［摘 要］ 目的 探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核糖體結(jié)合蛋白1 （RRBP1） 在肝癌組織細(xì)胞中的表達(dá)及在肝癌發(fā)展中的調(diào)控作用。方法 分別用生物信息學(xué)分析與免疫組化實(shí)驗(yàn)探討肝癌患者肝癌組織與癌旁正常組織中 RRBP1的表達(dá)。用 RT - PCR 與 Western blot 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)體外肝癌細(xì)胞與正常肝細(xì)胞中 RRBP1的表達(dá)。用小干擾 RNA （ siRNA） 下調(diào) RRBP1表達(dá)后，分別用 MTS 實(shí)驗(yàn)、 EdU 實(shí)驗(yàn)與克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肝癌細(xì)胞活力、增殖與克隆形成。結(jié)果 肝癌組織中 RRBP1表達(dá)顯著高于癌旁正常組織（ P lt;0.05）。 RRBP1在 Hep3B 、 HLE 、 HLF 、 SNU -739與 SNU -368中的表達(dá)高于正常肝細(xì)胞 LO2 （P lt;0.05）。下調(diào) RRBP1后，肝癌細(xì)胞的活力、增殖與克隆形成能力均被顯著抑制（ P lt;0.05）。結(jié)論 RRBP1在肝癌中異常高表達(dá)， RRBP1通過(guò)上調(diào)肝癌細(xì)胞的活力、增殖與克隆形成能力而促進(jìn)肝癌的發(fā)展。

［關(guān)鍵詞］ 核糖體結(jié)合蛋白1;細(xì)胞活力；細(xì)胞增殖；克隆形成；肝癌

doi：10.3969/j. issn.1674-7593.2023.01.002

The Roles of Endoplasmic Reticulum Ribosome - Binding Protein 1 in the Regulation of Liver Cancer Cell Proliferation

Liu Guochen ， Liu Dan ， Zhou Xiaorong ， Xiong Lan ， Lv Zhuomin **

Department of Pain Treatment ， the Second Affiliated Hospital ， Air Force Medical University ， Xi n 710038

** Corresponding author ： Lv Zhuomin ， email： zhuominlv@ hotmail. com

[Abstract] Objective To investigate the expression and biological roles of endoplasmic reticulum ribosome - binding pro- tein 1 （RRBP1） in the regulation of liver cancer cell growth . Methods Bioinformatics analysis and immunohistochemical staining were used to determine the expression of RRBP1 in tumor tissues and tumor - adjacent normal tissues of patients with liver cancer. Re- al - time polymerase chain reaction （RT - PCR） and western blot were performed to measure the expression of RRBP1 in human liver cancer cell lines and normal liver cell line . MTS assay ， EdU assay and colony formation assay were used to test the viability ， prolifer- ation and colony formation of liver cancer cells after RRBP1 was knocked - down by small interference RNA （ siRNA）. Results The expression level of RRBP1 was significantly higher in tumor tissues than in tumor - adjacent normal tissues in patients with liver cancer （P lt;0.05）. RRBP1 expression level was significantly higher in five liver cancer cell lines （Hep3B ， HLE ， HLF ， SNU -739 and SNU -368） than in a normal liver cell line （ LO2） （ P lt;0.05）. The viability ， proliferation and colony formation abilities were markedly inhibited after RRBP1 was knocked - down in liver cancer cells （P lt;0.05）. Conclusion RRBP1 is overexpressed in liver cancer ， it promotes the development of liver cancer by enhancing cell viability ， proliferation and colony formation abilities .

