郭姝彤 審校 劉永仙 艾彩蓮 李寶莉

延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院(延安 716000)

·文獻(xiàn)綜述·

五倍子有效成分提取分離、藥理作用及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展*

郭姝彤 審校 劉永仙 艾彩蓮 李寶莉△

延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院(延安 716000)

五倍子為漆樹科植物，具有斂肺、止血等作用，作為傳統(tǒng)中藥，在臨床用于解毒、治療燒燙傷、久咳、咳血等多種病癥。主產(chǎn)于我國四川、貴州等地，其有效成分十分復(fù)雜，主要為鞣質(zhì)和沒食子酸。本文就五倍子的化學(xué)成分、提取分離、藥理作用及臨床應(yīng)用等幾個(gè)方面展開綜述，闡述了五倍子近年來的研究現(xiàn)狀，但其物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)理方面還有待更深入的研究，以利于新藥的開發(fā)和為臨床應(yīng)用研究提供可靠的依據(jù)。

五倍子在世界上僅分布于東亞的中國、朝鮮、日本及中南半島。中國的五倍子產(chǎn)量最多、質(zhì)量最好，以“中國五倍子”聞名于海內(nèi)外。它是我國林業(yè)特產(chǎn)之一，適宜在較溫暖濕潤的山區(qū)和丘陵生長，主產(chǎn)于四川、貴州、云南，以角倍產(chǎn)量為大，肚倍質(zhì)量為佳。我國歷代本草文獻(xiàn)對(duì)五倍子均多有記載，本品始載于唐《本草拾遺》，在宋《開寶本草》、《圖經(jīng)本草》中均有記載，《證類本草》收于木部中品，《本草綱目》收于蟲部。五倍子為漆樹科植物，性寒、味澀，其氣特異、微臭。具有斂肺降火、澀腸止瀉、斂汗止血、收濕斂瘡等作用。在臨床上多用于治療肺虛肺熱痰嗽、久瀉久痢、盜汗、消渴、便血痔血、外傷出血等。五倍子的化學(xué)成分十分復(fù)雜，主要有效成分為鞣質(zhì)和沒食子酸。

1 化學(xué)成分

1.1 鞣 質(zhì) 即鞣酸(Tannic acid)，又叫單寧酸。五倍子主含鞣質(zhì)，含量約為50%～70%(角倍低，肚倍高)。五倍子鞣質(zhì)為一混合物，由一分子葡萄糖和5～8個(gè)分子沒食子酸縮合而成。分子量500～3000，大多為無定形固體，味澀，易潮解，較難提純；有強(qiáng)還原性，在空氣中(尤其是堿性條件下)易被氧化而顏色加深；除此之外，鞣質(zhì)還能與與蛋白質(zhì)相結(jié)合，形成不溶于水的沉淀，是制革工業(yè)的重要原料。根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)，可把鞣質(zhì)類分為可水解鞣質(zhì)、縮合鞣質(zhì)和復(fù)合鞣質(zhì)三類，水解鞣質(zhì)可被酸、堿或鞣酶水解,而縮合鞣質(zhì)不能被酸和堿水解。利用甲醛濃鹽酸—硫酸鐵銨反應(yīng)可鑒別水解鞣質(zhì)和縮合鞣質(zhì)。通過研究發(fā)現(xiàn)，從7種五倍子中測定了單寧酸的含量，其中角倍為49.01%，肚倍為64.75%，圓角倍為60.75%，其他幾種均在40%左右[1]。

1.2 沒食子酸 五倍子的主要有效成分是沒食子酸(Gallic acid)，它是植物體中一類次生代謝產(chǎn)物,屬于低毒物質(zhì)?；瘜W(xué)名為3,4,5-三羥基苯甲酸,分子式為C7H6O5,分子量170.12，通常以一水合物的狀態(tài)存在,白色或微黃色針狀晶體,還原性強(qiáng),遇氧易變?yōu)楹稚?能與蛋白質(zhì)、重金屬、生物堿等結(jié)合[2]。還具有酚酸的一般性質(zhì)(如遇三氯化鐵顯色等)，并在205～224nm和260～283nm內(nèi)有兩個(gè)明顯的紫外吸收峰。在五倍子中的含量約為2%～4%，沒食子酸一般通過水解五倍子鞣質(zhì)可獲得,廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。

