周 潔, 羅秋玲, 丁 強(qiáng), 陳修來(lái), 劉立明*
(1. 食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江南大學(xué),江蘇 無(wú)錫214122;2. 江南大學(xué) 工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 無(wú)錫214122;3. 江南大學(xué) 糧食發(fā)酵工藝與技術(shù)國(guó)家工程實(shí)驗(yàn)室,江蘇 無(wú)錫214122)
L-蘋果酸是一種重要的從可再生能源碳水化合物轉(zhuǎn)化的化學(xué)品, 已被美國(guó)能源部列為12 大構(gòu)架化合物之一。 作為生物體TCA 循環(huán)的中間體,L-蘋果酸廣泛應(yīng)用于食品、煙草、化工和醫(yī)藥行業(yè)[1]。其具體用途如下:1) 在食品行業(yè):L-蘋果酸可以作為一種酸性和味覺(jué)增強(qiáng)劑代替檸檬酸,還可以作為食品保色保鮮劑和食品抗氧化劑等;2) 在煙草行業(yè):蘋果酸衍生物(如酯類)能作為煙草調(diào)味劑;3)在化工行業(yè):是良好的絡(luò)合劑、酯劑,用于牙膏配方、合成香料配方等,還可以作為除臭劑和工業(yè)洗滌劑的成分;4) 在醫(yī)藥行業(yè),可作為抗癌藥物前體、血管吻合劑,同時(shí)還可以配合各種片劑使其具有水果味,并有助于在體內(nèi)擴(kuò)散、吸收。
目前,利用發(fā)酵法生產(chǎn)L-蘋果酸時(shí)主要使用米曲 霉 (Aspergillus oryzae)、 黃 曲 霉 (Aspergillusflavus)[2-4]。 雖然黃曲霉能高產(chǎn)L-蘋果酸,但其產(chǎn)生的黃曲霉毒素具有強(qiáng)致癌性, 不能作為食品添加劑。 而米曲霉作為食品安全菌株,廣泛用于發(fā)酵工業(yè)。 米曲霉作為絲狀真菌,在液態(tài)深層發(fā)酵過(guò)程中生長(zhǎng)緩慢、機(jī)械剪切力耐受性較差,易形成絲狀、團(tuán)狀和球狀等形態(tài),形態(tài)的變化通常會(huì)引起發(fā)酵液流變性的改變,使其發(fā)酵過(guò)程變得十分復(fù)雜并且難以控制。 絲狀真菌在發(fā)酵過(guò)程中的形態(tài)受多個(gè)基因調(diào)控,其中包括hypA/podA、swoF和sepA等基因[5]。這些基因編碼的蛋白質(zhì)控制細(xì)胞大小、菌絲極性或細(xì)胞間隔膜的間距來(lái)改變菌體形態(tài)。 菌體形態(tài)還受到營(yíng)養(yǎng)條件(如碳氮源種類及其濃度、金屬離子的添加等)、環(huán)境條件(如溫度、pH 值、孢子濃度、攪拌轉(zhuǎn)速、通氣量、表面活性劑等外源添加物)等因素的影響[6-9]。
曲霉在液體深層發(fā)酵過(guò)程中,菌體宏觀和微觀形態(tài)的變化對(duì)代謝產(chǎn)物的合成有重要的影響,不同菌株積累代謝產(chǎn)物最佳形態(tài)各不相同。 Aftab Ahamed[10]等人在利用Aspergillus niger生產(chǎn)蛋白酶時(shí)發(fā)現(xiàn),當(dāng)菌體為球狀時(shí)蛋白酶產(chǎn)量低于150 U/g,而當(dāng)菌體為絮狀時(shí)蛋白酶產(chǎn)量可超過(guò)350 U/g。 而Aspergillus niger生產(chǎn)檸檬酸則以球狀為佳,與菌球相比非菌球生產(chǎn)檸檬酸不僅產(chǎn)量低, 葡萄糖吸收率、氧氣吸收速率和二氧化碳釋放速率都處于低水平[11]。 此外,Aspergillus terreus生產(chǎn)衣康酸和洛伐他汀、Rhizopus oryzae生 產(chǎn) 富 馬 酸、Rhizopus arrhizus生產(chǎn)乳酸等最佳形態(tài)都為菌球[12-15]。 作者通過(guò)研究營(yíng)養(yǎng)條件和環(huán)境條件對(duì)米曲霉菌體形態(tài)的影響,確定最佳形態(tài)并分析得到菌體形態(tài)與L-蘋果酸產(chǎn)量的關(guān)系,從而由此調(diào)控A. oryzae形態(tài)在發(fā)酵罐上獲得高產(chǎn)L-蘋果酸。
