劉洋，李浪，蘇強，周游，王江友，孫羽涵，楊棟

強化阿托伐他汀對不穩(wěn)定性心絞痛患者冠狀動脈介入治療術(shù)后CD4+T淋巴細胞微小核糖核酸-21表達的影響*

劉洋，李浪，蘇強，周游，王江友，孫羽涵，楊棟

目的：探討強化阿托伐他汀對不穩(wěn)定性心絞痛患者經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(PCI）術(shù)后CD4+T淋巴細胞微小核糖核酸-21（microRNA-21，miRNA-21）表達的影響。

阿托伐他??；微小核糖核酸-21；經(jīng)皮冠狀動脈介入治療術(shù)；PDCD4； CD4+T淋巴細胞

(Chinese Circulation Journal, 2014,29: 26.)

經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(PCI）是目前治療冠心病先進而有效的手段之一,在迅速開通病變冠狀動脈恢復心肌血供的同時常常也可引起術(shù)后心肌損傷，是臨床常見而棘手的并發(fā)癥，是患者近遠期預后不良的獨立預測因子，臨床上缺乏有效的防治方法。因此，探索術(shù)后心肌損傷機制與防治的研究日益受到人們的重視。

既往研究發(fā)現(xiàn)，不穩(wěn)定性心絞痛急性反應期可激活CD4+T淋巴細胞,并致使腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-10等炎癥因子分泌異常，CD4+T淋巴細胞尤其Th1細胞，參與了不穩(wěn)定動脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生、發(fā)展過程[1]。PCI可誘發(fā)或促進不穩(wěn)定斑塊破裂，導致外周血T淋巴細胞的顯著激活，誘導促炎因子腫瘤壞死因子-α分泌增加，促進心肌局部炎癥的發(fā)生發(fā)展[2]。

微小核糖核酸（MicroRNA，miRNA）是一類廣泛存在基因組非編碼區(qū)的小分子RNA。近年發(fā)現(xiàn)，miRNA調(diào)控CD4+T淋巴細胞活化、分化，參與免疫炎癥反應[3]。新近研究發(fā)現(xiàn)miRNA-21通過負調(diào)控其靶基因程序性細胞死亡因子4（PDCD4）從而限制過度激活的炎癥反應[4]。有研究表明，miRNA-21表達上調(diào)可減少促炎因子腫瘤壞死因子-α分泌，促進抑炎因子白細胞介素-10釋放，抑制CD4+T淋巴細胞亞型Th1細胞過度活化的炎癥反應[5,6]。因而miRNA-21在CD4+T淋巴細胞介導的免疫炎癥反應中具有重要作用。

Patti等[7]研究結(jié)果表明，PCI術(shù)前2天給予80 mg大劑量的阿托伐他汀，可以有效的降低炎癥指標C反應蛋白水平，明顯減輕術(shù)后心肌損傷，推測該效益可能歸因于阿托伐他汀抗炎作用。雖然目前他汀類藥物在防治PCI術(shù)后心肌損傷中的作用機制尚未完全闡明，但眾多研究已表明他汀具有抑制心肌炎癥反應作用，而術(shù)后心肌CD4+T淋巴細胞被激活，誘發(fā)心肌炎癥反應是明確的[8]。 因此我們的研究目的觀察強化阿托伐他汀對不穩(wěn)定性心絞痛患者PCI圍術(shù)期CD4+T淋巴細胞miRNA-21表達的影響，為PCI術(shù)后心肌損傷的臨床防治提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

實驗對象：選取2011-11至2012-05入住我院行擇期PCI的不穩(wěn)定性心絞痛患者68例(男58例，女10例)，年齡（63±10）歲，隨機分為強化他汀組（術(shù)前2天給予阿托伐他汀80 mg/d，術(shù)后改為阿托伐他汀40 mg/d，n=34）和常規(guī)他汀組（術(shù)前及術(shù)后均給予阿托伐他汀20 mg/d，n=34），兩組均為術(shù)前2天首次服用阿托伐他汀。不穩(wěn)定性心絞痛患者均經(jīng)冠狀動脈造影證實存在冠狀動脈狹窄，有行PCI指征，且術(shù)前心肌酶學標記物肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌鈣蛋白I陰性，無他汀應用禁忌證，初發(fā)心絞痛、勞累惡化性心絞痛和靜息性心絞痛等。排除標準：合并嚴重感染或腫瘤患者；嚴重肝腎功能不全者；他汀類藥物過敏者；腦卒中；左心室射血分數(shù)＜30%；急診PCI。

