于海霞 郭 佳 劉東偉 秦 麗 余 琦 劉章鎖

瞬時(shí)受體電位離子通道3在糖尿病腎病小鼠的表達(dá)及意義

于海霞1,2,3郭 佳1,2劉東偉1,2秦 麗1,2,3余 琦1,2,3劉章鎖1,2

目的：研究瞬時(shí)受體電位離子通道3(TRPM3)在2型糖尿病腎病模型db/db小鼠腎組織的表達(dá)，以及高糖對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞(HK2)和小鼠足細(xì)胞(MPC)TRPM3表達(dá)的影響。 方法：(1)將20只雄性5周齡db/db小鼠隨機(jī)分為兩組，各10只。同窩出生的db/m小鼠作為正常對(duì)照組(n=20)。待db/db小鼠生長(zhǎng)至10周齡和18周齡后取血、尿標(biāo)本測(cè)定相關(guān)生化指標(biāo)，留取腎組織。利用Western blot、實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)和免疫組織化學(xué)方法，檢測(cè)正常對(duì)照組(db/m小鼠)及不同周齡(10周、18周)db/db小鼠腎組織中TRPM3的表達(dá)水平及分布情況。 (2)體外培養(yǎng)HK2和條件永生化MPC，分別按以下處理分組：對(duì)照組(D-葡萄糖5.6 mmol/L)；甘露醇組(D-葡萄糖5.6 mmol/L+甘露醇24.4 mmol/L)；高糖組(D-葡萄糖30 mmol/L)，培養(yǎng)24h、48h、72h收獲細(xì)胞，用Western blot和qRT-PCR檢測(cè)細(xì)胞中TRPM3的表達(dá)。 結(jié)果：(1)與db/m小鼠相比，db/db小鼠腎組織腎小管和腎小球中TRPM3的表達(dá)增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；(2)與正常對(duì)照組相比，高糖組HK2和MPC中TRPM3的表達(dá)均增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)； 結(jié)論：TRPM3可表達(dá)于糖尿病腎病小鼠腎臟組織的腎小管和腎小球中，且高血糖可誘導(dǎo)TRPM3在HK2細(xì)胞和MPC細(xì)胞的高表達(dá)；TRPM3可能參與了糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展。

糖尿病腎病 瞬時(shí)受體電位離子通道3 人腎小管上皮細(xì)胞 條件永生化的小鼠足細(xì)胞

糖尿病腎病(DN)是糖尿病最常見(jiàn)的微血管并發(fā)癥,是導(dǎo)致終末期腎病(ESRD)的主要病因之一。腎小球?yàn)V過(guò)屏障受損(足細(xì)胞損傷起關(guān)鍵作用)、腎小球硬化及腎間質(zhì)纖維化在DN的進(jìn)展中發(fā)揮重要作用[1]。瞬時(shí)受體電位通道(即TRP通道)是位于細(xì)胞膜上一類(lèi)重要的陽(yáng)離子通道，它可廣泛表達(dá)多種哺乳動(dòng)物的組織和細(xì)胞[2]。TRP家族分為7個(gè)亞家族，不同亞型在腎臟發(fā)揮的作用不同。近年來(lái)，亞家族中TRPC6與瞬時(shí)受體電位離子通道3(TRPM3)備受關(guān)注。最早有研究指出，TRPC6基因突變能夠?qū)е戮衷罟?jié)段性腎小球硬化(FSGS)，由此揭示了TRPC6與腎臟疾病的密切關(guān)系[3]。最新研究發(fā)現(xiàn)，在DN的發(fā)病進(jìn)程中，TRPC6能夠誘導(dǎo)細(xì)胞Ca2+內(nèi)流改變，進(jìn)而引起足細(xì)胞濾過(guò)功能的損傷，最終導(dǎo)致蛋白尿[4]。作為另一個(gè)鈣通透性離子通道TRPM家族中的一員，TRPM3主要表達(dá)于腦和腎臟。相關(guān)報(bào)道指出，TRPM3在背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元中可參與調(diào)控機(jī)體的避害行為[5]。同時(shí)它能夠調(diào)控寡突膠質(zhì)細(xì)胞的分化和中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘的形成[6]。此外，還在維持腎臟的鈣離子穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用，但是目前有關(guān)TRPM3在DN小鼠腎組織及細(xì)胞中的表達(dá)及作用研究較少?？紤]到TRPC6在DN中的相關(guān)研究較多，因此本課題選取TRPC6為參照，同時(shí)比較TRPM3、TRPC6在DN小鼠腎組織中的表達(dá)分布情況及高糖環(huán)境下兩者在人腎小管上皮細(xì)胞、小鼠足細(xì)胞中的表達(dá)情況。

