā)性骨髓瘤患者Survivin、VEGF的表達(dá)以及二者間的相關(guān)性。 結(jié)果 Survivin在MM患者骨髓組織中的陽(yáng)性率達(dá)72.5%（29/40），VEGF在MM患者骨髓組織中的陽(yáng)性率達(dá)65.0%（26/40）。Survivin、VEGF在MM患者骨髓組織中的表達(dá)與治療情況及腫瘤分期關(guān)系密切，差異存在顯著性（P < 0.05）。Survivin與VEGF在MM患者骨髓組織中共同陽(yáng)性表達(dá)例數(shù)為23例，共同陰性例數(shù)8例，MM患者骨髓組織中Survivin和VEGF表達(dá)呈正相關(guān)（r = 0.562，P < 0.05）。 結(jié)論 Survivin和VEGF均參與了MM的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，且與疾病的進(jìn)展關(guān)系密切，Survivin和VEGF存在協(xié)同關(guān)系，值得臨床予以關(guān)注。

[關(guān)鍵詞] 多發(fā)性骨髓瘤；Survivin；VEGF；相關(guān)性

[中圖分類號(hào)] R733.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2013）09-0095-02

凋亡蛋白抑制因子（IAPs）具有抑制細(xì)胞凋亡的作用，研究證實(shí)，其表達(dá)與腫瘤發(fā)生關(guān)系密切[1]。生存素（Survivin）屬于IAPs家族中的一員，具有控制細(xì)胞分化及抑制凋亡的功能，是一種具有潛在價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物，也參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展[2]。研究證實(shí)，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，Survivin的表達(dá)與凋亡呈負(fù)相關(guān)，而與細(xì)胞增殖和血管發(fā)生呈正相關(guān)。多發(fā)性骨髓瘤（MM）是常見(jiàn)的血液腫瘤，其發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后與骨髓新生血管形成密切相關(guān)。已經(jīng)證實(shí)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）在此過(guò)程中扮演了關(guān)鍵角色[3]。目前關(guān)于Survivin在MM中的表達(dá)及與VEGF的關(guān)系的研究報(bào)道并不多，本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)30例MM患者的Survivin與VEGF的表達(dá)，并探討二者間的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年1月～2012年6月在我院就診的MM患者40例，符合張之南主編的《血液病診斷和療效標(biāo)準(zhǔn)》（1998年）中提出的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，40例MM中男21例，女19例；年齡35～79歲，平均（56.2±1.4）歲； 病程1～8年，平均（3.1±0.5）年。其中初治 22例，復(fù)發(fā)/難治患者18例；其中Ⅱ期11例，Ⅲ期29例。IgG型19例，IgA 型12例，其他類型9例。所有患者初治時(shí)均給予長(zhǎng)春地辛、表柔比星、地塞米松方案治療。

1.2 方法

鼠抗人Survivin單克隆抗體、鼠抗人VEGF單克隆抗體、S-P試劑盒購(gòu)自北京中山生物公司。采用免疫組化S-P法。應(yīng)用PBS替代一抗作陰性對(duì)照，已知陽(yáng)性片作陽(yáng)性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判斷[4]

Survivin、VEGF位于細(xì)胞質(zhì)，陽(yáng)性細(xì)胞出現(xiàn)明顯的棕黃色顆粒，每張骨髓片在高倍視野（×400）下觀察計(jì)數(shù)200個(gè)瘤細(xì)胞，以腫瘤陽(yáng)性細(xì)胞>10%為陽(yáng)性表達(dá)，≤10%為陰性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 討論

多發(fā)性骨髓瘤（MM）是惡性漿細(xì)胞病中最常見(jiàn)的一種類型，起病徐緩，臨床表現(xiàn)多樣， 嚴(yán)重危害成年人健康和生活質(zhì)量。研究證實(shí)，MM的發(fā)生發(fā)展與骨髓瘤細(xì)胞的異常增殖和微環(huán)境血管生成密切相關(guān)[5]。

VEGF在血管形成及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。它不僅促進(jìn)血管新生，使骨髓瘤細(xì)胞增殖，骨髓內(nèi)新生血管增多又可增加VEGF的分泌，VEGF在MM中起自分泌和旁分泌作用，可直接刺激MM細(xì)胞的體外增殖和遷移。 骨髓瘤細(xì)胞可能通過(guò)分泌VEGF，與微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的VEGFR相作用，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞增殖和趨化，刺激血管發(fā)生。MM的骨髓內(nèi)皮細(xì)胞（MMEC）可以通過(guò)自分泌方式促進(jìn)增殖，誘導(dǎo)血管新生。VEGF能刺激骨髓瘤細(xì)胞株和患者的瘤細(xì)胞增殖，且呈劑量依賴性。VEGF不僅通過(guò)自分泌途徑誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞增殖，還可以通過(guò)旁分泌途徑誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞增殖，其中骨髓基質(zhì)細(xì)胞起關(guān)鍵作用[6-10]。

Survivin是凋亡抑制蛋白家族的一個(gè)成員，具有控制細(xì)胞分化及抑制凋亡的功能。 研究表明，Survivin的表達(dá)與多種腫瘤的預(yù)后相關(guān)。國(guó)內(nèi)的李娟等[11]比較了初治和難治/復(fù)發(fā)MM患者Survivin的陽(yáng)性率表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但難治/復(fù)發(fā)組Survivin的陽(yáng)性率表達(dá)水平明顯高于初治組，說(shuō)明Survivin在骨髓瘤患者中的高表達(dá)可能是部分患者對(duì)化療不敏感的原因之一。王曉毅等[12]采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)MM 患者Survivin mRNA的表達(dá)，結(jié)果顯示初治組中Survivin mRNA的表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照組，復(fù)發(fā)組Survivin mRNA的表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照組，且較初治組亦高，因此，他們認(rèn)為，Survivin可能通過(guò)某種途徑抑制多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的凋亡，從而影響MM的治療效果。本研究中，結(jié)果顯示Survivin在MM患者骨髓組織中陽(yáng)性率達(dá)72.5%（29/40），VEGF在MM患者骨髓組織中的陽(yáng)性率達(dá)65.0%（26/40）。Survivin、VEGF在MM患者骨髓組織中的表達(dá)與治療情況及腫瘤分期關(guān)系密切，差異存在顯著性（P < 0.05）。與上述觀點(diǎn)基本一致。

近年來(lái)研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)，Survivin與血管生成亦密切相關(guān)。VEGF的大部分抗凋亡特性是通過(guò)誘導(dǎo)內(nèi)皮上Survivin表達(dá)實(shí)現(xiàn)，反義抑制Survivin可消除VEGF的抗凋亡功能。VEGF在腫瘤血管生成過(guò)程中發(fā)揮的內(nèi)皮細(xì)胞抗凋亡作用依賴于Survivin的表達(dá)上調(diào)，在VEGF誘導(dǎo)的基因中，Survivin是重要的和關(guān)鍵的調(diào)節(jié)因子， VEGF誘導(dǎo)Survivin表達(dá)可能是內(nèi)皮細(xì)胞耐藥的先決條件[13-16]。 本組資料也證實(shí)，MM患者骨髓組織中Survivin和VEGF表達(dá)呈正相關(guān)（r = 0.562，P < 0.05），進(jìn)一步證實(shí)Survivin和VEGF均參與了MM的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，且與疾病的進(jìn)展關(guān)系密切。Survivin和VEGF存在協(xié)同關(guān)系，值得臨床予以關(guān)注。

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（收稿日期：2013-01-08）