試劑：人淋巴細胞分離液（中國），Dynabeads?FlowComp?人 CD4淋巴細胞試劑盒（挪威 ），RevertAid?FistStrand cDNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(立陶宛)，F(xiàn)ase Start Universal SYBR Green 實時熒光定量聚合酶鏈式反應試劑盒(美國)，All-in-one?微小核糖核酸實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(qRT-PCR)試劑盒(美國)，miRNA-21引物（美國），PDCD4 mRNA、甘油醛磷酸脫氫酶mRNA引物（中國），兔抗人PDCD4單抗（美國），GAPDH單抗(中國)，人腫瘤壞死因子-α 酶聯(lián)免疫法試劑盒（美國），人白細胞介素-10超敏酶聯(lián)免疫法試劑盒（中國）。

標本采集：強化他汀組和常規(guī)他汀組術(shù)前、術(shù)后16～24 h均抽血檢查肌酸激酶同工酶、肌鈣蛋白I、超敏C反應蛋白（由我院檢驗科檢測）及新鮮外周血，其中取1 ml新鮮外周血自然凝固20 min，2000 rpm離心10 min,收集血清用酶聯(lián)免疫法檢測腫瘤壞死因子-α和白細胞介素-10。余下用肝素抗凝后分離細胞。本試驗遵照廣西醫(yī)科大學醫(yī)學倫理委員會人體試驗管理規(guī)范執(zhí)行。標本采集均獲患者知情同意并簽署同意書。

細胞提?。焊鶕?jù)Ficoll-Paque密度梯度離心法提取兩組患者外周血單個核細胞(PBMC)細胞，嚴格按照Dynabeads?FlowComp?人 CD4淋巴細胞磁珠分選試劑盒說明書操作分選CD4+T淋巴細胞。分選出的細胞同樣做細胞計數(shù)，同時用0.4%臺盼藍染色觀察并計算出活細胞存活率，存活率＞90%的CD4+T淋巴細胞留下備用。

實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應檢測miRNA-21、PDCD4 mRNA表達量：按照 Trizol操作說明提取CD4+T淋巴細胞的總RNA，根據(jù)RevertAid?FistStrand cDNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書和All-in-one?miRNA實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應試劑盒說明書分別將PDCD4 mRNA及miRNA-21逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。根據(jù)Fase Start Universal SYBR Green實時熒光定量聚合酶鏈式反應試劑盒說明書和All-in-one?miRNA實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應試劑盒說明書分別加入不同組分，總反應體系均為20 μl。miRNA-21及內(nèi)參U6引物由GeneCopeia公司提供（引物ID分別為：hsmq-0057和hsnRNAU6），PDCD4引物：上游：5’-AACTGTGCCAACCAGTCCAA-3’，下游：5’-TCTTCTCAAATGCCCTTTCATC-3’；GAPDH引物：上游：5’-GAGTCAACGGATTTGGTCGT-3’下游：5’- GACAAGCTTCCCGTTCTCAG-3’，按試劑盒說明設置反應體系及參數(shù)，每個樣本均做復孔檢測，同時每次反應均設置陰性孔。實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應產(chǎn)物經(jīng)過測序檢測。結(jié)果采用2-ΔΔCT法比較。

蛋白免疫印跡法檢測各組 PDCD4 蛋白的表達：分選出的CD4+T淋巴細胞中加入100 μl蛋白裂解液混勻，然后在4℃下13 201×g離心20 min，提取上清轉(zhuǎn)移至新離心管中，然后用二辛可寧酸（BCA）法[15]檢測蛋白濃度，內(nèi)參為甘油醛磷酸脫氫酶（GAPDH）。配置12%分離膠和5%濃縮膠，進行十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳，半干法轉(zhuǎn)膜40 min，5%脫脂奶粉封閉1 h，一抗（稀釋比例1:2500）4℃敷育過夜，脫色搖床上用磷酸鹽吐溫洗脫液洗膜5次，紅外熒光二抗（稀釋比例1:5000）室溫敷育2 h后在雙色紅外激光成像系統(tǒng)掃描成像。odyssey 3.0軟件分析目標條帶及內(nèi)參條帶灰度值，以目標PDCD4條帶灰度值與內(nèi)參甘油醛磷酸脫氫酶條帶灰度值的比值作為目的蛋白的相對表達量。

