【摘 要】目的：研究內(nèi)在過表達miR-31及其下游靶基因Sfn、SuFu在咪喹莫特誘導(dǎo)的小鼠銀屑病模型發(fā)生發(fā)展中的作用。方法：從文獻及PubMed收集與銀屑病相關(guān)基因，使用Target Scan Human數(shù)據(jù)庫預(yù)測miR-31靶基因。使用咪喹莫特乳膏對野生型FVB小鼠和miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠進行銀屑病造模，每日采集造模小鼠背部變化圖像，隨后使用PASI評分評價小鼠銀屑病樣情況。HE染色觀察組織形態(tài)學(xué)變化。取0 d、3 d、7 d模型小鼠的背部皮膚，隨后進行RT-PCR檢測miR-31及其下游靶基因mRNAs的表達，篩選出2個miR-31靶基因，并對篩選靶基因進行免疫熒光及Western blot檢測分析。結(jié)果：Target Scan Human數(shù)據(jù)庫預(yù)測出8個miR-31下游靶基因，經(jīng)熒光定量PCR篩選出2個與銀屑病相關(guān)靶基因Sfn、SuFu。咪喹莫特誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生銀屑病樣癥狀，表現(xiàn)為背部出現(xiàn)紅斑、銀白鱗屑，表皮增厚等，實驗結(jié)果顯示miR-31實驗組較野生型FVB實驗組銀屑病樣癥狀輕，HE染色切片同樣證實此情況。RT-PCR檢測3 d、7 d時miR-31，Sfn和SuFu的表達，結(jié)果顯示野生型FVB小鼠miR-31的表達均升高，而miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠miR-31的表達卻降低，其靶基因Sfn、SuFu均出現(xiàn)相反情況，免疫熒光及western blot結(jié)果均與PCR結(jié)果一致。結(jié)論：在銀屑病動物模型中，內(nèi)在過表達miR-31的皮膚，其銀屑病樣癥狀較弱，它可能聯(lián)合機體內(nèi)與銀屑病相關(guān)的器官通過內(nèi)在過表達miR-31的調(diào)控作用而減弱銀屑病嚴重程度。Sfn、SuFu作為miR-31下游靶基因，可能在銀屑病的發(fā)病過程中起抑制作用。

【關(guān)鍵詞】微小RNA-31；銀屑??；絲氨酸/蘇氨酸激酶Fused抑制物；分層蛋白

【中圖分類號】R758.63 【文獻標志碼】A 【收稿日期】2023-12-01

銀屑病是一種慢性復(fù)發(fā)性炎癥性皮膚病，臨床表現(xiàn)為皮膚紅斑、大量銀白色鱗屑覆蓋及表皮增厚，病理表現(xiàn)為表皮異常增生伴隨顆粒層的消失、角質(zhì)形成細胞的異常分化及大量炎性細胞浸潤等[1-2]。目前尚無有效治療銀屑病的藥物和方法。近年來隨著對microRNAs（miRNAs）研究的不斷發(fā)展，越來越多的miRNAs在銀屑病中被發(fā)現(xiàn)[3]。MiR?NAs 是一類非編碼單鏈小分子RNA，通過與靶mRNA完全或不完全結(jié)合，使其降解或抑制其轉(zhuǎn)錄，從而在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因的表達[4]。MiRNAs在調(diào)節(jié)個體生長發(fā)育，細胞增殖、分化、凋亡及包括腫瘤在內(nèi)的多種疾病的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。有研究使用基因芯片技術(shù)篩選銀屑病皮損組織與健康人皮膚組織差異性表達的miRNAs，結(jié)果顯示miR-31 表達上調(diào)且最為明顯[5]。但究竟是過表達的miR-31引起銀屑病的發(fā)生，還是機體因銀屑病的發(fā)展而使miR-31過表達，這并不是很明確。