[Key words] Reticulum ribosome - binding protein 1; C ell viability; C ell proliferation; C olony formation; Liver cancer

線(xiàn)粒體與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)均是真核細(xì)胞中重要的細(xì)胞器，線(xiàn)粒體在調(diào)控細(xì)胞代謝、凋亡及氧化還原穩(wěn)態(tài)等生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮重要作用，而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)則在細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成與物質(zhì)運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)揮重要作用[1-2]。近年來(lái)，隨著超高分辨顯微技術(shù)的發(fā)展和人們對(duì)細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)認(rèn)識(shí)的加深，線(xiàn)粒體與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)間的物理連接（ Mitochondria - associated endo-plasmic reticulum membranes ， MAMs） 被逐步認(rèn)識(shí)，該結(jié)構(gòu)將細(xì)胞內(nèi)的線(xiàn)粒體與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)和功能緊密聯(lián)系在一起[3-4]。研究發(fā)現(xiàn)， MAMs 異常與包括腫瘤在內(nèi)多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[5-7]。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核糖體結(jié)合蛋白1 （ Reticulum ribosome - bindingprotein 1 ， RRBP1） 是組成 MAMs 結(jié)構(gòu)的重要蛋白之一。以往研究證實(shí)， RRBP1在前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌、膀胱癌及結(jié)腸癌中表達(dá)顯著上調(diào)，并與患者不良預(yù)后顯著相關(guān)[8-12] ， 表明 RRBP1是潛在的促癌基因。本文探討 RRBP1在肝癌組織細(xì)胞中的表達(dá)及在肝癌發(fā)展中的調(diào)控作用。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

收集2016年1月～2018年12月空軍軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院進(jìn)行肝癌根治性手術(shù)的137例患者的癌組織與癌旁正常肝組織。所有患者經(jīng)病理科確診為肝細(xì)胞肝癌，并在術(shù)前簽署了知情同意書(shū)。年齡34～74歲，平均（49.01±9.73） 歲，男105例，女32例，甲胎蛋白 AFP 水平1～ 41295μg/mL ， 中位數(shù)為87μg/mL ， 腫瘤最大直徑lt;5 cm 者98例，≥5 cm 者39例，伴乙肝114例，門(mén)靜脈癌栓12例， TNM 分期Ⅰ期73例，Ⅱ期22例，Ⅲ期40例，Ⅳ期2例。

5 株人肝癌細(xì)胞 （ Hep3B 、 HLE 、 HLF 、SNU -739與 SNU -368） 與1 株人正常肝細(xì)胞（LO2）購(gòu)自中科院上海細(xì)胞庫(kù)，常規(guī)保存于液氮中。細(xì)胞培養(yǎng)均采用 Dulbecco 改良的 Eagle 培養(yǎng)基（Dulbecco 's modified Eagle medium ， DMEM） 培養(yǎng)，培養(yǎng)液內(nèi)含10%的胎牛血清（生工生物公司），溫度37℃ ， CO2濃度5%。

1.2 方法

1.2.1 生物信息學(xué)分析 生物信息學(xué)分析采用在線(xiàn)腫瘤基因表達(dá)分析工具 UALCAN13（網(wǎng)址 ht- tp：//ualcan . path . uab . edu/index . html ）[13]。對(duì) RRBP1表達(dá)分析主要包括兩方面：①RRBP1在肝癌患者癌組織（357例）與正常肝組織（50例）中的表達(dá)；②RRBP1在不同腫瘤 Edmondson 分級(jí)腫瘤組織中的表達(dá)，共分為四級(jí)（Edmondson 分級(jí)1級(jí)樣本量為54例、2級(jí)樣本量為173例、3級(jí)樣本量為118例、4級(jí)樣本量為12例）。

1.2.2 免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn) 137例肝癌患者的癌與癌旁組織在手術(shù)切除后迅速置于液氮中保存，組織依次經(jīng)福爾馬林溶液固定、脫水與石蠟包埋后進(jìn)行切片，65℃烤片與水化后將切片置于檸檬酸修復(fù)液中高壓5 min 對(duì)組織中損傷的抗原進(jìn)行修復(fù)，切片用3%的雙氧水浸泡10 min 后加入稀釋過(guò)的 RRBP1抗體（武漢三鷹生物技術(shù)有限公司，型號(hào)22015-1- AP ， 稀釋比例為1∶200） ， 將切片置于4℃孵育過(guò)夜，之后用免疫組化試劑盒（福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司，型號(hào) KIT -5010）進(jìn)行后續(xù)抗體孵育與二氨基聯(lián)苯胺（Diaminobenzi- dine ， DAB） 顯色，最后封片并在顯微鏡下對(duì)結(jié)果進(jìn)行觀(guān)察。