材料與方法

材料與試劑 兔抗小鼠(或兔抗人)多克隆抗體TRPM3 (SantaCruz，CA)；兔抗小鼠(或兔抗人)多克隆抗體TRPC6(英國(guó)Abcam)；小鼠抗小鼠(或小鼠抗人)GAPDH單克隆抗體(中杉金橋生物工程公司)；辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔二抗及山羊抗小鼠二抗(北京鼎國(guó)昌盛生物技術(shù)公司)；RPIM 1640 培養(yǎng)基、胎牛血清、0.25%胰蛋白酶(均購(gòu)自美國(guó)Gibco)；DMEM培養(yǎng)基(美國(guó)Hyclone)；小鼠γ-干擾素(美國(guó)R&D systems)；cDNA合成試劑盒及實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒(日本東洋紡公司)；PV-9001免疫組化檢測(cè)試劑(中杉金橋生物工程公司)。

儀器與設(shè)備 安穩(wěn)血糖儀(三諾生物傳感股份有限公司)、液氮容器(北京恒奧生物科技有限公司)、CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱、高速低溫離心機(jī)(德國(guó)Eppendorf)、高壓滅菌器(日本SANYO公司)、數(shù)顯恒壓恒流電泳儀(Tanon公司)、轉(zhuǎn)移電泳槽(天能Tanon公司)。

方法

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 (1)C57BLKS/J的清潔級(jí)雄性db/db小鼠和db/m小鼠由南京模式動(dòng)物中心提供，于河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心動(dòng)物房分籠飼養(yǎng)，同窩出生的5周齡小鼠經(jīng)檢疫及適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。每籠5只，室溫18～24℃， 實(shí)驗(yàn)期間自由進(jìn)食飲水，喂養(yǎng)普通飼料，不使用胰島素和其他降糖藥物。(2)分組：將20只雄性5周齡db/db小鼠隨機(jī)分為兩組，各10只。同窩出生的db/m小鼠(20只)作為正常對(duì)照組。從6周齡起定期測(cè)定各組小鼠的體重，收集24h尿，禁食8 h后測(cè)尾尖血糖。飼養(yǎng)10周、18周后用5%水合氯醛按照0.1 ml/10g體重腹腔注射麻醉小鼠，收集心臟血，分離兩側(cè)腎臟，觀(guān)察一般情況，剝離腎包膜并留取腎臟，將腎臟皮質(zhì)切成綠豆樣大小后置于光鏡液中固定，剩余腎組織置于液氮中保存?zhèn)溆谩?/p>

細(xì)胞培養(yǎng)及分組 (1)人近端腎小管上皮細(xì)胞系(HK2)(購(gòu)自于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心)培養(yǎng)于含10%胎牛血清(FBS)的低糖(D-葡萄糖 5.6 mmol/L)DMEM培養(yǎng)基中，細(xì)胞置于37℃、5%C02細(xì)胞培養(yǎng)箱貼壁培養(yǎng)。0.25%胰酶消化，按需傳代，待細(xì)胞生長(zhǎng)至 70%～80%融合時(shí)，用無(wú)血清培養(yǎng)基饑餓同步12h后隨機(jī)分為以下5組：①正常對(duì)照組(NG 5.6 mmol/L葡萄糖)；②甘露醇組(NG+M即5.6 mmol/L葡萄糖+24.4 mmol/L甘露醇)；③高糖組(HG 30 mmol/L葡萄糖)，分別于24h、48h、72h各時(shí)間點(diǎn)收獲細(xì)胞。(2)條件性永生化小鼠足細(xì)胞株(MPC)由南方醫(yī)科大學(xué)聶靜教授(Southern Medical University，China)惠贈(zèng)。參照Peter Mundle教授的方法[7]，增殖狀態(tài)下，未分化足細(xì)胞在33℃、5% CO2培養(yǎng)箱貼壁培養(yǎng)，使用含10%胎牛血清、5.6 mmol/L葡萄糖、10 U/ml小鼠干擾素γ的RPMI1640培養(yǎng)基，待細(xì)胞生長(zhǎng)至70%～80%融合后進(jìn)行傳代或放入37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱使其分化，此時(shí)改用含10%胎牛血清、5.6 mmol/L葡萄糖、不含重組小鼠干擾素γ的RPMI 1 640培養(yǎng)基，培養(yǎng)足細(xì)胞12～14天，待其分化成熟后，余處理及分組同上。

