陳 麗，魏偉峰

(1.河南省中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院外科，河南 鄭州 450004； 2.河南中醫(yī)學(xué)院，河南 鄭州 450046)

黃連阿膠湯對2型糖尿病小鼠血糖、血脂的影響

陳 麗1，魏偉峰2

(1.河南省中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院外科，河南 鄭州 450004； 2.河南中醫(yī)學(xué)院，河南 鄭州 450046)

目的:通過觀察黃連阿膠湯對2型糖尿病小鼠血糖、血脂的影響,探討黃連阿膠湯對2型糖尿病的治療作用。方法:采用小劑量鏈脲佐菌尾靜脈注射加高脂、高熱量飼料喂養(yǎng)的方法建立2型糖尿病小鼠模型；將模型動物隨機(jī)分為模型對照組、黃連阿膠湯組和二甲雙胍組；另設(shè)正常對照組，以相應(yīng)藥物干預(yù)治療20 d后處理動物，檢測各組動物血清中空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和載脂蛋白A(ApoA)含量。結(jié)果：灌胃第20天，與模型對照組對比，黃連阿膠湯組、二甲雙胍組小鼠體質(zhì)量、ApoA和HDL-C水平增加，F(xiàn)BG、TC、TG和LDL-C水平降低，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)；此二組治療后小鼠體質(zhì)量、FBG較治療前差別亦有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。此外，黃連阿膠湯組與二甲雙胍組治療后以上各指標(biāo)對比，差別均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論:黃連阿膠湯對2型糖尿病小鼠的血糖和血脂有較好的調(diào)節(jié)作用。

黃連阿膠湯/治療應(yīng)用；2型糖尿病/藥效學(xué)；血糖；血脂；動物；小鼠

糖尿病是內(nèi)分泌科常見疾病，其并發(fā)癥與心、腦、腎等密切相關(guān),嚴(yán)重可致殘、致死[1]。如何快速、有效地降低血糖、改善癥狀成為當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究的熱點。與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)相比,中醫(yī)藥治療糖尿病有著獨到的優(yōu)勢和特色。中醫(yī)重視整體觀念,講究陰陽平衡,通過調(diào)理全身氣血陰陽的方法,改善患者癥狀,提高生活質(zhì)量,做到治標(biāo)亦治本。學(xué)者們[2]普遍認(rèn)為,糖尿病屬于中醫(yī)學(xué)“消渴病”范疇,其病機(jī)雖復(fù)雜多變,但仍以“陰虛為本,燥熱為標(biāo)”最為醫(yī)者接受。仝小林[3]認(rèn)為糖尿病雖然氣陰兩虛之證很常見,但往往單純益氣養(yǎng)陰治療效果不佳,尤其是血糖較難控制而不穩(wěn)定者,更要特別警惕隱藏在氣虛陰虛背后的熱。臨床上最常見的是熱耗氣傷陰，治療時宜用清熱之法。黃連阿膠湯具有育陰清熱、交通心腎的特點,取其異病同治之理,在原方基礎(chǔ)上加入烏梅, 與黃連配伍，以苦酸制甜，從而起到降低血糖的功效。本研究觀察了黃連阿膠湯對2型糖尿病小鼠空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和載脂蛋白A(ApoA)含量的影響,探討其對2型糖尿病的治療作用。

1 材料與方法

1.1 動 物

健康清潔級KM小鼠70只，雄性，4～5周，體質(zhì)量(20±2)g，由山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司實驗動物室提供，合格證號0020859，許可證號SCXK(魯)20130001。

