馬永超 范文娟 饒淑梅 趙麗芳 黃亞藍(lán) 金少舉 崔明辰△

（1 漯河醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校，漯河 462002；2 河南省南街村集團(tuán)，臨潁 462600；3 河南省腫瘤發(fā)生與防治創(chuàng)新型科技團(tuán)隊(duì)，漯河 462002）

阿爾茨海默?。ˋlzheimer’s disease，AD）特征性病理學(xué)改變?yōu)榧?xì)胞內(nèi)神經(jīng)元纏結(jié)、細(xì)胞外出現(xiàn)大量由β-淀粉樣蛋白肽（β-amyloid peptide，Aβ）構(gòu)成的老年斑以及神經(jīng)元缺失[1]。有研究認(rèn)為，Aβ的過量產(chǎn)生和沉積引發(fā)的神經(jīng)毒性是導(dǎo)致AD 病變過程逐漸加重的重要原因[2-4]。這種毒性作用可以觸發(fā)病理級聯(lián)反應(yīng)，引發(fā)炎癥反應(yīng)、氧化損傷、線粒體功能障礙以及細(xì)胞骨架的破壞，從而進(jìn)一步導(dǎo)致神經(jīng)功能的損害以致細(xì)胞死亡[5-6]。許多抗氧化劑都有保護(hù)原代神經(jīng)細(xì)胞及克隆的細(xì)胞系免受Aβ毒性損傷的作用[7-8]。大豆肽（soybean peptide，SBP）具有較強(qiáng)的抗氧化作用，其內(nèi)含有多種抗氧化物質(zhì)[9]，研究表明，大豆肽可通過消除自由基及螯合金屬離子等方式發(fā)揮抗氧化作用[10]。但大豆肽能否對抗Aβ 毒性并產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用，目前尚未有相關(guān)的研究報(bào)道。Aβ25-35為Aβ 位于第25～35位氨基酸位點(diǎn)的基因片段，是引起神經(jīng)毒性的主要活性部位。體外研究顯示，Aβ25-35可以降低PC12細(xì)胞的存活率，誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡以及細(xì)胞骨架解體，并具有劑量依賴性[11-13]。因此，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用Aβ25-35作用于原代培養(yǎng)的小鼠海馬神經(jīng)元，建立體外AD 神經(jīng)元模型，研究大豆肽對Aβ 損傷的海馬神經(jīng)元是否具有保護(hù)作用，為大豆肽在AD 治療方面的開發(fā)應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

C57BL/6 小鼠購于南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所。細(xì)胞培養(yǎng)所用試劑購自美國Gibco 公司；Aβ25-35購自美國Sigma 公司；大豆肽購自湖北瑞邦生物科技有限公司，DAPI 購自美國Invitrogen 公司；小鼠抗caspase-3 抗體，小鼠抗caspase-9 抗體、兔抗β-actin多克隆抗體均購自美國Santa Cruz 公司；HRP 標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 購自北京中杉金橋生物公司；抗干擾Lowry 法蛋白定量試劑盒購自珠海健康元生物技術(shù)公司；ECL 化學(xué)發(fā)光試劑盒購自北京索萊寶公司；兔抗β-Ⅲ-tubulin 多克隆抗體、小鼠抗微管相關(guān)蛋白2（MAP2）單克隆抗體購自美國Abcam 公司；Alexa 568 結(jié)合的羊抗小鼠IgG 、Alexa 488 結(jié)合的羊抗兔IgG 購自美國Invitrogen 公司；BX61 型熒光顯微鏡購自日本Olympus 公司。

1.2 原代神經(jīng)元培養(yǎng)

取孕18.5 d 母鼠拉頸處死，取出胎鼠，剝離胎鼠海馬，0.25%胰酶消化15 min，加入神經(jīng)元預(yù)培養(yǎng)液（MEM，10% 胎牛血清，1 mmol/L 丙酮酸鈉，100 U 青/鏈霉素雙抗，1× GlutaMAX）終止酶反應(yīng)，并反復(fù)吹打10～20 次，將海馬組織吹散成單細(xì)胞；計(jì)數(shù)后按照1×105/mL 分別接種至24 孔板、96 孔板以及6 cm 培養(yǎng)皿中。隨后放入37 ℃ CO2培養(yǎng)箱3～5 h 后，換成神經(jīng)元培養(yǎng)液（neurobasal medium，1×B27，1×GlutaMAX，100 U 青/鏈霉素雙抗）。每隔3 d 半量換液。