本課題組之前構(gòu)建了miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠，且miR-31在各組織器官中穩(wěn)定過表達。在此基礎(chǔ)上，本研究使用咪喹莫特乳膏對miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型FVB小鼠進行銀屑病模型的制作，并形成對比。意在研究內(nèi)在過表達的miR-31在銀屑病的發(fā)生發(fā)展過程中所起的作用。為了進一步研究miR-31在銀屑病進程中所發(fā)揮的作用，本研究篩選出2個miR-31下游靶基因Sfn和SuFu。SuFu為Hedgehog信號通路重要的抑制因子，先前研究表明Hedgehog信號通路在銀屑病中是被激活的，而此通路的激活能夠誘導(dǎo)角質(zhì)形成細胞的過度增生[6-7]。Sfn是一種具有高同源性的14-3-3蛋白家族成員，在所有真核生物體中都表達的調(diào)控分子，其參與細胞周期調(diào)控，抑制細胞進入增殖周期，阻止分裂，促進終末分化，最終誘導(dǎo)其凋亡[8-10]。

因此，本研究利用miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠，研究內(nèi)在過表達miR-31在銀屑病動物模型中所發(fā)揮的作用，探究miR-31及其靶基因Sfn、SuFu如何發(fā)揮調(diào)控作用而影響銀屑病的進程。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 清潔級FVB小鼠64只，3～4個月齡，體質(zhì)量25～30 g，購于山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心[編號：SCXK（晉）2019-0004]，飼養(yǎng)于山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心屏障環(huán)境中[編號：SYXK（晉）2019-0007]，飼養(yǎng)期間給予小鼠標準飼料及潔凈飲用水（均由山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供）。實驗小鼠的飼養(yǎng)過程和其他實驗操作均符合實驗動物倫理學(xué)要求以及中華人民共和國《實驗動物管理條例》飼養(yǎng)環(huán)境：晝夜各半交替，濕度恒定，溫度20～25 ℃。本研究得到山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物倫理委員會的審查批準（倫理審批號：KQDW-2022-007）。采用隨機分組方式分別將miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠（n=32）和野生型FVB小鼠（n=32）分為0 d（n=8），3 d（n=12），7 d（n=12），實驗分組見表1。

1.1.2 實驗試劑與儀器 實時熒光定量PCR 系統(tǒng)（ThermoFisher Scientific，美國），石蠟切片機（Leica RM 2245，德國），熒光顯微鏡（OLYMPUS，日本），電泳儀（Bio-Rad，美國），轉(zhuǎn)膜儀（Bio-Rad，美國），高靈敏度化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)（Bio-Rad，美國）。咪喹莫特乳膏46 mg（四川明欣藥業(yè)有限責任公司），miRNA Isolation Kit（Life technologies），Trizol（Life technolo?gies），熒光定量試劑盒（TaqMan MicroRNA Assay，ABI），一抗（Rabbit Anti-14-3-3 sigma，ab151504，abcam；Rabbit Anti-Suppressor of Fused，ab28083，abcam），二抗（FITC-Goat Anti-Rabbit IgG，BA1105，Boster；Goat Anti-Rabbit IgG，BA1054，Boster），HE 染色試劑盒（G1120，Solarbio），hoechst（C0020，Solarbio）。

1.2 方法

1.2.1 收集基因 預(yù)測miR-31 靶基因經(jīng)文獻閱讀和PubMed 收集相關(guān)基因40 余個。與細胞增殖相關(guān)：IRF-4、PAK1、CD47；與細胞分化相關(guān)：Sfn、SuFu、RUNX3；與調(diào)控轉(zhuǎn)錄相關(guān)：c/EBPα、KGF等。每個基因功能多樣，有的功能相互交叉，然后利用Target Scan Human數(shù)據(jù)庫預(yù)測miR-31靶基因。

1.2.2 銀屑病模型制作 將實驗組小鼠用1%的戊巴比妥鈉（50 mg/kg）麻醉，用動物推毛器將小鼠背部毛發(fā)剔除，形成一個2 cm×3 cm 的暴露區(qū)域，連續(xù)7 d 在暴露區(qū)域涂抹5%咪喹莫特乳膏46 mg，采用數(shù)碼照相的方式每天采集小鼠背部變化照片。

1.2.3 PASI評分 小鼠銀屑病樣皮損面積和疾病嚴重程度（psoriasis area and severity index，PASI）評分，依據(jù)PASI評分標準，對小鼠皮損處紅斑（erythema）、鱗屑（scales）及浸潤增厚程度（thickness）進行評分，然后匯總相加得到總分（cumu?lative scores）。對各組小鼠進行評分繪制趨勢線，評估各組小鼠皮損的變化情況。PASI評分標準按照疾病嚴重程度分為0級（無），1級（輕度），2級（中度），3級（重度），4級（極重度）。不同的嚴重程度對應(yīng)不同的癥狀，具體評分標準見表2。