生化指標(biāo)檢測(cè) 空腹血糖采用快速血糖儀檢測(cè)，血生化在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院生化室檢測(cè)。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)法檢測(cè)相關(guān)mRNA表達(dá) Trizol法提取動(dòng)物腎組織和各實(shí)驗(yàn)細(xì)胞中的總RNA，采用紫外線(xiàn)分光光度計(jì)測(cè)定各樣本RNA濃度，按反轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書(shū)反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA。用熒光定量PCR儀分別擴(kuò)增內(nèi)參照基因和各目的基因，用Ct值表示樣品中內(nèi)參照基因和目的基因的相對(duì)含量。qRT-PCR擴(kuò)增體系如下：PCR Master Mix 10 μl,上、下游引物(10 nmol/L)各1 μl,模板cDNA 2 μl，加RNase-free水補(bǔ)足至20 μl。循環(huán)條件:95℃ 30s、95℃ 5s和60℃ 32s，循環(huán)45次，重復(fù)實(shí)驗(yàn)至少3次。各引物序列見(jiàn)表1。

表1 目的基因引物序列

Western印跡法檢測(cè)蛋白表達(dá) (1)組織蛋白的提?。喝∫旱獌龃娴哪I組織，加適量裂解液后充分研磨，4℃ 裂解組織，12 000×rpm低溫離心10 min，取上清液，BCA法測(cè)蛋白濃度，不煮蛋白，直接將各組蛋白上樣進(jìn)行SDS-PAGE電泳，然后濕轉(zhuǎn)將膠上蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF膜上，5% BSA室溫封閉2h，4℃一抗孵育過(guò)夜，各抗體工作濃度分別為：TRPM3抗體(1∶ 1 500)、TRPC6抗體(1∶ 1 500)、GAPDH抗體(1∶ 2 000)。次日1×TSBT洗膜三次、10 min/次，用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔二抗(1∶ 2 500)或山羊抗小鼠二抗(1∶ 2 500)室溫孵育2h，1×TSBT洗膜三次、10 min/次。用Tanon全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng)進(jìn)行曝光成像，以GAPDH為內(nèi)參，Image J軟件分析條帶并計(jì)算TRPM3、TRPC6蛋白表達(dá)水平。(2)細(xì)胞蛋白的提?。菏占鹘M細(xì)胞，按照全細(xì)胞裂解液說(shuō)明書(shū)冰上提取總蛋白，12 000×rpm低溫離心10 min，取上清液，BCA法測(cè)定蛋白濃度，余方法同上。按相同實(shí)驗(yàn)條件、用不同批次細(xì)胞重復(fù)實(shí)驗(yàn)至少3次。