1.3 Aβ25-35的老化與造模

Aβ 蛋白具有“老化”特性，即在體外能聚集成纖維狀寡聚體，從而對神經(jīng)細(xì)胞具有更強(qiáng)的毒性作用。本研究結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)，在PC12 細(xì)胞造模前首先對Aβ25-35進(jìn)行了老化處理[13-14]。方法如下：首先使用0.01 mol/LPBS 將Aβ25-35稀釋成1 μg/μL 的溶液，在37 ℃培養(yǎng)箱中孵育7 d，使Aβ25-35聚集以增加其毒性。分裝后在4 ℃保存，備用。

小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)7 d 時(shí)，使用Aβ25-35造模。取 1 支已處理好的Aβ25-35加入培養(yǎng)7d 的原代神經(jīng)元培養(yǎng)基內(nèi)，使其終濃度為10 μmol/L。繼續(xù)孵育24 h 后，即為造模完成。

1.4 大豆肽的處理與實(shí)驗(yàn)分組

使用0.01 mol/L PBS 將大豆肽配制成濃度為20 %的儲(chǔ)存液，隨后加入到已完成造模處理的小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)基內(nèi)，使大豆肽在培養(yǎng)基中的終濃度分別為0.1%、0.5%、1.0%。大豆肽處理48 h 后，終止孵育，將小鼠原代神經(jīng)元從培養(yǎng)箱中取出，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)分析。

按照大豆肽在培養(yǎng)基中的濃度不同，將小鼠原代處理的神經(jīng)元分為對照組與實(shí)驗(yàn)組2個(gè)組別。對照組為：正常對照組（不加任何處理），DMAO對照組（培養(yǎng)基中加10% DMSO），模型對照組（使用10 μmol/L 的Aβ25-35造模）。在模型對照組的基礎(chǔ)上，分別加0.1%、0.5%、1.0%大豆肽處理，即為實(shí)驗(yàn)組，分別為 0.1%、0.5%、1.0%大豆肽處理組。

1.5 大豆肽對小鼠海馬神經(jīng)元活力及細(xì)胞凋亡的影響

1.5.1 MTT 法比色法 神經(jīng)元經(jīng)造模及大豆肽處理48 h 后，利用MTT 法檢測各組神經(jīng)細(xì)胞的活力。在神經(jīng)元培養(yǎng)基中加入 5.0 mg/mL 的MTT，使其終濃度為0.5 mg/mL；4 h 后終止培養(yǎng)，小心吸棄培養(yǎng)基，每孔加入DMSO 150 μL，37 ℃振蕩 10 min 混勻，采用酶聯(lián)免疫檢測儀在490 nm 處檢測其光吸收值，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

1.5.2 DAPI 染色法 Aβ 毒性會(huì)增加細(xì)胞的死亡，為了研究大豆肽對抗Aβ 毒性的作用，利用DAPI 檢測各組凋亡的神經(jīng)細(xì)胞。首先使用ddH2O 將DAPI配制成2.5 mg/mL 儲(chǔ)存液，再用0.01 mol/L 的PBS將其按照1∶2000 稀釋成工作液。在神經(jīng)元經(jīng)造模及大豆肽處理48 h 后，吸棄神經(jīng)元培養(yǎng)基，4% 多聚甲醛4 ℃固定后，加200 μL DAPI 工作液，室溫避光孵育5 min。吸棄廢液，0.01 mol/L 的PBS洗2 次?？篃晒獯銣绶馄瑒┓馄?，隨后在熒光顯微鏡下觀察拍照。

