吳佳 吳進(jìn) 肖凱 凌超

摘要 目的：觀察梔子苷對(duì)載脂蛋白E缺乏（ApoE-/-）小鼠Th17/調(diào)節(jié)性T（Treg）細(xì)胞失衡的影響及其作用機(jī)制。方法：將50只純合子ApoE-/-雌性小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組和梔子苷低劑量組、梔子苷中劑量組、梔子苷高劑量組。對(duì)照組小鼠喂養(yǎng)普通飼料，模型組和梔子苷組小鼠喂養(yǎng)高脂飼料。從第8周開(kāi)始，梔子苷各劑量組每日灌胃梔子苷（25、50、100 mg/kg），連續(xù)8周。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，采用油紅O染色評(píng)估主動(dòng)脈及其根部動(dòng)脈粥樣硬化（AS）病變面積比。采用定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）分析主動(dòng)脈組織腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素（IL）-6、IL-17A和IL-10 mRNA表達(dá)；采用流式細(xì)胞儀分析脾臟中Th17和Treg細(xì)胞百分比；蛋白免疫印跡法（Western Blot）檢測(cè)主動(dòng)脈組織磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)。結(jié)果：油紅O染色病變顯示，梔子苷中劑量組、梔子苷高劑量組病變百分比低于模型組（P＜0.05）。與對(duì)照組比較，模型組主動(dòng)脈TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表達(dá)水平升高（P＜0.05）；梔子苷各劑量組主動(dòng)脈TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表達(dá)水平降低（P＜0.05）。與對(duì)照組比較，模型組主動(dòng)脈抗炎細(xì)胞因子IL-10 mRNA表達(dá)水平降低（P＜0.05）；梔子苷各劑量組主動(dòng)脈抗炎細(xì)胞因子IL-10 mRNA表達(dá)水平升高（P＜0.05）。與對(duì)照組比較，模型組小鼠脾臟中Th17細(xì)胞百分比升高，Treg細(xì)胞百分比降低（P＜0.05）。梔子苷處理恢復(fù)了AS小鼠Th17和Treg細(xì)胞的平衡。梔子苷抑制PI3K的表達(dá)及AKT和mTOR的磷酸化，MHY1485（mTOR活化劑）減弱了梔子苷對(duì)T細(xì)胞分化的影響。結(jié)論：梔子苷抗AS作用機(jī)制可能與抑制PI3K/AKT/mTOR信號(hào)引起的Treg細(xì)胞增多和Th17細(xì)胞減少有關(guān)。

關(guān)鍵詞 動(dòng)脈粥樣硬化；梔子苷；載脂蛋白E缺乏；Th17/調(diào)節(jié)性T細(xì)胞；磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信號(hào)通路；小鼠；實(shí)驗(yàn)研究

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.05.008

Effect of Geniposide Regulating PI3K/AKT/mTOR Signaling Pathway on Th17/Treg Function during Atherogenesis

WU Jia， WU Jin， XIAO Kai， LING Chao

Hunan Provincial Maternal and Child Health Care Hospital， Changsha 410008， Hunan， China

Corresponding Author WU Jin， E-mail： wujinwujin@163.com

Abstract Objective：To observe the effect of Geniposide on Th17/ regulatory T（Treg） cell imbalance in apolipoprotein E deficient（ApoE-/-） mice and its mechanism.Methods：Fifty female homozygous ApoE-/- mice were randomly divided into control group，model group，geniposide low-dose group，geniposide medium-dose group and geniposide high-dose group.From the 8th week，each dose group was given daily gavage of geniposide（25，50，100 mg/kg） for 8 weeks respectively.At the end of the experiment，the lesion area ratio of atherosclerosis（AS） in the aorta and its roots was assessed by oil red O staining.Quantitative reverse transcription polymerase chain reaction（RT-PCR） was used to detect the mRNA expression of tumor necrosis factor-α（TNF-α），interleukin-6（IL-6），IL-17A and IL-10 in aortic tissue.The percentage of Th17 and Treg cells in spleen was analyzed by flow cytometry.Western Blot was used to detect phosphatidylinositol 3-kinase（PI3K）/protein kinase B（AKT）/mammalian target of rapamycin（mTOR） signals in aortic tissue.Results：Oil red O staining showed that pathological percentage in the geniposide medium-dose group and geniposide high-dose group was lower than that in the model group（P＜0.05）.Compared with the control group，the mRNA expressions of TNF-α，IL-6，and IL-17A in aorta of the model group increased（P＜0.05），and the mRNA expressions of TNF-α，IL-6 ，and IL-17A in aorta of geniposide dose groups decreased（P＜0.05）.Compared with the control group，the percentage of Th17 cells increased and the percentage of Treg cells decreased in the spleens of the model group（P＜0.05）.Geniposide restored the balance of Th17 and Treg cells in AS mice.Geniposide inhibited the expression of PI3K and the phosphorylation of AKT and mTOR，and MHY1485（mTOR activator） attenuated the effect of geniposide on T cell differentiation.Conclusion：The mechanism of anti-AS action of geniposide might be related to the increase of Treg cells and the decrease of Th17 cells induced by inhibition of PI3K/AKT/mTOR signaling pathway.