酶聯(lián)免疫法檢測各組腫瘤壞死因子-α和白細胞介素-10濃度：將收集的血清標本及培養(yǎng)基上清和elisa試劑盒常溫下放置約30 min，根據(jù)試劑盒說明書操作，于酶標儀下讀取450 nm的OD值，根據(jù)標準曲線計算出樣本的濃度。

統(tǒng)計學處理：應用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)做統(tǒng)計學分析。計量資料以均數(shù)±標準差表示，正態(tài)性分析采用Kolmogorov-Smirnov檢驗，兩組間比較采用成組設計t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較用LSD檢驗；計數(shù)資料以頻數(shù)和構(gòu)成比表示，采用卡方檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1兩組一般臨床資料比較

兩組在既往冠心病史、吸煙史、高血壓、糖尿病史、藥物治療、術(shù)前CK-MB及肌鈣蛋白I等方面差異均無統(tǒng)計學意義（P均＞0.05）。表1

表1 兩組患者一般資料比較

表1 兩組患者一般資料比較

注：CK-MB：肌酸激酶同工酶。1 mmHg=0.133 kPa

項目 強化他汀組 (n=34) 常規(guī)他汀組 (n=34)男性[例 (%)] 30 (88.24) 27 (79.41)年齡 (歲) 62.54±9.35 65.57±11.45高血壓[例 (%)] 21 (61.76) 19 (55.88)糖尿病[例 (%)] 9 (26.47) 7 (20.59)血脂異常[例 (%)] 10 (29.41) 12 (35.29)冠心病史[例 (%)] 9 (26.47) 6 (17.65)吸煙史[例 (%)] 18 (52.94) 14 (41.18)收縮壓 (mmHg) 128.29±31.17 127.40±30.10舒張壓 (mmHg) 79.35±8.61 78.76±8.90術(shù)前肌鈣蛋白I陰性[例 (%)] 34 (100) 34 (100)術(shù)前CK-MB (U/L) 14.53±5.70 14.73±5.53藥物治療[例 (%)]阿司匹林 34 (100) 34 (100)氯吡格雷 34 (100) 34 (100)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑 30 (88.24) 31 (91.18) β受體阻滯劑 25 (73.53) 23 (67.65)鈣離子通道阻滯劑 11 (32.35) 8 (23.53)硝酸酯類 18 (52.94) 20 (58.82)

2.2兩組患者支架置入情況比較

兩組病變血管部位、病變血管支數(shù)及支架置入數(shù)等差異均無統(tǒng)計學意義（P均＞0.05）。表2

2.3兩組患者心肌損傷標記物術(shù)后高于正常高值的發(fā)生率比較

強化他汀組肌鈣蛋白I高于正常高值1～5倍的發(fā)生率低于常規(guī)他汀組（17%和30%），高于正常高值5倍以上的發(fā)生率也低于常規(guī)他汀組（30%和56%），差異均有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05）。強化他汀組CK-MB高于正常高值的發(fā)生率也低于常規(guī)他汀組（分別為25%和38%），差異均有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05）。

表2 兩組患者病變血管部位、支數(shù)及支架置入情況比較

表2 兩組患者病變血管部位、支數(shù)及支架置入情況比較

注：1 atm=101.325 kPa

項目 強化他汀組 (n=34) 常規(guī)他汀組 (n=34)病變血管左前降支[例（%）] 27 (79.41) 29 (85.29)左主干[例（%）] 4 (11.76) 5 (14.71)左回旋支[例（%）] 17 (50.00) 12 (35.29)右冠狀動脈[例（%）] 20 (58.82) 13 (38.24)單支血管病變[例（%）] 20（58.82） 22（64.71）兩支血管病變[例（%）] 12（35.29） 15（44.12）多支血管病變[例（%）] 5（14.70） 7（20.59）每個病人支架置入數(shù)（枚） 1.61±0.80 1.44±0.78平均支架長度（mm） 24.88±7.64 23.08±8.24平均支架直徑 (mm) 3.00±0.40 3.00±0.52支架釋放壓力（atm） 12.71±2.64 11.80±2.35

