摘要金剛烷胺（AMD）可與其核酸適配體特異性結(jié)合，導(dǎo)致構(gòu)象由單鏈轉(zhuǎn)換成莖環(huán)結(jié)構(gòu)。為避免多余的核苷酸影響適配體與靶標(biāo)結(jié)合形成復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)，本研究通過保留適當(dāng)?shù)那o環(huán)結(jié)構(gòu)對AMD 原適配體J 進行截短優(yōu)化，開發(fā)出新的截短適配體。與原適配體相比，截短適配體J-7 與AMD 的親和力和特異性更好。以J-7 為特異性識別元件，結(jié)合二硫化鉬納米片（MoS2Ns）信號放大技術(shù)構(gòu)建了一種基于核酸適配體-MoS2Ns的超靈敏免標(biāo)記熒光法用于AMD 的檢測，檢出限為0.11 ng/mL。將本方法用于實際牛奶、酸奶及SD 大鼠血清樣品中AMD 的檢測，回收率為86.6%～108.2%。本研究為其它長序列適配體的截短提供了參考依據(jù)，也為食品中AMD 殘留的檢測提供了更靈敏的檢測方法。

關(guān)鍵詞截短適配體；二硫化鉬納米片；信號增強；金剛烷胺；免標(biāo)記熒光法

金剛烷胺（Amantadine， AMD）是一種典型的抗病毒藥物，尤其在禽流感的防治中應(yīng)用廣泛[1]。然而，不合理或者非法使用AMD 將導(dǎo)致其在動物組織中殘留，并通過食物鏈進入人體，可引起緊張、焦慮和噩夢，偶爾還會產(chǎn)生幻覺[2]；同時，還會導(dǎo)致抗病毒藥物耐藥性，“超級病毒”的進化可能會加速[3]。此外，近年還出現(xiàn)了抗AMD 藥的高頻率突變現(xiàn)象[4-5]。早在2005 年，包括我國在內(nèi)的許多國家已明令禁止在家禽養(yǎng)殖場中使用AMD[6-7]。目前，已開發(fā)了多種分析方法對AMD 殘留物進行檢測[8]，主要有高效液相色譜法[9]、超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[10]、氣相色譜法[11]和酶聯(lián)免疫吸附分析法[12]等。雖然這些檢測方法的靈敏度和準(zhǔn)確性較好，但通常需要復(fù)雜的樣品前處理過程或昂貴的儀器，無法滿足在資源緊張地區(qū)對AMD 進行快速、高效和低成本檢測的需求。因此，設(shè)計一種簡單快捷、靈敏度高、準(zhǔn)確可靠的檢測方法具有重要的現(xiàn)實意義。

核酸適配體是通過指數(shù)富集配體系統(tǒng)進化（SELEX）技術(shù)經(jīng)人工篩選獲得的具有特定堿基序列的單鏈DNA 或RNA，并可與多種靶標(biāo)特異性結(jié)合[13-14]。與傳統(tǒng)抗體相比，核酸適配體不僅對靶標(biāo)具有較高的生物親和力，而且具有成本低、穩(wěn)定性高、批間差異小、可大量制備、易修飾和免疫原性低[15]等優(yōu)點，被用作多種生物傳感器的識別元件[16]。在適宜的條件下，核酸適配體與靶標(biāo)結(jié)合，由自由卷曲的狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)楠毺氐亩壔蛉壗Y(jié)構(gòu)，并形成穩(wěn)定的靶標(biāo)-適配體復(fù)合體[17]。靶標(biāo)與適配體的結(jié)合通常作用于特定的區(qū)域，該區(qū)域可能是適配體的某一部分，因此適配體中可能存在“多余”的核苷酸，即對識別靶標(biāo)以及形成復(fù)合物作用不大的序列。具有長寡核苷酸序列的原適配體可能通過引物區(qū)域或額外片段結(jié)合其目標(biāo)類似物，導(dǎo)致其特異性降低[18]。因此，通過對原寡核苷酸序列截短優(yōu)化，開發(fā)具有更高親和性、特異性的高效核酸適配體，在降低合成成本的同時，也有利于提高生物傳感體系的靈敏度。

