汪鳳華 任琦 胡壽榮 付輝政

中圖分類號(hào) R284.1;R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2019）17-2369-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.17.13

摘 要 目的：研究油茶根正丁醇萃取部位的化學(xué)成分，為闡明其抗腫瘤的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供參考。方法：以95%乙醇為溶劑對油茶根進(jìn)行提取得到醇提物，依次用乙酸乙酯、水飽和正丁醇溶液萃取醇提物后得到正丁醇萃取部位，然后利用D101大孔樹脂柱以及硅膠柱色譜、常壓反相柱色譜、葡聚糖凝膠SephadexLH-20柱色譜和制備液相色譜等方法對油茶根正丁醇萃取部位的化學(xué)成分進(jìn)行分離、純化，并通過理化常數(shù)測定以及電噴霧-質(zhì)譜、核磁共振氫譜、核磁共振碳譜等波譜分析鑒定所得化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果：從油茶根正丁醇萃取部位中分離得到8個(gè)化合物，分別鑒定為槲皮素-3′ -O-β-D-葡萄糖苷（化合物1）、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷（化合物2）、（+）-南燭木樹脂酚-3α-O-β-D-葡萄糖苷（化合物3）、甜葉懸鉤子苷（化合物4）、杜爾可苷B（化合物5）、4-羥基-3-甲氧基苯酚1-O-β-D-[6-O-（4-羥基-3，5-二甲氧基苯甲?；-吡喃葡萄糖苷（化合物6）、3，4，5-三甲氧基苯基-6-O-紫丁香?；?β-D-葡萄糖苷（化合物7）和gordonoside P（化合物8）。結(jié)論：化合物1～8均為首次從油茶中分離得到。本研究結(jié)果不僅豐富了該屬植物的化學(xué)成分，并且為該部位抗腫瘤藥效物質(zhì)的闡明提供了參考。

關(guān)鍵詞 油茶根;正丁醇萃取部位;化學(xué)成分;分離;鑒定

Study on Chemical Constituents of n-Butanol Part from the Roots of Camellia oleifera

WANG Fenghua1，REN Qi2，HU Shourong2，F(xiàn)U Huizheng2（1.Dept. of Pharmacy， the Fourth Affiliated Hospital of Nanchang University， Nanchang 330003， China;2.Jiangxi Provincial Institute for Drug Control/Jiangxi Provincial Engineering Research Center for Drug and Medical Device Quality， Nanchang 330029， China）

ABSTRACT ? OBJECTIVE： To study the chemical constituents of n-Butanol part from the roots of Camellia oleifera， and to provide reference for elucidating the pharmacodynamic substance basis of it’s anti-tumor effect. METHODS： The ethanol extracts were obtained by using 95% ethanol as extraction solvent to extract the roots of C. oleifera， and the n-Butanol part was obatined after the extracts were extratced with ethyl acetate and water-saturated n-butanol solution in turn. The chemical constituents of n-butanol part were isolated and purified by D101 macroporous resin column， silica gel， atmospheric pressure reversed phase column chromatography， sephadex gel SephadexLH-20 column chromatogram and preparative HPLC. The structure of the compounds was identified by spectroscopic analysis of physicochemical constants， electrospray ionization mass spectrometry， 1H-NMR and 13C-NMR. RESULTS： Eight compounds were isolated from the roots of C. oleifera and elucidated as quercetin 3′ -O-β-D-glucoside （compound 1）， apigenin-7-O-β-D-glucoside （compound 2）， （+）-lyoniresinol-3α-O-β-D-glucopyranoside （compound 3）， rubusoside （compound 4）， dulcoside B （compound 5）， 4-hydroxy-3-methoxyphenol 1-O-β-D-[6-O-（4-hydroxy-3，5-dimethoxylbenzoate）-glucopyranoside （compound 6）， 3，4，5-trimethoxyphenyl-6-O- syringoyl-β-D-glucopyranoside （compound 7）， gordonoside P （compound 8）. ?CONCLUSIONS： Compounds 1-8 were isolated from this plant for the first time. This not only enriches the chemical constituents of this genus， but also provides a reference for elucidating the anti-tumor bioactive substances in this part.