1.2.3 轉(zhuǎn)染小干擾 RNA （Small interference RNA ，siRNA）下調(diào)肝癌 SNU -739細(xì)胞中 RRBP1表達(dá)將靶向 RRBP1的 siRNA 片段（ siRRBP1） 與對(duì)照siRNA 片段（ siCtrl）分別轉(zhuǎn)染肝癌 SNU -739細(xì)胞， siRRBP1序列為5′- GCUCUGUAGUGAAUUCCAUTT -3′與5′- AUGGAAUUCACUACAGAGCTT -3′， 對(duì)照 siCtrl 序列為5′- UUCUCCGAACGUGUCACGUTT -3′和5′- ACGUGACACGUUCGUAGAATT -3′。轉(zhuǎn)染流程：分別將 siRNA 片段或轉(zhuǎn)染試劑 lip2000用無(wú)血清 DMEM 培養(yǎng)液稀釋?zhuān)瑢?種稀釋液混合后加入細(xì)胞中，細(xì)胞培養(yǎng)48 h 后即可進(jìn)行其他實(shí)驗(yàn)操作。

1.2.4 RT - PCR 實(shí)驗(yàn) 用商品化試劑盒（購(gòu)自 O-MEGA 生物技術(shù)公司，型號(hào) R6688） 提取不同組肝癌細(xì)胞中總 RNA ， RNA 提取詳細(xì)步驟嚴(yán)格參照說(shuō)明書(shū)執(zhí)行，將提取到的 RNA 反轉(zhuǎn)錄為互補(bǔ) DNA（ complementary DNA ， cDNA） 后進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR （Real - Time - PCR ， RT - PCR） ， RRBP1分子 PCR 擴(kuò)增引物序列為 F -5′- TACGACACTCAAAC- CTTGGGG -3′， R -5′- GGTTGGCTAGGGCTTCT- TCATA -3′。以“管家基因”β- actin 為內(nèi)參對(duì)最終結(jié)果進(jìn)行校準(zhǔn)，引物序列為 F -5′- TCGCCTTT- GCCGATCCG -3 ， R -5′- ATGATCTGGGTCATCT- TCTCG -3′。采用2-ΔΔCt 公式計(jì)算各組細(xì)胞中 RRBP1的相對(duì)表達(dá)值。

1.2.5 Western Blot 實(shí)驗(yàn) 用含蛋白酶抑制劑的放射免疫沉淀裂解液（ Radioimmunoprecipitation assay buffer ， RIPA） 于冰上裂解細(xì)胞并在4℃離心收集蛋白上清，加入含十二烷基磺酸鈉（ Sodium dode- cyl sulfate ， SDS） 的 loading buffer 后煮沸5 min 使蛋白變性，用上樣針將蛋白加入聚丙烯酰胺凝膠孔內(nèi)，打開(kāi)電源對(duì)蛋白進(jìn)行電泳分離，蛋白轉(zhuǎn)印到聚偏二氟乙烯（ Polyvinylidene fluoride ， PVDF） 膜表面，用脫脂牛奶對(duì)非特異性抗原封閉后加入 RRBP1抗體（稀釋比例為1∶1000） ， 并在4℃條件下孵育過(guò)夜，磷酸緩沖鹽溶液（Phosphate buffer saline ， PBS ） 洗4 次后加入辣根過(guò)氧化物酶（Horseradish Peroxidase ， HRP） 標(biāo)記的二抗并于室溫孵育2 h ， PBS 洗4次后加入發(fā)光液對(duì)結(jié)果進(jìn)行拍照。