1.1.1 菌種A. oryzaeFMME 338 (CCTCC NO:M 2016401) 保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心。
1.1.2 試劑 L-蘋果酸標(biāo)準(zhǔn)樣品:Sigma 公司產(chǎn)品;葡萄糖:山東西王生化科技有限公司產(chǎn)品;其他化學(xué)試劑均為分析純:國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品。
1.1.3 培養(yǎng)基 斜面培養(yǎng)基 (g/L): 去皮馬鈴薯200,葡萄糖20,瓊脂15;自然pH。
種子培養(yǎng)基 (g/L): 葡萄糖60, 胰蛋白胨3,KH2PO40.75,K2HPO4·3H2O 0.98,MgSO4·7H2O 0.1,CaCl20.075,1 mL 微量元素溶液 (NaCl 5, FeSO4·7H2O 5,去離子水1 L)。
發(fā)酵培養(yǎng)基 (g/L): 葡萄糖120,CaCO3(60~100), 胰蛋白胨6,KH2PO40.2,K2HPO4·3H2O 0.2,MgSO4·7H2O 0.1,CaCl20.075,1 mL 微量元素溶液(同上) 。
1.2.1 培養(yǎng)方法 生孢培養(yǎng): 從-80 ℃的甘油保藏管中取一環(huán)孢子懸液接種于斜面培養(yǎng)基,30 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4~6 d;
種子培養(yǎng): 將培養(yǎng)的成熟孢子用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.05%吐溫80 洗下,經(jīng)玻璃珠打散后過(guò)濾制成孢子懸浮液,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 將孢子懸浮液轉(zhuǎn)接至種子培養(yǎng)基中,種子培養(yǎng)基的裝液量為250 mL 的三角瓶中裝入50 mL 培養(yǎng)基, 培養(yǎng)轉(zhuǎn)速200 r/min,在30 ℃下恒溫?fù)u床培養(yǎng)24 h;
發(fā)酵培養(yǎng)(搖瓶):按體積分?jǐn)?shù)10 %的接種體積分?jǐn)?shù),將液體種子接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中,發(fā)酵培養(yǎng)基的裝液量為250 mL 三角瓶中裝入50 mL 培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)速200 r/min,30 ℃下恒溫?fù)u床培養(yǎng)6 d;發(fā)酵培養(yǎng)(發(fā)酵罐):按體積分?jǐn)?shù)10%接種,將液體種子接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中,發(fā)酵培養(yǎng)基的裝液量為30 L發(fā)酵罐裝入16 L 培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)速200~600 r/min,通氣量1~3 vvm,30 ℃下培養(yǎng)6 d。
1.2.2 分析方法 L-蘋果酸和葡萄糖質(zhì)量濃度測(cè)定:用高效液相色譜(HPLC) 分析檢測(cè),色譜柱為AminexHPX-87H Ion (300 mm×250 mm),流動(dòng)相為5 mmol/L H2SO4,流速為0.6 mL/min;柱溫為35 ℃;波長(zhǎng)為215 nm; 進(jìn)樣量為10 μL;L-蘋果酸質(zhì)量濃度檢測(cè)器為紫外檢測(cè)器, 葡萄糖濃度檢測(cè)器為示差檢測(cè)器;生物量測(cè)定:采用干質(zhì)量法,用2 N 的HCl 除去發(fā)酵液中的CaCO3, 將發(fā)酵液經(jīng)濾紙過(guò)濾后用蒸餾水洗滌3 遍再抽濾, 置于干燥箱中60 ℃烘干至恒重,用稱重法測(cè)定其生物量;菌體形態(tài)測(cè)定:Canon IXUS115 數(shù)碼相機(jī)拍攝,菌球直徑使用千分尺測(cè)量。