KEYWORDS ? Camellia oleifera; n-Butanol part; Chemical constituents; Separate; Identify

油茶（Camellia oleifera Abel.）為常綠灌木或小喬木，屬于山茶科山茶屬植物，主要分布在熱帶及亞熱帶地區(qū)，我國的產(chǎn)區(qū)主要集中在西南部和東南部，如江西、福建、重慶等地區(qū)[1]，是我國基本的木本食用油料樹種。油茶的根（油茶根）、葉（油茶葉）、花（油茶花）、果實(shí)的脂肪油（茶油）及其渣滓（茶餅）均可供藥用，其中茶油已收載在2015年版《中國藥典》（一部）中[2]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，油茶中主要含有三萜及三萜皂苷、黃酮、木脂素、鞣質(zhì)、脂肪酸、甾體等化學(xué)成分，其中的三萜皂苷以齊墩果烷型五環(huán)三萜皂苷為主，黃酮類成分主要是槲皮素、山柰酚以及芹茶素等為母核的黃酮醇類，具有諸如抗腫瘤、抗菌、抗炎、抗突變等多種藥理活性[3-10]。油茶皂苷的抗腫瘤效果非常顯著[7-9]。例如譚珍媛等[11]通過MTT法觀察油茶皂苷在體外對腫瘤細(xì)胞及人腎小管上皮細(xì)胞HK-2的影響，并建立S180荷瘤小鼠模型，證實(shí)了油茶皂苷的抗腫瘤作用，闡明了其抗腫瘤作用機(jī)制是通過增強(qiáng)荷瘤小鼠免疫功能，增加腫瘤壞死因子α（TNF-α）和白細(xì)胞介素2（IL-2）的釋放。

為了尋找油茶抗腫瘤的有效成分，闡明其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，更好地開發(fā)利用該植物資源，本課題組在前期對油茶莖和茶餅研究基礎(chǔ)上[12-16]，采用MTT法評(píng)價(jià)了油茶根粗提取物對人胃癌細(xì)胞BGC-823、人卵巢癌細(xì)胞A2780、人肺腺癌細(xì)胞A549、人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-8、人肝癌細(xì)胞Bel7402這5種腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒活性，結(jié)果表明油茶根95%乙醇提取物正丁醇部位對上述5種腫瘤細(xì)胞顯示出非選擇性的細(xì)胞毒活性，半數(shù)抑制濃度（IC50）范圍為2.78～12.44 μmol/L，顯示出較好的抗腫瘤活性，但其具體的抗腫瘤藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚不明確。為了探明油茶抗腫瘤藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，以為其開發(fā)應(yīng)用提供較好的理論支持，筆者采用有機(jī)溶劑提取及分級(jí)萃取法，利用多種色譜和波譜技術(shù)對油茶根抗腫瘤活性部位進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，以期為油茶根在抗腫瘤方面的藥理活性研究提供參考。

1 材料

1.1 儀器

UNITY INOVA 500型超導(dǎo)核磁共振儀（美國瓦里安公司）;ZabSpec型質(zhì)譜儀（美國Micromass公司）;1260型液相色譜儀、1200型制備液相色譜儀（美國Agilent科技有限公司）;Buchi型中壓液相制備色譜儀（瑞士Buchi有限公司）;BP211D型十萬分之一電子天平（德國Sartorius集團(tuán)）;Autopol IV-T/V型旋光儀（美國魯?shù)婪蚬荆?SB-1000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、A-1000 S型循環(huán)水真空泵（日本東京理化器械株式會(huì)社）。

