呂廣義

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一、引言

目前，頂空氣相色譜法已經(jīng)在很多研究領(lǐng)域得到了應(yīng)用。其主要應(yīng)用原理是，在特定條件下的各相態(tài)組分之間維持著動態(tài)的分配平衡，因此只需對組分的組成進(jìn)行分析即可對目標(biāo)成分的含量進(jìn)行測定[1-2]。這項技術(shù)不同于傳統(tǒng)的萃取技術(shù)，有效規(guī)避了傳統(tǒng)萃取技術(shù)的缺陷[3]。由此，本次實驗將這種方法用于魚肝油酸鈉注射液的有機(jī)溶劑殘留檢測中，以建立一個良好的注射液殘留溶劑檢測方法。

二、實驗藥品和儀器

本次實驗所使用的藥品為：無水乙醇、N，N－二甲基甲酰胺（下簡稱DMF）、乙醚、魚肝油酸鈉注射液。本次實驗所使用的儀器如表1所示。

表1 本次實驗所使用的儀器

三、實驗方法

（一）色譜條件

本次實驗的色譜條件如表2所示。

表2 色譜條件設(shè)置

在設(shè)置好全部參數(shù)后，開始進(jìn)樣，色譜柱內(nèi)樣品先在40℃下恒溫8min，再以7℃每分鐘的升溫速率，升至70℃并保持4min，最后再以50℃每分鐘的升溫速率升至230℃，并恒溫5min。

（二）溶液配制

溶液共配制兩組，實驗組溶液使用一定量的魚肝油酸鈉注射液和DMF均勻混合制成，并精密量取一定量溶液置于頂空進(jìn)樣瓶中待用；對照組選用乙醇和乙醚液體，同樣采用DMF溶液均勻混合，精密量取后，置于頂空進(jìn)樣瓶中待用。

（三）線性關(guān)系考察

取對照組所制得的溶液，分別制備乙醇和乙醚比例不同的數(shù)組溶液，量取后再進(jìn)行分析，對于分析所得到的數(shù)據(jù)，以峰面積（A）為縱坐標(biāo)，以濃度（C，單位為μg/mL）為橫坐標(biāo)，對數(shù)據(jù)進(jìn)行線性擬合。經(jīng)計算，擬合結(jié)果如下：

乙醇：A=0.2901C-0.7576，r=0.9998

乙醚：A=6.0392C-15.2775，r=0.9997

（四）加樣回收率實驗

精密量取一定量的實驗組溶液，并再次使用DMF溶液定容和搖勻，用于后續(xù)的回收率檢測，并采用同樣方式對對照組的回收率進(jìn)行檢測，檢測完成后，進(jìn)行回收率的計算。計算結(jié)果為：乙醇平均回收率為100.0%，RSD值為0.7。乙醚的平均回收率為100.0%，RSD值為0.8。

（五）檢測限的測定

取對照組的溶液適當(dāng)進(jìn)行稀釋后進(jìn)行進(jìn)樣測定，當(dāng)信噪比為3時即可得到測定結(jié)果，經(jīng)檢測，乙醇的檢測限為71ng/mL，乙醚的檢測限為3ng/mL。

（六）重復(fù)性實驗

分別精密量取實驗組樣品各3份放置于容量瓶中，使用DMF溶液定容并搖勻，作為測試液。后取測試組和對照組液體共9組，密封，分別測定，使用外標(biāo)法測定有機(jī)溶劑的殘留量。經(jīng)分析，所有樣品中均未檢出乙醇，但全部樣品均檢測出乙醚，平均含量為0.021%，RSD值為1.3%，這表明本次實驗選用的方法具有較好的重復(fù)性。

（七）樣品的最終測定

采用本實驗所建立的方法，對各組樣品溶液進(jìn)行測試，其測定結(jié)果如表3。

表3 全部樣品測定結(jié)果

四、結(jié)束語

在本次實驗中，由于乙醇和乙醚的極性相差較大（乙醇極性大，乙醇極性?。?，因此，本次實驗選用中等極性的色譜柱，型號為DB-624，同時在測定有機(jī)溶劑時參考了《中華人民共和國藥典》（2015年版）中的測定方法，選用了較為合理的升溫程序設(shè)置，有效分離了乙醇和乙醚。由于本實驗需要測定的魚肝油酸鈉濃度較高，且分子鏈較長，容易粘連在色譜柱上，因此并不適用常規(guī)的直接進(jìn)樣法。對于這種情況，本實驗采用頂空進(jìn)樣法，在這種方法下，進(jìn)入色譜柱的物質(zhì)僅僅是樣品中殘留的有機(jī)溶劑氣化后的組分，主成分則不會進(jìn)入到色譜柱中，有效確保了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度。

除此之外，考慮到乙醚在魚肝油酸鈉注射液（水溶液）中溶解度較低的情況，因此本次實驗采用DMF溶液為溶劑，確保乙醇和乙醚均能在樣品溶液中有效溶解，由此，保證了對照品溶液的濃度準(zhǔn)確。不僅如此，所選用的DMF溶液對于待測的乙醇和乙醚成分無明顯干擾，使得本次所建立的實驗方法具有較高的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，可用于后續(xù)的類似實驗。