采用單因素實(shí)驗(yàn)在搖瓶中研究有機(jī)氮源和無(wú)機(jī)氮源對(duì)A. oryzae 發(fā)酵過(guò)程中形態(tài)和產(chǎn)酸的影響(表1)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),當(dāng)以胰蛋白胨和大豆蛋白胨為氮源時(shí),產(chǎn)酸和菌體生長(zhǎng)均好于其余氮源。 研究發(fā)現(xiàn),氮源種類對(duì)A. oryzae 菌體形態(tài)有顯著的影響,除尿素以外,其他所有氮源都能使A. oryzae 在培養(yǎng)基中形成數(shù)量、大小都不同的菌球。 氮源對(duì)A.oryzae 形態(tài)和L-蘋果酸生產(chǎn)的影響如表1 所示。當(dāng)黃豆粉為氮源時(shí),菌球濃度、菌球直徑、單位體積發(fā)酵液菌球總體積(V 值)比胰蛋白胨時(shí)分別提高4.90%,4.22%和18.9%;比大豆蛋白胨時(shí)分別提高114.0%、28.0%和347.1%。當(dāng)?shù)礊辄S豆粉和胰蛋白胨時(shí),菌體質(zhì)量濃度(以干質(zhì)量計(jì)算)在15~16 g/L 左右。 當(dāng)大豆蛋白胨作為氮源時(shí)菌體質(zhì)量濃度達(dá)到最高 (23.7 ± 0.74) g/L。當(dāng)?shù)礊橐鹊鞍纂藭r(shí),L-蘋果酸產(chǎn)量和得率比大豆蛋白胨時(shí)分別提高22.3%和36.6%; 比黃豆粉為氮源時(shí)分別提高58.8%和19.1%. 但是,以大豆蛋白胨為氮源時(shí),葡萄糖消耗比胰蛋白胨和黃豆粉時(shí)分別高出10.7%和49.2%。 因此,胰蛋白胨是最佳有機(jī)氮源。 此外,無(wú)機(jī)氮源的添加不利于A. oryzae 的生長(zhǎng)和L-蘋果酸的積累。 當(dāng)?shù)礊槟蛩貢r(shí),A. oryzae 在發(fā)酵液中以大量菌絲和少量菌球狀呈現(xiàn)(圖1)。 以(NH4)2SO4和NH4Cl 為 氮 源 時(shí), 菌 球 濃 度 分 別 為(110±6) 個(gè)/mL 和(86±4)個(gè)/mL,菌球直徑分別為(0.625±0.01) mm 和 (0.652 ± 0.01) mm,V 值均不超過(guò)15.0 mm3/mL。 以(NH4)2SO4為氮源時(shí),菌體質(zhì)量濃度比尿素和NH4Cl 時(shí)分別提高125.0%和4.85%。 以NH4Cl 為氮源時(shí)L-蘋果酸產(chǎn)量比尿素和(NH4)2SO4時(shí)分別提高13.8%和5.60%。尿素為氮源時(shí)葡萄糖消耗比(NH4)2SO4和NH4Cl 為氮源時(shí)分別高出36.7%和27.1%。 然而,當(dāng)NH4Cl 和(NH4)2SO4為氮源時(shí)得率比尿素時(shí)均提高47.4%。 所以,NH4Cl為最佳無(wú)機(jī)氮源。 結(jié)果表明,以胰蛋白胨為氮源時(shí),菌球濃度、菌球直徑、V 值、菌體質(zhì)量濃度、L-蘋果酸產(chǎn)量、葡萄糖消耗和產(chǎn)率比NH4Cl 為氮源時(shí)分別提高137.2%、81.7%、1329.0%、158.9%、303.0%、101.5%和100.0%。 表明有機(jī)氮源促進(jìn)菌體生長(zhǎng)、L-蘋果酸積累和葡萄糖消耗并提高產(chǎn)率。 因此,胰蛋白胨是最佳氮源。