1.2.6 MTS 法測(cè)定細(xì)胞活力 將進(jìn)行過(guò) RRBP1表達(dá)干涉處理的肝癌細(xì)胞（1000個(gè)／孔）接種至96孔板內(nèi)，培養(yǎng)液總體積為0.1 mL 。將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1～4 d 。分別在每日的同一時(shí)刻向96孔板內(nèi)加入20“L 的 MTS （ Promega ， #G5421） 反應(yīng)液檢測(cè)細(xì)胞活力，加入 MTS 反應(yīng)液后于37℃孵育2 h ， 酶標(biāo)儀在490 nm 波長(zhǎng)處讀取各組細(xì)胞的吸光值（Optical density ， OD）。 OD 值越大代表細(xì)胞活力越強(qiáng)，反之則代表細(xì)胞活力越弱。

1.2.7 5-乙炔基-2′脫氧尿嘧啶核苷（5- ethy- nyl -2′- deoxyuridine ， EdU） 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn) 將進(jìn)行過(guò) RRBP1表達(dá)干涉處理的肝癌細(xì)胞接種至共聚焦顯微鏡專(zhuān)用細(xì)胞培養(yǎng)皿內(nèi)，待細(xì)胞貼壁后加入4%的多聚甲醛固定10 min 。加入0.2 mL 的 EdU 染色液孵育25 min ， PBS 緩沖液清洗3次后加入 Hochest 對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色。 PBS 洗3次后，于不同激發(fā)光波長(zhǎng)下對(duì) EdU 與 Hochest 染色進(jìn)行拍照。

1.2.8 克隆形成實(shí)驗(yàn) 將進(jìn)行過(guò) RRBP1表達(dá)干涉處理的肝癌細(xì)胞（1000個(gè)／孔）接種至6孔板，孵育箱中培養(yǎng)2周，棄去培養(yǎng)液用 PBS 洗3次，用 4%的多聚甲醛固定10 min 后用結(jié)晶紫染色10 min ， PBS 清洗3次后，對(duì)培養(yǎng)板中細(xì)胞克數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用 SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，正態(tài)分布計(jì)量資料采用 x ±s 表示，組間比較采用 t 檢驗(yàn)，多組比較采用單因素方差分析，兩組間比較用 LSD - t 檢驗(yàn)。 P lt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肝癌組織中 RRBP1表達(dá)顯著上調(diào)

生物信息學(xué)在線(xiàn)分析工具 UALCAN 分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)：肝癌組織中 RRBP1表達(dá)量為222.67±32.29 ， 正常肝組織中表達(dá)量為171.61±21.92 ， 肝癌組織中 RRBP1表達(dá)量高于正常組織 （ t = 25.413 ， P lt;0.05）。以腫瘤惡性程度分級(jí)不同進(jìn)行分層分析，結(jié)果表明：正常肝組織中 RRBP1表達(dá)量為171.61±21.92 ， 1 級(jí)腫瘤組織中 RRBP1表達(dá)量為185.78±18.93 ， 2 級(jí)腫瘤組織中 RRBP1表達(dá)量為223.02±23.33 ， 3 級(jí)腫瘤組織中 RRBP1表達(dá)量為233.42±28.39 ， 4級(jí)腫瘤組織中 RRBP1表達(dá)量為282.76±31.47。各組中 RRBP1表達(dá)量比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （ F =4 .572 ， P lt;0.05）。其中，1 ～4級(jí) 腫瘤組織中 RRBP1表達(dá)均高于癌旁正常組織（ P lt;0.05） ， 2～4級(jí)腫瘤組織中 RRBP1表達(dá)均高于1級(jí)腫瘤組織（ P lt;0.05） ， 4級(jí)腫瘤組織中 RRBP1表達(dá)高于1～ 3級(jí)腫瘤組織（ P lt;0.05）。

為驗(yàn)證生物信息學(xué)分析結(jié)果，進(jìn)一步用免疫組化法對(duì)137例肝癌患者癌與癌旁組織中 RRBP1的表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)，癌旁正常肝組織中 RRBP1表達(dá)量為3.99±0.22 ， 肝癌組織中 RRBP1表達(dá)量為7.21±0.23 ， 肝癌組織中表達(dá)量高于癌旁組織（ t =10.013 ， P lt;0.05） ， 見(jiàn)圖1。