1.2.4 miR-31 和預(yù)測靶基因mRNA 的表達量檢測 取100 mg 左右背部皮膚剪碎研磨，分別用miRNA Isolation Kit和Trizol提取miRNAs和總RNA，隨后經(jīng)RT-PCR檢測miR-31和預(yù)測靶基因mRNA的表達，引物序列見表3。

成熟miR-31 序列：AGGCAAGAUGCUGGCAUAGCUG。miR-31反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)步驟：100 nmol/L dNTP 0.15 μL、逆轉(zhuǎn)錄酶 1 μL、10×逆轉(zhuǎn)錄緩沖液 1.5 μL、RNase抑制劑0.19 μL、無核酸酶水 4.16 μL、RNA 5 μL、反轉(zhuǎn)錄引物 3 μL，反應(yīng)體系：15 μL。反應(yīng)程序：16 ℃ 30 min、42 ℃ 30 min、85 ℃ 5 min。熒光定量PCR 反應(yīng)步驟：Taqman Small RNA Assay 1 μL、cDNA 1.33 μL、Taqman Universal PCR預(yù)混液 10 μL、無核酸酶水 7.67 μL，反應(yīng)體系：20 μL。反應(yīng)程序：50 ℃ 2 min、95 ℃ 10 min、95 ℃ 15 s、60 ℃ 1 min，后2 個循環(huán)重復(fù)40次。

靶基因RT 反應(yīng)步驟：RNA 1 μL、oligo（dt）引物 1 μL、Rnase free water 4 μL，70 ℃ 10 min后冰上急冷2 min以上。模板引物變性溶液6 μL、5×M-MLV緩沖液2 μL、dNTP預(yù)混液0.5 μL、Rnase抑制劑 0.25 μL、M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶0.25 μL、無核酸酶水1 μL，反應(yīng)體系：10 μL。反應(yīng)程序：42 ℃ 1 h、70 ℃ 15 min。熒光定量PCR反應(yīng)步驟：SBRY Green 10 μL、引物0.6 μL、cDNA 1 μL、無核酸酶水8.4 μL，反應(yīng)體系：20 μL。反應(yīng)程序：50 ℃ 2 min、95 ℃ 10 min、95 ℃ 15 s、60 ℃ 1 min，后2個循環(huán)重復(fù)40次。

1.2.5 HE染色及免疫熒光染色 皮膚取材后立即置于4%多聚甲醛進行固定，常規(guī)步驟脫水包埋。將包埋好的蠟塊置于切片機上，5 μm厚度連續(xù)切片，經(jīng)展片、撈片、烘片后待用。HE染色：切片脫蠟，蘇木精3 min，蒸餾水沖洗，分化液30 s，蒸餾水浸泡15 min，伊紅染液2 min，蒸餾水沖洗，常規(guī)脫水透明，中性樹脂封片后鏡下觀察。免疫熒光染色：切片脫蠟后進行抗原熱修復(fù)，7％山羊血清室溫封閉30 min，一抗4 ℃過夜孵育，PBS清洗后二抗室溫避光孵育2 h，hoechst復(fù)染后熒光顯微鏡下觀察。

1.2.6 Western blot 100 mg 皮膚組織加入增強型RIPA 裂解液和1％ PMSF 冰上充分研磨，4 ℃、12 000 r/min 離心20 min后分裝收集蛋白，經(jīng)BCA蛋白濃度測定后-80 ℃保存待用。依蛋白分子量配置適宜的分離膠和5％的濃縮膠，依各組蛋白濃度20 μg 等質(zhì)量上樣，按marker 條帶切下目的條帶，轉(zhuǎn)膜1 h，5％脫脂奶粉室溫封閉1 h，適宜濃度一抗4 ℃孵育過夜，TBST 清洗后適宜濃度二抗室溫孵育2 h，TBST清洗后拍照保存。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件和GraphPad Prism 6軟件處理。在經(jīng)過正態(tài)性檢驗及方差齊性驗證之后，滿足正態(tài)分布和方差齊的計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示。2組組間比較采用獨立樣本t 檢驗分析；多組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用LSD-t 檢驗；組內(nèi)不同時間點比較進行重復(fù)測量資料的方差分析。檢驗水準α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1 小鼠銀屑病動物模型皮損形態(tài)學(xué)變化及PASI評分