1.5.3 免疫印檢測跡 取3 只孕18.5 d 的母鼠按1.2 所述方法培養(yǎng)原代神經(jīng)元后，接種至10 個(gè)6 cm 培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)7 d 后進(jìn)行造模及大豆肽處理。48 h 后，搜集各組細(xì)胞，利用RIPA 裂解液提取蛋白。采用Lowry 法測定各組總蛋白，定量后，煮沸變性，并于12% SDS 聚丙稀酰胺凝膠中電泳。隨后電轉(zhuǎn)蛋白至NC 膜；5%脫脂奶粉封閉過夜，次日分別加入小鼠抗caspase-3 抗體（1∶1 500）和小鼠抗caspase-9 抗體（1∶1 000）。隨后室溫孵育 3 h；TBST 緩沖液漂洗后分別加入HRP 標(biāo)記的羊抗小鼠IgG；室溫孵育1 h，TBST 緩沖液漂洗后，使用ECL 化學(xué)發(fā)光法顯示結(jié)果，壓片曝光。以兔抗β-actin 多克隆抗體為內(nèi)參照，Image J 軟件分析條帶灰度值，結(jié)果以對照組的百分率表示。

1.6 大豆肽對神經(jīng)元細(xì)胞骨架的影響

神經(jīng)元經(jīng)造模及大豆肽處理48 h 后，吸去培養(yǎng)基，經(jīng)0.01 mol/L 的PBS 漂洗后，4% 多聚甲醛4 ℃固定 15 min。隨后利用神經(jīng)元微管相關(guān)蛋白MAP2（1∶500）及微管蛋白β-Ⅲ-tubulin（1∶2 000）特異性抗體進(jìn)行免疫熒光染色，以觀察小鼠原代神經(jīng)元中細(xì)胞骨架的變化情況。方法如下：0.01 mol/L 的PBS 漂洗3 次后，加入兔抗β-Ⅲ-tubulin 多克隆抗體、小鼠抗MAP2 單克隆抗體。并于4 ℃孵育過夜。切片經(jīng)0.01 mol/L 的PBS漂洗后入Alexa 568 結(jié)合的羊抗小鼠IgG 和Alexa 488 結(jié)合的羊抗兔IgG；室溫下避光孵育3 h，之后 0.01 mol/L 的PBS 漂洗，熒光封片介質(zhì)封片。在羅達(dá)明和FITC 激發(fā)光下，用Olympus 熒光顯微鏡進(jìn)行觀察，拍片。

細(xì)胞計(jì)數(shù)在Image J 1.47V 軟件下進(jìn)行，對以下參數(shù)進(jìn)行測量：① 細(xì)胞存活率（%）=（實(shí)驗(yàn)組OD570-空白組OD570）/（對照組OD570-空白組OD570）×100%；② 細(xì)胞凋亡率（DAPI 染色）=（凋亡細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)）×細(xì)胞數(shù)（%）；③ 微絲/微管解體率=（發(fā)生微絲、微管解體的細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)）×細(xì)胞數(shù)（%）。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)3 次，結(jié)果用±s，采用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。多組間比較采用單因素方差（One-Way ANOVA）分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 大豆肽對神經(jīng)元損傷模型中細(xì)胞活力的影響

利用MTT 法檢測各組神經(jīng)細(xì)胞活力，結(jié)果顯示神經(jīng)元經(jīng)Aβ25-35造模處理后，相對于空白對照組與DMSO 對照組，細(xì)胞存活率顯著降低（P＜0.01），僅為55.8%；經(jīng)0.1%濃度的大豆肽處理后相對于對照組細(xì)胞存活率仍然是明顯降低（P＜0.05），為65.3%；經(jīng)0.5%濃度的大豆肽處理后，能提高細(xì)胞存活率至89.7%；1.0%濃度的大豆肽亦能提高細(xì)胞存活率至80%以上，但相較0.5%濃度的大豆肽，量效并無明顯提升（圖1）。

