熊倩妤，楊興林，洪章萍，屠大朋，楊 俊

（貴陽市公共衛(wèi)生救治中心檢驗(yàn)科，貴州 貴陽 550004）

流行性感冒（流感）是指由流感病毒感染引起的一種急性呼吸道傳染病。流感病毒具有傳染性強(qiáng)、易變異、傳播迅速等特點(diǎn)。流感在學(xué)校、托幼機(jī)構(gòu)等人群聚集場(chǎng)所可大規(guī)模爆發(fā)，嚴(yán)重危害人們的健康[1]。世界衛(wèi)生組織報(bào)道，每年全球有20%～30%的兒童和5%～10%的成年人會(huì)發(fā)生季節(jié)性流感，其中有300 萬～500 萬例患者為重癥患者，有29 萬～65 萬人可因患此病死亡[2]。引起流感的常見病毒有甲型流感病毒、乙型流感病毒和丙型流感病毒。近年來，甲型流感（由甲型流感病毒感染引起的流感）和乙型流感（由乙型流感病毒感染引起的流感）在世界各地的流行趨勢(shì)均有所上升[3]。建立快速的流感檢測(cè)方法，可為臨床診療工作的開展提供依據(jù)，提高抗病毒藥物應(yīng)用的合理性，也利于對(duì)流感疫情采取更有效的控制措施。本文主要是探討流感病毒抗原檢測(cè)在流感篩查中的應(yīng)用效果。

1 資料與方法

1.1 基線資料

選擇貴陽市公共衛(wèi)生救治中心2019 年11 月至2020 年9 月期間接診的5442 例發(fā)熱（體溫＞37.3℃）患者作為研究對(duì)象。在這些患者中，有男性3083 例，女性2359 例；其年齡最大為97 歲，最小為1 個(gè)月，平均年齡為12.2 歲。

1.2 方法

1.2.1 流感病毒抗原檢測(cè) 對(duì)患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的方法是：采集其鼻咽拭子，標(biāo)本采集后立即置于消毒干燥、嚴(yán)格密封的塑料管中保存并送檢，若不能立即送檢需在2℃～8℃的冷藏柜中保存（最長(zhǎng)可保持8 h）。采用膠體金免疫層析法和甲型/ 乙型流感病毒抗原檢測(cè)試劑盒（由廣州萬孚生物技術(shù)有限公司提供）對(duì)標(biāo)本進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)，在15～20 min 內(nèi)觀察檢測(cè)結(jié)果。整個(gè)檢測(cè)必須在生物安全柜中進(jìn)行。將剩余的樣本提取液標(biāo)注好患者姓名等信息后放入－ 80℃的冰柜中保存待檢（核酸檢測(cè)）。

1.2.2 核酸檢測(cè) 采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）法對(duì)患者進(jìn)行核酸檢測(cè)，方法是：以磁珠法提取病毒的核酸，RNA 提取儀為EX2400 核酸自動(dòng)提取儀，嚴(yán)格按照試劑盒（由上海之江生物有限公司提供）的說明書提取病毒的核酸。用羅氏Z480 擴(kuò)增儀對(duì)病毒的核酸進(jìn)行基因擴(kuò)增，嚴(yán)格按試劑盒（試劑盒為湖南圣湘生物有限公司提供的甲型、乙型流感病毒核酸檢測(cè)試劑盒）的說明書進(jìn)行操作。整個(gè)檢測(cè)必須在生物安全柜中進(jìn)行。當(dāng)Ct值＜38時(shí)表示檢測(cè)結(jié)果呈陽性，當(dāng)Ct值≥40 時(shí)表示檢測(cè)結(jié)果呈陰性，當(dāng)Ct值介38～40 之間時(shí)需進(jìn)行復(fù)檢。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察對(duì)5442 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的陽性檢出率及檢測(cè)結(jié)果呈陽性的患者性別及年齡的分布情況。統(tǒng)計(jì)甲型、乙型流感病毒抗原檢測(cè)的陽性檢出率。在5442 例患者中隨機(jī)抽取153 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)及核酸檢測(cè)，觀察其檢測(cè)結(jié)果。統(tǒng)計(jì)用流感病毒抗原檢測(cè)診斷153例患者甲型流感及乙型流感的準(zhǔn)確率、特異度及敏感度。準(zhǔn)確率=（真陽性例數(shù)+真陰性例數(shù)）/ 總例數(shù)×100%。靈敏度=真陽性例數(shù)/（真陽例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%。特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS 25.0 軟件處理本研究中的數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用%表示，用χ2 檢驗(yàn)，計(jì)量資料用表示，用t檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的陽性檢出率及檢測(cè)結(jié)果呈陽性的患者性別及年齡的分布情況