1.2 藥品與試劑

油茶藥材采自江西省上饒市廣豐區(qū)，由本文通信作者所在單位的袁桂平主任中藥師鑒定為山茶科山茶屬植物油茶C. oleifera Abel.的根，標(biāo)本保存在該單位的中藥標(biāo)本室;葡聚糖凝膠Sephadex LH-20（瑞典Amersham Biosciences公司，批號(hào)：0180106，粒徑：18～111 μm）;C18反相填料（批號(hào)：12372，粒徑：10 μm）、制備型色譜柱（規(guī)格：250 mm× 20 mm，10 μm）均購自日本YMC公司;D101大孔樹脂（安徽三星樹脂科技有限公司，批號(hào)：20180618）;柱色譜硅膠（批號(hào)：0180052、0180167、0180614，規(guī)格：100～200、200～300、300～400目）、薄層色譜硅膠G預(yù)制板（批號(hào)：20180503）均為青島海洋化工廠生產(chǎn);氘代甲醇（CD3OD，批號(hào)：LN50S112）、氘代吡啶（C5D5N，批號(hào)：l1050）、氘代二甲基亞砜（DMSO-d6，批號(hào)：PR-28498/12196DM2）均購自美國劍橋公司;色譜甲醇和色譜乙腈均購自美國賽莫飛世爾科技有限公司;乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷、甲醇、乙腈、95%乙醇等均購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，均為分析純;水為娃哈哈純凈水。

2 方法與結(jié)果

2.1 化合物的提取、分離

取常溫干燥油茶根10.3 kg，粉碎（粒度≤355 μm），然后用4倍量的95%乙醇加熱回流提取3次，每次2 h，合并提取液并濃縮至適量。依次用乙酸乙酯、水飽和正丁醇溶液萃取，萃取液分別減壓濃縮至干，得到乙酸乙酯萃取部位（40.5 g）和正丁醇萃取部位（90.7 g）。將正丁醇萃取部位用適量水溶解，過濾，濾液經(jīng)過D101大孔樹脂柱，依次用水和30%、50%、70%乙醇洗脫，分別得水洗脫部位（40.8 g）、30%乙醇洗脫部位（22.3 g）、50%乙醇洗脫部位（18.5 g）和70%乙醇洗脫部位（12.2 g）。將70%乙醇洗脫部位經(jīng)正相硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇（7 ∶ 3、7 ∶ 4、2 ∶ 1、6 ∶ 4，V/V）系統(tǒng)梯度洗脫，然后經(jīng)薄層色譜檢視，根據(jù)比移值合并相近的組分后，得到12個(gè)組分（Fr.1～Fr.12）。將組分Fr.9（2.4 g）再經(jīng)過常壓反相（ODS）色譜柱，以乙腈-水（20 ∶ 80、25 ∶ 75、30 ∶ 70、 ? ? 35 ∶ 65、40 ∶ 60、45 ∶ 55、50 ∶ 50，V/V）為流動(dòng)相系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)高效液相色譜檢測后，合并相同組分，即得到10個(gè)流份（Fr.9-1～Fr.9-10）。將流份Fr.9-2（45.7 mg）以甲醇-水（38 ∶ 62，V/V）為流動(dòng)相，經(jīng)高效液相色譜分析和反相高效制備液相色譜純化后，得到化合物1[12.5 mg，保留時(shí)間（tR）=76 min]、化合物2（7.6 mg，tR=87 min）和化合物3（18 mg，tR=103 min）;將流份Fr.9-4（25.8 mg） 以乙腈-0.05%三氟乙酸（36 ∶ 64，V/V）為流動(dòng)相，經(jīng)高效液相色譜分析和反相高效制備液相色譜純化后，得到化合物4（3.4 mg，tR=62 min）和化合物5（6.1 mg，tR=75 min）;將流份Fr.9-7（156.2 mg）以乙腈-水（37 ∶ 63，V/V）為流動(dòng)相，經(jīng)高效液相色譜分析和反相高效制備液相色譜純化后，得到化合物6（33.7 mg，tR=93 min）和化合物7（16.3 mg，tR=114 min）;將Fr.9-9（17.4 mg）以乙腈-0.05%三氟乙酸（38 ∶ 62，V/V）為流動(dòng)相，經(jīng)高效液相色譜分析和反相高效制備液相色譜純化后，得到化合物8（4.8 mg，tR=105 min）。

