裴曉陽 胡雪松 鄺碧娟 劉 偉 顏 雯 閔 敏

（深圳市第四人民醫(yī)院心內(nèi)科，廣東 深圳 518033）

心房顫動（房顫）是臨床上最常見的心律失常，房顫本身及其引起的并發(fā)癥，如心力衰竭、血栓栓塞等嚴重威脅著人類健康。房顫發(fā)生的電生理機制包括異位局灶的觸發(fā)作用和心房內(nèi)存在折返發(fā)生的基質(zhì)兩個方面。此外，炎癥在房顫的發(fā)生過程中起重要作用。巨噬細胞移動抑制因子（macrophage migration inhibitory factor，MIF）是集細胞因子、生長因子、激素和酶特性于一身的多效能蛋白分子，MIF高度保守，在多種急慢性炎癥性疾病中發(fā)揮多種免疫功能。本文主要通過觀察非瓣膜性心房顫動（NVAF）患者血清MIF的水平，探討非瓣膜性心房顫動發(fā)生的可能機制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇在深圳市第四人民醫(yī)院心內(nèi)科住院診治確診的非瓣膜性房顫患者50例為房顫組，其中男32例，女18例，平均年齡（64.5±7.3）歲；正常對照組50例，男28例，女22例，平均年齡（63.9±8.1）歲。所有研究者均行體格檢查，檢查甲狀腺功能、血糖、血脂、肝腎功能等，行常規(guī)心電圖、動態(tài)心電圖和心臟超聲檢查及胸片檢查。并停用血管緊張素受體阻滯劑（ARB）、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（ACEI）等可能對MIF有影響的藥物。

1.2 血清MIF水平檢測方法

所有研究對象于清晨抽取空腹靜脈血5mL于干燥管中，室溫血液自然凝固10～20min，2000轉(zhuǎn)/分，離心20min，仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。分離出的血清置于-80℃超低溫冰箱以備檢測血清人巨噬細胞移動抑制因子的濃度。

采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）測定血清MIF水平，檢測步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。實驗前20min將試劑盒和血漿標本分別從4℃、-80℃冰箱中取出，平衡至室溫。將濃縮洗滌液用蒸餾水倍比稀釋，除空白孔外，分別將不同濃度標準品/標本（50μL/孔）加入相應孔中。封住反應孔，室溫（20～25℃）、（500±50）rpm孵育2h。加入酶結(jié)合反應液再次孵育2h，加入顯色劑A、B混合液避光反應30min。每孔加終止液50μL，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15min以內(nèi)進行。

1.3 統(tǒng)計學處理

使用SPSS11.0統(tǒng)計軟件包進行處理，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，兩組間比較t檢驗。計數(shù)資料采用χ2檢驗。兩因素間采用相關(guān)分析。P＜0.05為統(tǒng)計學有差異。

2 結(jié) 果

2.1 房顫組與正常對照組臨床資料指標的比較

在性別、年齡、吸煙，血壓、血脂，血糖等基線資料上，兩組間無統(tǒng)計學意義。但與正常對照組比較，左房直徑（LAD）房顫組較正常對照組增大，（45.25±6.48）mm與（37.19±5.27）mm比較有統(tǒng)計學意義，（P＜0.01）。

2.2 血清MIF水平的比較

房顫組血清MIF水平為（33.18±6.07）ng/mL，明顯高于正常對照組（15.79±5.16）ng/mL水平（P＜0.01）。

2.3 血清MIF水平與左房直徑（LAD）之間的相關(guān)性

血清MMP-2水平與LAD呈正相關(guān)（r=0.421，P＜0.01）。在控制年齡、性別、血壓、MIF水平等因素相互作用的情況下，血清MIF水平與LAD仍呈正相關(guān)（r=0.379，P＜0.01）。

