陳嵐融

（福建醫(yī)科大學(xué)附屬福州市第一醫(yī)院，福建 福州 350009）

ABO血型系統(tǒng)是臨床上根據(jù)人類血型的抗原最早進(jìn)行命名的血型系統(tǒng)，對(duì)其進(jìn)行正確的檢測(cè)對(duì)于臨床上的法醫(yī)學(xué)鑒定、輸血等方面有重要的意義。臨床上常于輸血之前對(duì)血型進(jìn)行檢測(cè)，只有當(dāng)ABO血型一致時(shí)才可保證臨床上輸血的安全性，若臨床上血型不符合，進(jìn)行輸血極易導(dǎo)致血管中的紅細(xì)胞凝集，進(jìn)而促使凝血反應(yīng)的發(fā)生，最終使得臨床上出現(xiàn)諸多的輸血不良反應(yīng)發(fā)生，若進(jìn)行大量輸血，極易引發(fā)被輸血者的死亡[1-3]。故而，臨床上對(duì)于血型的準(zhǔn)確鑒定具有重要的意義，而臨床上ABO血型正反定型不符又是較為常見(jiàn)的現(xiàn)象，為降低臨床上不良現(xiàn)象的發(fā)生率，提升輸血的安全性，需對(duì)ABO血型正反定型不符的相關(guān)影響因素進(jìn)行研究探討。微柱凝膠（MGT）法屬于臨床上較為常規(guī)的一種血型檢測(cè)方法，但既往研究發(fā)現(xiàn)，其易受血清蛋白異常、血清抗體效價(jià)降低、血清中含有纖維蛋白等因素的影響，導(dǎo)致ABO血型正反定型不符現(xiàn)象的出現(xiàn)，使得臨床上對(duì)于血型的判斷出現(xiàn)一定的偏差[4-5]。故本研究旨在探討MGT法檢測(cè)ABO血型正反定型不符的相關(guān)危險(xiǎn)因素，進(jìn)而采取相應(yīng)的干預(yù)策略降低其臨床上的發(fā)生率，以期為臨床上輸血的安全性提供一定參考，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性選取我院2017年1月至2022年1月收治的71 163例經(jīng)輸血科診斷為ABO血型患者的臨床資料，其中正反定型不符的標(biāo)本為60例（排除進(jìn)行多次重復(fù)送檢的標(biāo)本）。知情同意并簽署知情同意書，本研究已獲得我院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)（倫理編號(hào)：202208047）。

1.2 方法 ①檢測(cè)試劑及儀器：ABO血型正反定型及Rh血型檢測(cè)卡[（微柱凝膠法）規(guī)格：8孔/卡，2×25卡/盒]及全自動(dòng)配血及血型分析儀（北京佰利申科貿(mào)有限公司W(wǎng)ADiana Compact，國(guó)械注進(jìn)20163404539），孵育器DG Therm及醫(yī)用離心機(jī) DG Spin（北京佰利申科貿(mào)有限公司，規(guī)格：DG Therm，國(guó)械備20161428號(hào)及DG Spin，國(guó)械備20161402號(hào)）低速冷凍離心機(jī)（安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司，型號(hào)：KDC-2046），醫(yī)用數(shù)顯恒溫箱（常州普天儀器有限公司），血型專用離心機(jī)（日本久保田，型號(hào)：KA-2200）。②檢測(cè)方法：采用MGT法對(duì)所有ABO血型患者的血型進(jìn)行檢測(cè)[6]。所有患者均采集EDTA2K抗凝血樣本約2 mL，其檢測(cè)的基本原理為根據(jù)樣本離心后的凝集狀態(tài)進(jìn)行判定，將凝膠、人球蛋白血清抗體置于微柱中進(jìn)行離心，而后觀察其狀態(tài)，當(dāng)抗原抗體出現(xiàn)凝集塊，經(jīng)離心后發(fā)現(xiàn)其不能通過(guò)凝膠間隙且保留在凝膠上層時(shí)，則為陽(yáng)性反應(yīng)（ABO血型正反定型不符），若其為出現(xiàn)凝集，未凝集的紅細(xì)胞經(jīng)離心后發(fā)現(xiàn)可以通過(guò)凝膠間隙，且沉積于凝膠管底部，則表明為陰性反應(yīng)（無(wú)ABO血型正反定型不符）。對(duì)患者的臨床基本資料進(jìn)行分析檢測(cè)時(shí)需要注意，排除操作失誤等因素對(duì)于檢測(cè)結(jié)果的影響，對(duì)于出現(xiàn)問(wèn)題的血樣需及時(shí)的重新抽取樣本，必要時(shí)須增抽一管無(wú)添加劑的樣本進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo) ①血清ABO血型抗體檢測(cè)結(jié)果：比較所有納入樣本的血型抗體檢測(cè)結(jié)果，對(duì)各血型的正反定型不符情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并比較。②正反定型不符的影響因素分析。主要通過(guò)對(duì)人為因素（標(biāo)本稀釋、標(biāo)本溶血、纖維蛋白原干擾）、生理因素（老年＞60歲、脂血、ABO亞型）、疾病因素（冷凝集素、白血病、多發(fā)性骨髓瘤）、治療因素（骨髓移植）、其他因素（不規(guī)則抗體干擾）等的正反定型不符的標(biāo)本例數(shù)及占比進(jìn)行統(tǒng)計(jì)比較。③致血型抗原/抗體減弱或缺失的影響因素分析。主要對(duì)包括年齡＞60歲、試劑干擾、ABO亞型、惡性實(shí)體腫瘤、惡性血液疾病在內(nèi)的因素對(duì)血型抗原/抗體減弱或缺失的影響程度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)比較。④ABO血型抗原抗體出現(xiàn)額外反應(yīng)的影響因素分析。主要包括對(duì)ABO血型抗原抗體出現(xiàn)正定型額外反應(yīng)、反定型額外反應(yīng)、同時(shí)額外反應(yīng)的影響因素（血清蛋白較高、同種抗體、試劑、ABO亞型、同種抗體及自身抗體、自身抗體）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)比較。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清ABO血型抗體檢測(cè)結(jié)果 71 163例ABO血型的患者中，正反定型不符的標(biāo)本有60例，其中A、B、O血型正反定型不符分別為22例（36.67%）、26例（43.33%）、12例（20.00%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 血清ABO血型抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2 正反定型不符的影響因素 60例正反定型不符標(biāo)本的影響因素中，人為因素為6例（10.00%），生理因素為19例（31.67%），疾病因素為16例（26.67%），治療因素為2例（3.33%），其他因素為17例（28.33%）。見(jiàn)表2。