1.3 其他成分 除此之外，五倍子中還含有白果酚、2-羥基-6-十五烷基苯甲酸、淀粉、脂肪、大量的樹脂、蠟質(zhì)等成分，但因?yàn)槿狈ζ毡榈纳砘钚?，?yīng)用受到一定的局限。

2 五倍子主要成分的提取和分離

五倍子中主要成分有鞣質(zhì)和沒食子酸，其中鞣質(zhì)的提取可以采用浸漬法、滲漉法、煎煮法、加壓提取法、超臨界流體萃取技術(shù)等方法；而沒食子酸的提取主要有酸水解法和堿水解法、酶法轉(zhuǎn)化法。

2.1 鞣質(zhì)的提取 五倍子鞣質(zhì)是一類結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的多元酚類化合物，與黃酮類、蒽醌類等既性質(zhì)相近又可在植物體內(nèi)共存，其活性較強(qiáng)，所以五倍子主要成分的提取和分離有些困難。

2.1.1 浸漬法：浸漬法是在常溫或低熱(<80℃)條件下用適當(dāng)?shù)娜軇┙n藥材以溶出其中成分的方法。李紅然等文中提到柳世萍等采用水溫浸提法從五倍子中提取單寧酸,提取率約為50%左右，該方法適用于有效成分遇熱不穩(wěn)定的藥材提取[3]。

2.1.2 超臨界流體萃取技術(shù)：超臨界流體萃取技術(shù)是指在超臨界(臨界溫度和臨界壓力)狀態(tài)下，將超臨界流體與待分離的物質(zhì)接觸，通過控制不同的溫度、壓力以及不同種類及含量的夾帶劑，使超臨界流體有選擇性地把極性大小、沸點(diǎn)高低和分子量大小不同的成分依次萃取出來?？勺鳛槌R界流體的物質(zhì)有很多，其中以CO2最為常用。關(guān)健等文中提到姜萍等在萃取壓力25MPa、溫度44℃、萃取120 min及夾帶劑為乙酸乙酯的條件下，提取率為57.83%，該方法提取率高、工藝流程簡單、操作方便，產(chǎn)品是純天然的，但設(shè)備造價(jià)高[4]。適用于對(duì)熱不穩(wěn)定物質(zhì)的提取，在醫(yī)藥、化工、食品及環(huán)保等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。

2.1.3 加壓提取法：加壓提取法是指在溫度和壓力一定的狀態(tài)下,采用常規(guī)溶劑對(duì)固體或半固體樣品進(jìn)行萃取。閔凡芹文中提到申明樂采用加壓法提取單寧酸，得出在破碎粒度為3～5mm、五倍子與水的質(zhì)量比為1∶5、溫度為60℃、100min內(nèi)的條件下，提取率為99%。該方法使用時(shí)間短，提取率高，工藝流程簡單，用水量少，消耗低，對(duì)環(huán)境污染小[5]。

2.2 沒食子酸的提取

2.2.1 酸水解法：酸水解法是在酸性條件下把單寧酸溶液水解成沒食子酸和葡萄糖的過程。王廣娟以五倍子為原料、在酸為催化劑的條件下水解單寧酸制取沒食子酸，得出在100℃、3h條件下(鹽酸濃度為4mol/mL，料液比1：80)，單寧酸水解率約56.3%[6]。該方法使用時(shí)間長，提取率較低，不適用于五倍子中單寧含量低的原料。

2.2.2 堿水解法：堿水解法是在堿性條件下先把單寧酸溶液水解，再用酸中和堿后得到?jīng)]食子酸的過程。邵元元等文中提到陳茜文等研究五倍子單寧酸水解時(shí)反應(yīng)溫度、時(shí)間和堿液濃度對(duì)沒食子酸轉(zhuǎn)化率的影響，通過實(shí)驗(yàn)分析得出在106℃、100min條件下(單寧酸與氫氧化鈉的物質(zhì)的量比為1∶38)，單寧酸水解率約48.3%[7]。該方法工藝過程較為復(fù)雜,生成的廢液會(huì)污染環(huán)境。

2.2.3 酶法轉(zhuǎn)化法：酶法轉(zhuǎn)化法最關(guān)鍵的是篩選活性高的單寧酶。五倍子單寧可在單寧酶的作用下水解生成沒食子酸。張楚晗等采用單寧酶和五倍子作用，得出結(jié)論：不同單寧酶在使用量不同的情況下轉(zhuǎn)化率無明顯差別,該方法耗時(shí)短，提取率較高，環(huán)境條件溫和，基本上不會(huì)污染環(huán)境[8]。

