何顯 王真 蘇心愛 張清泉 王麗華
潰瘍性結(jié)腸炎患者血清脂聯(lián)素水平變化及意義
何顯王真蘇心愛張清泉王麗華
【摘要】目的檢測潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)患者血清脂聯(lián)素水平,探討其臨床意義。方法用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測68例UC患者[根據(jù)嚴重程度分為輕度(n=23)、中度(n=24)和重度(n=19) ;根據(jù)病變范圍分為乙狀結(jié)腸型(n=18)、左半結(jié)腸型(n=25)和全結(jié)腸型(n=25)]和20例健康體檢者(對照組)血清脂聯(lián)素水平,并分析其與UC臨床特征的相關(guān)性。結(jié)果活動期UC患者血清脂聯(lián)素水平顯著高于緩解期UC患者和正常對照組(P<0.05) ;重度UC患者脂聯(lián)素水平與輕、中度比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05) ;直乙結(jié)腸、左半結(jié)腸及全結(jié)腸UC患者血清脂聯(lián)素水平與正常對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。活動期UC患者血清脂聯(lián)素水平與其疾病活動指數(shù)正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論脂聯(lián)素可能參與UC疾病的發(fā)生發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】潰瘍性結(jié)腸炎;脂聯(lián)素;白細胞介素
項目來源:衡水市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展指導(dǎo)計劃(編號: 11039Z)
作者單位: 053000河北省衡水市,哈勵遜國際和平醫(yī)院消化科(何顯、蘇心愛、王麗華),檢驗科(張清泉) ;河北省衡水市第三人民醫(yī)院檢驗科(王真)
潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)是一種易復(fù)發(fā)的,主要累及結(jié)腸的慢性炎性疾病,其臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉及黏液膿血便。UC發(fā)病率近年呈上升趨勢,但是UC的發(fā)病原因仍未完全闡明,研究認為UC的發(fā)病因素主要為宿主基因易感性、環(huán)境因素、感染及免疫因素等幾方面相互作用的結(jié)果。其中宿主免疫功能異常、促炎細胞因子和抗炎細胞因子失衡是UC發(fā)病的關(guān)鍵因素[1]。脂聯(lián)素是近年發(fā)現(xiàn)的具有抗炎作用的脂肪細胞因子,研究發(fā)現(xiàn)炎癥性腸病患者血清脂聯(lián)素升高,脂聯(lián)素對于炎癥性腸病患者腸黏膜慢性炎癥有調(diào)節(jié)作用[2]。本研究通過檢測UC患者血清脂聯(lián)素水平,進一步探討其在UC發(fā)病過程中的作用。
1.1一般資料收集哈勵遜國際和平醫(yī)院2011年7月至2012年12月UC患者68例,其中男32例,女36 例;年齡19~63歲,平均年齡(39±14)歲;平均體重指數(shù)(BMI) 22.8 kg/m2。全部病例均符合2012年炎癥性腸病診斷與治療的共識意見[3]。并根據(jù)該診斷標準將入組UC患者分為輕度(n=23)、中度(n=24)、重度(n=19) 3組。所有入組患者根據(jù)電子結(jié)腸鏡檢查,依據(jù)病變范圍將入組UC患者分為乙狀結(jié)腸型(n=18)、左半結(jié)腸型(n=25)、全結(jié)腸型(n=25)。所有入組病例均經(jīng)過門診或者住院治療后達到病情緩解,并選擇隨訪資料完整28例UC患者作為緩解期對照組。正常對照組20例,均來自我院健康體檢者。排除標準: (1)不符合上述診斷標準與入組標準。(2)重度潰瘍性結(jié)腸炎患者,病理提示腸黏膜腸上皮化生或異型增生者;或者合并有消化道腫瘤病變患者。(3)合并有心腦血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等原發(fā)性疾病患者。(4)妊娠期或哺乳期女性。(5)應(yīng)用免疫抑制劑及研究中認為有任何不適宜入選的情況。
1.2試劑、儀器血清脂聯(lián)素應(yīng)用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測,試劑盒為武漢博士得公司提供。所有受試者均于清晨空腹采肘靜脈血5 ml,離心取血清,置-20℃冰箱保存待同時檢測。
1.3方法(1)試劑盒平衡至室溫(20~25℃)進行試驗; (2)取出所需酶標板,按照標準品的次序分別加入100 μl的標準品溶液于空白微孔中; (3)空白微孔中加入100 μl的樣品,空白對照加入100 μl的蒸餾水; (4)在各孔中加入50 μl的酶標記溶液; (不含空白對照) ; (5)將酶標板用封口膠密封后,在孵育箱中37℃孵育反應(yīng)1 h; (6)充分清洗酶標板3~5次,濃縮洗滌液以1∶100的比例用蒸餾水稀釋; (7)酶標板洗滌后用吸水紙徹底拍干; (8)每孔加入顯色劑A、B液各50 μl,20~25℃下避光反應(yīng)15 min; (9)每孔加入50 μl終止液,輕輕混勻30 s; 30 min內(nèi)在450 nm的酶標儀上讀取各孔的OD值。
1.4UC的疾病活動指數(shù)(disease activity index,DAI)評分DAI總分為腹瀉次數(shù)、便血情況、內(nèi)鏡下黏膜表現(xiàn)、醫(yī)師病情評估分數(shù)之和。癥狀緩解<2分;輕度活動3~5分,中度活動6~10分,重度活動11~12分。