免疫組織化學(xué) 用石蠟包埋小鼠腎組織，切成3 μm厚度薄組織，貼于防脫片上，60℃恒溫箱烤片2h，后于4℃冰箱內(nèi)保存。用前烤片30 min，經(jīng)二甲苯、梯度酒精進(jìn)行脫蠟、水化，PBS洗滌5 min/次×3次，微波修復(fù)抗原，待恢復(fù)室溫后PBS洗滌5 min/次×3次，3%H2O2室溫孵育30 min以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，PBS洗滌5 min/次×3次，山羊血清封閉20 min，分別滴加一抗TRPM3(1∶ 150)、TRPC6(1∶ 150)，4℃孵育過(guò)夜；次日PBS洗滌5 min/次×3次后滴加相應(yīng)HRP標(biāo)記的二抗及反應(yīng)增強(qiáng)液，顯微鏡下控制DAB顯色時(shí)間，蘇木素染核，梯度酒精脫水、二甲苯透明后封片。陰性對(duì)照組使用PBS 替代一抗。

結(jié) 果

糖尿病腎病小鼠腎組織TRPM3、TRPC6的表達(dá)分布

一般狀態(tài)和生化指標(biāo) db/db小鼠的體重和空腹血糖、24h尿蛋白和肌酐水平均高于同周齡db/m小鼠(P<0.05)(表2)。

表2 各組小鼠生化指標(biāo)情況

db/db：糖尿病腎病模型小鼠；db/m：正常對(duì)照組；*：與同周齡db/m小鼠相比，P<0.05

腎組織TRPM3、TRPC6表達(dá) Western 印跡法示，10周db/db小鼠和18周db/db小鼠腎組織中TRPM3、TRPC6蛋白表達(dá)量明顯高于db/m小鼠(P<0.05)；qRT-PCR結(jié)果與Western印跡結(jié)果趨勢(shì)一致(圖1)。

腎組織TRPM3、TRPC6免疫組織化學(xué)結(jié)果 TRPM3、TRPC6主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)，呈棕色。與同周齡db/m小鼠相比，db/db小鼠腎組織腎小管和腎小球中的TRPM3、TRPC6表達(dá)明顯增多(圖2、3)。

高糖環(huán)境下HK2和MPC細(xì)胞TRPM3、TRPC6的表達(dá)情況

HK2細(xì)胞 (1) Western 印跡結(jié)果顯示，與NG組相比，HG組中TRPM3、TRPC6蛋白表達(dá)隨高糖培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增多(均P<0.05)。qRT-PCR結(jié)果與Western印跡結(jié)果趨勢(shì)一致(圖4)；(2) 對(duì)各組中TRPM3、TRPC6蛋白表達(dá)水平進(jìn)行相關(guān)性分析顯示，兩者呈線(xiàn)性正相關(guān)(r=0.609，P=0.016)。

圖1 各組小鼠腎組織中TRPM3、TRPC6蛋白和mRNA表達(dá)情況db/db：糖尿病腎病模型小鼠；db/m：正常對(duì)照組；TRPM3：瞬時(shí)受體電位離子通道3；TRPC6：瞬時(shí)受體電位通道6；A、B：Western Blot檢測(cè)TRPM3、TRPC6蛋白結(jié)果；C：qRT-PCR檢測(cè)TRPM3、TRPC6 mRNA結(jié)果；*：與db/m(10周)相比，P<0.01

圖2 各組小鼠腎組織中TRPM-3、TRPC-6免疫組化結(jié)果(IH，×200)db/db：糖尿病腎病模型小鼠；db/m：正常對(duì)照組；TRPM3：瞬時(shí)受體電位離子通道3；TRPC6：瞬時(shí)受體電位通道6

圖3 小鼠腎組織中TRPM3、TRPC6表達(dá)的半定量分析TRPM3：瞬時(shí)受體電位離子通道3；TRPC6：瞬時(shí)受體電位通道6；*：與db/m(10周)相比，P<0.05；△：與db/m(18周)相比，P<0.05

MPC細(xì)胞 (1)Western印跡結(jié)果顯示，與NG組相比，HG組中TRPM3、TRPC6蛋白表達(dá)隨高糖培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增多(均P<0.01)。qRT-PCR結(jié)果與Western印跡結(jié)果趨勢(shì)一致(圖5)；(2) 對(duì)各組中TRPM3、TRPC6蛋白表達(dá)水平進(jìn)行相關(guān)性分析顯示，兩者呈線(xiàn)性正相關(guān)(r=0.939，P<0.01)。