2.2 RRBP1在肝癌細(xì)胞中的表達(dá)

RT - PCR 實(shí)驗(yàn)對(duì)5 株肝癌細(xì)胞 （ Hep3B 、 HLE 、 HLF 、 SNU -739與 SNU -368） 與1株正常肝細(xì)胞（ LO2） 中 RRBP1的表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果證實(shí)： Hep3B 、 HLE 、 HLF 、 SNU - 739 與 SNU -368中 RRBP1分子的 mRNA 表達(dá)水平分別為1.47±0.06、3.32±0.09、2.45±0.08、3.60±0.10、2.97±0.08 ， LO2中 RRBP1分子的 mRNA 表達(dá)水平為1.00±0.03 ， 所有肝癌細(xì)胞中 RRBP1的 mRNA 表達(dá)水平均高于正常肝細(xì)胞 （ F = 180.468 ， P lt;0.05） ， 見(jiàn)圖2。

2.3 RRBP1對(duì)肝癌細(xì)胞的活力與增殖的影響

為研究 RRBP1在肝癌生長(zhǎng)中的調(diào)控作用，依據(jù)“結(jié)果2.2”中 RRBP1在不同肝癌細(xì)胞中的表達(dá)，從中選定 RRBP1表達(dá)相對(duì)較高的 SNU -739細(xì)胞為研究對(duì)象，通過(guò)轉(zhuǎn)染靶向 RRBP1的 siRNA干涉片段，分析下調(diào) RRBP1對(duì)肝癌生長(zhǎng)的影響。首先，用 RT - PCR 實(shí)驗(yàn)對(duì) RRBP1在 mRNA 水平表達(dá)的干涉效率進(jìn)行了分析，結(jié)果證實(shí)：對(duì)照組（ siCtrl） RRBP1表達(dá)量為1 .00±0.05 ， 干涉組（ si - RRBP1） RRBP1表達(dá)量為0.27±0.01 ， 干涉組 RRBP1表達(dá)低于對(duì)照組 （ t = 13.674 ， P lt; 0.05） ， 見(jiàn)圖3。表明該細(xì)胞模型可滿(mǎn)足后續(xù)有關(guān)RRBP1生物學(xué)作用的研究。

用 MTS 實(shí)驗(yàn)分析了下調(diào) RRBP1對(duì)肝癌 SNU -739細(xì)胞活力的影響，細(xì)胞培養(yǎng)第2天、第3天、第4天與第5天時(shí)， RRBP1干涉組細(xì)胞活力均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P lt;0.05） ， 見(jiàn)表1。提示下調(diào) RRBP1抑制了肝癌細(xì)胞的增殖活力。

進(jìn)一步用 EdU 實(shí)驗(yàn)分析了 RRBP1在肝癌細(xì)胞增殖中的調(diào)控作用，結(jié)果顯示：對(duì)照組（ siCtrl）細(xì)胞 EdU 染色陽(yáng)性率為 （46.102±1.308）% ， RRBP1干涉組（ si - RRBP1） 細(xì)胞 EdU 染色陽(yáng)性率為 （13.630±0.841）% ， RRBP1干涉組細(xì)胞 EdU 染色陽(yáng)性率低于對(duì)照組 （ t =20.883 ， P lt; 0.05） ， 見(jiàn)圖4。表明 RRBP1具有促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖的作用。

2.4 RRBP1對(duì)肝癌細(xì)胞克隆形成能力的影響

用平板克隆形成實(shí)驗(yàn)，分析用 siRNA 下調(diào) RRBP1表達(dá)后，肝癌 SNU -739細(xì)胞克隆形成的改變。結(jié)果顯示：對(duì)照組（ siCtrl） 細(xì)胞克隆數(shù)為（126.03 ±5.19） 個(gè)， RRBP1 干涉組 （ si - RRBP1） 細(xì)胞克隆數(shù)為 （84.67 ±4.91） 個(gè)，RRBP1干涉組細(xì)胞克隆數(shù)少于對(duì)照組（ t =5.782 ， P lt;0.05） ， 見(jiàn)圖5。表明干涉 RRBP1表達(dá)顯著抑制了肝癌細(xì)胞的克隆形成能力。