以核酸適配體為識別元件，結(jié)合信號放大技術(shù)進一步提高分析檢測的靈敏度是近年來構(gòu)建高效生物傳感器的常用策略。層狀二硫化鉬（MoS2）是一種具有類似于石墨烯的二維層狀結(jié)構(gòu)的過渡金屬二鹵化物，獨特的能帶結(jié)構(gòu)使其光學(xué)性能優(yōu)于石墨烯。此外，層狀MoS2 具有較大的比表面積、獨特的物理化學(xué)性質(zhì)以及對單雙鏈DNA 不同的親和力，因此常被用作信號放大材料，在構(gòu)建高靈敏生物傳感器研究中發(fā)揮了重要的作用[19]。

目前，有關(guān)AMD 核酸適配體的研究報道很少[20]，而對AMD 核酸適配體的截短優(yōu)化相關(guān)研究尚未見報道。本研究通過截短優(yōu)化AMD 原寡核苷酸序列[20]，獲得了具有更高親和力和特異性的截短適配體，結(jié)合二硫化鉬納米片（MoS2Ns）的信號放大功能，構(gòu)建了用于檢測AMD 的超靈敏熒光傳感方法。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

1260-6460 液相色譜串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜儀（美國Agilent 公司）；JEM-7900F 掃描電鏡（SEM，日本JEOL 公司）；JEM-2100F 透射電鏡（TEM，日本JEOL 公司）；ISOplane-160 拉曼光譜儀（美國PI 公司）；Scientz-12N 真空冷凍干燥機（寧波新芝生物科技股份有限公司）；Cary Eclipse 熒光分光光度計（美國Varian 公司），激發(fā)和發(fā)射狹縫設(shè)定為10 nm， 激發(fā)波長為346 nm；光源氙燈（美國Varian 公司）；1 cm標(biāo)準(zhǔn)石英杯樣品池（中國譜析光學(xué)元件有限公司）；Milli-Q 凈水系統(tǒng)（美國密里博公司）。

鹽酸金剛烷胺、金剛乙胺、嗎啉雙胍、利巴韋林和阿昔洛韋（美國Sigma-Aldrich 公司）；鹽酸小檗堿、三羥甲基氨基甲烷（Tris）、KCl、NaCl 和MgCl2（分析純，阿拉丁試劑公司）。BB 緩沖液（10 mmol/LTris，含10.0 mmol/L NaCl、1.0 mmol/L MgCl2 和5.0 mmol/L KCl， pH=7.4）。牛奶、酸奶購自本地超市。大鼠血清由山西醫(yī)科大學(xué)校醫(yī)院提供。AMD 陽性樣品1、2、3 由本實驗室提供。所有實驗均按照中國現(xiàn)行法規(guī)進行，并經(jīng)山西醫(yī)科大學(xué)動物研究所與醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。實驗用水為超純水（18.2 MΩ·cm）。AMD 原長適配體和截短適配體由上海生工生物科技有限公司合成，具體序列見表1。

1.2 實驗方法

1.2.1 AMD原適配體截短

利用MFold 軟件模擬獲得AMD 核酸適配體的二級結(jié)構(gòu)，該適配體數(shù)據(jù)引用自文獻[20]。利用5′端、3′端及兩端同時裁剪的方式將AMD原適配體截短獲得截短適配體。通過保留合適的莖環(huán)結(jié)構(gòu)，一端裁剪時以3個堿基為裁剪單元；兩端同時裁剪時先去掉兩端多余的“手臂”，再以堿基對為裁剪單元進行裁剪。

1.2.2 MoS2Ns的合成

參考文獻[21]的方法并稍作改進合成MoS2Ns。將60 mg Na2MoO4·2H2O 和120 mg 硫代乙酰胺溶解在50 mL 超純水中，常溫下攪拌60 min。將混合溶液移入100 mL 高壓反應(yīng)釜中， 220 ℃下水熱反應(yīng)24 h。產(chǎn)物依次用超純水和乙醇洗滌3 次，冷凍干燥，備用。

1.2.3 熒光測定方法

移取10 μL 核酸適配體溶液（10 μmol/L）于800 μL BB 緩沖溶液中，加入不同體積的AMD 溶液使其終濃度分別為0、0.2、1.2、2.0、2.5、23.5、140.8、351.9、516.2、703.9、938.5、1173.1、1642.3 和1877.0 ng/mL，在37 ℃下反應(yīng)20 min，加入8 μL 鹽酸小檗堿溶液（20 mmol/L），在室溫條件下放置10 min，再加入125 nmol/L MoS2Ns，在4 ℃條件下13000 r/min 離心15 min，取上清液進行熒光光譜掃描。