1.2 藥品、試劑與儀器

黃連阿膠湯由黃連[4]、阿膠、烏梅、黃芪、玄參、山藥、黃芩、白術(shù)、檳榔組成，由河南省中醫(yī)藥研究院制劑室制備：按臨床劑量100倍取材，所得制劑生藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為2.5 g/mL，高溫消毒后于4 ℃冰箱保存以備用，臨用時配成適當(dāng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)藥液。鹽酸二甲雙胍片，中美施貴寶制藥有限公司產(chǎn)品，批號20133370；9 g/L NaCl注射液，福州海王福藥制藥有限公司產(chǎn)品，批號20140213。實驗用水為二次重蒸水；TC(批號APRM013)、TG(批號ZCJUNM004)、HDL-C(批號QWNB267)、LDL-C(批號CDEC034)、ApoA試劑盒(批號CCKM651)，溫州東甌生物工程有限公司產(chǎn)品；鏈脲佐菌素(STZ)，Sigma 公司產(chǎn)品，批號H44024979。檢測儀器為 GF-D800 型半自動化生化分析儀，美國貝克曼公司產(chǎn)品；DK-98-1電熱恒溫水浴鍋，天津市泰斯特儀器公司產(chǎn)品；血糖儀，美國強(qiáng)生公司產(chǎn)品；TDL-5臺式離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠產(chǎn)品；酶標(biāo)儀9602A，南京普朗醫(yī)療器械公司產(chǎn)品。

1.3 動物分組與給藥

將70只小鼠隨機(jī)分為正常對照組(15只，以普通飼料喂養(yǎng))，其余55只用于建立2型糖尿病大鼠模型[5]，以高脂飼料喂養(yǎng)。大鼠高脂飼料喂養(yǎng)4周后，腹腔注射小劑量STZ 30 μg/g 2次，間隔1周；2周后檢測FBG，以FBG≥7.8 mmol/L 作為判斷模型成功的標(biāo)準(zhǔn)。將42只制備成功的2型糖尿病模型大鼠隨機(jī)分為模型對照組、黃連阿膠湯組和二甲雙胍組，每組14只。二甲雙胍組每天按150 μg/g的劑量給予二甲雙胍(以蒸餾水稀釋成2.5 g/L)灌胃；黃連阿膠湯組每天按成人劑量(1.67 g/kg)15倍,即30 mg/g的劑量灌胃；正常對照組和模型對照組給予等容積的蒸餾水。連續(xù)給藥20 d，每周稱量體質(zhì)量并調(diào)整給藥量。

1.4 檢測指標(biāo)

灌胃前、后觀察大鼠一般情況。于灌胃第1天和第20天同一時間測量體質(zhì)量，并尾尖取血測FBG。末次灌胃后，禁食12 h，眼球采血、分離血清，分別測定血清中TC 、TG 、LDL-C、HDL-C 及ApoA的含量，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 各組小鼠治療前后一般情況對比

灌胃第1天，4組小鼠體質(zhì)量之間對比，差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。灌胃第20天，黃連阿膠湯組、二甲雙胍組小鼠體質(zhì)量較模型對照組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。黃連阿膠湯組和二甲雙胍組治療后小鼠體質(zhì)量較治療前差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

表1 各組小鼠治療前后體質(zhì)量對比

注：與同時間點正常對照組對比，***P<0.01；與同時間點模型對照組對比，##P<0.05；與同組治療前對比，△△△P<0.01。

2.2 各組小鼠治療前后FBG對比

灌胃第1天:二甲雙胍組、黃連阿膠組小鼠的FBG與模型對照組對比，差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。灌胃第20天:黃連阿膠湯組和二甲雙胍組小鼠的FBG值均較治療前下降，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；且二者均低于模型對照組治療后FBG，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。二甲雙胍組的空腹血糖較正常對照組低，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，黃連阿膠湯組較正常對照組高，但差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)果表明:黃連阿膠湯可有效降低糖尿病小鼠FBG。 見表2。

組 別第1d第20d正常對照組8.28±1.299.35±1.56模型對照組17.32±6.8718.66±6.70***黃連阿膠湯組18.02±4.8610.42±3.98*##△二甲雙胍組17.90±4.957.15±3.32**###△