討 論

db/db小鼠是早期DN的模型，有研究證實(shí)，db/db小鼠自第8～10周開(kāi)始出現(xiàn)蛋白尿及腎功能損害[8]。本研究顯示，自第6周開(kāi)始，db/db小鼠的血糖較db/m小鼠升高，出現(xiàn)多飲、多尿、體重增加。自第10周開(kāi)始，db/db小鼠的尿蛋白較db/m小鼠明顯增高，這都與既往研究結(jié)果一致，這說(shuō)明DN小鼠模型建立成功。

TRPM3是一種瞬時(shí)受體電位通道，可介導(dǎo)Ca2+、Mn2+、Zn2+等進(jìn)入細(xì)胞[9](以通透Ca2+為主)，參與機(jī)體的各種病理生理過(guò)程。有研究表明，TRPM3能夠介導(dǎo)胰島素的分泌[10]，還可以下調(diào)增殖的血管平滑肌中炎癥因子IL-6的表達(dá)[11]。它主要表達(dá)于人體腎臟中，在鈣離子穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用，但具體機(jī)制仍然處于待研究階段。新近研究指出，腎透明細(xì)胞癌中TRPM3的表達(dá)上調(diào)，這可能與TRPM3誘導(dǎo)細(xì)胞鈣離子內(nèi)流增多進(jìn)而引起細(xì)胞的自噬有關(guān)，由此可利用TRPM3通道為切入點(diǎn)對(duì)腎臟腫瘤進(jìn)行靶向治療[12]，這表明TRPM3通道在腎臟中發(fā)揮的作用不可小覷。而截止目前，TRPM3與DN的關(guān)系鮮有報(bào)道，且其在小鼠腎臟組織中的表達(dá)及分布情況并不十分清楚。因此，本研究通過(guò)DN模型小鼠，我們發(fā)現(xiàn)db/db小鼠腎臟組織TRPM3 mRNA及其蛋白表達(dá)水平較正常對(duì)照組小鼠(db/m)升高，且隨著周齡的增加TRPM3的表達(dá)也隨之升高；免疫組化結(jié)果提示db/db小鼠腎小管和腎小球中TRPM3表達(dá)上調(diào)；此外我們的研究以人腎小管上皮細(xì)胞和小鼠足細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，從細(xì)胞水平驗(yàn)證了高糖能夠誘導(dǎo)HK2和MPC中TRPM3的高表達(dá)。這表明TRPM3可能在DN的發(fā)生發(fā)展中產(chǎn)生了作用。

圖4 高糖對(duì)HK-2中TRPM3、TRPC6蛋白和mRNA表達(dá)情況TRPM3：瞬時(shí)受體電位離子通道3；TRPC6：瞬時(shí)受體電位通道6；NG：正常對(duì)照組；NG+M：甘露醇組;HG：分別為D-葡萄糖30 mmol/L 24h/48h/72h組；A/B：Western blot檢測(cè)TRPM3、TRPC6蛋白結(jié)果；C：qRT-PCR檢測(cè)TRPM3、TRPC6 mRNA結(jié)果;*：與NG組相比，P<0.05

圖5 高糖對(duì)MPC中TRPM3、TRPC6蛋白和mRNA表達(dá)情況TRPM3：瞬時(shí)受體電位離子通道3；TRPC6：瞬時(shí)受體電位通道6；NG：正常對(duì)照組；NG+M：甘露醇組;HG：分別為D-葡萄糖30 mmol/L 24h/48h/72h組；*：與NG組相比，P<0.01；A、B：Western Blot檢測(cè)TRPM3、TRPC6蛋白結(jié)果；C：qRT-PCR檢測(cè)TRPM3、TRPC6 mRNA結(jié)果