Keywords atherogenesis; Geniposide; apolipoprotein E deficient; Th17/ regulatory T cell; phosphatidylinositol 3-kinase（PI3K）/protein kinase B（AKT）/mammalian target of rapamycin（mTOR） signaling pathway; mice; experimental study

基金項(xiàng)目 湖南省衛(wèi)生健康委科研項(xiàng)目（No.20200083）

作者單位 湖南省婦幼保健院（長(zhǎng)沙? 410008）

通訊作者 吳進(jìn)，E-mail：wujinwujin@163.com

引用信息 吳佳，吳進(jìn)，肖凱，等.梔子苷調(diào)節(jié)PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路在動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中對(duì)Th17/Treg功能的影響［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2024，22（5）：817-822.

動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是一種由先天性和適應(yīng)性免疫反應(yīng)及白細(xì)胞浸潤(rùn)引起的進(jìn)行性慢性炎癥性疾?。?-2］。相關(guān)研究表明，Th17和CD4＋CD25＋調(diào)節(jié)性T（Treg）細(xì)胞的平衡在炎癥和自身免疫性疾病的發(fā)展中十分重要［3］。在AS動(dòng)物模型和急性冠脈綜合征病人的局部AS病變和循環(huán)淋巴細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)Th17細(xì)胞反應(yīng)性上調(diào)，且Treg細(xì)胞/Th17細(xì)胞失衡與AS

發(fā)展、斑塊破裂有關(guān)［4-5］。梔子苷（Geniposide）是從梔子中分離得到的一種環(huán)烯醚萜苷化合物，具有廣泛的抗炎和抗氧化作用［6］。有研究顯示，梔子苷可抑制巨噬細(xì)胞中炎癥介質(zhì)釋放［7］。目前，關(guān)于梔子苷的抗炎作用是否有助于改善AS中的Th17/Treg細(xì)胞失衡尚未明確。本研究觀察梔子苷對(duì)載脂蛋白E缺乏（apolipoprotein-E deficient，ApoE-/-）小鼠Th17/Treg細(xì)胞失衡的影響及其作用機(jī)制，旨在為梔子苷防治AS提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

50只7周齡純合子ApoE-/-雌性小鼠購(gòu)自南京大學(xué)模式動(dòng)物遺傳研究中心。將小鼠飼養(yǎng)在聚碳酸酯籠中，每籠5只，在無(wú)病原體溫度（25 ℃）環(huán)境中進(jìn)行嚴(yán)格的12 h光照/黑暗循環(huán)飼養(yǎng)，自由進(jìn)食、飲水。將小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、梔子苷低劑量組、梔子苷中劑量組、梔子苷高劑量組，每組10只。對(duì)照組小鼠喂養(yǎng)普通飼料，模型組和梔子苷各劑量組小鼠喂養(yǎng)高脂飼料（18%脂肪和1.2%膽固醇）。從第8周開(kāi)始，梔子苷各劑量組每日灌胃梔子苷（25、50、100 mg/kg），連續(xù)8周。對(duì)照組、模型組給予等量生理鹽水灌胃。第16周，使用0.5%戊巴比妥鈉（美國(guó)Sigma公司）腹膜內(nèi)麻醉小鼠。通過(guò)心臟穿刺收集血液，解剖并保存主動(dòng)脈和脾臟組織以備進(jìn)一步研究。

1.2 主動(dòng)脈粥樣斑塊分析

將主動(dòng)脈及其根部在磷酸緩沖鹽溶液（PBS）、4%甲醛、30%蔗糖中固定過(guò)夜，之后將其固定在OCT包埋劑（美國(guó)Sakura公司）中并在－70 ℃下冷凍。將冷凍切片（10 mm）用油紅O染色。從每只小鼠的5個(gè)切片中分別獲取病變面積百分比以定量分析AS情況。采用Olympus BX51成像系統(tǒng)（日本Olympus公司）捕獲切片圖像，使用Image-Pro Plus 6.0測(cè)量斑塊面積。