注：與同時間點正常對照組對比，*P>0.05，**P<0.05，***P<0.01；與同時間點模型對照組對比，##P<0.05，###P<0.01；與同組治療前對比，△P<0.01。

2.3 各組小鼠治療后血脂水平對比

與模型對照組對比，黃連阿膠湯組、二甲雙胍組小鼠的ApoA、HDL-C水平升高，TC、TG、LDL-C水平下降，差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。黃連阿膠湯組與二甲雙胍組各指標(biāo)對比，差別無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果表明:黃連阿膠湯對糖尿病小鼠的血脂有較好的調(diào)節(jié)作用。 見表3。

組 別TGTCLDL-CHDL-CApoA正常對照組1.24±0.132.56±0.060.86±0.111.53±0.311.02±0.16模型對照組2.85±0.394.06±0.132.1±0.331.03±0.100.66±0.10黃連阿膠湯組2.38±0.59##2.97±0.84##0.87±0.16##1.34±0.16##0.79±0.14##二甲雙胍組2.37±0.12##2.98±0.75###0.93±0.10###1.36±0.24###0.77±0.09##

注：與模型對照組對比，##P<0.05，###P<0.01。

3 討 論

早在《素問》就有消渴病內(nèi)熱傷陰病機(jī)的論述,其后歷代醫(yī)家對消渴病病機(jī)不斷有所發(fā)揮,豐富了消渴病的中醫(yī)病機(jī)理論,但多認(rèn)為陰虛燥熱為其基本病機(jī)。有研究[6]表明，糖尿病患者的TG、TC值均較血糖正常的健康人高，這提示糖尿病患者血糖水平異常的同時，還伴隨著血脂水平異常。糖尿病血脂異常的機(jī)制與胰島素減少或胰島素抵抗有關(guān)，糖尿病患者體內(nèi)由胰島素激活的脂蛋白酯酶的活性降低，從而使其對TG的水解能力降低。同時，胰島素作用減弱，其對激素敏感酯酶的抑制作用亦減弱，從而使激素敏感酯酶活性增強(qiáng)，使得脂肪組織大量釋放脂肪酸，而這種不能轉(zhuǎn)化為酮體的游離的非酯化的脂肪酸進(jìn)而使TG、TC的合成增加[7]。此外，糖尿病所致的脂質(zhì)代謝異常與動脈粥樣硬化、冠心病、腦血管病的發(fā)生密切相關(guān)；因此，在糖尿病中，監(jiān)測血脂與監(jiān)測血糖同等重要[8]，血脂也可作為判斷糖尿病疾病進(jìn)展和藥物治療效果的指標(biāo)。

本研究中，經(jīng)20d藥物干預(yù)后，黃連阿膠湯組和二甲雙胍組血糖均低于模型對照組，黃連阿膠湯組與正常對照組血糖的差別無統(tǒng)計學(xué)意義，表明黃連阿膠湯能有效降低血糖，并使血糖逐漸恢復(fù)正常范圍。黃連阿膠湯能降低TC、TG、LDLC，升高HDL-C、ApoA，表明黃連阿膠湯能有效改善2型糖尿病小鼠的血脂代謝，對預(yù)防2型糖尿病的血管并發(fā)癥具有預(yù)防作用。此外，黃連阿膠湯組大鼠經(jīng)藥物干預(yù)20 d后精神狀態(tài)好, 神態(tài)悠閑，毛發(fā)潤澤，且隨著給藥時間的延長，“三多一少”癥狀得到明顯改善，體質(zhì)量雖低于正常對照組，但高于模型對照組，表明黃連阿膠湯能治療肥胖性糖尿病。綜上所述，黃連阿膠湯組能有效降低糖尿病小鼠的血糖，調(diào)節(jié)血脂，其具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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(編輯 陶 珠)

1001-6910(2015)10-0065-03 ·實驗研究·

R587.1

B

10.3969/j.issn.1001-6910.2015.10.31

2015-08-21；

2015-08-28