1.2.4 實際樣品處理

將大鼠血液樣品在13000 r/min 下離心10 min 后，取上清液，獲得血清儲備液；牛奶和酸奶分別加1%醋酸，渦旋混勻后，在13000 r/min 下離心10 min，取上清液，得到牛奶和酸奶儲備液。上述儲備液用BB 緩沖液稀釋50 倍，采用本方法進行檢測。

2 結(jié)果與討論

2.1 適配體截短

經(jīng)人工篩選得到的原適配體序列通常較長，適配體在與靶標(biāo)作用時僅有部分核苷酸參與結(jié)合，留有未結(jié)合的部分，多余的核苷酸會影響適配體-靶標(biāo)復(fù)合體的形成。此外，冗余堿基可能干擾適配體對靶標(biāo)的識別[22]。因此，通過設(shè)計合理的裁剪方式對原核苷酸序列進行截短優(yōu)化，不僅可以降低合成成本，更有利于提高適配體傳感器的靈敏度[23]，擴大其應(yīng)用范圍和適用種類。本研究采用MFold軟件對AMD 核酸適配體的二級結(jié)構(gòu)進行模擬（圖1），利用5′端、3′端及兩端同時裁剪方式獲得J-1～J-9截短適配體，序列見表1。

2.2 材料表征

對合成的MoS2Ns 結(jié)構(gòu)和組成進行表征。由圖2A 可見， MoS2 主要以分散的片狀形式存在，大小均勻，尺寸在40～70 nm 之間。由圖2B 可見， MoS2 邊緣比較薄，制備得到的樣品為褶皺狀，呈無序狀態(tài)的納片狀結(jié)構(gòu)。對MoS2 溶液在300～500 cm–1 范圍進行拉曼光譜掃描，結(jié)果出現(xiàn)2 個吸收峰，分別位于385 和409 cm?1 處（圖2C），與文獻[24]報道的MoS2 的2 個特征峰一致。此外， MoS2 溶液的能譜圖（圖2D）中顯示有Mo 元素和S 元素。上述結(jié)果均說明成功合成了MoS2Ns。

2.3 檢測原理

利用優(yōu)化后的適配體作為識別元件，小檗堿（BBR）為信號探針，結(jié)合MoS2Ns 信號放大技術(shù)，構(gòu)建檢測AMD 的免標(biāo)記熒光傳感體系，原理如圖3 所示。為了驗證設(shè)計策略的可行性，考察了熒光探針BBR在不同BB 緩沖溶液體系中的熒光發(fā)射。如圖4A 所示， BBR 在水溶液中的熒光發(fā)射較弱[25]（圖4A-a），加入AMD 適配體（AMD-Apt）后， BBR 嵌入適配體結(jié)構(gòu)中并引起B(yǎng)BR/AMD-Apt 體系的熒光發(fā)射增強（圖4A-b）；再加入MoS2Ns，由于MoS2Ns 具有較強的單鏈吸附能力， BBR/AMD-Apt 吸附在MoS2Ns 上，BBR/AMD-Apt 與MoS2Ns 發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）， BBR/AMD-Apt/MoS2Ns 體系的熒光發(fā)射較BBR/AMD-Apt 減弱（圖4A-d）；在靶標(biāo)AMD 存在的情況下，其適配體與AMD 特異性結(jié)合，形成AMDApt/AMD 復(fù)合物， BBR 嵌入復(fù)合物結(jié)構(gòu)中，由于空間位阻增大， BBR/AMD-Apt/AMD 脫離MoS2Ns 表面，BBR/AMD-Apt/AMD/MoS2Ns 體系的熒光發(fā)射較BBR/AMD-Apt/MoS2Ns 體系明顯增強（圖4A-e）。因此，可通過測定AMD 濃度變化引起的體系熒光強度的改變實現(xiàn)AMD 的靈敏檢測。進一步考察了MoS2Ns 對BBR/AMD-Apt/AMD 體系的影響，如圖4B 所示，當(dāng)MoS2Ns 存在時，體系的熒光強度較未加入MoS2Ns 時變化明顯；對比圖4A 中的曲線b、c 與曲線d、e 可知，加入MoS2Ns 后，體系的熒光強度變化趨勢明顯增大。