表1 氮源對(duì)米曲霉形態(tài)和L-蘋果酸生產(chǎn)的影響Table 1 Effect of nitrogen source on the morphology of Aspergillus oryzae and the production of L-malate
在培養(yǎng)基中添加CaCO3不僅能控制發(fā)酵過(guò)程的pH,中和蘋果酸形成鈣鹽沉淀,以固體顆粒存在的CaCO3對(duì)菌球形態(tài)也有明顯的影響。 研究表明,隨著CaCO3質(zhì)量濃度從60 g/L 增加到100 g/L,A. oryzae 菌球濃度從208 個(gè)/mL 增加到250 個(gè)/mL,同時(shí), 菌球直徑從1.173 mm 降低到0.810 mm,V值由(175.4±8.77)mm3/mL 降低到(69.4±1.70) mm3/mL。培養(yǎng)基中CaCO3質(zhì)量濃度越高,固形物越多,對(duì)菌體的磨損程度就越高,菌球直徑逐漸減小。 此外,孢子在萌發(fā)過(guò)程中包裹一定量的CaCO3更有利于形成菌球。 CaCO3質(zhì)量濃度對(duì)產(chǎn)酸和菌體濃度影響見(jiàn)圖2(a) (b)。 當(dāng)CaCO3質(zhì)量濃度為80 g/L 時(shí),菌體濃度比當(dāng)CaCO3質(zhì)量濃度為60 g/L 和100 g/L 時(shí)分別高出13.7%和5.75%。 向培養(yǎng)基中添加80 g/L 的CaCO3時(shí),最高在發(fā)酵144 h 后積累(59.7±1.71) g/L的L-蘋果酸, 比CaCO3質(zhì)量濃度為60 g/L 和100 g/L時(shí)分別高出9.69%和5.87%。 在CaCO3質(zhì)量濃度為80 g/L 時(shí), 葡萄糖消耗比60 g/L 和100 g/L 時(shí)分別高出8.53%和1.38%。但是,CaCO3質(zhì)量濃度為80 g/L時(shí)產(chǎn)率最高, 比60 g/L 和100 g/L 時(shí)分別提高1.79%和3.64%。 表明CaCO3最優(yōu)質(zhì)量濃度為80 g/L。
圖1 氮源對(duì)米曲霉形態(tài)的影響Fig. 1 Effect of nitrogen source on morphology of Aspergillus oryzae
圖2 CaCO3 質(zhì)量濃度對(duì)L-蘋果酸產(chǎn)量、菌體質(zhì)量濃度、菌球濃度、菌球直徑和葡萄糖消耗的影響Fig. 2 Effect of concentration of CaCO3 on L-malate production,dry cell weight,pellet number,pellet size diameter and consumption of glucose
以搖瓶發(fā)酵優(yōu)化結(jié)果為基礎(chǔ),本工作研究了30 L 發(fā)酵罐中攪拌轉(zhuǎn)速對(duì)A. oryzae菌體形態(tài)和L-蘋果酸積累的影響。 當(dāng)攪拌轉(zhuǎn)速為200 r/min 時(shí),菌體在發(fā)酵罐中呈菌絲狀,當(dāng)攪拌轉(zhuǎn)速在400~600 r/min范圍內(nèi),A. oryzae主要形成菌球, 隨著攪拌轉(zhuǎn)速的提高,單位體積發(fā)酵液中菌球濃度不斷增加,菌球直徑不斷減?。ū?)。 攪拌轉(zhuǎn)速?gòu)?00 r/min 提高到600 r/min 時(shí),菌球濃度增加而菌球直徑減小。 攪拌轉(zhuǎn)速為600 r/min 時(shí)V值為(99.3±5.06) mm3/mL,比攪拌轉(zhuǎn)速是400 r/min 時(shí)降低了35.0%。不同轉(zhuǎn)速攪拌帶來(lái)的流體流動(dòng)與剪切力會(huì)顯著影響菌體的形態(tài),攪拌轉(zhuǎn)速越大,液體流動(dòng)速度越快,剪切力越大,更利于形成數(shù)量多的小直徑菌球。 