1.3 血脂與脂蛋白譜分析

采用7060型自動(dòng)分析儀（日本日立公司）酶法測(cè)定血清血脂［三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）］和脂蛋白譜。

1.4 定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）分析

使用TRIzol試劑（日本TaKaRa公司）從小鼠主動(dòng)脈組織中提取總RNA。使用RNA PCR試劑盒（日本Takara Biotechnology公司）將1 μg總RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，并將cDNA作為模板，使用StepOnePlus實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)（美國(guó)Applied Biosystems公司）進(jìn)行實(shí)時(shí)PCR。管家基因磷酸苷油酸脫氫酶（GAPDH）作為PCR的內(nèi)部對(duì)照。PCR反應(yīng)混合物使用SYBR Green I（日本Takara Biotechnology公司）、cDNA和引物。使用常規(guī)2－△△Ct方法計(jì)算目的基因的表達(dá)。引物序列：腫瘤壞死因子-α（TNF-α），正向引物5′-CGCCTCACCTGACCTACC-3′，反向引物5′-TTGCCTCGTTCTGGACTATAC-3′；白細(xì)胞介素（IL）-6，正向引物5′-CACCTATGCCACCCTTATCC-3′，反向引物5′-CGAACATGCGAGTAAACCAA-3′；IL-17A，正向引物5′-GCTGACCCCTAAGAAACCCC-3′，反向引物5′-GAAGCAGTTTGGGACCCCTT-3′；IL-10，正向引物5′-ATGCTGCCTGCTCTTACTGACTG-3′，反向引物5′-CCCAAGTAACCCTTAAAGTCCTGC-3′；GAPDH，正向引物5′-AGCAATGCCTCCTGCACCACCAAC-3′，反向引物5′-CCGGAGGGGCCATCCACAGTCT-3′。

1.5 細(xì)胞制備與流式細(xì)胞儀

參照文獻(xiàn)［8］中方法制備脾細(xì)胞懸液。使用無(wú)菌針在冷的PBS中擠壓小鼠新鮮脾臟，使其通過(guò)70 μm的細(xì)胞過(guò)濾器，制備單個(gè)核細(xì)胞懸液。通過(guò)Ficoll-Hypaque分離脾淋巴細(xì)胞，并重懸于完全培養(yǎng)基：RPMI-1640（美國(guó)Gibco公司）中，使用臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)的細(xì)胞存活率＞95%。采用流式細(xì)胞儀分析Th17和Treg細(xì)胞。將細(xì)胞等分至試管中，并在PBS中洗滌1次，之后重懸至106個(gè)細(xì)胞/mL。使用異硫氰酸熒光素（FITC）結(jié)合CD4（1∶200）或PE結(jié)合CD4（1∶200）在4 ℃下持續(xù)孵育20 min。通過(guò)細(xì)胞內(nèi)固定和滲透試劑盒在細(xì)胞內(nèi)用PE-cy7-結(jié)合的IL-17A（1∶100）進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)染色或使用叉頭框蛋白p3（Foxp3）/轉(zhuǎn)錄因子染色緩沖試劑盒在核內(nèi)用PE-cy7-結(jié)合的Foxp3（1∶100）（抗體和試劑盒均購(gòu)自美國(guó)eBioscience公司）進(jìn)行染色。給予同型對(duì)照以實(shí)現(xiàn)正確的補(bǔ)償并確認(rèn)抗體特異性。在BD-FACS-Calibur流式細(xì)胞儀（美國(guó)BD-Biosciences公司）進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析。使用Flow Jo軟件（美國(guó)Ashland公司）分析數(shù)據(jù)。

為了分析哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）對(duì)Treg細(xì)胞的影響，將脾臟單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)于RPMI 1640完全培養(yǎng)基中，用抗CD3、抗CD28抗體（1 μg、1×106個(gè)/細(xì)胞）刺激，加用或不加用梔子苷（5 μmol/L）和MHY1485（mTOR活化劑，2 μmol/L）處理72 h。使用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞樣品中Th17和Treg細(xì)胞進(jìn)行定量測(cè)定。