3 討論

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是細(xì)胞內(nèi)調(diào)控蛋白質(zhì)合成與轉(zhuǎn)運(yùn)的重要場(chǎng)所，以往研究表明，當(dāng)腫瘤細(xì)胞處在各種壓力環(huán)境中時(shí)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)常常會(huì)發(fā)生應(yīng)激并出現(xiàn)非折疊蛋白反應(yīng) （ Unfolded protein response ， UPR）。研究證實(shí)，非折疊蛋白翻譯 UPR 在促進(jìn)腫瘤發(fā)生與轉(zhuǎn)移中均發(fā)揮重要作用[14]。線(xiàn)粒體是除內(nèi)質(zhì)網(wǎng)外另一重要的細(xì)胞器，在細(xì)胞能量代謝與凋亡等生物學(xué)過(guò)程發(fā)揮重要作用。研究已證實(shí)，線(xiàn)粒體基因突變與形態(tài)結(jié)構(gòu)的異常改變?cè)谀[瘤發(fā)生發(fā)展的各個(gè)階段均發(fā)揮了重要的促進(jìn)作用[15]。 RRBP1是位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與線(xiàn)粒體交流與相互作用的重要蛋白，在調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與線(xiàn)粒體間的物質(zhì)和信息交流中均扮演了重要角色[4 ， 16]。

本研究中生物信息學(xué)分析與免疫組化實(shí)驗(yàn)首次在肝癌中發(fā)現(xiàn)， RRBP1在肝癌組織中的表達(dá)顯著高于癌旁正常肝組織。同樣， RRBP1在肝癌細(xì)胞細(xì)胞系中的表達(dá)也顯著高于正常肝細(xì)胞。與本研究肝癌中得到的 RRBP1表達(dá)上調(diào)的結(jié)果類(lèi)似， RRBP1在卵巢癌、前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌、結(jié)腸癌及食管癌等多個(gè)類(lèi)型的惡性腫瘤中的表達(dá)也同樣異常升高[17-18]。盡管 RRBP1表達(dá)上調(diào)已在多種腫瘤中被證實(shí)，但 RRBP1在腫瘤惡性進(jìn)展中的生物學(xué)作用卻少有研究。 RRBP1在肝癌組織細(xì)胞中表達(dá)異常上調(diào)提示其可能在肝癌中發(fā)揮潛在的促癌作用。進(jìn)而，本研究分析了 RRBP1在肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)中的調(diào)控作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)下調(diào) RRBP1后肝癌細(xì)胞的活力、增殖與克隆形成能力均被顯著抑制，表明 RRBP1在促進(jìn)肝癌生長(zhǎng)中發(fā)揮了重要的促進(jìn)作用。與本研究結(jié)果類(lèi)似，以往在腎癌中的研究同樣證實(shí)，過(guò)表達(dá) RRBP1可顯著促進(jìn)腎癌細(xì)胞的增殖[19]。以往在肝癌中研究也證實(shí)，糖尿病患者體內(nèi)的高糖微環(huán)境可通過(guò)調(diào)控 RRBP1而促進(jìn)肝癌 HepG2細(xì)胞的增殖與侵襲[20] ， 進(jìn)一步支持本研究的發(fā)現(xiàn)，即 RRBP1在促進(jìn)肝癌生長(zhǎng)與惡性進(jìn)展中發(fā)揮了重要作用。作為介導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與線(xiàn)粒體相互作用的重要蛋白，我們推測(cè) RRBP1發(fā)揮促進(jìn)肝癌增殖與克隆形成的作用可能與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與線(xiàn)粒體間物質(zhì)與信息交流異常導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與線(xiàn)粒體功能障礙相關(guān)，這些推測(cè)有待未來(lái)的研究進(jìn)一步闡明。

綜上所述，本研究首次在肝癌中證實(shí)了 RRBP1表達(dá)的異常上調(diào)及其在促進(jìn)肝癌細(xì)胞活力、增殖與克隆形成中的作用，提示 RRBP1是重要的促癌基因并有望成為肝癌潛在的分子治療靶點(diǎn)。

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（2022-01-16收稿）