2.3 五倍子中有效成分的分離和測定 近年來，隨著中藥工程技術(shù)的迅速發(fā)展，目前已發(fā)現(xiàn)許多分離和精制有效成分的方法，包括溶劑分離法、萃取法、絮凝沉淀法、超濾法、分子蒸餾法和色譜分離法等，這些方法大大促進(jìn)了中藥的發(fā)展[9]。

2.3.1 鞣質(zhì)：高燕等文中提到汪詠梅等采用活性炭除去單寧酸中色素、樹膠等雜質(zhì)，提高產(chǎn)品總質(zhì)量[10]。劉剛等文中提到Degenhardt等采用高速逆流色譜法(HSCCC)分離花青素，該方法操作條件溫和，不需要固體支持劑，可以避免因各物質(zhì)的吸附而造成鞣質(zhì)的損失[11]。高效液相色譜(HPLC)技術(shù)已經(jīng)廣泛用于分離多酚類化合物。正相HPLC能夠依據(jù)原花青素的聚合度進(jìn)行分離(一直到十聚體)；反相HPLC可以分離黃烷-3-醇單體和低聚體(尤其是二聚體和三聚體)[12]。

2.3.2 沒食子酸：張雅麗文中提到付紹平等采用CZE法測定了沒食子酸的含量,HPLC法可用于測定熱穩(wěn)定性差或易揮發(fā)的樣品，CE法可用于測定微量小的樣品，這兩種方法不僅操作簡單而且使用也很方便[13]。

3 藥理作用

3.1 抗菌作用 五倍子具有廣譜抗菌作用。體外實(shí)驗(yàn)表明，五倍子煎劑對(duì)金黃色葡萄球菌、肺炎球菌、乙型溶血性鏈球菌、傷寒桿菌、副傷寒桿菌、綠膿桿菌、痢疾桿菌、炭疽桿菌、白喉?xiàng)U菌、大腸桿菌等均有不同程度的抑制作用[14]。閻愛榮等對(duì)五倍子體外抗ESBLs大腸埃希菌、假單胞銅綠桿菌、變形鏈球菌進(jìn)行了抑菌研究，其對(duì)上述菌種均有不同的抑制作用，其中對(duì)假單胞銅綠桿菌的生物膜具有清除作用[15]。向麗等進(jìn)一步研究了五倍子對(duì)表皮葡萄球菌的抗菌作用及其形態(tài)學(xué)變化,另外，五倍子煎劑對(duì)接種于雞胚的流感甲型PR8株病毒有抑制作用，可能與其中所含鞣酸有關(guān)[16]。近年來，隨著科學(xué)技術(shù)水平的提高和不斷深入的研究，五倍子的抗菌作用在臨床上得到了更廣泛的應(yīng)用。

3.2 抗生育作用 體外殺精試驗(yàn)表明，精子活動(dòng)度在80%以上的精液，當(dāng)與10%五倍子甘油溶液1∶1滴于載玻片上攪拌后鏡下觀察，無一精子活動(dòng)，全部呈僵直狀態(tài)。將其各一滴接觸，相鄰部形成一個(gè)自然接觸面時(shí)，在顯微鏡下觀察，未見精子能越入五倍子甘油溶液界內(nèi)，且均相繼在臨界面死亡[17]。

3.3 清除自由基及抗氧化作用 五倍子的化學(xué)成分幾乎都有鄰位酚羥基結(jié)構(gòu),在生物體內(nèi)具有較強(qiáng)的清除超氧自由基的作用，從而產(chǎn)生抗衰老的作用。體外實(shí)驗(yàn)證明，五倍子鞣酸能清除亞硝酸根離子，故推測對(duì)亞硝酸胺致癌過程可能有抑制作用。Seyed FN報(bào)道五倍子酸可通過對(duì)“氧化/抗氧化”平衡的改變，減輕氟化鈉導(dǎo)致的神經(jīng)毒性[17]。勾明玥等通過研究五倍子鞣酸，發(fā)現(xiàn)其有降低體內(nèi)亞硝胺的產(chǎn)生和清除自由基的作用[18]。研究了五倍子多酚提取物的抗氧化作用，通過對(duì)逐級(jí)萃取后的五倍子各組分進(jìn)行了抗氧化研究，發(fā)現(xiàn)五倍子具有較強(qiáng)DPPH自由基清除能力[19]。

