劉 梅， 周海松， 許錦文， 李 萍， 奉建芳*（.上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥產(chǎn)學(xué)研合作中心，上海00；.上海中醫(yī)藥大學(xué)穆拉德中藥現(xiàn)代化研究中心，上海00；.廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥理教研室，廣西南寧5000；）

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藜?xì)g解郁膠囊的抗抑郁作用

劉 梅1， 周海松2，3， 許錦文2， 李 萍3， 奉建芳2*
（1.上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥產(chǎn)學(xué)研合作中心，上海201203；2.上海中醫(yī)藥大學(xué)穆拉德中藥現(xiàn)代化研究中心，上海201203；3.廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥理教研室，廣西南寧530001；）

目的 探討藜?xì)g解郁膠囊 （蒺藜、合歡花、石菖蒲、甘草）抗抑郁的作用及其相關(guān)機(jī)制。方法 運(yùn)用慢性應(yīng)激性刺激加孤養(yǎng)法造成大鼠抑郁模型，觀(guān)察大鼠體質(zhì)量、皮毛、飲食、排泄、強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間和懸尾不動(dòng)時(shí)間；用酶聯(lián)免疫吸附法 （ELISA法）觀(guān)察藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠血清去甲腎上腺素 （NE）、多巴胺 （DA）、5-羥色胺 （5-HT）及皮質(zhì)酮 （CORT）含有量的影響；用蛋白質(zhì)印跡法觀(guān)察藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠腦內(nèi)海馬體腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 （BDNF）蛋白表達(dá)水平的影響。結(jié)果 與空白組比較，模型組動(dòng)物造模后體質(zhì)量增長(zhǎng)緩慢 （P＜0.01），動(dòng)物皮毛出現(xiàn)干枯、斑禿、不思飲食、不喜活動(dòng)等情況。與模型組比較，各給藥組動(dòng)物體質(zhì)量增加明顯 （P＜0.05），飲食、皮毛等較正常。藜?xì)g解郁膠囊低、高劑量組能明顯縮短大鼠的強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間和懸尾不動(dòng)時(shí)間 （P＜0.05或P＜0.01），升高抑郁大鼠血清中NE、DA、5-HT的含有量及腦內(nèi)海馬BDNF蛋白的表達(dá)水平（P＜0.05或P＜0.01），降低血清中CORT的含有量 （P＜0.01）。結(jié)論 藜?xì)g解郁膠囊有抗抑郁作用，其作用機(jī)制可能是通過(guò)提高單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)功能，抑制下丘腦-垂體-腎上腺軸功能，提高腦內(nèi)海馬BDNF的表達(dá)水平，升高5-HT含有量，保護(hù)5-HT能神經(jīng)元功能等途徑發(fā)揮抗抑郁作用。

藜?xì)g解郁膠囊；抗抑郁；單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)；腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子

抑郁癥是一種常見(jiàn)的精神障礙性疾病，以焦慮不安和情緒低落為主要特征，同時(shí)伴有思維遲鈍、注意力和學(xué)習(xí)記憶力下降、意志活動(dòng)減弱或持續(xù)顯著的緊張不安伴自主神經(jīng)功能興奮等癥狀［1-2］。

目前常見(jiàn)的抗抑郁藥物包括三環(huán)和四環(huán)類(lèi)抗抑郁劑，單胺氧化酶（MAO）抑制劑，選擇性5-HT重吸收抑制劑，非典型抗抑郁藥 （SSRI）等。盡管其起效快、用藥量少，但長(zhǎng)期服用都有一定的毒副作用。如臨床最常見(jiàn)的選擇性5-HT重吸收抑制劑鹽酸氟西汀 （百憂(yōu)解），很多病人因其惡心、嘔吐或食欲減退等不良反應(yīng)，而放棄治療，以致病情進(jìn)一步惡化［3］。