Park J P 等[16]考察了攪拌強(qiáng)度對(duì)蛹蟲(chóng)草 (Cordyceps militaris) 菌體形態(tài)的影響, 研究表明攪拌轉(zhuǎn)速為300 r/min 時(shí),菌球直徑小并且表面光滑, 但當(dāng)攪拌轉(zhuǎn)速為50 r/min時(shí),菌球大而松散。 菌體質(zhì)量濃度也隨著攪拌轉(zhuǎn)速的提高而增加, 當(dāng)攪拌轉(zhuǎn)速?gòu)?00 r/min 增加到400 r/min時(shí),菌體質(zhì)量濃度提高了14.4%。原因可能是隨著攪拌轉(zhuǎn)速增加發(fā)酵液溶氧也不斷增加,從而利于菌體生長(zhǎng)導(dǎo)致菌體質(zhì)量濃度增加。 然而,當(dāng)攪拌轉(zhuǎn)速繼續(xù)增加到600 r/min 時(shí), 菌體質(zhì)量濃度并沒(méi)有大幅度增加(約19.8 g/L)。 結(jié)果如圖3 所示,隨著攪拌轉(zhuǎn)速的提高,L-蘋果酸的產(chǎn)量也隨之增加, 當(dāng)攪拌轉(zhuǎn)速是600 r/min 時(shí), 最高積累83.0 g/L 的L-蘋果酸, 比攪拌轉(zhuǎn)速是200 r/min 和400 r/min 時(shí)分別提高了63.4% 和31.5%; 葡萄糖消耗比攪拌轉(zhuǎn)速是200 r/min 和400 r/min 時(shí)分別提高了24.1%和17.0%,產(chǎn)率比攪拌轉(zhuǎn)速是200 r/min 和400 r/min 時(shí)分別提高了31.4%和12.2%。 結(jié)果表明高攪拌轉(zhuǎn)速促進(jìn)A. oryzae生長(zhǎng), 增加葡萄糖消耗和L-蘋果酸積累,最佳攪拌轉(zhuǎn)速是600 r/min。 在絲狀真菌發(fā)酵過(guò)程中, 在菌體形態(tài)和攪拌轉(zhuǎn)速之間有一種最優(yōu)的狀態(tài),在這種情況下,攪拌可能也會(huì)對(duì)細(xì)胞的氧氣供應(yīng)進(jìn)行調(diào)節(jié)[17]。
圖3 攪拌轉(zhuǎn)速對(duì)L-蘋果酸產(chǎn)量, 菌體質(zhì)量濃度和葡萄糖消耗的影響Fig. 3 Effect of agitation speed on L-malate production,dry cell weight and consumption of glucose
表2 攪拌轉(zhuǎn)速對(duì)菌體形態(tài)的影響Table 2 Effect of agitation speed on the morphology of Aspergillus oryzae
通氣條件同樣是影響發(fā)酵罐中溶氧水平的一個(gè)重要因素,因此進(jìn)一步研究了通氣條件對(duì)A. oryzae菌體形態(tài)和產(chǎn)酸的影響。 如圖4 所示,隨著通氣量增加,單位體積發(fā)酵液菌球數(shù)量不斷增加,通氣量為3 vvm 時(shí)單位體積發(fā)酵液菌球濃度為(273±6) 個(gè)/mL,比通氣量為1 vvm 和2 vvm 時(shí)分別高出46.0%和8.76%。 通氣從1 vvm 提高到2 vvm 時(shí)菌球直徑從0.997 mm 降低為0.834 mm。 當(dāng)通氣量為3 vvm 時(shí),菌球直徑?jīng)]有進(jìn)一步縮?。s0.832 mm)。 此外,通氣量為2 vvm 時(shí),V 值比1 vvm 和3 vvm 時(shí)分別降低23.1%和10.2%。 菌體質(zhì)量濃度隨著通氣量的提高也不斷增加,結(jié)果見(jiàn)圖4(b), 通氣量為3 vvm 最大菌體質(zhì)量濃度為33.6 g/L,比通氣量為1 vvm 和2 vvm 分別高出69.8%和14.7%。 通氣量為2 vvm時(shí),L-蘋果酸產(chǎn)量比1 vvm 和3 vvm 時(shí)分別提高32.5%和21.9%。 但是,葡萄糖消耗并沒(méi)有隨著通氣量的改變而發(fā)生明顯變化(~180 g/L),這表明增加通氣并不能促進(jìn)葡萄糖消耗。 當(dāng)通氣量為2 vvm時(shí), 產(chǎn)率比1 vvm 和3 vvm 時(shí)分別提高34.8%和26.5%。因此,最適通氣量為2 vvm。結(jié)果表明氧氣的傳遞是影響L-蘋果酸在發(fā)酵罐中積累的一個(gè)重要因素,同樣的現(xiàn)象也存在于葡萄糖酸發(fā)酵過(guò)程中[9]。