對(duì)5442 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的結(jié)果顯示，其中檢測(cè)結(jié)果呈陽性的患者有519 例，陽性檢出率為9.54%。在519 例檢測(cè)結(jié)果呈陽性的患者中，男女患者的占比相比（P＞0.05）；不同年齡的患者相比（P＜0.05），其中年齡為6～18 歲患者的占比高于其他年齡段患者的占比（P＜0.05）。詳見表1。

表1 進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的陽性檢出率及檢測(cè)結(jié)果呈陽性的患者性別及年齡的分布情況

2.2 甲型、乙型流感病毒抗原檢測(cè)的陽性檢出率

對(duì)5442 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的結(jié)果顯示，其中甲型流感病毒抗原呈陽性的患者有388 例，陽性檢出率為7.13%；乙型流感病毒抗原呈陽性的患者有131 例，陽性檢出率為2.41%。5442 例患者甲型流感病毒抗原的陽性檢出率高于乙型流感病毒抗原的陽性檢出率（P＜0.05）。詳見表2。

表2 甲型、乙型流感病毒抗原檢測(cè)的陽性檢出率

2.3 隨機(jī)抽取153 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)及核酸檢測(cè)的結(jié)果

隨機(jī)抽取153 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的結(jié)果顯示，其中甲型流感病毒抗原呈陽性的患者有86 例；對(duì)其進(jìn)行核酸檢測(cè)的結(jié)果顯示，其中甲型流感病毒抗原呈陽性的患者有69 例。隨機(jī)抽取153 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的結(jié)果顯示，其中乙型流感病毒抗原呈陽性的患者有21 例；對(duì)其進(jìn)行核酸檢測(cè)的結(jié)果顯示，其中乙型流感病毒抗原呈陽性的患者有24 例。詳見表3、表4。

表3 甲型流感病毒抗原檢測(cè)及核酸檢測(cè)的結(jié)果（例）

表4 乙型流感病毒抗原檢測(cè)及核酸檢測(cè)的結(jié)果（例）

2.4 用流感病毒抗原檢測(cè)診斷其中153 例患者流感的準(zhǔn)確率、特異度及敏感度

用流感病毒抗原檢測(cè)診斷其中153 例患者甲型流感的準(zhǔn)確率、特異度、敏感度分別為86.27%、77.38%、97.10%。用流感病毒抗原檢測(cè)診斷其中153 例患者乙型流感的準(zhǔn)確率、特異度、敏感度分別為92.81%、96.90%、70.83%。

3 討論

流感是全球重點(diǎn)監(jiān)測(cè)的急性傳染病之一，具有起病急、傳染性強(qiáng)、傳播速度快等特點(diǎn)，可引起嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題[4]。對(duì)流感病毒進(jìn)行快速檢測(cè)對(duì)于防控流感疫情至關(guān)重要。目前，臨床上檢測(cè)流感病毒的方法有病毒培養(yǎng)法、流感病毒抗原檢測(cè)法、核酸檢測(cè)法等。病毒培養(yǎng)法是臨床上診斷流感最準(zhǔn)確的方法，但采用該方法進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)鑒定的周期長(zhǎng)達(dá)14 d 左右，在此期間難以為臨床用藥提供指導(dǎo)，故該檢測(cè)法在臨床應(yīng)用中受限較為嚴(yán)重。用核酸檢測(cè)法診斷流感的特異度和靈敏度較高，但需要使用昂貴的設(shè)備，且對(duì)實(shí)驗(yàn)室的條件要求嚴(yán)格，很多醫(yī)療機(jī)構(gòu)和流感檢測(cè)點(diǎn)都不具備相應(yīng)的檢測(cè)人員和檢測(cè)設(shè)備[5]。采用流感病毒抗原檢測(cè)法診斷流感具有操作簡(jiǎn)單、快捷、能在短時(shí)間（20 min）內(nèi)快速作出定性診斷等優(yōu)點(diǎn)[6]。本研究的結(jié)果顯示，5442 例患者甲型流感病毒抗原的陽性檢出率高于乙型流感病毒抗原的陽性檢出率（P＜0.05）。究其原因主要是，2019 年11 月至2020 年9 月期間我中心的流感類型以甲型流感為主。與乙型流感病毒相比，甲型流感病毒具有更強(qiáng)的變異性，故甲型流感更易流行及造成嚴(yán)重的后果[7-8]。

本研究的結(jié)果證實(shí)，用流感病毒抗原檢測(cè)診斷甲型流感和乙型流感的準(zhǔn)確率、特異度、敏感度均較高，該方法可用于對(duì)患者進(jìn)行流感篩查。