西安市中心醫(yī)院呼吸科(西安710003)　邵景韞　劉　安　杜旭升　白　潔　陳明偉

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肺間質纖維化患者的PAI-1、VEGF的變化*

西安市中心醫(yī)院呼吸科(西安710003)邵景韞劉安杜旭升白潔陳明偉△

摘要目的:探討纖溶酶原激活劑抑制劑-1 (PAI-1)、血管內皮生長因子(VEGF)在肺間質纖維化發(fā)病機制中的作用。方法：選擇肺間質纖維化患者40例，健康人40例，采用ELISA法測定其血清及肺泡灌洗液的PAI-1、VEGF。結果：肺纖維化患者的肺泡灌洗液中的PAI-1水平為3.736±0.485μg/L，比健康人的1.245±0.126μg/L明顯增高(P<0.05)；肺纖維化患者的肺泡灌洗液中的VEGF水平為3.236±0.133μg/L，比健康人的1.545±0.231μg/L明顯增高 (P<0.05)；肺纖維化患者的血清PAI-1水平為58.486±0.148μg/L，較健康對照組的45.383±0.119μg/L明顯增高(P<0.01)；肺纖維化患者的血清VEGF水平為0.530±0.048μg/L，較健康對照組的0.423±0.069μg/L明顯增高(P<0.05)。結論:肺纖維化組PAI-1、VEGF水平明顯升高，推測其參與了肺間質纖維化的形成。

主題詞肺纖維化/血液纖溶酶原激活物抑制物-1/代謝血管生成因子/代謝內皮，血管

特發(fā)性肺纖維化(Idiopathic plumonary fibrosis，IPF)是臨床常見的一種慢性間質性肺疾病，發(fā)病隱匿、進展迅速、病死率高，嚴重影響患者生存質量及預后[1]。其發(fā)病機制不明確，多種細胞因子在肺纖維化中起到關鍵性作用，如轉化生長因子-β(TGF-β)，纖溶酶原激活劑抑制劑-1(PAI-1)等。血管生成在肺纖維化形成中起關鍵作用，但血管內皮生長因(VEGF)在肺纖維化中的研究較少。檢測肺纖維化患者的血清、肺泡灌洗液中的PAI-1、VEGF的變化，以探討其在肺纖維化發(fā)病機制中的作用。

資料與方法

1一般資料選擇2012年1月至2015年12月我院呼吸內科IPF組患者40例，其中男26例，女14例，年齡46～73歲，平均51.5±13.6歲；病程3.0～15.0年，平均12.73.7年；IPF診斷依據IPF循證醫(yī)學診治指南[2]，結合病史、臨床表現(xiàn)、BALF、胸部HRCT及支氣管肺活檢及臨床治療等診斷。健康對照組40例，其中男30例，女10例，年齡39～70歲，平均48.5±11.4歲；18例為健康志愿者，22例有干咳、胸悶癥狀，胸部HRCT、肺功能、BALF等檢查正常，除外器質性疾病。

2研究方法

2.1BALF及血液采集和處理：BALF操作參考美國胸科協(xié)會官方指南[3]，用Olympus電子支氣管鏡操作BALF，回收BALF無菌紗布過濾除去粘液，離心，上清-70℃儲存待測。清晨采集空腹靜脈血抗凝，離心，血液分離后置-70℃保存待測。研究符合西安交通大學醫(yī)學院科研倫理要求，所有患者簽署知情同意書。

2.2PAI-1、VEGF測定：PAI-1 ELISA試劑盒購置于北京太陽公司，VEGF ELISA試劑盒購置于武漢博士德公司，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定，按說明書進行操作。

結果

1兩組BALF中PAI-1、VEGF的變化對比肺纖維化患者的肺泡灌洗液中的PAI-1 水平為3.736±0.485μg/L，比健康人的1.245±0.126μg/L明顯增高(P<0.05)；肺纖維化患者的肺泡灌洗液中的VEGF水平為3.236±0.133μg/L，比健康人的1.545±0.231μg/L明顯增高 (P<0.05)。

2兩組血清中PAI-1、VEGF的變化對比肺纖維化患者的血清PAI-1水平為58.486±0.148μg/L，較健康對照組的45.383±0.119μg/L 明顯增高(P<0.01)；肺纖維化患者的血清VEGF水平為0.530±0.048μg/L，較健康對照組的0.423±0.069μg/L明顯增高(P<0.05)。