2.2 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定

采用電噴霧離子源-質(zhì)譜（ESI-MS）、核磁共振氫譜（1H-NMR）、核磁共振碳譜（13C-NMR）等波譜技術(shù)對分離得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。

化合物1：淡黃色粉末（甲醇）。ESI-MS 質(zhì)荷比 ? （m/z）487 [M+Na]+，465 [M+H]+。1H-NMR（CD3OD，500 MHz） δ：7.50（1H，d，J=2.1 Hz，H-2′），7.47（1H，dd，J=8.5，2.1 Hz，H-6′ ），7.30（1H，d，J=8.5 Hz，H-5′ ），6.55（1H，d，J=1.7 Hz，H-8），6.15（1H，d，J=1.7 Hz，H-6），4.93（1H，d，J=7.6 Hz H-1″ ）;13C-NMR（125 MHz，CD3OD） δ：150.1（C-2），137.2（C-3），183.0（C-4），159.8（C-5），103.7（C-6），165（C-7），96.3（C-8），157.6（C-9），104.9（C-10），122.2（C-1′ ），118.5（C-2′ ），157.0（C-3′ ），149.8（C-4′ ），115.4（C-5′ ），127.8（C-6′ ），105.2（C-1″ ），75.2（C-2″ ），78.0（C-3″ ），71.7（C-4″ ），78.9（C-5″ ），62.8（C-6″ ）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]報(bào)道數(shù)據(jù)進(jìn)行比對，基本一致，因此鑒定化合物1為槲皮素-3′ -O-β-D-葡萄糖苷。

化合物2：淡黃色粉末（甲醇）。ESI-MS m/z：1 197.8 [M+Na]+。1H-NMR（C5D5N，500 MHz） δ：12.92（1H，s，5-OH），10.40（1H，s，4′ -OH），7.93（2H，d，J=8.0 Hz，H-2′ ，6′ ），6.96（2H，d，J=8.0 Hz，H-3′ ，5′ ），6.84（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.81（1H，s，H-3），6.41（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），5.07（1H，d，J=7.0 Hz，葡萄糖醛酸基-H-1″ ）;13C-NMR（C5D5N，125 MHz） δ：163.3（C-2），103.3（C-3），181.5（C-4），159.7（C-5），99.4（C-6），163.2（C-7），95.4（C-8），156.8（C-9），105.6（C-10），119.0（C-1′ ），128.8（C-2′ ，6′ ），117.3（C-3′ ，5′ ），161.8（C-4′ ），101.3（C-1″ ），73.2（C-2″ ），76.5（C-3″ ），69.8（C-4″ ），77.6（C-5″ ），60.7（C-6″ ）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[18]報(bào)道數(shù)據(jù)進(jìn)行比對，基本一致，因此鑒定化合物2為芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物3：白色粉末（甲醇）。ESI-MS m/z：605 [M+Na]+。1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz） δ：6.56（1H，s，H-8），6.35（2H，s，H-2′ ，H-6′ ），4.28（1H，d，J=6.0 Hz，H-4），4.18（1H，d，J=7.8 Hz，H-1″ ），3.95（1H，m，H-3a），3.78（3H，s，7-OCH3），3.67（1H，dd，J=11.4，5.4 Hz，H-2a），3.66（6H，s，3′ ，5′ -OCH3），3.30（3H，s，5-OCH3），3.04（2H，m，H-2a，H-3a），2.65（1H，dd，J=15.0，4.2 Hz，H-1），2.56[1H，overlap（重疊），H-1]，1.94（1H，m，H-3），1.52（1H，m，H-2）;13C-NMR（DMSO-d6，150 MHz） δ：33.9（C-1），40.5（C-2），66.1（C-2a），46.8（C-3），71.5（C-3a），42.9（C-4），148.4（C-5），138.5（C-6），147.3（C-7），107.6（C-8），130.5（C-9），126.6（C-10），139.2（C-1′ ），106.8（C-2′ ），149.0（C-3′ ），134.4（C-4′ ），149.2（C-5′ ），106.7（C-6′ ），104.5（C-1″ ），75.1（C-2″ ），78.0（C-3″ ），71.6（C-4″ ），78.3（C-5″ ），62.5（C-6″ ），60.1（5-OCH3），56.5（7-OCH3），56.9（3′ -OCH3），56.9（5′ - OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]報(bào)道數(shù)據(jù)進(jìn)行比對，基本一致，因此鑒定化合物3為（+）-南燭木樹脂酚-3α-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物4：白色粉末（甲醇）。ESI-MS m/z：641[M-H]-，665[M+Na]+。1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz） δ：6.13（1H，d，J=7.5 Hz，Glc-H-1′ ），5.12（1H，d，J=8.0 Hz，Glc-H-1″ ），5.51（1H，brs，H-17），4.97（1H，brs，H-17），1.24（3H，s，H-20），1.23（3H，s，H-18）;13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：39.8（C-1），19.4（C-2），38.3（C-3），44.0（C-4），57.3（C-5），21.3（C-6），41.7（C-7），42.4（C-8），53.9（C-9），40.7（C-10），20.7（C-11），37.3（C-12），85.9（C-13），44.5（C-14），47.7（C-15），154.5（C-16），104.4（C-17），28.3（C-18），177.0（C-19），15.6（C-20）;δ：95.9（C-1′ ），74.0（C-2′ ），79.3（C-3′ ），71.1（C-4′ ），79.1（C-5′ ），62.1（C-6′ ）;δ：104.4（C-1″ ），72.4（C-2″ ），78.8（C-3″ ），75.5（C-4″ ），78.1（C-5″ ），63.1（C-6″ ）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20]報(bào)道數(shù)據(jù)進(jìn)行比對，基本一致，因此鑒定化合物4為甜葉懸鉤子苷。