2.4兩組患者PCI術(shù)前術(shù)后超敏C反應蛋白、miRNA-21、PDCD4 mRNA、PDCD4蛋白、腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-10表達量的比較

常規(guī)他汀組術(shù)后超敏C反應蛋白、PDCD4 mRNA、PDCD4蛋白、腫瘤壞死因子-α較術(shù)前明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。強化他汀組術(shù)后miRNA-21、白細胞介素-10表達量較術(shù)前明顯升高，PDCD4 mRNA、PDCD4蛋白較術(shù)前明顯降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。表3，圖1

表3 兩 組 患 者PCI術(shù) 前 術(shù) 后 超 敏C反 應 蛋 白、miRNA-21、PDCD4 mRNA、PDCD4蛋白、腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-10表達量的比較

表3 兩 組 患 者PCI術(shù) 前 術(shù) 后 超 敏C反 應 蛋 白、miRNA-21、PDCD4 mRNA、PDCD4蛋白、腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-10表達量的比較

注：與本組術(shù)前比較*P＜0.05。PCI：經(jīng)皮冠狀動脈介入治療 miRNA-21：微小核糖核酸-21；PDCD4：程序性細胞死亡因子

常規(guī)他汀組 (n=34) 強化他汀組 (n=34)術(shù)前 術(shù)后 術(shù)前 術(shù)后超敏C反應蛋白(mg/L) 1.69±0.24 3.34±0.3* 1.83±0.18 1.69±0.25 miRNA-21 0.68±0.39 0.82±0.34 0.7±0.41 2.02±0.9*PDCD4 mRNA 7.83±2.32 9.54±1.68* 8.06±2.1 6.99±1.89*PDCD4蛋白 1.13±0.42 1.69±0.58* 1.38±0.54 0.83±0.44*腫瘤壞死因子-α (pg/ml) 15.20±9.92 26.25±9.32*15.56±7.28 17.29±7.13白細胞介素-10 (pg/ml) 7.60±2.83 7.36±3.78 8.82±5.31 11.38±6.64*

圖1 兩組患者PCI術(shù)前后PDCD4蛋白表達量電泳圖

3 討論

PCI是冠心病介入治療目前最有效手段之一，在開通病變冠狀動脈的同時常常也可引起心肌損傷，主要臨床表現(xiàn)為心肌損傷標記物肌鈣蛋白I水平的升高，預后不良。術(shù)中經(jīng)皮球囊擴張、支架置入等擠壓斑塊，損傷血管內(nèi)皮，誘導單核細胞合成炎性細胞因子等激發(fā)炎癥反應。PCI術(shù)后心肌損傷與炎癥反應密切相關(guān)，是圍術(shù)期心肌損傷的重要病因之一[9]。阿托伐他汀在血管成形術(shù)中減少心肌損傷的系列研究結(jié)果表明[7]，PCI前給予強化他汀治療可減少術(shù)后心肌損傷，改善患者預后。在本研究中，與常規(guī)他汀組（阿托伐他汀20 mg/d）比較，術(shù)前2天給予強化他?。ò⑼蟹ニ?0 mg/d）治療可有效降低術(shù)后心肌損傷標記物肌鈣蛋白I及CK-MB高于正常高值的發(fā)生率，更能減少PCI術(shù)后肌鈣蛋白I高于正常高值5倍的發(fā)生率（2012年全球心肌梗死工作組將PCI術(shù)后心肌梗死定義為超過肌鈣蛋白I 99%正常高值達5倍以上），這說明了PCI術(shù)前給予強化他汀藥物治療更能減少術(shù)后心肌損傷，起到心肌保護作用。超敏C反應蛋白是急性期蛋白，與炎癥反應程度呈正相關(guān)[10]。PCI術(shù)后兩組患者超敏C反應蛋白均比術(shù)前升高，常規(guī)他汀組升高更為明顯，而強化他汀組可以緩解超敏C反應蛋白上升趨勢，表明術(shù)前強化他汀治療能有效減輕PCI術(shù)后炎癥反應，起到術(shù)后心肌保護作用。