2.4 實驗條件的優(yōu)化

2.4.1 緩沖液pH值對體系的影響

緩沖溶液的酸度是影響AMD-Apt/AMD 莖環(huán)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的重要因素?？疾炝薆B 緩沖液的pH 值分別為6.5、7.0、7.4 和8.0 時對BBR/AMD-Apt/AMD/MoS2Ns 傳感體系的影響（見電子版文后支持信息圖S1），結(jié)果表明，在AMD 存在的條件下，隨pH 值增高，傳感體系的熒光強度變化增大，并且在pH=7.4時體系熒光強度變化幅度最大， pHgt;7.4 時，體系的熒光強度變化幅度開始減小。因此，選擇此傳感體系的最佳pH 值為7.4。

2.4.2 BBR濃度的優(yōu)化

BBR 作為傳感體系的熒光探針對檢測體系的性能影響較大。為了確定其最佳濃度，首先考察了BB 緩沖溶液中不同濃度的BBR 的熒光強度（電子版文后支持信息圖S2A），可見隨著BBR 濃度增大，溶液的熒光強度增強，并且BBR 濃度與其熒光強度在5～40 μmol/L 濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系（電子版文后支持信息圖S2B 插圖）?？疾炝薆BR 濃度對BBR/AMD-Apt/AMD/MoS2Ns 體系熒光強度的影響（電子版文后支持信息圖S2C），當(dāng)BBR 濃度為20 μmol/L 時，與10、30 和50 μmol/L 時相比，隨AMD 濃度增大，傳感體系的熒光強度變化幅度增加明顯，結(jié)合BBR 的檢測范圍，選擇BBR 的最佳濃度為20 μmol/L。

2.4.3 核酸適配體濃度的優(yōu)化

適配體濃度也是影響傳感體系靈敏度的重要因素?？疾炝薃MD-Apt 濃度為0～200 nmol/L 范圍內(nèi)BBR/AMD-Apt 體系的熒光發(fā)射強度（電子版文后支持信息圖S3A）， BBR/AMD-Apt 體系的熒光發(fā)射隨AMD-Apt 濃度增大而增強，這歸因于BBR 與AMD-Apt 的相互作用。當(dāng)AMD-Apt 濃度高于187.5 nmol/L時， BBR 與AMD-Apt 的作用達到飽和（電子版文后支持信息圖S3B 散點圖）。AMD-Apt 濃度與BBR/AMD-Apt 熒光強度的線性關(guān)系曲線見電子版文后支持信息圖S3B 插圖（0～187.5 nmol/L， R2=0.9990）。考察了AMD 濃度為0、0.25、1.25 和1.88 μmol/L 時，不同濃度AMD-Apt（60、100、125、150 和187.5 nmol/L）對BBR/AMD-Apt/AMD/MoS2Ns 體系熒光強度的影響（電子版文后支持信息圖S3C）。當(dāng)AMD-Apt 濃度為125 nmol/L 時，體系的熒光強度變化最大，表明在此濃度條件下檢測AMD 的靈敏度較高。因此，選擇核酸適配體的最佳濃度為125 nmol/L。

2.4.4 MoS2Ns濃度的優(yōu)化

MoS2Ns 通過與核酸堿基之間的范德華力吸附單鏈DNA，依據(jù)FRET 原理， MoS2Ns 表現(xiàn)出優(yōu)異的熒光猝滅能力[26-27]。MoS2Ns 在AMD 的檢測體系中作為信號放大材料，用于增大檢測信號的信噪比，其濃度對傳感體系的靈敏度有較大影響?？疾炝瞬煌瑵舛鹊腗oS2Ns（10、20、30、40、50 和60 μg/mL）對檢測體系的熒光猝滅能力（電子版文后支持信息圖S4），結(jié)果表明，傳感體系的熒光猝滅率隨MoS2Ns 濃度增大而增大，當(dāng)MoS2Ns 濃度大于40 μg/mL 時，體系的熒光強度達到穩(wěn)定。因此，選擇MoS2Ns 的最佳濃度為40 μg/mL。