圖4 通氣量對(duì)L-蘋果酸產(chǎn)量、菌體質(zhì)量濃度、菌球濃度、菌球直徑和葡萄糖消耗的影響Fig. 4 Effect of aeration rate on L-malate production,dry cell weight,pellet number,pellet size diameter and consumption of glucose
菌球形態(tài)與細(xì)胞代謝關(guān)系緊密,單位體積發(fā)酵液菌球總體積 (V 值) 與L-蘋果酸產(chǎn)量的關(guān)系如(圖5) 所示。 搖瓶上V 值與L-蘋果酸產(chǎn)量的關(guān)系是:y=-0.0046x2+1.1307x-0.6498,R2= 0.9897;發(fā)酵罐上V 值與L-蘋果酸產(chǎn)量的關(guān)系是:y=0.0091x2-2.6346x+253.53,R2=0.9684。 結(jié)果表明, 在搖瓶水平,L-蘋果酸產(chǎn)量隨著V 值增加先上升后降低;當(dāng)V 值在122.9 mm3/mL 左右時(shí),L-蘋果酸產(chǎn)量達(dá)到最高(約68.8 g/L)。 原因可能是當(dāng)V 值低時(shí),菌球個(gè)數(shù)和菌球直徑的值處于低水平,菌球內(nèi)部結(jié)構(gòu)疏松密度小不利于菌球生長(zhǎng)和產(chǎn)酸, 而當(dāng)V 值高時(shí),菌球濃度和菌球直徑的值處于高水平,單位發(fā)酵液菌球數(shù)量增加導(dǎo)致發(fā)酵液粘稠,菌球直徑過(guò)小導(dǎo)致內(nèi)部結(jié)構(gòu)致密從而不利于O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的傳遞[18]。在乳酸發(fā)酵過(guò)程中也出現(xiàn)了相似的情況,當(dāng)菌球密度較低時(shí)內(nèi)部中空不利于產(chǎn)酸, 而當(dāng)菌球密度大于60 kg/m3時(shí)影響傳質(zhì)抑制產(chǎn)酸[19]。 在發(fā)酵罐水平,L-蘋果酸產(chǎn)量隨V 值增加而逐漸降低, 當(dāng)V 值為76.4 mm3/mL 時(shí),L-蘋果酸產(chǎn)量最高為109.9 g/L。
圖5 搖瓶上V 與L-蘋果酸產(chǎn)量的關(guān)系和發(fā)酵罐上V 與L-蘋果酸產(chǎn)量的關(guān)系Fig. 5 Relationship between the total of pellet in the unit volume fermentation (V) and L-malate production
本文通過(guò)研究氮源種類、CaCO3質(zhì)量濃度、攪拌轉(zhuǎn)速和通氣量對(duì)A. oryzae 菌體形態(tài)和L-蘋果酸產(chǎn)量的影響,得出最佳營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件為:胰蛋白胨為氮源,CaCO3質(zhì)量濃度為80 g/L, 攪拌轉(zhuǎn)速600 r/min,通氣量2 vvm。以菌球濃度、菌球直徑和單位體積發(fā)酵液菌球總體積(V 值) 來(lái)表征形態(tài),并研究得出V 值與L-蘋果酸產(chǎn)量的關(guān)系。 在30 L 發(fā)酵罐中:發(fā)酵132 h,菌球濃度251 個(gè)/mL,菌球直徑0.834 mm,V 值為76.4 mm3/mL,A. oryzae 消耗177.6 g/L 葡萄糖,L-蘋果酸質(zhì)量濃度達(dá)到109.9 g/L,產(chǎn)率為0.62 g/g,生產(chǎn)強(qiáng)度達(dá)到0.83 g/(L·h)。