既往研究表明，冠心病患者體內(nèi)存在CD4+T淋巴細胞的過度激活[11]，尤其CD4+T淋巴細胞亞型Th1細胞過度增殖，并致使腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-10等各種炎癥因子的分泌失衡,參與了不穩(wěn)定粥樣斑塊的發(fā)生、發(fā)展過程[1]，PCI術(shù)則進一步加重CD4+T淋巴細胞介導的炎癥反應[2]。miRNA-21既往發(fā)現(xiàn)具有心肌保護作用，主要參與心肌細胞的生長及分化[12]，抑制血管生成[13]。Yin等[14]通過動物實驗證實，缺血再灌注損傷可使大鼠心肌細胞中miRNA-21的表達顯著上調(diào)，將miRNA-21注入大鼠體內(nèi)可顯著減少缺血再灌注損傷所致的心肌細胞梗死面積，從而起到心肌保護效應,這一效應可能與miRNA-21具有潛在調(diào)控炎癥反應的作用有關(guān)[15]。

研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-21具有抑制免疫炎癥反應的作用。Lu等[16]的研究發(fā)現(xiàn)抑制CD4+T淋巴細胞miRNA-21表達能加重Th1介導的炎癥反應，減少Th2細胞分泌抗炎因子，表明促進miRNA-21表達可抑制CD4+T淋巴細胞亞型Th1過度激活的炎癥反應。PDCD4是miRNA-21的靶基因[4]，研究發(fā)現(xiàn)敲除小鼠PDCD4基因后，小鼠抵抗炎癥的能力增加，淋巴細胞分泌白細胞介素-10炎癥因子明顯增多，腫瘤壞死因子-α濃度減少[17]。在CD4+T淋巴細胞中，miRNA-21負調(diào)控PDCD4蛋白表達[18]。將miRNA-21前體轉(zhuǎn)染至CD4+T淋巴細胞誘導miRNA-21表達增加，可明顯抑制PDCD4蛋白表達，導致白細胞介素-10分泌增多[19],抑制miRNA-21表達可使腫瘤壞死因子-α表達增加[6]。這些結(jié)果提示上調(diào)miRNA-21表達，可負調(diào)控其靶基因PDCD4蛋白，從而促進CD4+T淋巴細胞分泌白細胞介素-10增多，抑制腫瘤壞死因子-α表達。

阿托伐他汀在血管成形術(shù)中減少心肌損傷的系列研究發(fā)現(xiàn)，PCI術(shù)前給予大劑量阿托伐他汀，能夠有效的降低炎癥因子水平，減少術(shù)后心肌損傷的發(fā)生率，明顯改善患者近、遠期預后[7]。阿托伐他汀能夠抑制T淋巴細胞的生長、增殖、活性，促進白細胞介素-10表達增加，抑制腫瘤壞死因子-α。腫瘤壞死因子-α是啟動級聯(lián)炎癥反應的關(guān)鍵因子，與PCI術(shù)后心肌損傷密切相關(guān)[20]。白細胞介素-10又稱細胞因子合成抑制因子，能抑制多種炎癥因子包括腫瘤壞死因子-α分泌，減輕炎癥反應發(fā)生、發(fā)展[21]。Derkacz等[22]的表明，血清白細胞介素-10的增加可有效減少PCI術(shù)后心肌炎癥損傷。

本研究發(fā)現(xiàn)，PCI術(shù)前給予80 mg大劑量的阿托伐他汀， CD4+T淋巴細胞miRNA-21表達增多，其靶標PDCD4表達減少，血清白細胞介素-10分泌增多，腫瘤壞死因子-α濃度減少，而常規(guī)組miRNA-21上調(diào)不明顯，PDCD4蛋白表達增加，腫瘤壞死因子-α濃度增多，這些結(jié)果提示，強化阿托伐他汀減少PCI術(shù)后心肌損傷，可能部分通過上調(diào)CD4+T淋巴細胞miRNA-21的表達，抑制靶蛋白PDCD4，促進血清白細胞介素-10分泌，降低腫瘤壞死因子-α濃度而起效。這一發(fā)現(xiàn)，為PCI術(shù)后心肌損傷的防治提供了新的理論思路。

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Effect of Intensive Atorvastatin Up-regulating CD4+T Lymphocyte MicroRNA-21 Expression on Reducing the Post PCI Myocardial Injury in Patients With Unstable Angina Pectoris

LIU Yang, LI Lang, SU Qiang, ZHOU You, WANG Jiang-you, SUN Yu-han, YANG Dong.