2.4.5 AMD與適配體以及BBR與復(fù)合物孵育時間的影響

AMD 與其適配體的孵育時間影響兩者的結(jié)合效率，從而影響檢測體系的傳感性能?？疾炝薃MD 與其適配體分別孵育0、10、20 和30 min 后體系的熒光強度變化趨勢（電子版文后支持信息圖S5A），可見在20 min 以內(nèi)，隨著孵育時間延長，體系的熒光強度呈增加趨勢。這是由于隨著孵育時間延長， AMD/AMD-Apt 復(fù)合物增多，從而導(dǎo)致BBR/AMD-Apt/AMD/MoS2Ns 體系的熒光強度增大。在孵育時間為20 min 時，體系的熒光強度最大；當(dāng)孵育時間大于20 min 時，體系的熒光強度反而逐漸減小。因此，選擇AMD 與AMD-Apt 的孵育時間為20 min。考察了熒光探針與AMD/AMD-Apt 復(fù)合物的孵育時間對體系熒光強度的影響（電子版文后支持信息圖S5B），在0～20 min 范圍內(nèi)， BBR/AMD-Apt/AMD/MoS2Ns 體系的熒光強度隨孵育時間延長而增大；當(dāng)孵育時間超過20 min 后，體系的熒光強度反而呈下降趨勢，這可能是由于部分BBR 堿從AMD/AMD-Apt 復(fù)合物中解離出來。因此，選擇BBR 與AMD/AMD-Apt 的孵育時間為20 min。

2.5 截短適配體親和力研究

在最佳實驗條件下，對比了AMD 原適配體（J）和截短適配體（J-1～J-9）的親和力。采用熒光測定方法，在相同濃度的條件下，檢測體系熒光強度的變化。圖5 中F-F0 表示加入AMD 后BBR/AMD-Apt/AMD/MoS2Ns 體系熒光強度的變化值， F0 為空白熒光強度值， F 為加入AMD 后BBR/AMD-Apt/AMD/MoS2Ns 體系熒光強度值。由圖5 可見，截短適配體J-3、J-4 和J-5 在加入AMD 后， BBR/AMD-Apt/AMD/MoS2Ns 體系熒光強度的變化值呈負(fù)值，可見J-3、J-4 和J-5 與AMD 結(jié)合較差， J、J-1、J-2、J-6～J-9 在加入AMD后，傳感體系的熒光強度變化值為0.008-0.185，可見J、J-1、J-2、J-6～J-9 均與AMD 有不同程度的親和力。且與J-1、J-6、J-8 和J-9 相比， J、J-2 和J-7 與AMD 有更強的結(jié)合力， J-7 的結(jié)合力最強。此外，為了進一步驗證截短適配體（J-1～J-9）的親和力，考察了不同濃度AMD 原適配體（J）和截短適配體（J-1～J-9）對BBR/AMD-Apt/AMD/MoS2Ns 體系的影響，采用GraphPad Prism 5.0 軟件進行擬合，獲得適配體的Kd 值，結(jié)果見表2，與J-1、J-6、J-8 和J-9 相比， J、J-2 和J-7 的Kd 值更小，表明與AMD 有較強的結(jié)合力，其中J-7 的Kd 值最小即親和力最強， J-3， J-4 和J-5 雖有較小的Kd 值，但擬合相關(guān)系數(shù)（R2）較差，因此與AMD不具有有效的親和力，實驗結(jié)果與圖5 得到的結(jié)果一致。J-7 比原適配體J 具有更好的親和力，其原因可能是經(jīng)5′端裁剪堿基對后，堿基數(shù)目減少，減小了適配體與靶標(biāo)結(jié)合的空間位阻，使得截短適配體J-7 與原適配體相比對靶標(biāo)AMD 具有更好的結(jié)合能力。因此， J、J-2 和J-7 被用于后續(xù)的特異性研究。

2.6 截短適配體特異性研究

考察了AMD 原長適配體J 和親和力較高的截短適配體J-2 和J-7 的特異性。將AMD 及其類似物金剛乙胺、嗎啉雙胍、阿昔洛韋及利巴韋林依照本體系的熒光測定方法操作，在相同條件下反應(yīng)，檢測體系熒光強度的變化（類似物濃度為AMD 濃度的100 倍）。如圖6 所示， J-7 的熒光強度變化值較J 和J-2明顯增大，可見截短后獲得的適配體J-7 對AMD 有較好的選擇性。綜上所述， J-7 具有較好的特異性和親和力，本研究選擇其進行后續(xù)AMD 檢測。