3 討 論

房顫發(fā)生電生理機制之一是通過電重構(gòu)（包括心房有效不應期縮短、傳導延長等）導致心房功能性改變，使心律失常長期存在，即房顫促進房顫發(fā)生。心房的結(jié)構(gòu)重構(gòu)與電重構(gòu)的發(fā)生是平行的。結(jié)構(gòu)重塑包括左房擴張和心房纖維化增加，大量膠原和纖維連接蛋白沉淀，導致心肌細胞彼此分離。心房的異常組織增加使心房內(nèi)更多通路永久存在，成為房顫的電－解剖基質(zhì)，導致房顫的發(fā)生和持續(xù)。本研究亦發(fā)現(xiàn)房顫患者左心房直徑大于正常對照組，與房顫的結(jié)構(gòu)重構(gòu)有關(guān)，擴大的心房能容納更多的折返子波，從而共同促使房顫的發(fā)生和維持[1]。

心房內(nèi)發(fā)生折返的基礎(chǔ)為心房間質(zhì)纖維增生，越來越多的證據(jù)顯示房顫與心房心肌纖維化有關(guān)[2]。心房肌纖維化主要表現(xiàn)在間質(zhì)中膠原沉積增多，各型膠原比例失調(diào)和排列紊亂（特別是Ⅰ/Ⅲ型膠原）[3]?；|(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）是降解細胞外基質(zhì)的主要蛋白水解系統(tǒng)，導致組織纖維化。其中MMP-9參與影響膠原代謝、造成房顫時心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)，和房顫的發(fā)生和維持有密切關(guān)系[4,5]。提示基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）高表達可導致心房重構(gòu)，促進房顫的發(fā)生、發(fā)展。而巨噬細胞游走抑制因子（MIF）是集細胞因子、生長因子、激素和酶特性于一身的多效能蛋白分子。Verschuren L等[6]研究表明，巨噬細胞移動抑制因子（MIF）高水平表達與特異的MMPs如MMP-1、MMP-9和MMP-12的表達是平行的，即MIF可上調(diào)并且與MMPs共同表達。Xiyong Y等[7]的研究表明，人類動脈粥樣硬化斑塊中MIF可明顯上調(diào)MMP-9的表達，在體外平滑肌細胞與巨噬細胞培養(yǎng)實驗中，MIF能顯著上調(diào)MT-MMP1、MMP-2、MMP-9的表達，并呈時間與劑量依賴性。MIF上調(diào)MMPs表達的信號調(diào)節(jié)通路是通過MEK-ERK MAP激酶通路。這些研究均提示MIF可能通過上調(diào)MMPs的水平，降解細胞外基質(zhì)從而導致組織的纖維化。該研究表明心房顫動組血清MIF水平明顯高于正常對照組，提示MIF可能參與了房顫的發(fā)生、發(fā)展，其可能機制之一可能與其上調(diào)MMPs表達有關(guān)。

許多證據(jù)表明炎癥在房顫的病理過程中起作用[8-10]。Chung等[11]研究發(fā)現(xiàn)陣發(fā)性房顫和持續(xù)性房顫患者C反應蛋白（CRP）水平均明顯高于正常對照者，而持續(xù)性房顫患者相對于陣發(fā)性房顫患者有著更高的CRP水平，且CRP水平于房顫當時或持續(xù)24h較恢復竇律后高，提示CRP水平與房顫負荷有關(guān)。Kumagai等[12]在房顫的無菌性心包炎模型中發(fā)現(xiàn)，炎癥可縮短心房組織不應期，延長心房組織的傳導速度，首次驗證了炎癥對心房電生理的影響。而MIF是一種重要的促炎細胞因子，在機體的炎癥和免疫反應中起重要作用[13]。MIF能夠抑制巨噬細胞的游走，促進巨噬細胞在炎癥局部的聚集、增生、激活及分泌一些細胞因子，如通過激活和促進TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IFN-γ等炎性細胞因子表達，NO的釋放，COX-2的誘導而直接促使炎癥的發(fā)生和擴大。本研究表明心房顫動組血清MIF水平明顯高于正常對照組，且房顫組MIF水平與左房直徑水平成正相關(guān)，表明MIF作為是一種促炎細胞因子可能促進左房直徑增大和房顫的形成和維持。

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