化合物5：白色粉末（甲醇）。ESI-MS m/z：949[M- H]-，973[M+Na]+。1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz） δ：6.31（1H，J=8.0 Hz），6.00（1H，d，J=8.0 Hz），5.73（1H，brs，H-17），5.14（1H，brs，H-17），5.06（1H，d，J=8.0 Hz），4.97（1H，d，J=8.0 Hz），1.61（3H，d，J=6.0 Hz），1.34（3H，s，H-20），1.24（3H，s，H-18）;13C-NMR（DMSO-d6，150 MHz）δ：39.9（C-1），20.5（C-2），38.5（C-3），43.9（C-4），57.5（C-5），22.0（C-6），41.8（C-7），42.2（C-8），54.1（C-9），40.7（C-10），19.4（C-11），38.4（C-12），87.3（C-13），48.6（C-14），49.7（C-15），152.9（C-16），106.1（C-17），28.1（C-18），177.1（C-19），15.3（C-20）;δ：96.1（C-1′ ），74.0（C-2′ ），78.9（C-3′ ），70.7（C-4′ ），78.7（C-5′ ），62.0（C-6′ ）;δ：97.7（C-1″ ），79.5（C-2″ ），88.8（C-3″ ），69.8（C-4″ ），78.4（C-5″ ），62.3（C-6″ ）;δ：104.2（C-1″ ′ ），75.1（C-2″ ′ ），77.4（C-3″ ′ ），71.5（C-4″ ′ ），77.4（C-5″ ′ ），62.6（C-6″ ′ ）;δ：102.2（C-1″ ″ ），72.0（C-2″ ″ ），72.6（C-3″ ″ ），74.2（C-4″ ″ ），70.2（C-5″ ″ ），18.8（C-6″ ″ ）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[21]報(bào)道數(shù)據(jù)進(jìn)行比對，基本一致，因此鑒定化合物5為杜爾可苷B。