1.6 蛋白免疫印跡法（Western Blot）分析

采用RIPA緩沖液（北京索萊寶科技有限公司）裂解主動(dòng)脈組織標(biāo)本提取總蛋白。通過(guò)二喹啉甲酸（BCA）試劑盒評(píng)估蛋白質(zhì)含量。采用10%的十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到聚偏氟乙烯（PVDF）膜上（美國(guó)Invitrogen公司）。將膜用5%脫脂牛奶封閉1 h，之后在4 ℃條件下，以一抗封閉過(guò)夜：磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）（1∶1 000）、蛋白激酶B（AKT，1∶1000）、磷酸化AKT（p-AKT，1∶1000）、mTOR（1∶1500）、磷酸化mTOR（p-mTOR，1∶1 000）和GAPDH（1∶1 000），均購(gòu)自英國(guó)Abcam公司。將PVDF膜與二抗在室溫下孵育1 h。使用蛋白免疫印跡法檢測(cè)化學(xué)發(fā)光試劑盒觀察目標(biāo)條帶。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用雙尾t檢驗(yàn)或單因素方差分析和Bonferroni-Dunn事后檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 梔子苷對(duì)ApoE-/-小鼠AS發(fā)展的影響

與對(duì)照組比較，模型組和梔子苷各劑量組實(shí)驗(yàn)結(jié)束后TC和LDL-C升高（P＜0.05）。詳見(jiàn)表1。對(duì)整個(gè)主動(dòng)脈的油紅O染色病變量化結(jié)果顯示，梔子苷中劑量組、梔子苷高劑量組病變百分比低于模型組（P＜0.05）。詳見(jiàn)圖1A、圖1B。測(cè)量主動(dòng)脈根部的橫截面積時(shí)，梔子苷治療以劑量依賴的方式降低了病變百分比（P＜0.05）。詳見(jiàn)圖1C、圖1D。

2.2 梔子苷調(diào)節(jié)TNF-α、IL-6和IL-17A、IL-10 mRNA及Th17和Treg細(xì)胞的平衡

與對(duì)照組比較，模型組主動(dòng)脈TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表達(dá)水平升高；與模型組比較，梔子苷各劑量組主動(dòng)脈TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表達(dá)水平降低，且梔子苷組呈劑量依賴性降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與對(duì)照組比較，模型組主動(dòng)脈中抗炎細(xì)胞因子IL-10 mRNA表達(dá)水平降低；與模型組比較，梔子苷各劑量組主動(dòng)脈IL-10 mRNA表達(dá)水平升高，且梔子苷組呈劑量依賴性升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見(jiàn)圖2A。進(jìn)一步行流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，模型組脾臟中CD4＋I(xiàn)L-17A＋細(xì)胞百分比升高，CD4＋Foxp3＋細(xì)胞百分比降低；與模型組比較，梔子苷各劑量組脾臟中CD4＋I(xiàn)L-17A＋細(xì)胞百分比降低，CD4＋Foxp3＋細(xì)胞百分比升高，且梔子苷組呈劑量依賴性變化，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見(jiàn)圖2B～圖2D。

2.3 梔子苷抑制PI3K/AKT/mTOR信號(hào)的激活

與模型組比較，梔子苷各劑量組主動(dòng)脈PI3K表達(dá)及AKT和mTOR的磷酸化表達(dá)水平降低，且梔子苷各組呈劑量依賴性降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見(jiàn)圖3A、圖3B。當(dāng)用MHY1485（mTOR活化劑）/梔子苷/MHY1485＋梔子苷處理從ApoE-/-小鼠脾臟分離的單核細(xì)胞，結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，MHY組CD4＋I(xiàn)L-17A＋細(xì)胞百分比增加，CD4＋Foxp3＋細(xì)胞百分比降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與MHY組相比，梔子苷組CD4＋I(xiàn)L-17A＋細(xì)胞百分比顯著降低，CD4＋Foxp3＋細(xì)胞百分比增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與梔子苷組比較，梔子苷＋MHY組CD4＋I(xiàn)L-17A＋細(xì)胞百分比增加，CD4＋Foxp3＋細(xì)胞的百分比降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見(jiàn)圖4～圖6。