表2 正反定型不符的影響因素

2.3 血型抗原/抗體減弱或缺失的影響因素分析 60例正反定型不符的標(biāo)本中，血型抗原/抗體減弱或缺失的標(biāo)本有16例，其中年齡＞60歲、惡性血液疾病、試劑干擾、ABO亞型、惡性實(shí)體腫瘤是致血型抗體減弱或缺失的主要影響因素。見(jiàn)表3。

表3 血型抗原/抗體減弱或缺失的影響因素分析[n（%）]

2.4 ABO血型抗原抗體出現(xiàn)額外反應(yīng)的影響因素分析 60例正反定型不符的標(biāo)本中，ABO血型抗原抗體出現(xiàn)額外反應(yīng)的標(biāo)本有19例，其中ABO亞型、自身抗體是正定型額外反應(yīng)的主要影響因素，血清蛋白較高、同種抗體、試劑、同種抗體及自身抗體、自身抗體是反定型額外反應(yīng)的主要影響因素，自身抗體是同時(shí)額外反應(yīng)的主要影響因素。見(jiàn)表4。

表4 ABO血型抗原抗體出現(xiàn)額外反應(yīng)的影響因素分析[n(%)]

3 討論

血型是否相符是決定臨床上獻(xiàn)血安全性的主要因素，故對(duì)于血型的正確鑒定是十分必要的。臨床上若存在ABO正反定型不符會(huì)嚴(yán)重影響搶救時(shí)機(jī)，甚至加重被輸血者的臨床癥狀，進(jìn)一步威脅其生命健康，為保障臨床上輸血的安全性，需采取有效的方法對(duì)血型進(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定，并對(duì)ABO正反定型不符的原因進(jìn)行分析，進(jìn)而采取針對(duì)性的措施進(jìn)行處理[7-9]。對(duì)于ABO正反定型不符現(xiàn)象臨床上較為常見(jiàn)的原因?yàn)榛旌弦曇胺磻?yīng)、技術(shù)錯(cuò)誤、弱反應(yīng)或缺失抗原、多余抗原反應(yīng)等[10-12]。據(jù)既往研究表明[13]，最為主要的為抗體減弱和ABO血型抗體量合成不足，其中血型抗體減弱多發(fā)生于有免疫藥物治療史者、老年人、新生兒等人群中，其主要原因?yàn)榇祟惾巳嚎贵w水平下降或還未產(chǎn)生抗體。

MGT法檢測(cè)血型的本質(zhì)為根據(jù)血凝反應(yīng)對(duì)血型進(jìn)行鑒別，其屬于一種較為新型的免疫檢測(cè)方法，基本原理為使用離心技術(shù)和生物化學(xué)凝膠技術(shù)作用于紅細(xì)胞，根據(jù)凝集狀態(tài)對(duì)血型進(jìn)行鑒定[14-15]。既往研究表明[16]，MGT法相較于聚凝胺法、抗人球蛋白酶法等具有更高的靈敏度，對(duì)于血清的檢測(cè)結(jié)果較為準(zhǔn)確，故本研究對(duì)于所有患者均采取MGT法進(jìn)行血型檢測(cè)。