咪喹莫特誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生銀屑病樣癥狀。一般從第3 天開始出現(xiàn)少量紅斑、細微銀白鱗屑、輕微皮損褶皺，隨后癥狀逐漸加重，連續(xù)涂藥5～8 d（默認第7天為最嚴重時期）出現(xiàn)明顯銀屑病樣癥狀，此后鱗屑開始脫落，癥狀減弱。依圖可見野生型FVB實驗組小鼠第3天出現(xiàn)銀屑病樣癥狀，第4天出現(xiàn)片狀銀白鱗屑，第5天達到最嚴重期，可見層狀銀白色鱗屑覆蓋，隨著時間的推移，鱗屑脫落，癥狀減弱。MiR-31轉(zhuǎn)基因小鼠第3天同樣出現(xiàn)銀屑病樣癥狀，但較普通FVB小鼠較輕，隨著時間的推移，銀白鱗屑少量增加、輕微皮損褶皺，但不及普通FVB小鼠的銀屑病癥狀（圖1A）。PASI評分趨勢線同樣反映出2組實驗小鼠皮損變化對比情況（圖1B）。HE染色切片顯示，第0天實驗組小鼠皮膚表皮及細胞形態(tài)正常，2組并無差異。第7天時，野生型FVB實驗組小鼠表皮層明顯增厚，基底層角化細胞異常增生，膜脊延長，真皮層毛細血管擴張、炎性細胞浸潤；miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠癥狀則相對較輕（圖1C）。另外在第7天時，本研究解剖發(fā)現(xiàn)與空白對照組相比，實驗組中兩組小鼠脾臟均明顯淤血腫大，而且癥狀越嚴重的野生型FVB小鼠，脾臟淤血腫大程度越重（圖1D）。說明銀屑病的進展不僅會引起表皮癥狀，還會累及脾臟等其他器官。

2.2 篩選Sfn、SuFu

Taget Scan Human 數(shù)據(jù)庫預(yù)測出8 個miR-31 靶基因Bcl-XL、cebpα、Xiap、Irf4、Sfn、SuFu、Tnip1、Pak1（圖3A）。熒光定量PCR結(jié)果顯示，造模7 d時，野生型FVB小鼠miR-31的表達升高，而miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠miR-31的表達則降低（圖2B）。依據(jù)miRNA 與靶基因的表達關(guān)系，Bcl-XL、cebpα、Irf4、Pak1、Sfn、SuFu符合miR-31下游靶基因變化趨勢（圖2C）。經(jīng)文獻閱讀及基因功能分析，挑選出Sfn（F=17.108，P=0.014）、SuFu（F=12.395，P=0.024）2個下游靶基因做進一步研究（圖2A）。

2.3 miR-31、Sfn、SuFu在銀屑病進程中的動態(tài)變化

為了更好地研究miR-31、Sfn、SuFu在銀屑病中的動態(tài)變化情況，本研究在銀屑病造模過程中取第3天（剛出現(xiàn)銀屑病癥狀）皮膚進行檢測。RT-PCR結(jié)果顯示，第3天時，野生型FVB小鼠miR-31的表達最高（圖3A），Sfn、SuFu的表達均降低（圖3B）；miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠miR-31的表達最低（圖3A），Sfn、SuFu的表達均升高（圖3B）?？傮w來說在銀屑病樣癥狀開始出現(xiàn)到最嚴重時期這個時間段，普通FVB 小鼠miR-31的表達升高（F=19.594，P=0.011），而miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠miR-31的表達則降低（F=32.260，P=0.005），Sfn和SuFu的表達均符合靶基因變化趨勢。