中藥具有療效好、毒副作用低、較少的依賴(lài)性，以及不存在停藥后高復(fù)發(fā)或反跳作用等特點(diǎn)，近年來(lái)在抑郁癥的防治方面發(fā)揮了重要作用［4-5］。藜?xì)g解郁膠囊來(lái)源于臨床驗(yàn)方，前期的實(shí)驗(yàn)表明該膠囊具有明確的抗抑郁的藥效。本文擬通過(guò)行為學(xué)觀(guān)察結(jié)合分子生物學(xué)相關(guān)方法初步探討其抗抑郁的藥效及相關(guān)作用機(jī)制。

1　材料

1.1儀器 FA1604型電子分析天平（上海上天精密儀器有限公司）；大鼠曠場(chǎng)反應(yīng)箱 （自制，高25～30 cm，底邊長(zhǎng)40 cm，內(nèi)壁涂黑，底面平均分為25個(gè)小方格）；RE2000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠(chǎng)）；Tecan Infinite F50酶標(biāo)儀（美國(guó)Dickson）；DL-P14洗片機(jī)（蘇州市德利影像設(shè)備科技有限公司）；Powerpac通用標(biāo)準(zhǔn)濕式轉(zhuǎn)膜儀（美國(guó)Bio-Rad）；Powerpac通用標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)電泳儀（美國(guó)Bio-Rad）；Centrifuge 5810R超速低溫離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf）；JY92-ZD超聲波細(xì)胞粉碎機(jī) （上海江萊生物科技有限公司）。

1.2 試劑與藥品 95%乙醇 （分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20111228）；濃鹽酸 （國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20100426）；甘油 （國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)F20110411）；Tween-20（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)F20100302）；甲醇 （國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)T20111214）；NaC1（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20110422）；考馬斯亮藍(lán)顯色劑 （美國(guó)Bio-Rad公司，批號(hào)5000006）；甲叉雙丙烯酰胺Bic（美國(guó)Amresco公司，批號(hào)0172）；SDS（美國(guó)Amresco公司，批號(hào)0227）；過(guò)硫酸銨AP（美國(guó)Amresco公司，批號(hào)A0486）；四甲基乙二胺TEMED（Sigma公司，批號(hào)T8133）；溴酚藍(lán)（美國(guó)Amresco公司，批號(hào)0449）；硝酸纖維素膜 （上海依科賽生物制品有限公司，批號(hào)CS011-0001）；ECL化學(xué)發(fā)光顯色劑 （上海優(yōu)寧維生物科技有限公司，批號(hào)WBKLS0500）；一抗BDNF（H-117）200μg/mL（美國(guó)Santa cruz公司，批號(hào)sc-20981）；丙烯酰胺Acr（美國(guó)Amresco公司，批號(hào)0341）；甘氨酸（美國(guó)Amresco公司，批號(hào)0167）；Tris base（美國(guó)Sigma公司，批號(hào)93349）；beta-巰基乙醇（美國(guó)Sigma公司，批號(hào)BY-12286）；二抗（山羊抗兔1gG）（上海碧云天生物技術(shù)研究所，批號(hào)A0208）；苯甲基磺酰氟PMSF（上海碧云天生物技術(shù)研究所，批號(hào)ST506）；RIPA裂解液 （上海碧云天生物技術(shù)研究所，批號(hào)P0013B）；Western b1ot Mark（上海杰瑞生物工程有限公司，批號(hào)SM0671）；Western b1ot內(nèi)參GADPH（上?？党缮锟萍加邢薰?，批號(hào)KC-5G5）；大鼠皮質(zhì)酮、5-羥色胺、去甲腎上腺素、多巴胺ELISA試劑盒 （上海藍(lán)基生物科技有限公司，批 號(hào) 分別 為E02C0066、E02H0202、E02N0013、E02D0002）；膠片 （柯達(dá)）；牛血清蛋白BSA；脫脂奶粉；顯影液和定影液；藜?xì)g解郁膠囊 （由蒺藜、合歡花、石菖蒲、甘草4味藥組成，全方水提，提取液濃縮干燥加入木糖醇等輔料制粒，裝膠囊即得，上海中藥制藥技術(shù)有限公司制備，批號(hào)20120401）