本研究結(jié)果顯示，正反定型不符的標(biāo)本中A、B、O血型正反定型不符有差異，這可能與血液標(biāo)本中有IgG性質(zhì)不規(guī)則抗體有關(guān)，進(jìn)而使得臨床上出現(xiàn)配血不合導(dǎo)致退血，臨床上可采用譜細(xì)胞及細(xì)胞篩選對(duì)血型的不規(guī)則特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)鑒定[17]。此外，血型ABO正反定型不符的影響因素中最為主要的為生理因素中的年齡＞60歲及其他因素中的不規(guī)則抗體干擾，年齡＞60歲者易導(dǎo)致血型抗原減弱或缺失，有多次妊娠史及反復(fù)輸血的患者易出現(xiàn)不規(guī)則抗體，進(jìn)而造成血型鑒定中正反定型不符的現(xiàn)象，臨床上可通過(guò)選擇相應(yīng)抗體顯示陰性紅細(xì)胞的反應(yīng)細(xì)胞，以盡量降低不規(guī)則抗體對(duì)血型鑒定結(jié)果的影響。血型抗原減弱或缺失的主要因素為惡性血液疾病、試劑干擾、ABO亞型、惡性實(shí)體腫瘤，ABO血型抗原抗體出現(xiàn)正定型額外反應(yīng)的主要因素為ABO亞型、自身抗體，反定型額外反應(yīng)的主要影響因素為血清蛋白較高、同種抗體、試劑、同種抗體及自身抗體、自身抗體。分析其原因可能在于：①當(dāng)患者存在惡性血液疾病時(shí)，會(huì)使得其血液中的成熟紅細(xì)胞含量降低，而不規(guī)則形態(tài)的紅細(xì)胞比值反而上升，進(jìn)而使得機(jī)體的抗原能力降低，致使其經(jīng)血型檢測(cè)出ABO正反定型不符的比率較高，對(duì)于此類患者臨床上需采用試管法排除干擾后再進(jìn)行血型的鑒別。②當(dāng)患者年齡＞60歲，隨著機(jī)體自身各項(xiàng)功能的降低，使得其免疫能力下降，進(jìn)而導(dǎo)致抗體的水平有所下降，致使此類患者臨床上出現(xiàn)ABO正反定型不符現(xiàn)象，故臨床上需將采集的標(biāo)本置于37 ℃的條件下并進(jìn)行10～30 min的水浴后再進(jìn)行檢測(cè)。③當(dāng)患者的血清蛋白含量較高時(shí)，會(huì)導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)可促進(jìn)反定型的紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集的狀態(tài)，進(jìn)而易判斷為陽(yáng)性，出現(xiàn)ABO正反定型不符，臨床上可在進(jìn)行試驗(yàn)的過(guò)程中加入生理鹽水，觀察凝集狀態(tài)是否消失來(lái)進(jìn)行準(zhǔn)確的判斷，或?qū)ρ合♂尯笤龠M(jìn)行測(cè)定。④ABO亞型是一種具有明確血清學(xué)特點(diǎn)和一定遺傳基礎(chǔ)（排除妊娠、疾病等不可遺傳因素）的血清基因改變，當(dāng)基因發(fā)生改變時(shí)會(huì)致使患者臨床上出現(xiàn)抗體減弱或缺失，進(jìn)而出現(xiàn)ABO正反定型不符，此類患者臨床上可采取分子生物技術(shù)結(jié)合血清學(xué)實(shí)驗(yàn)特性對(duì)樣本的血型進(jìn)行明確[18-20]。

綜上所述，對(duì)于ABO正反定型不符患者的影響較大的因素為生理因素，其次為其他因素和疾病因素，人為因素次之；年齡＞60歲者易導(dǎo)致血型抗原減弱或缺失，而血型抗原減弱或缺失的主要因素為惡性血液疾病、試劑干擾、ABO亞型、惡性實(shí)體腫瘤；ABO血型抗原抗體出現(xiàn)正定型額外反應(yīng)的主要因素為ABO亞型、自身抗體，反定型額外反應(yīng)的主要影響因素為血清蛋白較高、同種抗體、試劑、同種抗體及自身抗體、自身抗體；臨床上可針對(duì)患者的疾病史、自身血液情況等進(jìn)行針對(duì)性的血清學(xué)試驗(yàn)來(lái)確認(rèn)患者的ABO血型，對(duì)患者的血型進(jìn)行準(zhǔn)確的區(qū)分，進(jìn)而保證患者臨床上輸血的安全性。