2.2 大豆肽對神經(jīng)元損傷模型中細(xì)胞凋亡的影響

DAPI 染色可用于細(xì)胞凋亡的檢測，在熒光顯微鏡下可以看到細(xì)胞核的形態(tài)變化。細(xì)胞凋亡時(shí)，染色質(zhì)凝集，胞核碎裂，熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)[15]。原代神經(jīng)元DAPI 染色結(jié)果表明，在正常培養(yǎng)組及DMSO 處理組，神經(jīng)元細(xì)胞核圓潤無皺縮，僅有少量細(xì)胞的核則呈現(xiàn)碎裂和固縮的特征（圖2A、B，見封二）；Aβ25-35作用24 h 后，細(xì)胞凋亡現(xiàn)象明顯增加，出現(xiàn)大量明亮固縮的胞核碎片（圖2C）。分別利用不同濃度的大豆肽對Aβ25-35所致的細(xì)胞損傷模型進(jìn)行處理，顯示0.5% 與1.0%濃度的大豆肽處理后，Aβ25-35所致的細(xì)胞凋亡可得到緩解（圖2D～F，見封二）。進(jìn)一步采用免疫印跡檢測各組神經(jīng)細(xì)胞凋亡蛋白的表達(dá)，結(jié)果顯示，Aβ25-35作用24 h后，模型組caspase-3、caspase-9蛋白表達(dá)量顯著高于對照組；0.1% 濃度的大豆肽作用模型組48 h后，caspase-3、caspase-9蛋白表達(dá)量與模型組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；0.5%與1.0% 大豆肽作用模型組48 h后，caspase-3、caspase-9蛋白表達(dá)量與模型組相比，均明顯降低，提示0.5%與1.0% 的大豆肽對Aβ25-35引起的細(xì)胞凋亡均具有保護(hù)作用；0.5% 與1.0% 大豆肽組之間，凋亡細(xì)胞及凋亡蛋白表達(dá)量沒有明顯差別，提示 0.5% 濃度的大豆肽已經(jīng)可以達(dá)到抗凋亡的最佳效果（圖3）。

圖1 Aβ25-35 和大豆肽對神經(jīng)元存活率的影響Fig 1 The viability of neurons after Aβ25-35-induced neuronal injury by soybean peptide treatment

圖2 大豆肽對Aβ25-35 所致神經(jīng)元損傷模型中細(xì)胞凋亡的影響。利用DAPI 染色（藍(lán)色）檢測細(xì)胞核的凋亡。A：正常對照組；B：DMSO 對照組；C：模型組（用10 μmol/L 的Aβ25-35 造模）；D：用0.1%大豆肽對模型組處理；E：用0.5%大豆肽對模型組處理；F：用1.0 %大豆肽對模型組處理。箭頭和框圖內(nèi)示高倍鏡下各組細(xì)胞核的聚集與凋亡小體.Fig 2 Effect of SBP on apoptosis in neural damage model by Aβ25-35-induced neurotoxicity.The apoptotic cells were visualized by DAPI staining.A：Normal control；B：DMSO control；C：Model group（using 10 μmol /L Aβ25-35 for modeling）；D：Model group treated with 0.1% SBP；E：Model group treated with 0.5% SBP；F：Model group treated with 1.0% SBP.The block diagram showed the nucleus aggregation and apoptotic bodies under high magnification.

2.3 大豆肽對神經(jīng)元損傷模型中細(xì)胞骨架的影響

為了研究大豆肽對Aβ 所致神經(jīng)細(xì)胞損傷的影響作用，利用免疫熒光技術(shù)檢測各組細(xì)胞形態(tài)及骨架蛋白特異性標(biāo)志物的表達(dá)變化。結(jié)果表明，正常體外培養(yǎng)10 d 的原代神經(jīng)元，MAP2 陽性的樹突分支較多，突起較長（圖4A，見封二）。利用10 μmol/L Aβ25-35造模處理，培養(yǎng)至第10 天時(shí)，一部分神經(jīng)元凋亡或死亡，幸存的神經(jīng)元與DMSO 對照組相比，樹突分支少，突起也比較短（圖4B，見封二）。