1.3動(dòng)物 Wistar大鼠（SPF級(jí)）體質(zhì)量180～220 g，購(gòu)自上海西普爾一必凱試驗(yàn)動(dòng)物有限公司 （合格證號(hào)SCXK［滬］2008-0016），動(dòng)物飼養(yǎng)于上海中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心 （使用許可證號(hào) SYXK［滬］2009-0069），標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境：溫度 （22±1）℃，相對(duì)濕度 （60±5）%，人工光照，12 h明暗周期，自由攝食、飲水，開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。

2　方法

2.1動(dòng)物分組、給藥及造模 Wistar大鼠40只，雄性，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分5組，每組8只，即空白對(duì)照組（生理鹽水NS，10 mL/kg），模型對(duì)照組 （NS，10 mL/ kg），陽(yáng)性對(duì)照組 （鹽酸氟西汀膠囊，2.8 mg/kg），藜?xì)g解郁膠囊高、低劑量組 （2.35、1.18 g/kg）。利用單籠飼養(yǎng)和長(zhǎng)期不可預(yù)見(jiàn)性溫和應(yīng)激建立慢性應(yīng)激大鼠抑郁模型（8種應(yīng)激因子按隨機(jī)分布表隨機(jī)安排到24 d中，平均每種刺激各2～3次，同一種刺激連續(xù)出現(xiàn)時(shí)間不超過(guò)2 d：①晝夜顛倒 （24 h）；②禁食 （24 h）；③潮濕墊料 （將200mL水加入有鋸木屑和大鼠糞便的籠底，24 h）；④鼠籠傾斜，搖晃 （速率1次/s 15min）；⑤40℃高溫環(huán)境 （5 min）；夾尾 （1min）；⑥4℃冰水游泳 （5min）；⑦陌生異常物品 （如塑料杯、木勺等）；⑧禁水24 h，除正常組外，各組大鼠均單籠飼養(yǎng)并按程序給予應(yīng)激刺激。于造模后第3 d開(kāi)始，每日上午9∶00～10∶00灌胃1次，給藥容量為10mL/kg，連續(xù)灌胃給藥21 d。

2.2指標(biāo)測(cè)定

2.2.1藥物對(duì)大鼠體質(zhì)量，飲食，毛發(fā)，排泄的影響 分別于給藥前，給藥后5 d，給藥后10 d，給藥后15 d，給藥后20 d稱(chēng)量各組動(dòng)物體質(zhì)量。每天觀(guān)察動(dòng)物飲食，排泄，毛發(fā)情況。

2.2.2大鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn) 第21天給藥后1 h進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)前大鼠訓(xùn)練游泳10 min，24 h后測(cè)試：大鼠單只放入盛水容器中 ［40 cm×18 cm，水深18 cm；水溫 （23± 2）℃］，記錄5min內(nèi)累計(jì)不動(dòng)時(shí)間 （s）（所謂不動(dòng)是指動(dòng)物在水中停止掙扎，或動(dòng)物呈漂浮狀態(tài)，僅有細(xì)小的肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在水面）。

2.2.3大鼠懸尾實(shí)驗(yàn) 末次給藥后1 h進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，將膠條粘在大鼠尾端2 cm處，懸掛在高于地面50 cm的架子上，使大鼠呈倒懸體位，每?jī)芍淮笫箝g用擋板隔開(kāi)。觀(guān)察6min，用秒表記錄后4min的累計(jì)懸尾不動(dòng)時(shí)間。不動(dòng)狀態(tài)以大鼠停止掙扎，身體呈靜止垂直倒懸狀態(tài)為準(zhǔn)。

2.2.4藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠血液中NE、DA、5-HT及CORT含有量的影響 于末次給藥后3 h從大鼠腹主動(dòng)脈取血6～8 mL，置于試管中，4℃條件下3 000 r/min離心10 min，分離血清，放置-20℃冰箱保存。采用ELISA法測(cè)定血清中NE、DA、5-HT、CORT的含有量。

2.2.5藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠海馬BDNF蛋白表達(dá)水平的影響 大鼠處死后于冰上取腦，分離雙側(cè)海馬后置液氮中保存，采用Western b1ot法檢測(cè)BDNF蛋白含有量變化。