2.4 2組之間miR-31、Sfn、SuFu對比

綜上結(jié)果表明，野生型FVB小鼠銀屑病癥狀重于miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠，miR-31的表達量影響著銀屑病的嚴重程度。為了更好地說明2 個實驗組的疾病變化情況，在0 d、3 d、7 d時，本研究將miR-31、Sfn、SuFu的表達進行組間對比。從結(jié)果可以看出，0 d時，miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠miR-31的表達明顯高于野生型FVB小鼠（F=54.431，P=0.002），3 d、7 d時，miR-31 轉(zhuǎn)基因小鼠miR-31 的表達低于野生型FVB 小鼠，Sfn、SuFu的表達則與之相反（圖4A）。免疫熒光結(jié)果顯示，在銀屑病癥狀最嚴重時期，野生型FVB小鼠表皮層增厚明顯，角質(zhì)形成細胞增生異常，但基底層下Sfn、SuFu陽性細胞明顯少于miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠（圖4B），Western blot結(jié)果（圖4C）與熒光定量PCR結(jié)果一致。

3 討 論

銀屑病是臨床上常見的一種慢性復(fù)發(fā)性炎癥性皮膚病，對于銀屑病發(fā)病機制的研究也一直是研究重點，但到目前為止，其發(fā)病機制尚未明確。目前認為銀屑病是由多種因素相互作用而形成的一種多基因遺傳病[2]，其中遺傳因素、環(huán)境因素和免疫因素起主要作用。在銀屑病發(fā)生發(fā)展的過程中，多種細胞（角質(zhì)形成細胞、免疫細胞、血管內(nèi)皮細胞等）、趨化因子、細胞因子、多條細胞內(nèi)傳導(dǎo)通路共同參與[11]，因此形成了銀屑病的疾病復(fù)雜性。

近年來，miRNAs成為研究熱點，隨著研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)多種miRNAs在皮膚的生理病理過程中都發(fā)揮著非常重要的作用。MiR-31在銀屑病皮損組織中表達異常已經(jīng)得到證實，這也意味著miR-31可能與銀屑病的發(fā)生發(fā)展有著密切關(guān)系。Xu N等[12]證實在銀屑病中，miR-31過表達并通過調(diào)控炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生和白細胞浸潤皮膚而加重銀屑病的炎癥。

在已有miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠的基礎(chǔ)上，本研究使用miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠與野生型FVB小鼠進行銀屑病模型制作，通過對造模圖片和HE染色切片的觀察可以看出，野生型FVB 小鼠銀屑病癥狀重于miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠。熒光定量PCR 結(jié)果顯示，從銀屑病開始出現(xiàn)到最嚴重這個時間段，野生型FVB小鼠miR-31 的表達升高，而miR-31 轉(zhuǎn)基因小鼠miR-31的表達降低。但為何miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠在銀屑病過程中出現(xiàn)miR-31表達顯著降低的現(xiàn)象，這是本研究在實驗過程中發(fā)現(xiàn)的有趣的現(xiàn)象，表明內(nèi)在過表達的miR-31在銀屑病的發(fā)生發(fā)展過程中可能會緩解銀屑病的嚴重程度。另外本研究在取材時發(fā)現(xiàn)，造模小鼠的脾臟、肝臟等出現(xiàn)明顯的淤血腫大現(xiàn)象，尤其脾臟腫大增厚，顏色加深，這說明銀屑病的癥狀不僅僅是表現(xiàn)在皮膚的單一情況。Balato N 等[13] 認為IL-1β，IL-6，C-reactive protein，E-selectin，TNF-α等血清炎癥標記物的升高使銀屑病從皮膚性疾病上升為系統(tǒng)性疾病。銀屑病并發(fā)銀屑病性關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸道疾病、心臟代謝紊亂、高血壓、糖尿病、脂肪肝等疾病也都有報道[14-17]。Balato N等[13]認為銀屑病中脾臟體積的增大并不是一種并發(fā)癥，而是免疫系統(tǒng)對慢性炎癥狀態(tài)的一種應(yīng)答。而脾臟是人體最大的淋巴器官，在機體免疫功能中起非常重要作用。Dai RJ等[18]認為miR-31在系統(tǒng)性紅斑狼瘡模型的脾臟細胞中過表達。而銀屑病和系統(tǒng)性紅斑狼瘡的發(fā)病都與自身免疫功能紊亂、遺傳等諸多因素有關(guān)。所以，脾臟可能在銀屑病等自身免疫性炎癥性疾病中起到重要作用。結(jié)合本研究實驗結(jié)果，本研究推測皮膚聯(lián)合脾臟內(nèi)在過表達miR-31 會對銀屑病的癥狀起到抑制作用。這說明銀屑病的發(fā)生發(fā)展會引起受累組織器官的miR-31 過表達，但若受累器官內(nèi)在過表達miR-31可能會因其調(diào)控而減弱疾病的嚴重程度。