大豆肽對Aβ25-35所致神經(jīng)元損傷具有改善作用。0.5%與1.0%濃度的大豆肽可以明顯提高神經(jīng)元樹突突起的長度（圖4C、D，見封二）。高倍鏡下觀察β-Ⅲ-tubulin 免疫熒光染色，結(jié)果可見，DMSO 對照組在培養(yǎng)至10 d 時(shí)，神經(jīng)元各突起分支多且較長，胞體及突起熒光信號較強(qiáng)（圖4E，見封二）；而Aβ25-35處理后培養(yǎng)至第10 天時(shí)，神經(jīng)元突起分支少，且在胞體及突起周圍散布很多點(diǎn)狀碎片（圖4F，見封二）；經(jīng)0.5%與1.0%濃度的大豆肽處理培養(yǎng)至第10 天時(shí)，神經(jīng)元突起明顯變長，點(diǎn)狀碎片減少（圖4G、H，見封二）。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明，相對于DMSO 對照組，模型組神經(jīng)元MAP2 陽性的突起長度明顯變短（圖5A），微管解體率顯著增高（P＜0.01）（圖5B）。0.5% SBP與1.0% SBP 處理后MAP2 陽性的突起長度有所恢復(fù)，與DMSO 對照組相比已無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差異（圖5A）。神經(jīng)元微管解體率亦有所改善，與模型組相比，微管解體率明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（圖5A、B）。

3 討論

圖4 大豆肽對Aβ25-35 所致神經(jīng)元損傷模型中細(xì)胞骨架的影響。A～D：用MAP2 免疫熒光染色示神經(jīng)元樹突，依次為DMSO 對照組、模型組、0.5%大豆肽處理組、1.0%大豆肽處理組；E～H：利用β-Ⅲ-tubulin 免疫熒光染色示神經(jīng)元微管蛋白，依次為DMSO 對照組、模型組、0.5%大豆肽處理組、1.0%大豆肽處理組.Fig 4 Effect of SBP on cytoskeleton in Aβ25-35-induced neurotoxicity.A-D：MAP2 immunofluorescence staining showed neuronal dendrites.They were DMSO control group，model group，0.5% SBP treatment group and 1.0% SBP treatment group in this order；E-H：Neuronal tubulin was shown by β-Ⅲ-tubulin immunofluorescence staining in DMSO control group，model group，0.5% SBP treatment group and 1.0% SBP treatment group orderly.

圖5 大豆肽改善Aβ25-35 所致神經(jīng)元內(nèi)細(xì)胞骨架損傷Fig 5 SBP improved cytoskeletal damage in neurons caused by Aβ25-35

Aβ 是由淀粉樣前體蛋白（amyloid precursor protein，APP）經(jīng)β-和γ-分泌酶水解產(chǎn)生。神經(jīng)系統(tǒng)所有細(xì)胞均表達(dá)APP 和產(chǎn)生Aβ，但在正常時(shí)Aβ 的產(chǎn)生和降解保持平衡，且體內(nèi)有一些因素可保 持Aβ的可溶性[5]。家族性AD 患者APP基因突變可以導(dǎo)致Aβ 的過量產(chǎn)生與沉積，從而引發(fā)Aβ 的神經(jīng)毒性作用，且這種作用在AD 的病程進(jìn)展中發(fā)揮著主要作用[6]。Aβ25-35為Aβ 位于第25～35 個(gè)氨基酸位點(diǎn)的基因片段，是引起神經(jīng)毒性的主要活性部位。本研究采用Aβ25-35作用于小鼠原代神經(jīng)元，24 h 即可引起神經(jīng)細(xì)胞的大量凋亡以及細(xì)胞骨架的解體及破碎，提示Aβ25-35誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元損傷模型成功建立。隨后，本研究采用大豆肽來改善Aβ 所致神經(jīng)元損傷，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大豆肽對神經(jīng)細(xì)胞的存活及增殖具有明顯的生理效應(yīng)。大豆肽可以降低神經(jīng)細(xì)胞的凋亡率，引起caspase-3、caspase-9 等凋亡蛋白的表達(dá)水平降低，且與DAPI 核染色表現(xiàn)出的凋亡程度基本一致。