Department of Cardiology, The First Aff i liated Hospital of Guangxi Medical University, Nanning (530021), Guangxi, China Corresponding Author: LI Lang, Email: drlilang@163.com

Objective: To explore the intensive atorvastatin up-regulating CD4+T lymphocyte microRNA-21 (miRNA-21) expression on reducing the post PCI myocardial injury in patients with unstable angina pectoris (UAP).Methods: A total of 68 UAP patients received elective PCI in our hospital from 2011-11 to 2012-05 were enrolled and randomized into 2 groups. Intensive group, the patients were treated by atorvastatin 80 mg/d before PCI and 40 mg/d after PCI. Routine group, the patients received atorvastatin 20 mg/d before and after PCI, n=34 in each group. The creatine kinase-MB (CK-MB), Troponin I (CTnI) and high sensitivity C-reactive protein (hs-CRP) were examined before and at 16-24 h after the operation. The miRNA-21 and programmed cell death 4 (PDCD4 ) mRNA in CD4+T lymphocyte were detected by RT-PCR, the PDCD4 protein expression was measured by Western blot analysis, the interleukin-10 (IL-10) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) were checked by ELISA.Results: ①In Intensive group, the incidence for CTnI at 1-5 times higher or above 5 times higher than normal value and the incidence for CK-MB higher than normal value were all lower than those in Routine group, all P<0.05. ②In Routine group, the post operational hs-CRP and TNF-α levels, the PDCD4 mRNA and protein expressions were signif i cantly increased thanthey were before the operation, all P<0.05.③In Intensive group, the post operational miRNA-21 and IL-10 expressions were increased, the PDCD4 mRNA and protein expressions were decreased than they were before the operation, P<0.05.Conclusion: The intensive atorvastatin treatment may reduce the post PCI myocardial injury, which might be related to upregulating CD4+T lymphocyte miRNA-21 expression and therefore, resulted in decreased expression of target protein PDCD4.

Atorvastatin; MicroRNA-21; Percutaneous coronary intervention; Programmed cell death 4; CD4+T lymphocyte

2013-08-22）

（編輯：王寶茹）

國家自然科學基金資助項目（81260042，81160046），廣西碩士研究生科研創(chuàng)新項目（YCSZ2013033） , 廣西科學研究與技術(shù)開發(fā)計劃資助項目（桂科攻1140003A-19）

530021 廣西壯族自治區(qū)南寧市，廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院 心血管內(nèi)科

劉洋 碩士研究生 主要研究方向：冠心病介入治療及其防治 Email：timedie@foxmail.com 通訊作者：李浪 Email：drlilang@163.com

R54

A

1000-3614（2014）01-0026-05

10.3969/j.issn.1000-3614.2014.01.008

方法：入選2011-11至2012-05在我院住院行擇期PCI術(shù)的不穩(wěn)定性心絞痛患者68例，隨機分為強化他汀組（阿托伐他汀術(shù)前80 mg/d，術(shù)后40 mg/d，n=34）和常規(guī)他汀組（阿托伐他汀術(shù)前術(shù)后均20 mg/d，n=34）。分別于PCI術(shù)前、術(shù)后16～24 h抽血檢查肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌鈣蛋白I、超敏C反應蛋白及新鮮外周血。實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應法（qRT-PCR）檢測CD4+T淋巴細胞miRNA-21、程序性細胞死亡因子4（PDCD4）mRNA表達，蛋白免疫印跡法檢測CD4+T淋巴細胞PDCD4蛋白表達，酶聯(lián)免疫法檢測血清白細胞介素-10、腫瘤壞死因子-α的濃度。

結(jié)果：強化他汀組肌鈣蛋白I高于正常高值1～5倍及高于5倍以上的發(fā)生率低于常規(guī)他汀組；強化他汀組CK-MB高于正常高值的發(fā)生率也低于常規(guī)他汀組，差異均有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05）。常規(guī)他汀組術(shù)后超敏C反應蛋白、PDCD4 mRNA、PDCD4蛋白、腫瘤壞死因子-α較術(shù)前明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。強化他汀組術(shù)后miRNA-21、白細胞介素-10表達量較術(shù)前明顯升高，PDCD4 mRNA、PDCD4蛋白較術(shù)前明顯降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

結(jié)論： 強化阿托伐他汀減輕PCI術(shù)后心肌損傷可能與上調(diào)PCI術(shù)后CD4+T淋巴細胞miRNA-21表達，導致其靶蛋白PDCD4表達減少有關(guān)。