討論

肺間質纖維化是一種原因不明的慢性間質性肺疾病中常見代表性疾病，呈進行性發(fā)展，致呼吸衰竭死亡，其發(fā)病機制不明確，無有效治療手段，預后差[4]。研究肺纖維化中的各種細胞因子的作用，對其發(fā)病機制及診治有應用價值。

PAI為絲氨酸蛋白水解酶抑制劑，是組織型和尿激酶型纖溶酶原激活物的抑制因子。PAI-1缺失減輕肺纖維化主要通過纖溶酶的纖溶作用。氣管內滴入PAI-1siRNA減少纖維化肺組織膠原沉積[5]，PAl-1促進成纖維細胞增殖和膠原合成[6]，促進肺纖維化的發(fā)生、發(fā)展。PAI可調節(jié)體內白細胞、纖維母細胞的粘附、移行，與TGF-β、TNF-α、PDGF相互作用，促進肺纖維化發(fā)展。PAI-1缺失減輕肺纖維化主要通過纖溶酶的纖溶作用。Eitzan發(fā)現(xiàn)PAI-1缺陷的小鼠氣管內灌注博萊霉素，肺纖維化減低。氣管內滴注重組uPA可減輕肺纖維化程度，使纖溶活性升高，膠原減少。Eitzman等用BLM致肺纖維化的轉基因大鼠模型證實了肺纖維化的程度與PAI-1的基因表達呈明顯正相關，本研究表明，肺纖維化患者的血清、BALF中的PAI-1水平比健康人明顯增高，表明存在纖溶抑制活性增強，PAI-1參與肺纖維化。

血管內皮生長因子(Vascularendothelialgrowthfactor，VEGF) 是最主要的血管生成因子，能夠促進血管內皮細胞分裂、增殖，促進新的血管生成，以增加血管通透性、維持血管完整性，參與肺纖維化的形成。健康人VEGF主要在肺內合成，在肺內可由上皮細胞、巨噬細胞、血管內皮細胞、肺間質細胞分泌。大鼠肺纖維化中VEGF增高，肺纖維化肺泡炎期VEGF的陽性表達與血管密度的增致加一。VEGF有抗凋亡作用，是維持內皮細胞存活的重要因子，損傷的血管內皮促進VEGF合成和釋放增加，低氧可誘導VEGF的表達，肺纖維化中高水平的VEGF可能是對低氧的反應。VEGF通過上調TGF-β1表達促進支氣管周圍纖維化，在肺纖維化形成中過度表達，通過促進上皮間質轉化促進肺纖維化。

本研究發(fā)現(xiàn)：肺纖維化組血清、肺泡灌洗液中的PAI-1、VEGF明顯高于健康對照組。說明PAI-1、VEGF參與了肺纖維化的形成，抗VEGF、PAI-1可能成為治療肺纖維化的新途徑。

參考文獻

[1]高 麗，代華平.特發(fā)性肺纖維化診治進展[J].內科急危重癥雜志2015，2l(5)：327-329.

[2]ATS/ERS/JRS/ALAT Committee on Idiopathic Pulmonary Fibrosis.An official ATS/ERS/JRS/ALAT statement:idiopathic pulmonary fibrosis:evidence-based guidelines for diagnosis and management[J].Am J Respir Crit Care Med,2011,183(6):788-824.

[3]美國胸科協(xié)會官方指南·支氣管肺泡灌洗液的細胞學分析在間質性肺疾病中的臨床應用(摘譯本)[J].中華結核和呼吸雜志,2012,35(9):650-654.

[4]Jordan RC,Erin EM.Recent evidence for pharmacological treatment of idiopathic pulmonary fibrosis[J].Annals of Pharmacotherapy,2014,48(12):1611-1619.

[5]Zhang YP,Li WB,Wang WL,etal.siRNA against plasminogen activator inhibitor-1 ameliorates bleomycin-induced lung fibrosis in rats[J].Acta Pharmacol Sin，2012，33(7)：897-908.

[6]張彥萍,王衛(wèi)麗,劉建,等.纖維溶解酶原激活物抑制劑-1對大鼠胚肺成纖維細胞的影響[J].中華結核和呼吸雜志,2011,34(7):500-503.

(收稿：2016-03-28)

通訊作者：△西安交通大學第一附屬醫(yī)院呼吸科

【中圖分類號】R563

【文獻標識碼】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.08.007

*陜西省科技研究發(fā)展計劃(2014KCT-23)

陜西省西安市科技計劃項目[SF1316(1)]