3.4 收斂作用 藥理實(shí)驗(yàn)表明，五倍子鞣質(zhì)對(duì)蛋白質(zhì)有沉淀作用,能使皮膚、黏膜、潰瘍面等局部組織的蛋白凝固,而呈收斂和止癢作用。同時(shí)小血管也被壓迫收縮,血液凝固而呈止血效果,鞣質(zhì)的收斂作用不僅可以減輕腸道的炎癥反應(yīng)，還有良好的止瀉功能[20]。有研究發(fā)現(xiàn)五倍子細(xì)辛酊能夠治療早泄，在該藥方中五倍子和細(xì)辛起到局部麻醉的作用，特別是五倍子中鞣酸能夠使皮膚黏膜干燥、收斂止泄，兩藥合用能夠降低陰莖皮膚的敏感性，從而起到治療早泄的作用[21]。此外，五倍子的收斂作用在外用時(shí)還能治療盜汗、軟組織損傷、燒燙傷、齲齒痛、慢性化膿性中耳炎及外傷出血等疾病。

3.5 毒性研究 現(xiàn)已有研究對(duì)五倍子酸的安全性進(jìn)行了比較全面的評(píng)價(jià)。在小鼠的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)五倍子酸濃度為5g/kg體重時(shí)，小鼠并未發(fā)生死亡或明顯毒性作用，當(dāng)五倍子酸濃度為1g/kg·bw時(shí)，小鼠血液學(xué)參數(shù)仍未發(fā)生顯著變化[22]。Swati等給予Swiss瑞士白化小鼠300mg/kg·bw時(shí)，小鼠沒有發(fā)生明顯的改變，表明五倍子酸無毒或具有低毒性，安全范圍廣[23]。

4 臨床應(yīng)用

近年來五倍子的應(yīng)用非常廣泛，內(nèi)服能斂肺降火、澀腸止瀉和斂汗，外用能解毒、消腫、收濕斂瘡和止血,在臨床上就有以下報(bào)道:有文獻(xiàn)報(bào)道五倍子有降血糖的作用[24]。還有研究發(fā)現(xiàn)五倍子沒食子酸可以促進(jìn)因牙齒脫礦釉質(zhì)而致的礦化,但在臨床中的抑齲作用還需要進(jìn)一步的研究。周勁光文獻(xiàn)中提到戰(zhàn)學(xué)驗(yàn)等在治療門診15例復(fù)發(fā)性口腔潰瘍時(shí)使用芪醬湯內(nèi)服、五倍子外敷有較好的療效[25]。近期也有文獻(xiàn)報(bào)道，系統(tǒng)性紅斑狼瘡一般采用激素治療，但會(huì)出現(xiàn)如盜汗；現(xiàn)在改用五倍子粉敷貼于神闕穴，有良好的臨床療效[26]。

5 小 結(jié)

綜上所述，我國五倍子產(chǎn)量較大、分布廣泛、價(jià)格便宜、安全系數(shù)較高，從古到今，許多醫(yī)藥學(xué)專家們都在臨床治療中應(yīng)用五倍子，不僅取得了較好的療效，而且在長期臨床使用過程當(dāng)中積累了許多豐富的經(jīng)驗(yàn)和藥物配方，為今后進(jìn)一步的研究奠定了扎實(shí)的基礎(chǔ)。從目前五倍子的臨床應(yīng)用來看,五倍子的療效基本上是五倍子鞣質(zhì)及五倍子各種化學(xué)成分和藥理活性共同作用的結(jié)果。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)其具有抗菌、抗病毒、抗氧化和收斂等功效，并且它的抗菌作用更加廣泛。如在治療早期宮頸癌時(shí)就采用了五倍子注射液，療效較好。隨著新時(shí)代的快速發(fā)展和人類生活的日益需求，專家們開始深入研究五倍子的各種活性和作用機(jī)理，相信在不久的將來，五倍子的應(yīng)用前景將會(huì)越來越廣闊，其藥用價(jià)值將會(huì)得到更好的利用，廣泛應(yīng)用到各個(gè)領(lǐng)域中。

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(收稿2015-01-12；修回2015-03-03)

*陜西省高水平大學(xué)建設(shè)專項(xiàng)資金基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)資助項(xiàng)目(2013SXTS02)

延安市科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2013-KW30)

△通訊作者

五倍子 提取分離 藥理作用 臨床應(yīng)用

R282

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2015.06.059