作為瞬時(shí)受體電位通道家族的另一成員，TRPC6是足細(xì)胞裂孔膜蛋白的一員，能夠介導(dǎo)鈣離子內(nèi)流進(jìn)而調(diào)節(jié)足細(xì)胞的功能，維系腎小球的正常濾過(guò)，成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，高糖能夠誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的足細(xì)胞中TRPC6的表達(dá)增多，最終引起足細(xì)胞骨架蛋白的損傷[13]。也有研究提出，高血糖可誘導(dǎo)TRPC6在DN大鼠腎小球中的高表達(dá)，這可能參與了DN大鼠足細(xì)胞的損害和蛋白尿的形成[14]。DN中氧化應(yīng)激的出現(xiàn)及活性氧簇(ROS)的增加可上調(diào)TRPC6的表達(dá)[15-16]，同時(shí)，TRPC6還可參與血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)足細(xì)胞損傷的病理生理過(guò)程[17]。本次研究從組織水平和細(xì)胞水平證實(shí)了TRPC6在DN小鼠腎組織和高糖環(huán)境處理后各細(xì)胞系中的表達(dá)均是增多的，這與既往研究的部分結(jié)果一致。

綜上所述，高血糖能誘導(dǎo)TRPC6和TRPM3在糖尿病腎病小鼠腎組織、人腎臟腎小管上皮細(xì)胞及小鼠腎小球足細(xì)胞的高表達(dá)。據(jù)此，我們推測(cè)TRPM3可能如TRPC6一樣也在DN發(fā)病進(jìn)程中發(fā)揮著重要的作用，而其是否受氧化應(yīng)激因子的調(diào)控及其能否通過(guò)調(diào)控鈣離子的濃度進(jìn)而影響DN的進(jìn)展，這些具體的機(jī)制尚待進(jìn)一步深入探究。

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(本文編輯 青 松)

Expression of transient receptor potential melastatin 3 in diabetic nephropathy mice

YUHaixia1,2,3,GUOJia1,2,LIUDongwei1,2,QINLi1,2,3,YUQi1,2,3,LIUZhangsuo1,2

1DepartmentofNephrology,TheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China2NephrologyResearchInstituteofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China3InstituteofClinicalMedicine,TheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China

LIUZhangsuo(E-mail:zhangsuoliu@sina.com)

Objective：To study the expression of transient receptor potential melastatin 3 (TRPM3) in the internationally recognized db/db mouse model of type 2 diabetic nephropathy, in human tubular epithelial cells (HK2) and conditionally immortalized mouse podocytes (MPC) under high glucose. Methodology：Twenty male five-week db/db mice were randomly divided into two groups (eachn=10), and we used db/m mice of littermate as the normal control group (n=20). At the age of 10 weeks and 18 weeks, the samples of blood, urine and renal tissues were collected. The biochemical indexes were measured. The expression of TRPM3 in renal tissues was assessed by Western blot、qRT-PCR and immunohistochemistry respectively. HK2 and MPC were cultured in vitro and divided into the following groups: (1) Normal control group (D-glucose 5.6 mmol/L); (2) Mannitol group (D-glucose 5.6 mmol/L+D-mannitol 24.4 mmol/L); (3) High glucose group (D-glucose 30 mmol/L).The corresponding indexes were measured at 24th，48th and 72th hour. Western blot and qRT-PCR were used to examine the expression of TRPM3 in protein and mRNA. Results：Compared with the 10w db/m mice, the expression of TRPM3 in the 10w db/db and 18w db/db mice was increased significantly (P<0.05). In cultured HK2 and MPC, the protein and mRNA expression of TRPM3 was increased in High glucose group, compared with the normal control group (P<0.05). Conclusion：TRPM3 can be expressed in the renal tubules and glomerulus of mouse, and high glucose can induce the higher expression of TRPM3 in HK2 and MPC. TRPM3 may be involved in the development of diabetic nephropathy.

diabetic nephropathy transient receptor potential melastatin 3 human tubular epithelial cells (HK2) conditionally immortalized mouse podocytes (MPC)

10.3969/cndt.j.issn.1006-298X.2017.02.008

1鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院腎臟內(nèi)科(鄭州，450052)；2鄭州大學(xué)腎臟病研究所；3河南省高等學(xué)校臨床醫(yī)學(xué)重點(diǎn)學(xué)科開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室

劉章鎖(E-mail:zhangsuoliu@sina.com)

2016-11-02

? 2017年版權(quán)歸《腎臟病與透析腎移植雜志》編輯部所有