2.2.5.1蛋白濃度測(cè)定 從-80℃冰箱取出海馬組織（35～52 mg）/組，剪碎放入加有300μL RIPA的1.5 mL VP管，4℃，超聲粉碎3～5次，4℃放置1 h，移入離心管，4℃，12 000 r/min，離心10 min。取上清液，稀釋一定倍數(shù)后考馬斯亮藍(lán)法測(cè)蛋白濃度。利用下表測(cè)定A595值，做出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，計(jì)算出樣品的蛋白濃度。樣品與考馬斯亮藍(lán)溶液 （考馬斯亮藍(lán)∶水為1∶4）比例為1∶10。見(jiàn)表1［其中1～8代表不同的加樣孔，是標(biāo)準(zhǔn)品 （BSA）梯度稀釋后的編號(hào)。BSA的原液質(zhì)量濃度為0.5mg/mL］。

表1　考馬斯亮藍(lán)法蛋白質(zhì)量濃度

2.2.5.2蛋白質(zhì)免疫印跡分析 ①稀釋后的上清液加入等體積2×電泳上樣緩沖液，95℃水浴變性5 min，-80℃凍存?zhèn)溆?。?0μg組織總蛋白在15%和4%的SDS-聚丙烯酰胺凝膠中電泳分離至溴酚藍(lán)到達(dá)凝膠即止。③將凝膠濕法轉(zhuǎn)印至硝酸纖維素膜 （NC膜）。④取出NC膜，浸于含5%脫脂奶粉的Tris緩沖生理鹽水（Tris buffered sa1ine，TBS）中室溫輕搖封閉1 h，用含0.05%的吐溫20的TBS（TBST）緩沖液漂洗干凈，浸入含5%脫脂奶粉的TBST稀釋的一抗（兔抗人BDNF抗體1∶500），GAPDH抗體（1∶5 000），4℃孵育過(guò)夜。⑤用TBST漂洗NC膜3次（每次8 min），在TBST稀釋的HRP標(biāo)記的二抗溶液（山羊抗兔IgG 1∶4 000）中室溫孵浴1 h。⑥NC膜用TBST緩沖液漂洗3次，用ECL檢測(cè)試劑盒顯色（滴加A+B混合液，每張膜約200μL），曝光、顯影和定影，膠片經(jīng)圖像分析軟件測(cè)定灰度值。以GAPDH為內(nèi)參，用相對(duì)值（BDNF/GAPDF）表示各實(shí)驗(yàn)組蛋白表達(dá)水平。

3　實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1藥物對(duì)大鼠體質(zhì)量、飲食、毛發(fā)、排泄的影響 與空白組比較，模型組動(dòng)物造模后體質(zhì)量增長(zhǎng)緩慢 （P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組動(dòng)物體質(zhì)量增加明顯（P＜0.05，P＜0.01）。造模后模型組動(dòng)物皮毛出現(xiàn)干枯、起球、脫落現(xiàn)象，身體出現(xiàn)斑禿，且不思飲食，蜷縮在籠子一側(cè)，不喜活動(dòng)，大便干枯，量少，小便發(fā)黃。而給藥組情況有明顯改善，飲食正常，毛發(fā)脫落減少，皮毛較光滑油亮，大小便基本正常，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠體質(zhì)量的影響 （n=8，±s）

表2　藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠體質(zhì)量的影響 （n=8，±s）

注：與空白組比較，##P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

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3.2大鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn) 造模后，模型組不動(dòng)時(shí)間延長(zhǎng)，與空白組進(jìn)行比較，有顯著性差異 （P＜0.05），說(shuō)明模型組造模成功。與模型組比較，藜?xì)g解郁膠囊低、高劑量組均可明顯縮短大鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間 （P＜0.05，P＜0.01）。與鹽酸氟西汀組比較，在給藥后無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。這說(shuō)明藜?xì)g解郁膠囊可顯著對(duì)抗大鼠因慢性應(yīng)激性刺激造成的抑郁癥狀，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3　藜?xì)g解郁膠囊對(duì)強(qiáng)迫游泳大鼠不動(dòng)時(shí)間的影響 （n= 8，±s）