3 討 論

AS是一種慢性炎癥性疾病，在病變形成過(guò)程中，免疫細(xì)胞發(fā)揮著重要作用［9-11］。CD4＋T細(xì)胞被認(rèn)為是最早進(jìn)入人類病變的免疫細(xì)胞之一［12］。嚴(yán)重免疫缺陷突變（SCID）小鼠與ApoE-/-小鼠雜交時(shí)由于缺乏成熟的T細(xì)胞和B細(xì)胞，其后代AS斑塊減少［13］。將CD4＋T細(xì)胞轉(zhuǎn)移到ApoE-/-的SCID小鼠體內(nèi)可加重AS發(fā)展［14］。近年來(lái)，多種抗炎治療AS的方法被研發(fā)出來(lái)，證實(shí)是有效的［15］。CANTOS研究顯示，IL-1β的單克隆抗體（canakinumab）可降低復(fù)發(fā)性心血管事件發(fā)生率，降低與血脂水平無(wú)關(guān)［16］。本研究結(jié)果顯示，ApoE-/-小鼠AS發(fā)展是Th17/Treg失衡的結(jié)果；與對(duì)照組比較，模型組小鼠Th17細(xì)胞百分比和IL-17A、IL-6和TNF-α mRNA水平明顯升高。有研究表明，Th17細(xì)胞在AS形成中發(fā)揮著重要作用，不穩(wěn)定型心絞痛和急性心肌梗死病人血漿IL-17A升高［17］。IL-17A可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-9，與易損斑塊有關(guān)［18］。相關(guān)研究顯示，在高脂血癥小鼠模型和人類研究中，Th17細(xì)胞和Tregs與AS進(jìn)展呈負(fù)相關(guān)［4］。本研究結(jié)果顯示，模型組小鼠Treg細(xì)胞及IL-10水平降低。因此，在高脂血癥ApoE-/-小鼠AS形成過(guò)程中存在Th17/Treg功能失衡，其可能在AS斑塊負(fù)荷和穩(wěn)定性中發(fā)揮作用。

梔子苷是從梔子中提取的環(huán)烯醚萜苷，是梔子中的主要活性成分。有研究表明，梔子苷可降低TNF-α、IL-1、IL-6和IL-1β含量，具有顯著的抗AS作用［19］。相關(guān)研究顯示，梔子苷對(duì)炎癥反應(yīng)的抑制作用涉及絲裂原活化蛋白激酶途徑的抑制［20］。本研究結(jié)果顯示，梔子苷以劑量依賴方式減弱了喂飼高脂飼料的ApoE-/-小鼠體內(nèi)AS病變發(fā)展，且梔子苷處理顯著降低了ApoE-/-小鼠主動(dòng)脈中促炎細(xì)胞因子（包括TNF-α、IL-6和IL-17A）水平，提高了抗炎細(xì)胞因子IL-10水平，提示梔子苷可能通過(guò)降低IL-17A和提高IL-10在主動(dòng)脈中的表達(dá)抑制AS發(fā)展。IL-17A/IL-10主要由Th17和Treg細(xì)胞產(chǎn)生，這兩種類型的T細(xì)胞可能受到梔子苷影響；進(jìn)一步流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果顯示，梔子苷處理恢復(fù)了AS小鼠Th17和Treg細(xì)胞的平衡。上述結(jié)果表明梔子苷改善AS發(fā)展的機(jī)制可能與Th17和Treg細(xì)胞的調(diào)節(jié)有關(guān)。

梔子苷如何調(diào)節(jié)T細(xì)胞分化尚未明確。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，mTOR在啟動(dòng)效應(yīng)CD4＋T細(xì)胞分化中發(fā)揮重要作用，缺乏mTOR的T細(xì)胞未分化為Th1、Th2或Th17效應(yīng)細(xì)胞，而是分化為Foxp3＋調(diào)節(jié)性T細(xì)胞［9］。本研究結(jié)果顯示，梔子苷抑制了高脂血癥ApoE-/-小鼠脾臟中PI3K/AKT/mTOR信號(hào)的激活，mTOR信號(hào)的激活增加了Th17細(xì)胞百分比，降低了Treg細(xì)胞百分比；同時(shí)mTOR的激活減弱了梔子苷對(duì)T細(xì)胞分化的影響。因此，梔子苷可能通過(guò)抑制PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路調(diào)節(jié)CD4＋T細(xì)胞分化。

綜上所述，梔子苷改善了AS的發(fā)展，有助于降低促炎細(xì)胞因子，提高抗炎細(xì)胞因子水平。梔子苷抗AS作用機(jī)制可能與抑制PI3K/AKT/mTOR信號(hào)引起的Treg細(xì)胞增多、Th17細(xì)胞減少有關(guān)。本研究對(duì)梔子苷抗AS發(fā)展提供了新方向。

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（收稿日期：2022-06-29）

（本文編輯薛妮）