化合物6：白色粉末（甲醇）。ESI-MS m/z：481[M-H]-，505[M+Na]+。1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz） δ：7.16（2H，s，H-2″ ，6″ ），6.57（1H，d，J=2.0 Hz，H-2），6.50（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.44（1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6），4.76（1H，d，J=8.0 Hz，葡萄糖醛酸基-H-1′ ），3.75（6H，s，3″ ，5″ -OCH3），3.62（3H，s，3-OCH3）;13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz） δ：151.9（C-1），102.6（C-2），150.3（C-3），145.1（C-4），112.4（C-5），106.3（C-6），100.4（C-1′ ），73.2（C-2′ ），76.4（C-3′ ），70.2（C-4′ ），73.8（C-5′ ），64.2（C-6′ ），119.5（C-1″ ），107.6（C-2″ ，6″ ），147.9（C-3″ ，5″ ），132.4（C-4″ ），55.5（3-OCH3），56.3（3″ ，5″ - OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[22]報(bào)道數(shù)據(jù)進(jìn)行比對，基本一致，因此鑒定化合物6為4-羥基-3-甲氧基苯酚1-O-β-D- [6-O-（4-羥基-3，5-二甲氧基苯甲酰基）]-吡喃葡萄糖苷。

化合物7：白色粉末（甲醇）。ESI-MS m/z：525[M-H]-，549[M+Na]+。1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz） δ：7.14（2H，s，H-2″ ，6″ ），6.28（2H，s，H-2，6），4.93（1H，d，J=7.5 Hz，Glc-H-1′ ），3.54（3H，s，4-OCH3），3.58（6H，s，3，5-OCH3），3.73（6H，s，3″ ，5″ -OCH3）;13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz） δ：153.7（C-1），94.2（C-2，6），153.2（C-3，5），100.3（C-1′ ），73.2（C-2′ ），76.3（C-3′ ），70.3（C-4′ ），74.0（C-5′ ），64.1（C-6′ ），119.3（C-1″ ），107.2（C-2″ ，6″ ），147.8（C-3″ ，5″ ），132.6（C-4″ ），55.7（3，5-OCH3），60.1（4-OCH3），56.1（3″ ，5″ -OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[23]報(bào)道數(shù)據(jù)進(jìn)行比對，基本一致，因此鑒定化合物7為3，4，5-三甲氧基苯基-6-O-紫丁香酰基-β-D-葡萄糖苷。

化合物8：白色粉末（甲醇）。ESI-MS m/z：1 093.4[M-H]-。1H-NMR（C5D5N，500 MHz）δ：6.88（1H，d，J=10.5 Hz，H-21），6.32（1H，d，J=10.5 Hz，H-22），5.95（1H，q，J=7.0 Hz，當(dāng)歸酰氧基-H-3′ ），5.91（1H，q，J=7.0 Hz，當(dāng)歸酰氧基-H-3″ ），5.34（1H，d，J=7.0 Hz，阿拉伯糖基-H-1），5.43（1H，brs，H-12），4.91（1H，d，J=7.0 Hz，木糖基-H-1），4.89（1H，d，J=7.5 Hz，葡萄糖醛酸基-H-1），4.49（1H，brs，H-16），3.66（1H，d，J=10.5 Hz，Ha-28），3.42（1H，d，J=10.5 Hz，Hb-28），3.30（1H，dd，J=11.0，4.0 Hz，H-3），2.07（1H，d，J=7.0 Hz，當(dāng)歸酰氧基-H-4′ ），2.04（1H，d，J=7.0 Hz，當(dāng)歸酰氧基-H-4″ ），1.99，1.89，1.87，1.33，1.25，1.10，0.95，0.86，0.82（3H × 9，s）;13C-NMR（C5D5N，125 MHz）δ：38.7（C-1），26.5（C-2），89.0（C-3），39.4（C-4），55.6（C-5），18.4（C-6），33.0（C-7），40.0（C-8），46.9（C-9），36.7（C-10），23.8（C-11），123.1（C-12），142.7（C-13），41.6（C-14），34.8（C-15），68.6（C-16），48.0（C-17），40.0（C-18），47.2（C-19），36.3（C-20），78.7（C-21），73.6（C-22），28.0（C-23），16.8（C-24），15.6（C-25），16.8（C-26），27.6（C-27），63.5（C-28），29.5（C-29），20.3（C-30）;δ：167.7（C-1′ ），128.9（C-2′ ），137.1（C-3′ ），15.8（C-4′ ），21.0（C-5′ ）;δ：168.2（C-1″ ），128.9（C-2″ ），137.1（C-3″ ），15.8（C-4″ ），20.8（C-5″ ）;δ：106.0（C-1），74.4（C-2），86.5（C-3），71.4（C-4），77.4（C-5），172.8（C-6）;δ：103.0（C-1），81.6（C-2），73.0（C-3），68.6（C-4），65.6（C-5）;δ：106.7（C-1），73.4（C-2），74.3（C-3），69.3（C-4），67.6（C-5）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[24]報(bào)道數(shù)據(jù)進(jìn)行比對，基本一致，因此鑒定化合物8為gordonoside P。