表3　藜?xì)g解郁膠囊對(duì)強(qiáng)迫游泳大鼠不動(dòng)時(shí)間的影響 （n= 8，±s）

注：與空白組比較，#P＜0.05；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

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3.3大鼠懸尾實(shí)驗(yàn) 造模后，模型組不動(dòng)時(shí)間延長(zhǎng)，與空白組有顯著性差異 （P＜0.05）；與模型組相比，藜?xì)g解郁膠囊低、高劑量組均可以縮短大鼠不動(dòng)時(shí)間，其中高劑量組可顯著性縮短大鼠不動(dòng)時(shí)間 （P＜0.01），可明顯改善大鼠因慢性應(yīng)激性刺激造成的抑郁癥狀，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4　藜?xì)g解郁膠囊對(duì)懸尾大鼠不動(dòng)時(shí)間的影響 （n=8，±s）

表4　藜?xì)g解郁膠囊對(duì)懸尾大鼠不動(dòng)時(shí)間的影響 （n=8，±s）

注：與空白組比較，#P＜0.05；與模型組比較，**P＜0.01

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3.4藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠血液中NE、DA、5-HT及CORT含有量的影響 與空白組比較，模型組能明顯降低大鼠血清中NE、DA、5-HT的含有量，升高血清中CORT的含有量 （P＜0.01），說(shuō)明造模成功。與模型組比較，鹽酸氟西汀組及藜?xì)g解郁膠囊組均能明顯升高大鼠血清中NE、DA、5-HT的含有量，并且降低血清中CORT的含有量（P＜0.05，P＜0.01），結(jié)果見(jiàn)表5。

表5　藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠血清中NE、DA、5-HT、CORT含有量的影響（n=8，±s）

表5　藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠血清中NE、DA、5-HT、CORT含有量的影響（n=8，±s）

注：與空白組比較，##P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

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3.5藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠海馬BDNF蛋白表達(dá)水平的影響

與空白組比較，模型組能明顯降低大鼠海馬BDNF蛋白表達(dá) （P＜0.01）。與模型組比較，鹽酸氟西汀組和藜?xì)g解郁膠囊組均能明顯增強(qiáng)大鼠海馬BDNF蛋白表達(dá) （P＜0.01），結(jié)果見(jiàn)表6、圖1。

4　討論

表6　藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠海馬BDNF蛋白表達(dá)水平的影響（n=4，±s）

表6　藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠海馬BDNF蛋白表達(dá)水平的影響（n=4，±s）

注：與空白組比較，##P＜0.01；與模型組比較，**P＜0.01

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抑郁癥的發(fā)生與體內(nèi)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)紊亂有關(guān)。環(huán)境變化 （如慢性應(yīng)激等）是誘致體內(nèi)激素水平變化的主要因素，主要影響腦內(nèi)邊緣系統(tǒng)-下丘腦-垂體-腎上腺素軸的激素水平。抑郁癥模型動(dòng)物的行為改變與內(nèi)源性抑郁癥癥狀相似，包括活動(dòng)能力下降、腦內(nèi)單胺神經(jīng)遞質(zhì)的變化及下丘腦-垂體-腎上腺軸功能亢進(jìn)引發(fā)的高皮質(zhì)酮血癥等［6-7］。中樞單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)如NE、DA、5-HT等含有量減少是抑郁癥的病理機(jī)制之一，有研究人員對(duì)重度抑郁癥的患者進(jìn)行尸檢，發(fā)現(xiàn)患者腦內(nèi)單胺神經(jīng)遞質(zhì)的含有量明顯低于正常人。因此，提高中樞神經(jīng)系統(tǒng)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)功能或提高它們?cè)谏窠?jīng)突觸間隙的濃度的藥物都有改善情緒或治療抑郁癥狀的作用。

圖1　藜?xì)g解郁膠囊對(duì)大鼠海馬BDNF蛋白的表達(dá)