大豆肽是一種大豆蛋白水解后產(chǎn)生的小分子肽鏈，不但具有良好的免疫調(diào)節(jié)和生物防御作用，還能促進(jìn)細(xì)胞的增殖。研究表明，大豆肽通過促進(jìn)2型糖尿病大鼠模型中胰島β細(xì)胞的增殖，調(diào)節(jié)血清胰島素的分泌水平[16-17]；大豆肽還可以刺激免疫細(xì)胞分泌免疫活性因子，增強(qiáng)機(jī)體免疫效應(yīng)[18]。在神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)方面，有關(guān)大豆肽的報(bào)道尚不多見。Kumrungsee等[18]的研究表明，大豆肽可以維持細(xì)胞內(nèi)Ca2+的穩(wěn)態(tài)，降低線粒體內(nèi)Ca2+含量，從而減輕細(xì)胞內(nèi)Aβ毒性導(dǎo)致的鈣平衡失調(diào)。本研究結(jié)果顯示大豆肽可以降低Aβ25-35誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元損傷模型中神經(jīng)細(xì)胞的凋亡率，提示大豆肽對神經(jīng)細(xì)胞的存活具有明顯的生理效應(yīng)。

為了進(jìn)一步尋找大豆肽改善神經(jīng)細(xì)胞存活的形態(tài)學(xué)證據(jù)，本研究在高倍鏡下觀察了大豆肽處理海馬神經(jīng)元損傷前后神經(jīng)元的細(xì)胞骨架情況。神經(jīng)元的細(xì)胞骨架是由蛋白多聚體組成的1個(gè)三維空間網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，主要有微管、微絲和神經(jīng)絲3種成分。在神經(jīng)細(xì)胞中，細(xì)胞骨架系統(tǒng)的基本功能是維持神經(jīng)元的特殊形態(tài)，參與形成神經(jīng)元的特定功能區(qū)如胞體、樹突、軸突及突觸，并為神經(jīng)元的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)提供保障。MAP2是一種神經(jīng)元特異性的細(xì)胞骨架蛋白，通常表達(dá)在成熟神經(jīng)元的樹突，能夠很好的顯示神經(jīng)元樹突的生長狀態(tài)，常作為神經(jīng)細(xì)胞表型的標(biāo)記物，MAP2蛋白被認(rèn)為參與微管組裝，通過與中間絲和其他微管的交聯(lián)作用穩(wěn)定微管生長[19]。β-Ⅲ-tubulin是一種參與神經(jīng)元細(xì)胞類型特異性分化的微管蛋白，是細(xì)胞骨架的組成成分，在細(xì)胞結(jié)構(gòu)的維護(hù)、有絲分裂、減數(shù)分裂、細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸?shù)确矫姘l(fā)揮作用，可以很好的展現(xiàn)神經(jīng)元軸突和軸突末端的細(xì)節(jié)[20]。目前的研究表明，突觸功能障礙是引起AD患者臨床癥狀加重的主要原因[21-22]，而細(xì)胞骨架蛋白不正常的解離、聚合及異常的修飾是引起突觸結(jié)構(gòu)和功能改變的重要原因[23-24]。目前有關(guān)大豆肽對抗Aβ毒性的研究還未有報(bào)道，本研究結(jié)果表明，經(jīng)0.5%大豆肽或者1.0% 大豆肽作用后，Aβ所致神經(jīng)元損傷后神經(jīng)元樹突突起的長度明顯提高，β-Ⅲ-tubulin、MAP2等微管蛋白及微管相關(guān)蛋白表達(dá)水平也有所增高。這一結(jié)果為大豆肽可以改善Aβ所致神經(jīng)元損傷提供了形態(tài)學(xué)證據(jù)。

綜上所述，Aβ 毒性可引起小鼠原代神經(jīng)細(xì)胞凋亡及神經(jīng)細(xì)胞骨架的改變，而大豆肽對Aβ 誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞骨架損傷具有明顯的保護(hù)和修復(fù)作用。由于大豆是我國重要的糧食作物之一，大豆蛋白含量豐富，因此大豆肽來源非常廣泛。而作為小分子蛋白質(zhì)，大豆肽又非常容易被人體吸收。大豆肽對Aβ 誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞損傷所起的保護(hù)作用提示大豆肽可能對一些神經(jīng)退行性疾病的預(yù)防和恢復(fù)有一定療效，在天然藥物及保健食品的開發(fā)方面有重要的研究和應(yīng)用價(jià)值。