3 討論

本研究利用多種色譜技術(shù)從油茶根95%乙醇提取物的正丁醇萃取部位中共分離得到8個(gè)化合物，通過多種波譜技術(shù)分別鑒定為槲皮素-3′ -O-β-D-葡萄糖苷（化合物1）、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷（化合物2）、（+）-南燭木樹脂酚-3-α-O-β-D-葡萄糖苷（化合物3）、甜葉懸鉤子苷（化合物4）、杜爾可苷B（化合物5）、4-羥基-3-甲氧基苯酚1-O-β-D-[6-O-（4-羥基-3，5-二甲氧基苯甲?；-吡喃葡萄糖苷（化合物6）、3，4，5-三甲氧基苯基-6-O-紫丁香酰基-β-D-葡萄糖苷（化合物7）、gordonoside P（化合物8），其中2個(gè)為黃酮苷類化合物，1個(gè)為木脂素類化合物，2個(gè)為二萜苷類化合物，2個(gè)為酚苷類化合物，1個(gè)為三萜皂苷類化合物。并且這些化合物中多個(gè)化合物顯示出良好的生物活性，如化合物1具有抑制B16黑色素瘤細(xì)胞中黑色素形成和抗氧化活性[25];化合物2具有抗腫瘤、抗氧化、降糖等作用[26-28];化合物3具有強(qiáng)烈的1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除作用[29];化合物4顯示出良好的降糖作用[30]。上述藥理結(jié)果表明，化合物1和2可能為油茶根的抗腫瘤活性成分，此研究結(jié)果為油茶根抗腫瘤活性提供了化學(xué)成分方面的依據(jù)。

另外，由于油茶中三萜皂苷類成分極性較大，且顯示末端吸收，紫外吸收波長在205 nm左右，在對該類成分進(jìn)行分析時(shí)，選擇210 nm作為其檢測波長，流動(dòng)相中有機(jī)相用乙腈的分離效果優(yōu)于甲醇，同時(shí)加適量的三氟乙酸，有利于改善峰形。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] 鄢慶偉.油茶化學(xué)成分研究[D].南昌：南昌大學(xué)，2016.

[ 2 ] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：一部[S]. 2015年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：411.

[ 3 ] 范康福，吳雪輝.油茶果殼制備活性炭的工藝研究[J].現(xiàn)代食品科技，2013，29（2）：339-341，375.

[ 4 ] 朱彬，鐘海雁，曹清明，等.油茶活性成分研究進(jìn)展與展望[J].經(jīng)濟(jì)林研究，2010，28（3）：140-145.

[ 5 ] 陳景斯，李奕彤，王曉佳，等.油茶果殼多糖乙醇提取工藝的優(yōu)化及其吸濕保濕性能[J].中成藥，2019，41（5）：970- 974.

[ 6 ] 佟小靜，陳重，李夏，等.油茶根化學(xué)成分的研究[J].中草藥，2011，42（10）：1936-1938.

[ 7 ] 馬麗媛，李林，唐玲，等.油茶的粕、果皮和葉的抗腫瘤活性研究[J].華西藥學(xué)雜志，2012，27（1）：8-12.

[ 8 ] LI X，ZHAO J，PENG C，et al. Cytotoxic triterpenoid glycosides from the roots of Camellia oleifera[J]. Planta Med，2014，80（7）：590-598.