海馬是邊緣系統(tǒng)的重要組成部分，對(duì)情緒、學(xué)習(xí)和記憶、行為等調(diào)節(jié)起重要作用，也是應(yīng)激反應(yīng)的高位調(diào)節(jié)中樞。慢性應(yīng)激可損害海馬，引起其結(jié)構(gòu)和功能的變化［5］。BDNF、神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3（NT-3）等多種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子合成的缺乏可能造成海馬神經(jīng)元的損失和凋亡［6-7］。BDNF的缺乏可導(dǎo)致海馬發(fā)生病理變化從而引起抑郁癥，BDNF表達(dá)水平的下降參與了抑郁癥的某些病理生理過(guò)程。當(dāng)機(jī)體處于長(zhǎng)期的應(yīng)激或慢性神經(jīng)心理應(yīng)激狀態(tài)時(shí)，機(jī)體處于失代償階段，經(jīng)過(guò)一系列中間因子的作用，BDNF表達(dá)下調(diào)，導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞凋亡或死亡［8-10］。因而有學(xué)說(shuō)認(rèn)為海馬體神經(jīng)元產(chǎn)生的BDNF缺失和功能降低會(huì)構(gòu)成抑郁行為，抗抑郁藥能提高腦的BDNF水平，BDNF通過(guò)激活其高親和力受體TrkB對(duì)神經(jīng)元的生存及活動(dòng)起重要調(diào)節(jié)作用［11-12］，BDNF的表達(dá)增加有利于神經(jīng)元的生存，提高海馬突觸可塑性，是各種抗抑郁劑治療的共同作用機(jī)制。此外，BDNF還與單胺系統(tǒng)密切相關(guān)，BDNF對(duì)5-HT神經(jīng)元具有神經(jīng)保護(hù)作用，而B(niǎo)DNF的表達(dá)同時(shí)也受5-HT調(diào)節(jié)［13-15］。當(dāng)處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí)，機(jī)體可產(chǎn)生一系列反應(yīng)來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié)以便最終適應(yīng)應(yīng)激狀態(tài)，其中包括升高腦內(nèi)BDNF的表達(dá)水平。當(dāng)應(yīng)激持續(xù)作用于機(jī)體時(shí)，BDNF水平將持續(xù)升高，最終通過(guò)進(jìn)一步發(fā)展后將破壞BDNF與5-HT能神經(jīng)元功能的動(dòng)態(tài)平衡，產(chǎn)生神經(jīng)性毒性并導(dǎo)致海馬神經(jīng)元的進(jìn)一步凋亡，進(jìn)而出現(xiàn)腦內(nèi)海馬BDNF表達(dá)持續(xù)減少，最終導(dǎo)致腦內(nèi)BDNF水平下降、5-HT及5-HT能神經(jīng)元功能的減弱，最終發(fā)展成為一種新的病態(tài)平衡［16-18］。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果得知，藜?xì)g解郁低、高劑量組均可改善抑郁大鼠的體質(zhì)量、飲食、毛發(fā)、排泄等情況，明顯縮短大鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間和大鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間，顯著增加大鼠體內(nèi)單胺遞質(zhì)NE、DA、5-HT等的含有量，明顯降低CORT的含有量，顯著增強(qiáng)腦內(nèi)海馬體BDNF蛋白表達(dá)水平，提示藜?xì)g解郁膠囊具有抗抑郁作用，其作用機(jī)制可能是通過(guò)提高單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)功能，抑制下丘腦-垂體-腎上腺軸功能，提高腦內(nèi)海馬BDNF的表達(dá)水平，升高5-HT含有量，保護(hù)5-HT能神經(jīng)元功能等途徑發(fā)揮抗抑郁作用。

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2015-05-27

上海市科學(xué)技術(shù)委員會(huì)中藥現(xiàn)代化項(xiàng)目 （10DZ1971800）；上海市教育委員會(huì)預(yù)算內(nèi)項(xiàng)目 （2011JW26）

劉梅 （1978—），女，碩士，副研究員，主要從事中藥新藥研發(fā)及新劑型的研究。Te1：（021）51323105，E-mai1：1mcao@ hotmai1.com

奉建芳 （1966—），男，博士，研究員，主要從事中藥新劑型與新制劑的研究。Te1：（021）51323104，E-mai1：fengjianfang @vip.163.com