既然內(nèi)在過表達的miR-31會減弱銀屑病的嚴重程度，那么miR-31是怎樣發(fā)揮其調(diào)控作用？經(jīng)過對其靶基因Sfn、SuFu的檢測分析。Sfn作為一種細胞周期的調(diào)控分子，能夠抑制細胞增殖，Sfn蛋白的表達受多方面調(diào)控，p53是Sfn基因的主要調(diào)控因子，去磷酸化的p53可激活Sfn的表達，進而抑制細胞有絲分裂。此外，Sfn的激活可發(fā)揮其正反饋作用，增加p53穩(wěn)定性和轉(zhuǎn)錄活性[19]。P53作為一種磷蛋白，表明其具有轉(zhuǎn)錄因子樣性質(zhì)[20-21]。P53的免疫反應(yīng)性已經(jīng)在多種免疫性皮膚病中被發(fā)現(xiàn)，比如：銀屑病、慢性皮炎、紅斑狼瘡等[22]。Moorchung N等[23]認為p53在銀屑病中扮演者重要角色。結(jié)合熒光定量PCR實驗結(jié)果，在兩組銀屑病模型中，Sfn在野生型FVB小鼠中低表達，在miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠中過表達，結(jié)合銀屑病造模圖片可知，Sfn過表達可減輕銀屑病癥狀。SuFu為Hedgehog信號通路重要的抑制因子，它通過降解Hh通路配體而發(fā)揮抑制作用。Shh是皮膚中主要的Hh配體[24]，Shh能促進角質(zhì)形成細胞的增殖、遷移，抑制其凋亡，Hh信號通路通過其配體Shh 的激活在銀屑病中發(fā)揮作用[25-26]。結(jié)合熒光定量PCR實驗結(jié)果，SuFu同樣在野生型FVB小鼠中低表達，在miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠中過表達，過表達的SuFu通過降解Shh而抑制Hh信號通路的激活，從而抑制角質(zhì)形成細胞的過度增殖，減輕銀屑病癥狀，這與造模圖片結(jié)果相符。因此，通過對miR-31及其下游靶基因Sfn、SuFu的檢測分析。本研究認為miR-31可能通過調(diào)控Sfn或SuFu這兩條通路，在減輕銀屑病癥狀方面發(fā)揮作用。

綜上所述，過表達的miR-31會減弱銀屑病癥狀，而通過動物實驗發(fā)現(xiàn)，內(nèi)在過表達miR-31的轉(zhuǎn)基因小鼠銀屑病癥狀反而較野生型FVB小鼠弱，經(jīng)過檢測發(fā)現(xiàn)，miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠miR-31的表達是明顯降低的，在實驗過程中，本研究還發(fā)現(xiàn)脾臟淤血腫大明顯，這說明銀屑病是一種系統(tǒng)性疾病。所以本研究推測，皮膚聯(lián)合脾臟內(nèi)在過表達miR-31可能會減弱銀屑病嚴重程度，miR-31的調(diào)控作用不僅僅作用在皮膚，聯(lián)合的調(diào)控作用也是系統(tǒng)性疾病應(yīng)該考慮的方向。作為miR-31 下游靶基因，Sfn、SuFu同樣在miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠皮膚中過表達并可減弱銀屑病的嚴重程度，但miR-31、Sfn和SuFu究竟如何調(diào)控銀屑病的發(fā)生發(fā)展，還需進一步研究。本實驗通過對內(nèi)在過表達的miR-31在銀屑病發(fā)生發(fā)展過程中的研究，發(fā)現(xiàn)在系統(tǒng)性疾病中，全面考慮與疾病相關(guān)的組織器官，可能會為疾病的發(fā)病機制研究和治療提供新的方向。

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（責任編輯：李青穎）