[ 9 ] 吳江平.油茶根中皂苷類化學(xué)成分及其抗腫瘤[D].蘇州：蘇州大學(xué)，2016.

[10] 宋昱，史麗穎，盧軒，等.山茶屬植物的化學(xué)成分及藥理活性研究[J].中國藥房，2018，29（15）：2143-2148.

[11] 譚珍媛，黃慧學(xué)，梁秋云，等.油茶皂苷抗腫瘤作用研究[J].中藥材，2015，38（1）：143-146.

[12] 鄢慶偉，鐘瑞建，周國平，等.油茶莖化學(xué)成分研究[J].中藥材，2015，38（10）：2102-2104.

[13] YAN QW，F(xiàn)U HZ，LUO YH，et al. Two new triterpenoid glycosides from the stems of Camellia oleifera Abel[J]. Nat Prod Res，2016，30（13）：1484-1492.

[14] 焦玉蘭，付輝政，周國平，等.油茶莖中1個(gè)新的三萜皂苷[J].中草藥，2016，47（15）：2592-2596.

[15] 熊磊，付輝政，鄢慶偉.油茶枯餅中1個(gè)新的三萜皂苷[J].中草藥，2017，48（21）：4375-4380.

[16] FU HZ，WAN KH，YAN QW，et al. Cytotoxic triterpenoid saponins from the defatted seeds of Camellia oleifera Abel[J]. J Asian Nat Prod Res，2017，20（5）：412-422.

[17] KAJJOUT M，ROLANDO C. Regiospecific synthesis of quercetin O-β-D-glucosylated and O-β-D-glucuronidated isomers[J]. Tetrahedron，2011.DOI：10.1016/j.tet.2011.03. 110.

[18] 劉可越，劉海軍，曲偉紅，等.款冬花多酚類化學(xué)成分的研究[J].中成藥，2009，31（10）：1582-1584.

[19] 聶田田，趙煥新，白虹.光葉海桐根化學(xué)成分研究[J].中國天然藥物，1983，22（1）：215-218.

[20] OHTAN K，AIKAWA Y，KASAI R，et al. Minor diterpene glycosides from sweet leaves of Rubus suavissimus [J]. Phytochemistry，1992，31（5）：1553-1559.

[21] KOBAYASHI M，HORIKAWA S，DEGRANDI I，et al. Dulcosides A and B，new diterpene glycosides from Stevia rebaudiana[J]. Phytochemistry，1977，16（9）：1405- 1408.

[22] 張艷玲，甘茂羅，李帥，等.大葉水團(tuán)花莖枝的化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志，2010，35（10）：1261-1271.

[23] PAN H，LUNDGREN LN. Rhododendrol glycosides and phenyl glucoside esters from inner bark of Betula pubescens[J]. Phytochemistry，1994，36（1）：79-83.

[24] 于磊.黃藥大頭茶和鐵籬笆果的活性成分研究[D].北京：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院，2009.

[25] ARUNG EK，F(xiàn)URUTA S，ISHIKAWA H，et al. Melanin biosynthesis inhibitory and antioxidant activities of quercetin-3′ -O-β-D-glucoside isolated from Allium cepa[J]. Z Naturforsch C，2011，66（5/6）：209-214.

[26] 昌妍希.破痞去滯蒙藥特穆日-敖日陽古生物活性成分及抗腫瘤機(jī)制研究[D].呼和浩特：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)，2017.

[27] 朱玲玲.白鵑梅中黃酮類物質(zhì)的分離純化和生物活性研究[D].廣州：暨南大學(xué)，2016.

[28] 張鑫.水楊梅化學(xué)成分及生物活性研究[D].西安：陜西科技大學(xué)，2013.

[29] MIN BS，LEE JP，NA MK，et al. A new naphthopyrone from the root of Pleuropterus ciliinervis[J]. Chem Pharm Bull，2003，51（11）：1322-1324.

[30] 胡楠.甜葉懸鉤子苷的分離純化及功能研究[D].長沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2013.

（收稿日期：2019-04-26 修回日期：2019-06-05）

（編輯：林 靜）