1.5統(tǒng)計學(xué)分析應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件,計量資料以±s表示,組間比較采用t檢驗,相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1活動期UC患者與正常對照組血清脂聯(lián)素比較
活動期UC患者血清脂聯(lián)素水平為(12.8±4.4)μg/ml,與正常對照組(8.4±2.6)μg/ml比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=9.925,P<0.05)。緩解期UC患者血清脂聯(lián)素水平為(9.9±3.1)μg/ml,仍高于正常對照組血清脂聯(lián)素水平(8.4±2.6)μg/ml(t=4.785,P<0.05)。
2.2不同程度UC患者血清脂聯(lián)水平變化正常對照組血清脂聯(lián)素水平為(8.4±2.6) pg/ml,輕度UC患者脂聯(lián)素水平為(8.9±3.0) pg/ml,中度UC患者脂聯(lián)素水平為(9.5±3.1) pg/ml,重度UC患者脂聯(lián)素水平為(14.1±3.8) pg/ml,重度UC患者脂聯(lián)素水平較輕度、中度UC患者UC患者脂聯(lián)素水平有明顯升高(t值分別為4.317、7.173和8.610,P<0.05)。但輕度與正常對照組、中度與輕度比較,UC患者血清脂聯(lián)素水平比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.886,P>0.05)。
2.3血清脂聯(lián)素與病變范圍關(guān)系直乙狀結(jié)腸、左半結(jié)腸及全結(jié)腸UC患者血清脂聯(lián)素水平分別為(9.9±3.1) pg/ml、(10.2±3.8) pg/ml和(13.9±4.1) pg/ml,與正常對照組血清脂聯(lián)素水平(8.4±2.6) pg/ml比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t值分別為5.841、5.893和6.869,P<0.05),病變范圍越大,血清脂聯(lián)素的含量越高,但在直、乙狀結(jié)腸組與左半結(jié)腸組血清脂聯(lián)素水平之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.078,P>0.05)。
2.4血清脂聯(lián)素水平與UC患者DAI評分關(guān)系活動期UC患者血清脂聯(lián)素水平與其DAI評分呈正相關(guān)(r=0.583,P<0.05)。
目前UC發(fā)病機制仍未完全闡明,免疫因素在其發(fā)病過程中的作用越來越受到重視。研究認為UC患者宿主免疫功能紊亂,促炎細胞因子和抗炎細胞因子失衡,輔助性T淋巴細胞及其細胞因子在UC發(fā)病過程中起重要作用[4]。
脂聯(lián)素是近年發(fā)現(xiàn)的具有抗炎作用的脂肪細胞因子,主要表達于脂肪細胞、骨骼肌細胞、心肌細胞及內(nèi)皮細胞。脂聯(lián)素與胰島素抵抗呈負相關(guān),在非酒精性脂肪肝、肥胖、2型糖尿病患者體內(nèi)表達降低。脂聯(lián)素通過抑制腫瘤壞死因子的產(chǎn)生及其活性,抑制核因子的活化,并誘導(dǎo)單核細胞、巨噬細胞及樹突細胞產(chǎn)生IL-10等抗炎細胞因子,從而發(fā)揮其抗炎作用[5,6]。在對脂聯(lián)素基因敲除小鼠模型研究后發(fā)現(xiàn),在相同誘導(dǎo)條件下,脂聯(lián)素基因敲除小鼠較野生小鼠進展致更為嚴重的結(jié)腸炎癥,提示脂聯(lián)素參與腸黏膜炎癥發(fā)生發(fā)展過程[7]。在對葡聚糖硫酸酯鈉誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸炎模型中研究發(fā)現(xiàn),脂聯(lián)素具有抑制腸上皮細胞趨化因子的產(chǎn)生,抑制巨噬細胞的吞噬作用及促炎細胞因子的釋放,證實脂聯(lián)素具有抑制腸黏膜炎癥發(fā)生發(fā)展的作用[8]。也有研究發(fā)現(xiàn)與健康對照組相比,UC患者血清脂聯(lián)素?zé)o明顯升高,研究認為脂聯(lián)素不參與UC發(fā)病過程[9]。但是多數(shù)研究認為脂聯(lián)素在UC發(fā)病過程中起到抑制腸黏膜炎癥作用。我們通過研究發(fā)現(xiàn),UC患者血清脂聯(lián)素水平較正常對照組升高,隨著病情進展,病變范圍的增大,UC患者血清脂聯(lián)素水平升高越明顯。治療后血清脂聯(lián)素水平降低,但仍高于正常對照組。研究發(fā)現(xiàn)UC患者體內(nèi)脂聯(lián)素表達升高,脂聯(lián)素通過調(diào)節(jié)IL-10高表達發(fā)揮其抗炎作用[10,11]。UC患者體內(nèi)脂聯(lián)素水平升高,推測與UC患者免疫失衡,促炎細胞因子表達增強,抗炎細胞因子表達減弱,血清脂聯(lián)素被動性升高,上調(diào)抗炎細胞因子的表達,發(fā)揮其抗炎作用,以進一步恢復(fù)抗炎細胞因子與促炎細胞因子之間的平衡。通過對UC患者血清脂聯(lián)素水平與疾病活動指數(shù)研究發(fā)現(xiàn):活動期UC患者血清脂聯(lián)素水平與疾病活動指數(shù)呈正相關(guān),因此血清脂聯(lián)素水平可作為評測UC疾病狀態(tài)的一個參考指標。
當然,UC發(fā)病中涉及多種細胞因子,并且相互影響,血清脂聯(lián)素的變化只是為探討UC發(fā)病機制及尋找新的治療方法提供一個切入點。脂聯(lián)素在UC發(fā)病過程中的免疫作用仍需進一步、大樣本研究。
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(收稿日期:2014-11-12)
doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2015.10.032
【文章編號】1002-7386(2015) 10-1536-02
【文獻標識碼】A
【中圖分類號】R 574.621