2.7 AMD的熒光檢測

在最佳實驗條件下，以J-7 適配體作為識別探針，采用BBR/J-7/AMD/MoS2Ns 體系檢測AMD 的熒光響應(yīng)。由圖7A 可見，隨著AMD 濃度增大， BBR/J-7/AMD/MoS2Ns 體系的熒光強度逐漸增強，這是由于AMD 可誘導(dǎo)J-7 形成穩(wěn)定的莖環(huán)結(jié)構(gòu)，改變了BBR 存在的微環(huán)境，從而導(dǎo)致體系熒光信號增強。當(dāng)AMD 的濃度大于1173 ng/mL 時，體系的熒光強度不再隨AMD 濃度增加而增大。BBR/J-7/AMD/MoS2Ns體系的熒光強度變化（F–F0）與AMD 濃度在0.23～1173 ng/mL 范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系（R2=0.9973），線性關(guān)系曲線見圖7B，檢出限為0.11 ng/mL（3σ）。與報道的AMD 檢測方法相比（表3），本方法具有較好的檢測靈敏度和較寬的線性范圍。

考察了此傳感體系檢測AMD 的重復(fù)性和穩(wěn)定性。在線性范圍內(nèi)配制3 個濃度水平（0.5、500 和800 ng/mL）的AMD 溶液，重復(fù)檢測體系的熒光強度的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）lt;5.0% （n=6），表明本方法具有良好的重復(fù)性和精密度?？疾炝薆BR/J-7/AMD/MoS2Ns 體系的穩(wěn)定性，將體系于4 ℃儲存7 d 后，檢測熒光強度結(jié)果的RSD≤7.5%，表明此檢測體系具有較好的穩(wěn)定性。

2.8 實際樣品檢測

為評估所構(gòu)建的截短適配體傳感體系用于實際樣品中AMD 檢測的可行性，將其用于牛奶、酸奶和大鼠血清中AMD 濃度的檢測。分別將不同濃度的AMD 標(biāo)準(zhǔn)溶液加入到牛奶、酸奶和大鼠血清溶液中，進行加標(biāo)回收實驗。如表4 所示，在牛奶、酸奶和大鼠血清樣品中， 3 個濃度水平的AMD 的加標(biāo)回收率為86.6%～108.2%， RSDlt;8.0%，表明本傳感體系可用于牛奶、酸奶和大鼠血清中AMD 濃度的準(zhǔn)確檢測。將陽性樣品[34]采用LC-MS 方法和本方法檢測結(jié)果進行對比，結(jié)果如表5 所示，兩種方法測定AMD樣品的結(jié)果一致，進一步證實了本研究構(gòu)建的截短適配體-MoS2Ns 免標(biāo)記熒光傳感體系具有較好的準(zhǔn)確性，可用于實際樣品中AMD 的靈敏檢測。

3 結(jié)論

通過對AMD 的原適配體序列進行剪裁，開發(fā)了截短核酸適配體，結(jié)合MoS2Ns 信號放大技術(shù)實現(xiàn)了對AMD 的靈敏檢測。通過保留AMD 原適配體的莖環(huán)部分，采用對其3′端和5′端及兩端堿基同時裁剪的方式，獲得9 條截短后的核酸適配體。在最佳實驗條件下，系統(tǒng)地研究了截短適配體的親和力和特異性，并對原適配體與截短適配體進行比較，獲得了對AMD 有較高親和力和較好特異性的截短適配體J-7。以截短適配體-MoS2Ns 信號增強免標(biāo)記熒光法測定AMD，檢出限為0.11 ng/mL，線性范圍為0.23～1173 ng/mL。將此傳感體系應(yīng)用于牛奶、酸奶及大鼠血清中AMD 的檢測，回收率為86.6%～108.2%。

本研究開發(fā)的截短適配體J-7 的親和力與特異性均優(yōu)于原適配體，在食品中AMD 殘留的檢測中具有較大的應(yīng)用潛力。此截短適配體策略也可用于設(shè)計其它基于不同機理的AMD 檢測傳感器。本研究為其它長序列適配體的截短提供了參考依據(jù)，也為復(fù)雜基質(zhì)中AMD 殘留的檢測提供了更靈敏的分析方法。

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支持信息

基于截短適配體-二硫化鉬納米片信號增強免標(biāo)記熒光檢測金剛烷胺

蘭藝鳳 侯博雅 尉志文 劉文 張潮 左雅慧 贠克明

國家自然科學(xué)基金項目（No. 82202083）和山西省自然科學(xué)基金項目（No. 20210302124290）資助。